HPLC同时测定药用白菊花中绿原酸、木犀草素、芹菜素和金合欢素

采用高效液相色谱法(HPLC)建立同时测定药用白菊花中绿原酸、木犀草素、芹菜素和金合欢素含量的方法,样品采用离子液体分散液相微萃法提取。采用Phenomenex C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇-0.2%冰醋酸溶液(65∶35);检测波长350 nm;柱温35℃;流速0.8 mL/min。绿原酸、木犀草素、芹菜素和金合欢素的质量浓度与峰面积分别在0.0005~100(r=0.9999)、0.00095~190(r=0.9999)、0.0008~160(r=0.9997)、0.00061~122μg/mL(r=0.9996)呈良好的线性关系;回收率分别为90.52%~100.44%、90.88%~98.58%、94.40%~98.82%、93.68%~100.54%。该方法快速,简便,重复性好,适合于同时测定药用白菊花中绿原酸、木犀草素、芹菜素和金合欢素的含量。     

不同海拔高度五脉绿绒蒿中槲皮素和木犀草素含量变化

采用HPLC法测定了青海达里加山和拉鸡山地区不同海拔五脉绿绒蒿的槲皮素和木犀草素含量.达里加山样品中槲皮素和木犀草素平均含量分别为0.1040和0.1299 mg/g,拉鸡山样品中分别为0.0719和0.2018 mg/g.结果表明,五脉绿绒蒿中槲皮素和木犀草素含量在青海达里加山地区呈现出随海拔升高而趋于增高的明显变化趋势,但在拉鸡山地区则呈现出先降后升的变化趋势,其内在变化规律尚待深入探究.     

不同季节灰毡毛忍冬茎叶中绿原酸和木犀草苷含量的分析

目的：比较分析不同季节的灰毡毛忍冬茎叶中绿原酸和木犀草苷的含量,为综合利用茎叶资源提供参考依据.方法：采用蒸制晒干法对灰毡毛忍冬的茎叶进行干燥处理,利用超声波法提取样品中的绿原酸和木犀草苷并通过高效液相色谱法进行含量测定.结果：绿原酸和木犀草苷含量在不同季节的灰毡毛忍冬茎叶中差异明显.绿原酸含量依次为花＞叶＞茎,以秋季（11月份）叶片样品中的绿原酸含量最高（3.031％）,是花蕾中含量的96％;木犀草苷含量总体趋势为叶＞花和茎,以冬季（2月份）叶片样品中的含量最高（0.558％）,是花蕾中含量的4.6倍;二者均高于2010版《中国药典》对山银花和金银花指标物质含量的规定.结论：秋冬季节对灰毡毛忍冬进行休眠期整型修剪,副产物叶片资源丰富,药源成分充足,具有广阔的开发应用前景.     

木豆种子萌发和幼苗生长过程中的芹菜素与木犀草素含量变化

在木豆种子萌发和幼苗生长过程中,芹菜素与木犀草素含量呈波动型上升,各个器官中的木犀草素含量均高于芹菜素。种子萌发过程中,芹菜素与木犀草素最高含量分别是其在干种子的3．04和4．47倍。幼苗生长过程中,根中芹菜素和木犀草素含量高于茎和叶,芹菜素最高含量是茎和叶的1．5和1．6倍,木犀草素最高含量是茎和叶的4．4和4.2倍。二者在茎和叶中的含量及其变化趋势都基本上相似,平缓上升。     

不同药用菊花品种绿原酸含量的RP-HPLC分析

药用菊花系菊科植物菊[Dendranthema morifolium (Ramat.) Tzvel.]的干燥头状花序,具有清心、明目、疏散风热的功效,临床用于治疗冠心病和高血压等[1].菊花为常用中药,使用量大,产地多,加工方法各异.中国菊花的药用类群通过人工长期栽培选育已形成一些相对稳定的栽培变种[2],由于受产地、气候和生态环境等因素的影响,不同菊花药材品种所含主要成分差异较大.中华人民共和国药典2000年版采用绿原酸作为菊花含量测定的指标[3],据此,本实验采用RP-HPLC法测定了来源于4省13个菊花品种的绿原酸含量,以期为药材菊花种质资源评价及利用提供参考.     

