利用纤维质原料生产高酶活单细胞蛋白

以蒸汽爆破处理的玉米秸秆为主要原料,接种木霉菌和酵母菌,进行混合发酵生产高酶活单细胞蛋白,在优选的条件下,产品蛋白质含量达31．82％,较原料提高49．69％,纤维素降解率达56．88％,产品纤维素酶活性达105U/g。     

微生物共发酵提高三七糠饲用价值的研究*

对白地霉Ｙ９６１０１株、绿色木霉Ｙ９６３０１株、米曲霉Ｌ９６２０１株和产朊假丝酵母Ｐ９６４０１株混合发酵三七糠生产的单细胞蛋白（ＳＣＰ）产品的饲用价值进行了研究。混菌发酵三七糠ＳＣＰ的纯蛋白质含量比发酵前提高１３０％,纤维素比发酵前降低３０．７％。小鼠急性毒性试验和微核试验均证明该产品无毒性。的饲养试验表明：三七糠ＳＣＰ产品适口性好、能降低料肉比、促进生长、具有潜在应用前景。     

里氏木霉和鸡腿菇利用秸秆共发酵产木质降解酶

为了更好地利用农业废弃物,提高其综合利用率,减少传统化学方法及秸秆焚烧过程造成的环境污染,实验对鸡腿菇、黑曲霉和里氏木霉3株产木质纤维素降解酶系的菌株进行混合平板产酶筛选,结果显示鸡腿菇和里氏木霉平板培养相容性良好,且产酶量高。在相容性实验的基础上,对鸡腿菇和里氏木霉的最优产酶条件进行了研究。在最优条件下:鸡腿菇和里氏木霉接种比例按5:2,接种时间间隔为12h,26oC、150r/min下,发酵3d产漆酶活力达3267.2U/mL,比单独发酵提高106%。     

利用微生物混合培养物生产沙棘果渣单细胞蛋白

以沙棘果渣作为唯一碳源进行了单细胞蛋白发酵研究。经过筛选,从４０多株霉菌、酵母菌和细菌中选育出Ｍｙ－９３１霉菌－酵母混合培养物能迅速地将沙棘果渣转变为单细胞蛋白。在最佳条件下,沙棘果渣经发酵后,其发酵产品粗蛋白含量达４４．１％。动物饲喂试验证明此发酵产品安全无毒,能部分替代鱼粉用作蛋白饲料。     

固态混合发酵提高木聚糖酶和纤维素酶活力的研究

研究了接种比例、接种时间、碳源、氮源等因素对木霉和黑曲霉混合发酵产木聚糖酶和纤维素酶的影响。试验结果表明,当木霉和黑曲霉按4:6同时接种,以玉米芯3．75g、麸皮3．75g、葡萄糖37．5mg为混合碳源,Mandels营养盐11．5mL、添加NH_4NO_37．5mg为氮源,在84h产纤维素酶活力达到230IU/g干物质,木聚糖酶活力达到1308IU/g干物质,与两菌纯培养相比,纤维素酶活力提高163％,木聚糖酶活力提高79．5％。     

发酵白酒糟生产饲料蛋白的培养条件及产物分析

利用白地霉(Geotrichum candidium) Z-4、热带假丝酵母(Candida tropicalis) Z-14和木素木霉(Trichoderma lignorum) Z-20三株菌混合发酵白酒糟生产饲料蛋白的培养基成分为白酒糟90％、麦芽根粉10％、尿素2％,原料:水=1:0.8,pH6.0,接种量10％,培养温度28～30℃,培养周期3d。分析结果表明,发酵产物营养丰富,粗蛋白含量高达32.1％,氨基酸含量齐全,脂肪含量为5.6％,维生素B_1和B_2的含量分别为2.2mg/kg和52.6mg/kg。具有较高的纤维素酶、半纤维素酶及淀粉酶活性。     

