新型人肝再生增强因子的分子克隆及其性能研究

肝再生增强因子(ALR)是新近发现,存在于新生大鼠肝组织中的一种新的肝增殖刺激因子,其人源性对应序列未见报道.研究在克隆大鼠ALRcDNA的基础上,首次报道了依据cDNA序列推导的人ALR的氨基酸序列;将人ALR编码区cD-NA亚克隆于真核表达质粒pcDNAⅠ,转染cos-7细胞后,发现其表达产物具有促进HTC肝癌细胞增殖的作用;Northern杂交提示人 ALR mRNA比大鼠ALR mRNA大,约l.4kb,表明人ALR cDNA具有更长的非翻译区序列;除肝脏外,ALR mRNA在胸腺及肾等人胚胎组织中也有较高丰度表达;正常大鼠肝组织仅低丰度表达ALRmRNA,但 2/3肝部分切除后12h肝组织ALR mRNA表达明显增高,提示 ALR可能是一种重要的肝再生刺激因子.     

磁共振心脏测功计

奥地利因斯布鲁克医科大学与当地一家医疗设备公司共同研发成功能用于心脏病早期诊断的心脏测功计。将心脏测功计安装在传统的磁共振设备中,就能够在短时间内检测出患者的血液循环、心脏新陈代谢和其他有关生化数据。     

不同肝脏疾病患者血浆游离氨基酸水平改变的模式

采用DNS -Cl荧光标记氨基酸 ,聚酰胺薄膜层析 ,分析了慢性血吸虫病肝肿大、晚期血吸虫病肝肿大 ,慢活肝 ,慢迁肝以及肝硬化等五种不同肝损伤患者血浆游离氨基酸水平 ,结果发现它们血浆游离氨基酸改变 ,均有一定的特异的模式     

黄缘盒龟细菌性感染的观察

利用电子显微镜,对一只濒死黄缘盒龟的心、肝、脾、肺、肾、胃和肠道进行了检查,在心、肝、脾、肾均发现一种短杆状细菌感染,受染器官均出现明显的病理变化,如线粒体、高尔基体和内质网均肿大变形. 肺部虽未找到细菌,但发现有明显的病变存在,如细支气管的微绒毛脱落,并可见坏死区. 胃和肠道未发现细菌感染,未见明显的病理改变.     

改造后的大肠杆菌氨基酸产量可望成倍增长

应用遗传工程学技术又获可喜成果。主要研究氨基酸、色氨酸生产方法的大阪大学工程学部的发酵工程数研室(合叶修一教授)研究小组,用大肠杆菌产生色氨酸研究成功。产生色氨酸的量是当代所采用的发酵法的两倍。 大肠杆菌以葡萄糖为原料,经过五种酶的复杂的连续地反应可以合成色氨酸。在一     

改造后的大肠杆菌氨基酸产量可望成倍增长

应用遗传工程学技术又获可喜成果。主要研究氨基酸、色氨酸生产方法的大阪大学工程学部的发酵工程数研室(合叶修一教授)研究小组,用大肠杆菌产生色氨酸研究成功。产生色氨酸的量是当代所采用的发酵法的两倍。 大肠杆菌以葡萄糖为原料,经过五种酶的复杂的连续地反应可以合成色氨酸。在一     

水貂(Mustla vison)染色体组型分析

水貂是一种珍贵的毛皮动物,有关水貂的染色体研究国外Shackelford和L.Wipf等人曾有报道,但都是采用睾丸压片或利用肝、肾、肺、脾、骨髓等经过组织培养进行观察的。在国内还未见有报道。我们应用人类外周血培养技术对水貂染色体进行了研究,现将结果介绍如下。     

新的氨基酸——氨基柠檬酸

过去的生物化学教科书上一直断言,在生物体的蛋白质中只有20种氨基酸。但是,最近西德生物化学家却在一种极重要的蛋白质——核糖核蛋白中发现了一种新的氨基酸。所有蛋白质都是由氨基酸的头与尾连接而成的线性分子。西德法兰克福大学的生物学家G.Wilhelm和K.D.Kupka从各种不同来源的材料(如     

