天然牛磺酸的离子色谱分析方法研究

通过考察实验的稳定性、精确度及回收率等,研究不同氨基酸对牛磺酸检测的干扰,成功建立了离子色谱法分离牛磺酸梯度洗脱程序,探索出一种更高效、更快速、更灵敏的离子色谱检测方法。色谱柱为氨基酸分析柱(Amino Pac PA-10,2 mm×250 mm)、氨基酸保护柱(Amino Pac PA-10 2 mm×50 mm);流动相组成为流动相A(纯水)、流动相B(250 mmol/L Na OH溶液),流动相C(1.0 mmol/L乙酸钠(Na OAc)),进行梯度洗脱;流速为0.24m L/min;柱温为30℃;采用积分脉冲安培检测器检测;进样量为25μL。该法优化了牛磺酸的检测时间,提高了牛磺酸的检测效率,可运用于实验和生产中。     

高效液相色谱法检测果蔬汁中五种添加剂

目的：运用高效液色谱法对果蔬汁中苯甲酸、安赛蜜、脱氢乙酸、糖精钠以及山梨酸添加剂进行检测。方法：色谱柱：Kromasil 100-5 C18（250mm×4.6mm,5μg）;流动相：甲醇∶0.02mol/L乙酰胺溶液=5∶95（V∶V）;流速：1.0mL/min;进样量：20μL;柱温：30℃;波长：230nm。结果：苯甲酸、安赛蜜、脱氢乙酸、糖精钠以及山梨酸在0.00~0.1mg/mL浓度范围内,均表现为良好的线性关系（r=0.97、r=0.98、r=0.96、r=0.98、r=0.98）。山梨酸、安赛蜜、糖精钠、苯甲酸、脱氢乙酸RSD分别为1.13%、1.01%、1.51%、1.05%、1.18%;平均回收率分别为98%~99%。结论：在液果蔬汁添加剂检测中,高效液相色谱法快速准确,且灵敏度较高,可满足检查需要。     

UAE-IC法测定大白口蘑中阴离子含量

采用超声波（UAE）辅助提取-离子色谱（IC）法测定了大白口蘑中F?、Cl?、NO2?、NO3?、PO43? 5种阴离子。选用NaOH溶液（3.0mmol/L）超声渗提30min后进样100μL,通过流速为1.2mL/min的淋洗液Na2CO3+NaHCO3（3.5mmol/L+1.0mmol/L）洗脱。F?、Cl?、NO2?、NO3?、PO43? 5种离子线性范围分别为2－25mg/L、2－20mg/L、2－100mg/L、10－55mg/L、10－100mg/L,峰面积RSD分别为0.58%、1.27%、0.73%、0.92%、2.33%,检出限在0.0976－1.0984mg/L之间。大白口蘑样品中未检出NO2?,其余F?、Cl?、NO3?、PO43? 4种离子加标回收率在95%－110%之间。     

蛹虫草子实体中海藻糖含量的测定

为分析食用菌中海藻糖的含量,以蛹虫草子实体为材料,比较了提取溶剂、提取方式及提取时间等条件对海藻糖提取效果的影响,确定海藻糖分析的前处理方法为：1g子实体粉中加入100mL 90%乙醇热回流提取1h。采用高效液相色谱法测定海藻糖,优化后的色谱条件为：SUGAR SP0810柱（300mm×8mm）,超纯水洗脱,流速0.5mL/min,柱温70℃,示差折光检测器检测,进样量10μL。方法学考察结果表明,该方法准确度高,稳定性、精密度、重现性好,对海藻糖标准品的检测特异性良好,适用于蛹虫草子实体中海藻糖含量的     

青海蚕豆中原花青素和左旋多巴的含量测定和品种间差异的比较

目的：建立青海蚕豆中左旋多巴和原花青素含量测定方法,测量22批样品的含量。方法：采用紫外分光光度法测量原花青素的含量,检测波长为554nm。采用HPLC法检测蚕豆中L-多巴含量：色谱柱：汉邦ODS-2（250mm×4-6mm,5μm）,流动相：甲醇-0-1mol/L冰醋酸溶液（5∶95）;流速：0-8 mL/min;测定波长：280 nm;柱温：25/3℃;进样量：20μL。结果：原花青素在75~375μg/mL范围内线性良好、L-多巴在75~375μg/mL范围内线性良好。结论：青海蚕豆中左旋多巴和原花青素含量测定方法稳定可靠。     