马铃薯渣固体发酵生产菌体蛋白饲料的研究

试验以提高马铃薯渣的营养价值为目的，以马铃薯渣为主原料，选用黑曲霉，白地霉，热带假丝酵母，酿酒酵母4个菌株，采用了多菌协生固态发酵技术，经糖比，发酵，干燥等工艺，试制出了菌体蛋白饲料。通过对其感官特征的比较和主要理化指标的定量分析，结果表明，经黑曲霉糖化多菌种协生（白地霉：热带假丝酵母：酿酒酵母=8：1.5：0.5，总接种量为10％，28℃，56h）发酵后，产物蛋白质含量可提高到22.16％，并使原料的霉腐味等异味消除。     

康氏木霉(P2)纤维素酶转化蔗髓纤维素成糖及生产SCP

在30升卧式酶解罐和5升标准发酵罐中,进行了以蔗髓纤维素为基质,用康氏木霉(Trichoderma koningii)P2菌株产生的纤维素酶水解成糖生产单细胞蛋白的试验。10%的底物浓度可以得到较高的转化率。最适搅拌速度为10r/min,用酶量为2.21u/g底物,50℃酶促水解24小时,酶解液中还原糖含量为3—4%,底物得糖率49.5%,全纤维素转化率73.8%。用该酶解糖生产单细胞蛋白,试验了5升标准罐培养酵母的最适条件。     

以啤酒糟为原料采用液体混和发酵法生产饲料蛋白的初步研究

真菌和高等真菌对自然界的木质素、纤维素有很强的分解作用。本实验将平菇、黑曲霉、啤酒酵母进行不同的组合：平菇＋酵母＋黑曲霉、黑曲霉＋酵母、黑曲霉＋酵母＋平菇这三种液体混合发酵体系。以利用平菇、黑曲霉高活力的木质素酶和纤维素酶,将不能直接被动物吸收利用的纤维素分解,并通过与啤酒酵母的混和生长,抑制了终产物还原糖的积累,促进了单细胞蛋白（ＳＣＰ）的合成。实验证明：在三种混和发酵体系中,纤维素酶活力和产品的蛋白含量均有提高,其中发酵饲料１＃（即平菇＋酵母＋黑曲酶这种发酵体系）各项指标提高得最多,纤维素酶活力提高了５．４Ｕ,粗蛋白含量提高了１１％,有较高的应用价值。     

利用城市垃圾发酵生产绿色木霉孢子

研究利用城市生活垃圾发酵生产绿色木霉孢子的可行性,培养条件和发酵过程中的种群密度变化规律。结果表明,城市生活垃圾适宜作为生产木霉孢子的培养基质;合适的培养条件为垃圾培养基质中添加 ３０％（Ｗ／Ｗ）的麸皮,接种量 ３０％（ｖ／ｗ）,发酵 ８—１０ｄ,孢子密度可达 １０９／ｇ以上。     

混合菌发酵转化纤维素生产单细胞蛋白

纤维素是自然界中存在的最丰富的天然资源,合理开发和利用纤维素是科学家们一直致力于研究的重点领域.尽管几十年来人们在纤维素及纤维素酶的理论研究和实践应用方面均取得了较大进步,迄今尚无一种微生物或一套酶系按传统方法用于大规模降解纤维素,并取得显著经济效益[1-3].利用微生物混合发酵,可使纤维素转化为单细胞蛋白.该方面研究不仅可以解决蛋白资源短缺,解决动物饲料需求上的短缺,而且还可以提高和改善饲料中的蛋白含量和营养价值.本文就混合菌发酵转化纤维素合成单细胞蛋白的应用研究进行概述. 1 液态混合菌体系发酵纤维素合成单细胞蛋白     

利用多菌种混合发酵转化玉米秸秆的研究

该文系统地研究了高产纤维素酶生产菌（ＴｒｉｃｈｏｄｅｒｍａｒｅｓｉＴＢ９７０１）与饲料酵母混合共发酵玉米秸秆粉对合成菌体蛋白质和利用纤维素的关系,优选出一条最佳的共发酵工艺途径和条件。研究表明在以氨法处理的玉米秸秆为底物的ＴＢ－９７０１与饲料酵母菌的混合菌共发酵正交实验中,于ｐＨ５．０,３０℃的条件下２００ｒ／ｍｉｎ的恒温、恒速摇瓶培养８ｄ,经测定发酵液终产物中粗蛋白（ＳＣＰ）的含量达到了２３．７０％,总秸秆纤维的转化率达到７０％以上。     