大鼠活体注射台盼蓝后肝和肾的组织学与组织化学变化的观察

大鼠连续4天腹腔注射1%台盼蓝后,观察隔天、隔周、隔二周后肝和肾的组织结构及PAS、AlP、AcP、G-6-Pase、Mg~(2+)-ATPase和SDH的活性变化。结果发现:肝细胞和肾小管的上皮细胞中有台盼蓝颗粒;肝PAS反应阴性;隔天后肝AlP、AcP、G-6-Pase和SDH活性增强,Mg~(2+)-ATPase活性减弱;肾的上述组化反应活性都减弱;隔二周后肝和肾的上述组化反应接近对照。实验结果提示:活体注射台盼蓝对肝和肾未构成实质性损伤,隔天后的组化变化可能是一种生理适应性反应。     

牛磺酸、羟脯氨酸、γ－氨基丁酸、鸟氨酸和色氨酸的测定

在日立８３５－５０型氨基酸分析仪上,用７２ｍｉｎ程序进行分析,通常一次只能分析１７种氨基酸。采用本文所述方法则一次能分析２２种氨基酸。在不延长分析时间,不增加成本的情况下,一次多分析了五种氨基酸,提高了仪器工作效率。经过精密度、准确度试验和样品分析证明：该方法测定的数据准确、可靠,是一个又快又省的好方法。     

遗传工程植物的田间试验

美国农业部批准了肯塔基大学对含有一种能调节重金属浓度的小鼠肝基因的烟草进行田间试验.该鼠基因指使植物产生一种与重金属如镉、汞和铜结合的蛋白——金属硫因。大学科学家们对鼠基因转化的烟草植株进行温室试验发现,叶中的镉含量降低约1/4. 美农业部动植物卫生检疫处的L.B.Slagle说“重金属与许多疾病的发生有关,当人类     

大鼠丙酮酸激酶同工酶催化性质的比较研究

利用DEAE纤维素柱层析分离大鼠组织匀浆105,000g上清中的丙酮酸激酶(PyK)同工酶,发现肝和肾中存在L及K两型PyK,肝中以L型为主,而肾中以K型较多,L:K的平均活性比值分别为6.07及0.248。但骨胳肌中只有M型。用聚丙烯酰胺凝胶板电泳也可获得相似的同工酶谱。用硫酸铵沉淀结合层析又从大鼠红细胞中提取了R型PyK,与上述三型一起,进行了催化性质的比较研究。结果如下: 1.K型对热极不稳定,而M型对热最为稳定。2.L型和K型可利用GDP代替ADP作为底物,但GDP作为底物时的酶活性远小于ADP作底物时的活性。M型利用GDP的能力很小,而R型几乎可忽略不计。3.某些氨基酸可抑制PyK,K型PyK对氨基酸的抑制最为敏感,可使其抑制的氨基酸最多,而M型最不敏感,在测定的12种氨基酸中仅受苯丙氨酸抑制,L型与R型介于上述两型之间,可使它们抑制的氨基酸种类相似。4.氨基酸对PyK的抑制作用与它们代谢途径中成糖或成酮的关系尚不明确,而与其结构有密切关系。能抑制PyK的氨基酸主要是非极性氨基酸,如丙、正丁、脯、苯丙氨酸等,当这四种氨基酸的侧链羟化成相应的丝氨酸、苏氨酸、羟脯氨酸或酪氨酸后,其抑制作用明显减弱或消失。5.小侧链的脂肪族氨基酸(如半胱、丙、正丁)对L型PyK的抑制作用强于大侧链的芳香族氨基酸(苯丙、酪);但对K型PyK的抑制却弱于大侧链芳香族氨基酸。并且L型对小侧链氨基酸的敏感性大于K型,而对大侧链氨基酸的敏感小于K型。6.丙氨酸对L、R、K三型PyK的抑制作用与其α-氨基和直链结构有密切关系,其中α-氨基尤为重要。7.果糖-1,6-二磷酸(FDP)能激活R及K型PyK,当底物PEP处于低浓度时,尚可激活L型。FDP还能逆转各种氨基酸对四型PyK同工酶的抑制作用,其中对R及K型的逆转效果较大。FDP对各种氨基酸抑制的逆转效应并不相同。8.丝氨酸可显著激活K型PyK,也可逆转氨基酸对K型PyK的抑制作用,其逆转效率仍因氨基酸而异,但其激活作用与FDP不能相加。对上述结果作了讨论,认为这些PyK同工酶催化性质的差异可有助于鉴定未知样品中的同工酶类型。还提出一个PyK同工酶上有两类氨基酸结合点的假说。     

1990年生物科学进展信息集萃(国外部分)