反相高效液相色谱法测定杜仲中松脂醇二葡萄糖甙和丁香脂素二糖甙

采用高效液相色谱法建立同时测定杜仲中松脂醇二葡萄糖甙(PDG)和丁香脂素二糖甙(SDG)的方法。色谱条件为:色谱柱为VP-ODSC18柱(150mm×4.6mm,预柱10mm×4.6mm);流动相为甲醇∶水(v/v)=30∶70;流速1mL/min;柱温25℃;进样量10μL;检测波长227nm。松脂醇二葡萄糖甙在和丁香脂素二糖甙进样量分别在30.8~154.0μg/mL之间,SDG的进样量在26.4~88.0μg/mL之间时,线性关系良好;平均回收率分别为99.8%,98.6%。结果表明该方法快速、准确、简单,可用于杜仲中松脂醇二葡萄糖甙和丁香脂素二糖甙的定量测定。     

蛹虫草子实体中甘露醇含量的测定

建立了HPLC法测定蛹虫草子实体中甘露醇含量的方法。通过比较提取溶剂、提取方式及提取时间等条件对甘露醇提取效果的影响,确定甘露醇分析的前处理方法为:1g子实体粉中加入150 mL 90%乙醇热回流提取1h。采用SUGAR SP0810柱(300 mm×8 mm)为分析柱,超纯水为流动相,流速1.0 mL/min,柱温70℃,示差折光检测器检测,进样量10μL。甘露醇在0.04-9.9 mg/mL范围内线性关系良好,回归方程为y=103860x+2183.9(r=0.9999),平均回收率为104.27%,RSD=2.19%(n=9)。本方法准确度高,稳定性、精密度、重现性好,适用于蛹虫草子实体中甘露醇含量的分析。     

胶束电动毛细管色谱法测定红丝线提取物中紫蓝素的含量

建立了胶束电动毛细管电泳色谱法(MECC)测定红丝线提取物中紫蓝素的含量的方法。毛细管柱内径75μm,长50.2cm;运行电压25kV,检测波长585nm,温度25℃;缓冲液为25mmol/L,β-CD10mmol/L,硼酸盐-20%乙腈(pH值8.0);进样方式:压力进样,进样时间5s。结果表明紫蓝素在10～100μmol/L浓度范围内具有良好的线性关系(r=0.9995),回收率为95.3%～103.2%。该方法快速、简便、并且较为准确,适用于测定红丝线提取物中紫蓝素的含量。     

配位体交换色谱法测定槐米废渣水解液单糖成分

利用生物质转化成糖研究近年来备受关注,为给工业化高效利用槐米废渣提供检测技术,本文建立了槐米废渣水解转化糖液中4种主要单糖的铅(Pb~(2+))配位体交换高效液相色谱分析方法并采用离子色谱法验证了方法的可行性;实验比较了Pb~(2+)和Ca~(2+)两种不同柱内抗衡离子对组分分离的影响,最终利用铅配体方法对实际样品进行了测试。方法分离柱采用Sepax Carbomix Pb-NP 5(300×7.8 mm ID,5μm,8%交联度)色谱柱,柱温75℃;流动相采用超纯水,流速0.50 m L/min;检测器采用示差折光检测器,检测器温度为30℃;样品采用活性炭固相萃取小柱脱除色素。结果表明,组分葡萄糖、木糖、半乳糖和阿拉伯糖在25 min内完成分离,在0.2~20.0 mg/m L浓度范围内呈现良好的线性关系,方法检测限在1.94~1.98μg/m L之间;槐米废渣水解液中阿拉伯糖平均含量大于67%,具有较高回收价值。方法样品前处理简便,重现性好,结果准确,测试成本低。     