高速逆流色谱法分离凤尾草中的芹菜素和木犀草素

建立了高速逆流色谱分离纯化芹菜素和木犀草素的方法。两相溶剂系统为氯仿-甲醇-水（4：3：2）,上相为固定相,下相为流动相进行洗脱。从100mg粗提物中一步分离得到17．0mg芹菜素和22．5mg木犀草素,经高效液相色谱分析,纯度分别为92％和96％。其化学结构由1H和13CNMR鉴定。     

飞机草中木犀草素和槲皮素分析样品制备工艺

研究了飞机草中木犀草素和槲皮素分析样品的制备工艺,确定了超声提取法制备分析样品的最佳工艺条件为：溶剂85%乙醇,液固比10：1,提取时间1h,飞机草中木犀草素和槲皮素的提取率为0.031 8%和0.019 2%,平均加样回收率为99.601 7%和99.032 6%,表明此分析样品制备工艺准确度高,可靠性强。     

木犀草素通过调节凝血活性物质及凝血因子含量维持机体血液循环功能的稳定

目的 探讨木犀草素通过调节凝血活性物质及凝血因子含量维持机体血液循环功能的作用机制。 方法 采用试剂盒和试管法测定木犀草素作用后的凝血酶原时间和血浆复钙时间;采用酶联免疫吸附法检测木犀草素对血液凝血活性物质血栓素(TXB2)、纤维酶原激活物抑制剂(PAI 1)、促红细胞生成素(EPO)和凝血因子Ⅶ(FⅦ)、凝血因子Ⅸ(FⅨ)含量的影响;采用PCR法测定木犀草素对凝血因子Ⅶ、Ⅸ的基因表达情况。 结果 木犀草素能缩短凝血酶原时间和血浆复钙时间,与对照组相比,40 mg/kg的木犀草素使凝血酶原时间和血浆复钙时间分别降低62.89%和64.05%(t=8.713 6、6.218 1,均P结论 木犀草素具有维持机体血液循环功能稳定的作用,其作用机制是通过提高凝血活性物质的含量,调节凝血因子的基因表达量,提高凝血因子的含量,以及抑制纤维酶原的激活和增加血液的黏度等多方面综合作用来实现的。     

木犀草素改善低温下离体大鼠心脏保存效果的研究

目的:研究木犀草素是否能改善心脏停搏保存液(UW液)对离体大鼠心脏的低温保存效果。方法:将40只成年SD大鼠随机分成4组(n=10):对照组(UW组)、7.5μmol/L木犀草素小剂量组,15μmol/L木犀草素中剂量组及30μmol/L木犀草素大剂量组。利用Langendorff离体心脏灌流法,观察心脏在4℃含或不含木犀草素的UW液中保存12 h复灌60 min后心脏功能及超微结构变化,比较心脏冠脉流量(CF)、心肌含水量及冠脉流出液中磷酸肌酸激酶(CK)的释放量。结果:与对照组比较,添加木犀草素后,复灌期心脏的收缩功能(LVPSP,+dp/dtmax)与心脏舒张功能(-dp/dtmax)、冠脉流量在多个复灌时间点均优于对照组,心率在复灌60 min时也显著优于对照组;复灌过程中磷酸肌酸激酶的漏出量及低温保存后心脏超微结构的损伤也均明显低于对照组;随灌注时间延长木犀草素组心脏结构和功能的改善有剂量依赖性趋势;木犀草素对心肌含水量没有影响。结论:木犀草素能显著改善UW液对离体大鼠心脏的低温保存效果,对心脏有明显的保护作用,以30μmol/L的木犀草素大剂量组作用最显著。     

亳菊花中黄酮类化合物的分离鉴定

菊花为菊科植物菊(Chrysanthemum morifolium Ramat.)的干燥头状花序,为了进一步揭示药理活性的物质基础,为该中药的开发利用和质量评价提供依据,安徽亳州亳菊花中的黄酮类化合物进行了系统研究.毫菊经醇提、萃取、硅胶柱层析与纯化得到4个黄酮类化合物.通过理化常数和波谱解析鉴定了其中3个化舍物的结构,分别为:芹菜素-7-甲醚(Apigenin-7-methyl ether)(Ⅰ)、芹菜素(Apigenin)(Ⅱ)和未犀草素(Luteolin)(Ⅲ),另外1个化合物的结构尚在鉴定中.上述3个化合物均为首次从该植物中分到的已知合物.     