利用城市垃圾发酵生产绿色木霉孢子*

研究利用城市生活垃圾发酵生产绿色木霉孢子的可行性,培养条件和发酵过程中的种群密度变化规律。结果表明,城市生活垃圾适宜作为生产木霉孢子的培养基质;合适的培养条件为垃圾培养基质中添加 ３０％（Ｗ／Ｗ）的麸皮,接种量 ３０％（ｖ／ｗ）,发酵 ８—１０ｄ,孢子密度可达 １０^９／ｇ以上。     

混合菌发酵转化纤维素生产单细胞蛋白

纤维素是自然界中存在的最丰富的天然资源 ,合理开发和利用纤维素是科学家们一直致力于研究的重点领域。尽管几十年来人们在纤维素及纤维素酶的理论研究和实践应用方面均取得了较大进步 ,迄今尚无一种微生物或一套酶系按传统方法用于大规模降解纤维素 ,并取得显著经济效益[1 3] 。利用微生物混合发酵 ,可使纤维素转化为单细胞蛋白。该方面研究不仅可以解决蛋白资源短缺 ,解决动物饲料需求上的短缺 ,而且还可以提高和改善饲料中的蛋白含量和营养价值。本文就混合菌发酵转化纤维素合成单细胞蛋白的应用研究进行概述。1　液态混合菌体系发酵纤…     

酿酒酵母和异常毕赤酵母混菌发酵对白酒液态发酵效率和风味物质的影响

[目的]通过酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)和异常毕赤酵母(Pichia anomala)在麸皮汁培养基中的混菌发酵,以增加发酵液的风味酯含量并保证发酵效率.[方法]采用两种酵母混合接种、顺序接种混菌发酵方式,以酵母单独接种发酵作对照,测定酵母的发酵性能和发酵液中乙酸乙酯含量,并对发酵结束时风味物质进行半定量;利用无细胞系统,分析两种酵母之间的相互作用.[结果]采用顺序接种混菌发酵方式,避免S.cerevisiae 对P.anomala的生长竞争性抑制,使两种酵母均能获得较高的生物量;发酵结束时,乙醇浓度为20.17 g/L,比酿酒酵母单菌种发酵时降低了9.14％;但乙酸乙酯含量达到0.74 g/L,比异常毕赤酵母单菌种发酵时提高了80％;发酵液风味物质的测定结果表明,酿酒酵母与异常毕赤酵母的混合发酵能够形成更多的酯类物质,总酸和高级醇含量却相对较低,有效改善了发酵液的风味特性;在混菌发酵时,碳源是影响酿酒酵母繁殖的重要因素,但酵母的代谢物对异常毕赤酵母产生明显的抑制作用.[结论]混菌发酵,为丰富发酵产物的风味复杂性和增强风格的独特性提供了一条有效的途径.     

里氏木霉Cel5A基因优化及其在毕赤酵母中的高效表达

内切纤维素酶Cel5A缺乏是限制纤维素酶制剂高效酶解天然纤维素的关键因素。本文尝试构建高效表达里氏木霉Cel5A的毕赤酵母重组菌株以弥补目前Cel5A的天然分泌不足,通过基因密码子偏好性优化里氏木霉Cel5A基因和构建表达载体p PIC9K-eg2,并将其电转入毕赤酵母GS115以构建重组子,利用浓度梯度平板和摇瓶发酵筛选获得一株高产毕赤酵母Pichia pastoris菌株GS115-EGⅡ。重组酶的酶学性质分析显示,该酶分子量50 k Da、最适p H(p H 4.5)略有降低及最适反应温度为60℃,专一性地作用于非结晶纤维素,与天然里氏木霉Cel5A并无明显区别。通过摇瓶发酵的初步优化,该菌摇瓶培养条件:培养温度28℃、起始p H 5.0、接种量2%、每24 h添加甲醇1.5%(V/V)、每24 h添加山梨醇4 g/L及吐温80添加4 g/L,发酵192 h重组酶酶活达到24.0 U/m L。进一步上罐(5 L)发酵180 h,该重组酶Cel5A酶活高达270.9 U/m L,蛋白含量达到4.16 g/L。重组毕赤酵母P.pastoris GS115-EGⅡ是一株适合于外源表达Cel5A的工程菌,该重组酶可替代天然分泌Cel5A适用于当前酶基生物炼制模式下木质纤维素基质高效水解中。     