利用超高效液相色谱和离子色谱法测定注射用磷酸川芎嗪的含量

目的:建立超高效液相色谱法(UPLC)和离子色谱法(IC)测定磷酸川芎嗪中川芎嗪和磷酸的含量,为质量评价提供依据。方法:UPLC测定川芎嗪的色谱柱为Waters Acquity BEH C18 (2.1 mm×50 mm,1.7μm);检测波长:300 nm检测川芎嗪,274 nm检测有关物质邻苯二甲酸二甲酯;流动相为0.1%甲酸水溶液(A)-0.1%甲酸乙腈(B),梯度洗脱(0.0～0.8 min,10%B→90%B;0.8～0.81 min,90%B→10%B;0.81～1.00 min,10%B),流速:0.7 m L/min。IC测定磷酸的离子交换色谱柱为Dionex IonPac AS11-HC-4μm (4×250 mm),流动相为30 mmol/L KOH溶液等度洗脱15 min,流速1.0 m L/min,柱温35℃;电导检测器;抑制器电流为50 m A。结果:川芎嗪和磷酸在10～100 g/m L内具有良好的线性关系,相关系数均为1.0,UPLC法测定川芎嗪的回收率为102.0%。IC测定磷酸的回收率为99.8%。7个公司生产的注射剂中川芎嗪的含量均在药典规定的范围90%～110%内。但是其中3个公司生产的注射剂磷酸超出药典规定范围90%～110%。结论:与常规HPLC/UPLC测定磷酸川芎嗪含量方法比较,本文所用方法测定结果更加准确、全面、且重复性好,能够真实反应注射用磷酸川芎嗪的实际含量,对于注射用磷酸川芎嗪的安全性和有效性评估提供了一定的依据。     

超声提取-高效液相色谱法测定甘草中甘草酸含量

确定了制备甘草酸分析样品的超声波提取条件, 0.3%稀氨水为溶剂,液固比50:1,提取时间5 h;确定了高效液相色谱法检测甘草酸含量的条件为ODS色谱柱(4.6mm×25 cm, 5 μm),检测波长254 nm,检测温度为室温,流动相CH3OH/3% HOA c(V/V)为75/25,流速1mL/m in,进样量10 μL,平均加样回收率100.20%,相对标准偏差为1.77%。结果表明超声提取-高效液相色谱法是一种准确度高,速度快的测定甘草中甘草酸含量的检测方法。     

反相高效液相色谱法测定食用菌中7种有机酸的研究

利用反相高效液相色谱法同时分析食用菌中7种有机酸,优化后的色谱条件为:Green ODS-AQ柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相为10mmol/L的磷酸二氢钾(pH2.8),流速为1.0mL/min,柱温30℃,检测波长为210nm,进样量10μL。该方法精密度、重复性、稳定性实验中7种有机酸的RSD值均小于5%,加样回收率在94.6%–99.3%之间;该方法简便,可应用于食用菌中7种有机酸的检测。运用建立的方法测定了8种食用菌中7种有机酸成分,结果发现不同食用菌中有机酸的种类和含量均差异显著。     

高效液相色谱测定发酵液中1，3－二羟基丙酮（DHA）方法的建立

摘要：本文建立了简单且准确的测定1,3-二羟基丙酮（DHA）的高效液相色谱（HPLC）方法。以Alltima C18（5μm,250×4.6mm）为分离柱,5％甲醇水溶液（0.05％H3PO4调pH至3.0）,流速为1mL/min,用紫外检测器在200nm处检测DHA。结果测得DHA标准样品的保留时间为6.2min,并测得DHA的线性范围为0.1～10.0 g/L。用HPLC法测得以甘油为底物发酵产DHA发酵液中DHA含量为6.2 g/L。并证明高效液相色谱法可有效应用于产DHA发酵过程中产物的检测。     

RP-HPLC法测定奥利司他片的含量

目的:建立奥利司他片的含量测定方法.方法:采用高效液相色谱法,Agela Venusil XBP-C18 色谱柱(15cm×4.0mm,5p m),流动相:甲醇:水:甲酸(89:11:0.1);柱温为35℃;流速1.5mL·min-1;进样量10μ L.紫外检测器,检测波长为210nm.结果:主成分奥利司他在0.4～0.6mg/ml浓度范围内线性关系良好,相关系数r>0.999,平均回收率为99.4%,符合规定.结论:该方法专属性强,准确度好,可作为奥利司他片含量测定的质量控制方法.     

YlyA和RNA聚合酶的反应性鉴定

目的：用亲和层析法鉴定YlyA与RNA聚合酶（RNAP）的结合性能。方法：将YlyA分别上样于以Affigel 15为亲和介质制备的空白柱、牛血清白蛋白（BSA）柱和RNAP柱;以GreA和绿色荧光蛋白（GFP）为阳性和阴性对照蛋白分别上样于同一RNAP柱,洗涤和洗脱缓冲液（pH均为7．9）的盐离子浓度分别为30mmol／L和400mmol／L;用免疫印迹法对洗涤和洗脱流出液中的YlyA进行检测。结果：在空白柱和BSA柱的洗脱收集液中,没有检测到YlyA,大量的YlyA出现在了洗涤收集液中;而在RNAP柱的洗脱收集液中,检测到了YlyA和GreA,没有检测到GFP。结论：YlyA与RNAP之间具有特异性结合能力,为YlyA极有可能是一种转录因子的生物信息学分析结果提供了实验证据。     