四种菊花超临界CO_2萃取物的GC-MS分析

对4种菊花:野菊花、神农香菊、杭黄菊和黄金菊进行超临界CO2萃取(SFE),运用GC-MS检测超临界萃取物中的化学成分,并比较4种菊花类药材萃取物化学成分的差异。结果表明:4种菊花SFE萃取物中共检测到77种成分,主要为萜烯类、醇、醛、酮和脂肪烃类成分,其中仅有14种成分为2种或以上菊花萃取物所共有,不同品种菊花之间所含成分具有明显的差异。     

菊花中一个新的多糖的研究

通过热水提取、离子交换层析和凝胶层析,从菊花(Chrysanthemum morifolium Ramat.)中分离得到一个新的多糖.根据糖组成分析、甲基化分析、高碘酸氧化、部分酸水解和NMR谱图分析,确定其结构如下:[→4)-Galp-(1→4)-Galp-(1→4)-Galp-(1→4)-Galp-(1→6)-Galp-(1]→F3L2Araf-(1→5)-Araf-(1→4)-Glcp-(1→4)-Glcp1→6 F3[→4)-Galp-(1→4)-Galp-(1→4)-Galp-(1→4)-Ga6p-(1→6)-Galp-(1]→n     

菊花中一个新的多糖的研究

通过热水提取、离子交换层析和凝胶层析,从菊花(Chrysanthemum morifolium Ramat．)中分离得到一个新的多糖。根据糖组成分析、甲基化分析、高碘酸氧化、部分酸水解和NMR谱图分析,确定其结构如下：     

菊花的化学成分研究

通过硅胶、Sephadex LH-20反复柱层析、纯化,从菊花的乙醇提取物中分离得到14个化合物,利用波谱方法分离鉴定为香叶木素(chrysoeriol,1),木犀草素(luteolin,2),芹菜素(apigenin,3),香叶木素7-O--βD-葡萄糖苷(chrysoeriol 7-O--βD-glucopyranoside,4),木犀草素7-O--βD-葡萄糖苷(luteolin 7-O--βD-glucopyranoside,5),金合欢素7-O--βD-葡萄糖苷(acacetin 7-O--βD-glucopyranoside,6),刺槐苷(acacetin 7-O--βD-glucopyranosyl(6→1)--αL-rhamnopy-ranoside,7),金合欢素7-O-(6″-O-乙酰)--βD-葡萄糖苷(acacetin 7-O-(6″-O-acetyl)--βD-glucopyranoside,8),金合欢素(acacetin,9),山奈酚(kaempferol,10),异泽兰黄素(eupatilin,11),大黄素(emodin,12),大黄酚(chrysophanol,13)和大黄素甲醚(physcion,14)。其中化合物8~14均为首次从菊花中分离得到。     

菊花R病毒杭白菊分离株全基因组序列测定与分析

杭白菊作为著名的中药“浙八味”之一,种植规模和产区不断扩大,但其病毒病的发生也日益严重,对其产量和品质造成严重影响。本研究利用双链RNA（double stranded RNA,dsRNA）和非序列依赖PCR扩增（sequence independent amplification,SIA）等方法,对感病杭白菊病原物进行鉴定,为杭白菊病毒病原的检测构建一套快速和简便的方法。结果表明,感病杭白菊被菊花R病毒（Chrysanthemum virus R,CVR）侵染,将其命名为CVR-TX。通过对其全基因组进行序列扩增与分析,获得其全长基因组为8 872 bp,编码6个ORF,具有Carlavirus属病毒的典型特征。基于全基因组核酸序列以及复制酶、外壳蛋白氨基酸的序列比对发现,CVR-TX与CVR-BJ同源性最高,分别为85.5%、96.0%和96.3%;与Carlavirus属其他病毒同源性分别在48.2%～54.4%、46.9%～55.3%和36.8%～59.5%,因此CVR被确定为一种新的Carlavirus属病毒。系统进化分析表明,基于全长基因组、复制酶（replicase）基因和外壳蛋白（coat protein,CP）基因与CVR-BJ聚为一簇,亲缘性最近。本研究获得了CVR-TX的全长基因组,丰富了CVR的基因组信息,通过生物信息学分析明确其种属关系和区域变化情况,从而为建立CVR可靠灵敏的分子检测手段和有效的防控措施提供理论基础。     