里氏木霉与米根霉混合固态发酵产纤维素酶

以里氏木霉及米根霉单菌固态发酵为对象,考察不同混合发酵形式对里氏木霉与米根霉混合固态发酵产纤维素酶的影响。结果表明:同时接种里氏木霉与米根霉,试验考察的两菌种接种量比1∶1(以孢子个数计)及5∶1条件下,两菌未产生明显协同产酶作用。米根霉延时(24 h)接种且菌种量比5∶1以及米根霉延时(48 h)接种且菌种量比1∶1,2种发酵形式产酶情况类似,滤纸酶活(FPA)及羧甲基纤维素酶(CMCase)酶活相对米根霉单菌发酵有所提高,而β-葡萄糖苷酶(β-GA)酶活相对里氏木霉单菌固态发酵结束时分别增加4.66及4.40倍,可以发现两菌产生一定协同作用。在米根霉延时(48 h)接种且菌种量比5∶1的发酵形式下,FPA及CMCase在发酵第7天酶活分别达到44.04 IU/g、627.14 U/g(以1 g干曲计),分别是里氏木霉固态单菌发酵产酶达到稳定期时酶活的1.36和1.63倍,两菌产生了有效的协同作用。     

不同预处理及发酵方式对提高蔗渣发酵产物蛋白含量的研究

采用不同的预处理方法对蔗渣进行预处理,并测定了其各个组分的含量。利用霉菌对蔗渣进行微生物降解,并讨论了不同发酵方式对产物中蛋白含量的影响。结果表明,木霉与热带假丝酵母共发酵时蛋白含量最高,为17．74％。     

油脂酵母发酵木糖生产微生物油脂

目的用斯达油脂酵母(Lipomyces starkeyi)作为发酵菌株,以纯木糖溶液为油脂发酵原料,对L.starkeyi利用木糖积累油脂进行系统研究。方法 L.starkeyi于斜面培养基中活化后,接种于YPD液体培养基,于30℃、200 r/min摇床培养。在摇瓶中培养一段时间后,测定发酵液细胞浓度,离心发酵液收集细胞。将离心后得到的菌体加入木糖溶液重悬,并转接于含50 mL木糖溶液的250 mL摇瓶中进行发酵生产。结果相比一阶段法,两阶段发酵方法可以在更短的时间内达到较高的油脂含量,油脂含量能够达到细胞自身干重的60%以上。实验发现高菌龄酵母产油速度更快;并且初始木糖浓度高达120 g/L时,酵母细胞仍然能够高效合成油脂。结论 L.starkeyi能够有效利用木糖进行发酵产生油脂,是以木质纤维素为原料生产微生物油脂的优良菌种。     

锁掷酵母预处理油脂原料膨化大豆

通过3株红酵母对膨化大豆进行固态发酵预处理,油脂和豆粕中类胡萝卜素的含量都显著增加,且油脂中脂肪酸组成没有显著变化。其中,锁掷酵母发酵膨化大豆所提取的油脂中类胡萝卜素含量最高,为15.010μg/g,比未发酵样品提高了5.526倍。进一步对锁掷酵母固态发酵进行工艺优化,培养时间、培养基含水量、接种量和发酵温度均显著影响油脂中类胡萝卜素的含量(P<0.05),且确定最佳培养条件为培养基含水量50%、接种量50%、培养温度30℃、发酵时间72 h,优化后油脂中类胡萝卜素含量较优化前提高了7.928%,所得功能性油脂符合油脂常规理化指标的国家标准。本研究表明,通过锁掷酵母对膨化大豆进行固态发酵预处理,所得油脂含有丰富的类胡萝卜素,且发酵后豆粕的营养价值也有所提升,这为开发富含微生物来源的生物活性物质、营养价值提升的功能油脂产品奠定了研究基础。