高效液相法测定阿司匹林肠溶片中阿司匹林含量

建立阿司匹林片HPLC含量测定方法。采用Kromasil（C18 150mm×4．6mm,5u）色谱柱,以乙腈-四氢呋喃-冰醋酸-水（23：5：5：61）为流动相;检测波长为280nm;流速1．0mL／min;进样量20uL,柱温：室温。阿司匹林在12．5～250ug／mL范围内有良好的线性关系。平均回收率100.22％,RSD为1．2％。本法操作简便、快速、结果准确、专属性强。     

毛细管气相色谱法测定甲磺酸伊马替尼中残留有机溶剂

目的：建立可同时测定甲磺酸伊马替尼原料药中甲醇、乙醇和N''N - 二甲基甲酰胺（DMF）等3 种残留有机溶剂的毛细管气相色谱法。方法：采用WondaCAP WAX 毛细管柱为色谱柱，程序升温，N2 为载气，载气流速为4.0 mL ? min-1，氢火焰离子化检测器，检测器温度为250 ℃，进样口温度为200 ℃，进样量为1.0 μL。以正丁醇为内标，通过内标法计算样品中3 种有机溶剂残留量。结果：甲醇、乙醇和DMF 在所建立的色谱条件下均能完全分离，分别在2.94~44.11、4.91~73.68 和0.084~12.60 mg ? L-1 的质量浓度范围内线性关系良好（r =0.9940~0.9985），进样精密度（RSD）均小于5.0%（n =6），平均回收率为104.8%~105.8%（RSD<5.0%，n =9），定量限分别为0.20、0.33 和0.08 ng（信噪比为10 ∶ 1），检测限分别为0.05、0.11 和0.02 ng（信噪比为3 ∶ 1）。样品中未检出甲醇和DMF，乙醇含量低于有关限度规定。结论：该方法简便、准确、灵敏、重复性好，可用于甲磺酸伊马替尼原料药中残留有机溶剂的检测。     

法罗培南钠片有关物质检查方法的研究

目的:建立法罗培南钠片有关物质检查方法。方法:色谱柱:Agilent-150mm XDB-C18 5μm;流动相:乙腈-磷酸二氢钾缓冲液(20mmol/L磷酸二氢钾水溶液,用10mol/L NaOH溶液调pH值至6.0)(10:90);柱温:30℃;检测波长为256nm;流速:1ml/min;进样量:20μl。结果:辅料不干扰测定,各破坏条件下产生的杂质峰与主峰完全分离;最低检出量:3.175ng;法罗培南钠可与其异构体完全分离。结论:本方法准确、可靠、专属性强,可以更好的控制产品质量。     

高效液相色谱法测定甜菊糖苷中甜菊醇的含量

建立高效液相色谱法测定甜菊糖苷中甜菊醇的含量。色谱条件:色谱柱为Phenomenex C18(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为乙腈-水(50∶50);流速1.0 mL/min;检测波长213 nm;柱温30℃;进样量10μL。线性范围为1.046μg/mL~52.3μg/mL(r=0.9997),加标平均回收率为96.60%,RSD为0.51%(n=6)。本方法准确度高、精密度高、重复性好、简捷易操作,可以作为甜菊糖苷中甜菊醇含量的测定方法。     

离子色谱法同时测定包装饮用水中的6种阴离子

建立离子色谱法同时测定包装饮用水中Br O3-、NO2-、Br-、NO3-、SO42-和Cl O4-含量的方法。选用亲水性的Ion Pac AS19阴离子交换色谱柱作为分离柱,KOH溶液作为淋洗液,优化淋洗液浓度、淋洗程序、流速、柱温等测试条件后,采用电导检测器测定包装饮用水中6种目标阴离子的含量。结果表明:当进样体积为100μL时,6种目标阴离子在一定浓度范围内与其对应的峰面积呈线性关系,相关系数均大于0. 999,Br O3-、NO2-、Br-、NO3-、SO42-和Cl O4-的最小检测质量浓度分别为0. 004 5、0. 005 9、0. 012 4、0. 004 0、0. 011 7和0. 015 6 mg/L;对每份样品进行3个水平的加标回收试验,加标回收率均为91. 35%～106. 88%,测定结果的相对标准偏差为0. 14%～3. 49%。该方法具有选择性好、准确度高和操作简单等优点,可应用于同时测定包装饮用水中多种阴离子的含量。