1月△美国新墨西哥大学的研究人员,用扫描隧道显微镜(STM)进行基因定序的研究。此法比目前可行的定序方法节省材料,并且快得多。△意大利科学家发现一种能控制神经细胞分化的神经肽——存在于嗅神经中的一种与降钙素相关的肽(CGRP)。△美国科学家发现一种新型蛋白质,通过影响细胞里微管的活动,促进细胞分裂和神经细胞的生长。这种蛋白质取名为“Dynamin”。 2月△加拿大科学家经过10年努力,开发出一种鉴别7日龄牲畜胚胎性别的技术。     

美洲鲥hsp70的分子特征及其对运输应激的应答

运用同源克隆和c DNA末端快速扩增(RACE)技术获取了美洲鲥(Alosa sapidissima)热应激蛋白70(hsp70)的全长c DNA序列,其总长度为2 545 bp,开放阅读框(ORF)为1 914 bp,推测编码637个氨基酸,其氨基酸的二级结构含有HSP70家族的3个特征序列。氨基酸同源性分析显示,美洲鲥hsp70与墨西哥脂鲤(Astyanax mexicanus)等鱼类的相似性达84%以上,与无脊椎动物果蝇(Drosophila auraria)及大肠杆菌(Escherichia coli)的相似性分别为73%和38%。荧光定量PCR检测显示,该基因在美洲鲥鳃、肌肉、头肾中高表达,在脑和心中相对高表达,在肝、脾、肠、肾中微量表达。采用荧光定量PCR方法研究运输应激对美洲鲥未经繁殖的亲鱼hsp70 m RNA水平的影响,在运输实验中鳃、肝hsp70 m RNA水平呈先升高后降低的变化趋势,头肾hsp70 m RNA水平呈现递增趋势。该结果表明克隆到的基因符合诱导型hsp70的特点,而且美洲鲥鳃、肝、头肾组织的hsp70 m RNA对运输应激表现出明显的应答作用。     

镧对鲤鱼五种组织超氧化物歧化酶同工酶及酶活性的影响

将鲤鱼暴露于不同浓度的氯化镧溶液120 d,研究稀土元素镧对鲤鱼脑、肝胰脏、肾、鳃、肌肉5种组织超氧化物歧化酶(SOD)同工酶及酶活性的长期影响,结果表明:镧对SOD的影响表现出一定的组织差异性.在实验浓度范围内(0.01～5 mg/L),镧对肝胰脏、鳃、肌肉SOD均有明显抑制作用,且与对照组相比相差显著或极显著(P< 0.05或P< 0.01),而脑、肾SOD活性与对照组相比无显著性差异(P>0.05).同工酶电泳实验结果表明:镧能使鲤鱼肝胰脏、脑、肾、肌肉、鳃SOD酶带活性强弱发生明显变化,还能使肝胰脏SOD同工酶酶带缺失.     

大鼠丙酮酸激酶同工酶催化性质的比较研究

利用DEAE 纤维素柱层析分离大鼠组织匀浆105,000g 上清中的丙酮酸激酶(PyK)同工酶,发现肝和肾中存在L 及K 两型PyK,肝中以L 型为主,而肾中以K 型较多,L:K 的平均活性比值分别为6.07及0.248。但骨胳肌中只有M 型。用聚丙烯酰胺凝胶板电泳也可获得相似的同工酶谱。用硫酸铵沉淀结合层析又从大鼠红细胞中提取了R 型PyK,与上述三型一起,进行了催化性质的比较研究。结果如下:1.K 型对热极不稳定,而M 型对热最为稳定。2.L 型和K 型可利用GIP 代替ADP 作为底物,但GDP 作为底物时的酶活性远小于ADP 作底物时的活性。M 型利用GDP 的能力很小,而R 型几乎可忽略不计。3.某些氨基酸可抑制PyK,K 型PyK 对氨基酸的抑制最为敏感,可使其抑制的氮基酸最多,而M 型最不敏感,在测定的12种氨基酸中仅受苯丙氨酸抑制,L 型与R 型介于上述两型之间,可使它们抑制的氨基酸种类相似。4.氨基酸对PyK 的抑制作用与它们代谢途径中成糖或成酮的关系尚不明确,而与其结构有密切关系。能抑制PyK 的氨基酸主要是非极性氨基酸,如丙、正丁、脯、苯丙氨酸等,当这四种氨基酸的侧链羟化成相应的丝氨酸、苏氨酸、羟脯氨酸或酪氨酸后,其抑制作用明显减弱或消失。5.小侧链的脂肪族氨基酸(如半胱、丙、正丁)对L 型PyK 的抑制作用强于大侧链的芳香族氨基酸(苯丙、酪);但对K 型PyK 的抑制却弱于大侧链芳香族氮基酸。并且L 型对小侧链氨基酸的敏感性大于K 型,而对大侧链氨基酸的敏感小于K 型。6.丙氨酸对L、R、K 三型PyK 的抑制作用与其α-氨基和直链结构有密切关系,其中α-氨基尤为重要。7.果糖-1,6-二磷酸(FDP)能激潘R 及K 型PyK,当底物PEP 处于低浓度时,尚可激活L 型。FDP 还能逆转各种氨基酸对四型PyK 同工酶的抑制作用,其中对R 及K 型的逆转效果较大。FDP 对各种氮基酸抑制的逆转效应并不相同。8.丝氨酸可显著激活K 型PyK,也可逆转氨基酸对K 型PyK 的抑制作用,其逆转效率仍因氪基酸而异,但其激活作用与FDP 不能相加。对上述结果作了讨论,认力这些PyK 同工酶催化性质的差异可有助于鉴定未知样品中的同工酶类型。还提出一个PyK 同工酶上有两类氨基酸结合点的假说。     