菊花R病毒杭白菊分离株全基因组序列测定与分析

杭白菊作为著名的中药“浙八味”之一,种植规模和产区不断扩大,但其病毒病的发生也日益严重,对其产量和品质造成严重影响。本研究利用双链RNA（double stranded RNA,dsRNA）和非序列依赖PCR扩增（sequence independent amplification,SIA）等方法,对感病杭白菊病原物进行鉴定,为杭白菊病毒病原的检测构建一套快速和简便的方法。结果表明,感病杭白菊被菊花R病毒（Chrysanthemum virus R,CVR）侵染,将其命名为CVR-TX。通过对其全基因组进行序列扩增与分析,获得其全长基因组为8 872 bp,编码6个ORF,具有Carlavirus属病毒的典型特征。基于全基因组核酸序列以及复制酶、外壳蛋白氨基酸的序列比对发现,CVR-TX与CVR-BJ同源性最高,分别为85.5%、96.0%和96.3%;与Carlavirus属其他病毒同源性分别在48.2%～54.4%、46.9%～55.3%和36.8%～59.5%,因此CVR被确定为一种新的Carlavirus属病毒。系统进化分析表明,基于全长基因组、复制酶（replicase）基因和外壳蛋白（coat protein,CP）基因与CVR-BJ聚为一簇,亲缘性最近。本研究获得了CVR-TX的全长基因组,丰富了CVR的基因组信息,通过生物信息学分析明确其种属关系和区域变化情况,从而为建立CVR可靠灵敏的分子检测手段和有效的防控措施提供理论基础。     

野菊花总黄酮的含量测定

对不同产地、不同加工方法的野菊花中总黄酮进行了含量测定和筛选研究 ,结果首选了湖北省麻城市采摘、烘干法加工的野菊花。并检测了其六批野菊花浸膏的总黄酮含量 ,结果均达 11%以上 ,符合质量要求。     

热激锻炼诱导菊花耐热性研究

以菊花(Chrysanthemum morifolium)叶片和花瓣为试验材料,在38℃下对其进行5 h的热激锻炼,再于50℃下分别进行0、0.5、1.0、1.5、3.0 h的高温胁迫,然后对其细胞膜透性、叶绿素、丙二醛(MDA)和蛋白质含量动态变化及5′-核苷酸酶的活性进行了测定.结果表明,热锻炼的菊花叶片电解质渗漏率相对较小,叶片叶绿素含量比对照下降的慢,5′-核苷酸酶活性比对照高,MDA含量也相对较低,而且花瓣中可溶性蛋白质保持了相对较高的含量,说明热锻炼诱导菊花获得了一定的耐热性.     

盐胁迫对盆栽滁菊生理特性的影响

以滁菊扦插苗为材料,采用不同盐浓度进行盆栽实验,研究了在不同 NaCl 浓度(0、100、200、300、400、500 mmol·L-1)下,滁菊的形态及叶绿素含量、可溶性糖含量、脯氨酸含量、MDA 含量、叶片伤害率和根系活力等生理指标的变化情况。结果表明：叶绿素含量、根系活力随盐胁迫强度的增强而下降;可溶性糖和MDA 含量随盐胁迫强度的增强呈先升后降趋势;叶片伤害率、脯氨酸含量随盐胁迫强度的增强而增加。研究发现滁菊扦插苗能耐受较低浓度的盐胁迫,当盐浓度较高时,其生长受到较大抑制。