退隐的胸腺:有关T细胞发生的研究

胸腺是Ｔ细胞分化成熟并接受教育选择的中枢免疫器官。以往一直认为,发育早期进入胸腺的Ｔ细胞必须经过Ｔ细胞受体基因重排,接受阳性选择和阴性选择,形成对ＭＨＣ和抗原具有识别能力的Ｔ细胞库,并获得对自身抗原的免疫耐受性。上述过程可删除90%以上的胸腺细胞,保留下来的Ｔ细胞进入外周淋巴循环,称为初生Ｔ细胞(ｎａｉｖｅＴｃｅｌｌ),并在以后的免疫应答中进一步分化,发挥免疫功能[1]。随着性腺发育的成熟,胸腺逐步退化,经典的理论认为胸腺只在生物发育早期行使功能。但新近随着器官移植和ＡＩＤＳ病研究的发展,人们发现成年胸腺在初生Ｔ…     

一种检测细胞微量点突变的方法——等位基因特异的PCR

为了灵敏、方便地检测出细胞群体中含量极低的点突变,利用一β珠蛋白基因簇Gγ -202 C→G突变的杂合细胞株,优化传统的等位基因特异PCR的反应条件,以定量的PCR产物为模板,在含5%甲酰胺的体系中用半巢式的等位基因特异引物进行扩增.结果表明,该方法灵敏可靠,可快速检测到细胞群体中低于0.025%的点突变.     

一种同时提取水稻土壤中细胞外和细胞内形态DNA的方法

采用灭菌的水稻田土壤为基质,分别投加细菌基因组DNA和细菌活体,应用该方法提取细胞内和细胞外DNA。结果表明,DNA提取效率平均在75.4%-82.3%,DNA纯度OD260/280在1.75-1.85之间。用细菌16S rDNA通用引物PCR表明,DNA纯度能满足PCR要求,细胞内DNA与细胞外DNA互不污染。     

受体相互作用蛋白激酶-3参与甲型H1N1流感病毒感染小鼠记忆性CD8＋ T细胞的应答

受体相互作用蛋白激酶-3(receptor-interacting protein kinase 3, RIPK3)是坏死复合体的关键成分之一,介导细胞程序性死亡(programmed cell death,PCD)的发生。前期研究发现流感抗原特异性CD8^＋T细胞的初次应答部分依赖于RIPK3分子,为探讨其在记忆性CD8^＋T细胞应答中的作用,对初次感染后的C57BL/6小鼠在免疫记忆阶段进行了再次感染,并用流式细胞仪检测了流感病毒特异性的记忆性CD8^＋T细胞的表型和功能。结果发现小鼠初次感染甲型 H1N1流感病毒株A/Puerto Rico/8/34后37 d, RIPK3敲除小鼠的CD8^＋T细胞比例及分泌细胞因子γ-干扰素(IFN-γ)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的能力均显著低于野生型小鼠;在再次感染相同病毒时,RIPK3敲除小鼠流感病毒特异性CD8^＋T细胞比例及分泌细胞因子IFN-γ的能力依旧显著低于野生型小鼠;而CD8^＋中枢型记忆性T细胞(TCM)比例显著高于野生型小鼠,效应型记忆性T细胞(TEM)或效应性T细胞(TEff)比例却显著低于野生型小鼠。提示RIPK3分子参与调节流感病毒特异的记忆性CD8^＋T细胞诱生数量和分泌细胞因子功能,并影响其TCM与TEM/TEff的比例,为深入探索病毒特异的记忆性CD8^＋T细胞应答的分子机制提供了新线索。     

一种用高效液相色谱-电喷雾/串联质谱(HPLC-ESI/MSn)定量检测植物组织中微量1-氨基环丙烷-1-羧酸(ACC)含量的方法

介绍一种用高效液相色谱碳18柱(HPLC-C18)分离.电喷雾串联质谱(ESI-MSn)鉴定和定量检测植物组织中微量1-氨基环丙烷-1-羧酸(ACC)含量的方法,其最低检测限达0.7 pmol,标准曲线线性符合系数为0.9992.建立了从20～100 mg微量植物样品中提取ACC和固相萃取(SPE)预纯化的方法,加样回收率为95.1%±4.2%.此种提取方法结合HPLC-ESI/MSn分析与定性定量检测苹果'2001富士'中ACC含量为306.6 ng·g-1(FW),表明此法适合于定性定量检测植物样品中的微量ACC.     

TCR基因重排在蕈样肉芽肿诊断中的应用

T细胞在成熟过程中通过T细胞表面受体基因重排,从而具有特异性识别抗原的能力,在这一过程中的任何失调都会导致疾病。蕈样肉芽肿是由于淋巴细胞的恶性增殖所导致的,病变组织表现出T细胞受体基因重排克隆性。通过Southern印迹分析技术和PCR技术来检测T细胞受体基因重排。T细胞受体基因重排的检测在蕈样肉芽肿的诊断的应用上有重要的参考价值。