应用流式细胞术分析林麝外周血 CD4+、CD8+ T淋巴细胞

通过对圈养林麝(Moschusberezovskii)外周血淋巴细胞CD4~+、CD8~+亚群的检测,探讨林麝细胞免疫功能状态,并探索应用流式细胞仪分析其淋巴细胞亚群的方法,为研究林麝重大疾病的病理机制及诊断方法提供科学依据。本研究选取健康林麝和患呼吸道疾病林麝各5头,以双色流式细胞术检测其外周血淋巴细胞CD4~+、CD8~+亚群的含量,并进行比较。结果显示,羊源CD4、CD8的流式荧光抗体能够标记林麝细胞并有效检测;患病林麝与健康林麝相比,外周血CD4~+细胞含量无差异(P 0.05),CD8~+细胞含量则显著降低(P 0.01),CD4~+/CD8~+比值显著增高(P 0.01)。结果表明,患呼吸系统炎性疾病的林麝其外周血淋巴细胞CD8~+亚群变化显著,检测淋巴细胞亚群对林麝疾病的诊断有重要意义。     

益生菌联合布地奈德对支气管哮喘患儿的疗效及对外周血CD4+和CD8+细胞水平的影响

研究益生菌联合布地奈德对支气管哮喘患儿的疗效及对外周血CD4⁺和CD8⁺细胞水平的影响, 为该类患者的治疗提供参考。

选择2019年6月至2020年5月我院收治的92例支气管哮喘患儿为研究对象, 按照随机数字表法分为观察组(益生菌联合布地奈德治疗)和对照组(布地奈德治疗)各46例, 比较两组患儿疗效、临床症状消失时间、治疗前及治疗4周后T淋巴细胞(CD4⁺、CD8⁺)和肺功能[用力肺活量(FVC)、第1秒用力呼气容积(FEV1)、最大呼气峰流速(PEF)]水平。

治疗4周后, 两组患儿总有效率比较差异无统计学意义(93.48%vs 89.13%, χ²=0.137, P=0.711)。观察组患儿咳嗽消失时间、气促消失时间、哮鸣音消失时间、憋喘消失时间均显著低于对照组(均P < 0.05)。治疗4周后, 观察组患儿CD4⁺细胞水平显著低于治疗前及同期对照组, CD8⁺细胞、肺功能(FVC、FEV1、PEF)水平显著高于治疗前及同期对照组(均P < 0.05)。

益生菌联合布地奈德对支气管哮喘的疗效显著, 能够促进患儿临床症状恢复, 改善患儿肺功能, 下调外周血CD4⁺细胞水平, 上调CD8⁺细胞水平。

     

布地奈德联合孟鲁司特钠对支气管哮喘患儿细胞因子、免疫功能影响

目的:探讨布地奈德联合孟鲁司特钠对支气管哮喘患儿细胞因子、免疫功能影响。方法:选自我院于2014年9月~2016年3月期间收治的支气管哮喘患儿96例,依据随机数字表法随机分为观察组与对照组,每组48例。对照组给予孟鲁司特钠治疗,观察组在对照组基础上结合布地奈德治疗。两组疗程均为4周。观察并比较两组的临床疗效、以及治疗前后患者血清细胞因子水平、免疫功能及肺功能的变化情况。结果:观察组治疗总有效率(95.83%)高于对照组(79.17%)(P0.05);观察组血清IL-5含量治疗后低于对照组,而IL-12含量高于对照组(P0.05);观察组血清Ig E含量治疗后低于对照组,而Ig A、Ig M含量高于对照组(P0.05);观察组FEV1和FVC治疗后高于对照组(P0.05);两组均未见明显不良反应。结论:布地奈德联合孟鲁司特钠治疗支气管哮喘患儿疗效显著,且作用可能与改善细胞因子、免疫功能及肺功能有关。     