水貂（Mustl A Vison）染色体组型分析

水貂是一种珍贵的毛皮动物，有关水貂的 染色体研究国外Shackelford^[5]和L. Wipf等人 曾有报道，但都是采用辜丸压片或利用肝、’肾、 肺、脾、骨髓等经过组织培养进行观察的。在国 内还未见有报道。我们应用人类外周血培养技 术对水貂染色体进行了研究，现将结果介绍如 下。     

翘嘴鳜NADPH氧化酶2个催化亚基cDNA的克隆和表达特征

吞噬细胞NADPH氧化酶能生成用于清除病原微生物的活性氧(reactive oxygen species, ROS),在机体的防御体系中起着非常重要的作用.本文利用RT-PCR结合RACE-PCR的方法,克隆到翘嘴鳜NADPH氧化酶的催化亚基gp91phox和p22phox的cDNA全长.并研究两者在正常的翘嘴鳜和注射了柱状黄杆菌灭活菌苗（FKG4）的翘嘴鳜组织中的表达模式.结果表明,gp91phox基因cDNA序列全长2 037 nt,开放阅读框长度为1 698 nt,翻译成565个氨基酸;p22phox 基因cDNA序列全长1 296 nt,开放阅读框561 nt,翻译成186个氨基酸.将这2个亚基推导的氨基酸序列与人的对应亚基相比,相似性分别为68.7%和60.8%,且具有相似的结构域和功能域,说明翘嘴鳜与人的NADPH氧化酶具有相似的功能活性.半定量PCR分析显示,在翘嘴鳜血液、脑、心脏、肾、肝、脾、胸腺等11种组织中均能检测到gp91phox和p22phox的基因表达.经FKG4免疫后,gp91phox在翘嘴鳜血液、头肾和脾3种组织中的表达量显著上升,p22phox在头肾和脾2种组织中的表达量显著上升.由此推断,NADPH氧化酶可能参与了机体的抗菌免疫应答.     

HPO结构与受体结合功能关系的初步研究

肝细胞生成素(HPO)是一种新型细胞因子,在肝再生过程中具有重要的调控作用,研究发现在肝源细胞表面有其特异性受体。为了研究HPO结构与其受体结合功能的关系,构建并表达了HPO及其系列缺失体,利用流式细胞术检测了HPO及其系列缺失体与受体的结合能力。结果表明,在HPO的序列中可能有多个受体结合功能区,其N端的前10位氨基酸残基和C端的第11—20位氨基酸残基对于其受体结合能力是必需的,而C端前10位氨基酸残基对HPO与受体的结合有一定的抑制作用。此外HPO结构的完整性对于其受体结合功能也是必需的。     

顺,反铂配合物诱导生物合成金属硫蛋白的研究

给家兔皮下注射不同结构的铂配合物溶液、对肝、肾组织的可溶性组分进行凝胶和离子交换层析分离,研究了它们诱导金属硫蛋白合成的性质,发现顺铂只选择性地诱导肝脏合成ＭＴ,反铂对肝,肾都不诱导,Ｋ２ＰｔＣｌ４同时可在肝和肾脏中诱导ＭＴ的合成。并通过用Ｚｎ（ＮＯ３）２预先诱导肝和肾中合成ＭＴ,然后每日以２、４、４和８ｍｇＰｔ／ｋｇ的剂量连续皮下注射４天顺铂或反铂溶液后,在肝和肾中分离出大量的铂化硫蛋白,且用反