急性冠脉综合征患者CD4~+T淋巴细胞亚群的变化及临床意义

目的:研究急性冠脉综合征(ACS)患者CD4+T淋巴细胞亚群的变化及临床意义。方法:收集2013年3月-2014年3月入住我院首次行冠脉成形术(PCI)治疗的ACS患者88例以及造影结果正常患者28例。分别于冠脉造影时取冠脉血流式细胞技术检测CD4+T细胞亚群Th1/Th2、Th17/Treg比例表达变化。结果:与对照组相比,ACS组患者冠脉血中Th1、Th17细胞占CD4+T淋巴细胞的百分比显著升高,而Th1、Treg细胞占CD4+T淋巴细胞的百分比显著降低,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:ACS患者体内免疫反应增强,CD4+T淋巴细胞不同功能亚群均参与了动脉粥样硬化(AS)的发生发展,Th1、Th17可促进AS的进展和不稳定性,而Th1、Treg作用相反。     

雷公藤甲素对哮喘豚鼠外周血CD_4~+和CD_8~+淋巴细胞的影响

探讨雷公藤甲素在治疗哮喘中对外周血 T淋巴细胞的影响机制 ,采用免疫细胞化学方法检测 30例豚鼠外周血淋巴细胞 CD+ 4 、 CD+ 8的表达。实验动物分为对照组、哮喘组和雷公藤甲素治疗组 (治疗组 ) ,每组各 1 0只。结果表明 ,治疗组CD+ 4 淋巴细胞表达阳性率及表达强度明显低于哮喘组 (P<0 .0 1 ) ,CD+ 8阳性率高于哮喘组 (P<0 .0 5 ) ,与对照组比较差异无显著性。本研究认为 ,雷公藤甲素可能通过增高哮喘豚鼠 CD+ 8淋巴细胞 ,降低 CD+ 4 淋巴细胞来发挥抗哮喘气道炎症作用。     

匹多莫德对反复呼吸道感染患儿外周血T淋巴细胞亚群变化的影响及其临床疗效

目的:研究匹多莫德治疗反复呼吸道感染患儿的临床疗效,并探讨其对患儿外周血T淋巴细胞亚群变化的影响。方法:选择我院收治的160例反复呼吸道感染患儿,根据临床治疗方法将其分成研究组(80例)与对照组(80例),对照组采用抗生素或抗病毒、退热、止咳、平喘与化痰等对症治疗,研究组则在对照组的基础上再加用匹多莫德口服。比较两组患儿外周血T淋巴细胞亚群变化并分析其临床疗效。结果:研究组治疗总有效率显著优于对照组(P0.05)。研究组治疗后CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平,与治疗前比较明显升高(P0.05),与对照组同期比较具有明显的差异(P0.05)。研究组患儿治疗后白细胞计数及中性粒细胞水平,与治疗前比较无明显差异(P0.05),与对照组同期比较无明显差异(P0.05);对照组治疗前后白细胞计数及中性粒细胞水平无明显差异(P0.05)。研究组患儿咳嗽、发热、喘息、肺部啰音消失时间以及抗生素使用时间均明显少于对照组(P0.01)。研究组与对照组患儿治疗过程中均未发生明显的药物不良反应。结论:匹多莫德治疗反复呼吸道感染患儿疗效确切,能有效改善T淋巴细胞的免疫功能,值得临床推广与应用。     

孟鲁司特钠治疗小儿咳嗽变异性哮喘的临床疗效及安全性研究

目的:探讨孟鲁司特钠治疗小儿咳嗽变异性哮喘的临床疗效及安全性。方法:166例小儿咳嗽变异性哮喘患者随机分为对照组和观察组,每组83例,对照组给予布地奈德联合特布他林雾化吸入,观察组在对照组的基础上加服孟鲁司特钠,治疗4周后对两组的临床疗效进行评价。结果:观察组临床总有效率显著高于对照组(91.57%VS80.72%,P<0.05);观察组患者哮喘持续时间、咳嗽消失时间及肺部哮鸣音消失时间均快于对照组(P<0.05);治疗后两组患者FEV1和PEF%显著升高(P<0.05),观察组升高更为明显(P<0.05),两组均无严重不良反应。结论:孟鲁司特钠治疗小儿咳嗽变异性哮喘可有效改善患者的肺通气功能和缓解临床症状,是治疗该病的可靠方法。     

孟鲁司特钠联合布地奈德混悬液对哮喘急性发作患儿血清EOS、ECP水平和肺功能的影响

目的:探索孟鲁司特钠联合布地奈德混悬液对哮喘急性发作患儿血清嗜酸性粒细胞(EOS)、嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)水平和肺功能的影响。方法:选择自2015年10月至2016年10月我院收治的200例支气管哮喘急性发作患儿,按照随机数表法分成观察组和对照组各100例。对照组患儿口服孟鲁司特钠,观察组患儿在对照组基础上给予布地奈德气雾剂进行雾化治疗,两组均治疗1周。统计分析两组患儿的临床有效率,肺功能指标,包括第1秒用力呼气容积(FEV1)、用力肺活量(FVC)及FEV1/FVC,对比治疗前后两组患儿血清中EOS、ECP水平的变化。结果:治疗后,观察组的总有效率为97.00%,显著高于对照组的81.00%(P0.05);经治疗后两组患儿肺功能指标均较治疗前明显改善,且观察组患儿优于对照组(P0.05);两组患儿治疗后EOS、ECP水平均低于治疗前,而观察组患儿低于对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:孟鲁司特钠联合布地奈德对于小儿哮喘的急性发作具有良好的临床疗效,能显著改善患儿肺功能和血清中炎症因子的水平,减轻患儿体内的炎症反应,值得在临床上推广应用。     

长期吸入布地奈德联合孟鲁司特钠治疗过敏性哮喘基因阳性患儿的临床观察

目的:观察长期吸入布地奈德联合孟鲁司特钠治疗过敏性哮喘基因阳性患儿的临床疗效。方法:将88例支气管哮喘患儿按简单随机法分为对照组(n=46)和研究组(n=42),两组均予以常规治疗,对照组在常规治疗基础上长期吸入布地奈德治疗,研究组在对照组基础上联合孟鲁斯特钠治疗,比较两组临床疗效、症状及体征消失时间,治疗前后嗜酸粒细胞阳离子蛋白(ECP)、嗜酸粒细胞(EOS)计数、免疫球蛋白(Ig E)、白介素-4(IL-4)和肺功能的变化及不良反应的发生情况。结果:治疗后,研究组总有效率显著高于对照组(97.62%vs. 84.78%,P0.05),气促、哮鸣音、肺部啰音、咳嗽消失时间均明显短于对照组(P0.05)。治疗前,两组ECP、EOS、Ig E、IL-4水平、峰值呼气流速(PEF)、第一秒用力呼气容积(FEV1)比较差异无统计学意义(P0.05);治疗后,两组ECP、EOS、Ig E及IL-4水平较治疗前下降(P0.05),研究组以上指标低于对照组(P0.05),两组治疗后PFE及FEV1较治疗前心脏上升,且研究组以上指标明显高于对照组(P0.05)。两组总不良反应发生率比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:长期吸入布地奈德联合孟鲁斯特纳可提高过敏性哮喘基因阳性患儿的疗效,显著减轻患儿症状,控制气道炎症反应,改善肺功能。     

阿昔洛韦对传染性单核细胞增多患儿CD~(4+)和CD~(8+)的影响

目的:探究阿昔洛韦对小儿传染性单核细胞增多症CD4+、CD8+的影响。方法:选取我院收治的小儿传染性单核细胞增多症的患者64例,随机分为两组。实验组予阿昔洛韦静脉滴注,对照组予利巴韦林静脉滴注。对比两组的临床疗效及CD4+、CD8+和CD4+/CD8+比值的变化情况。结果:1治疗后两组患儿临床疗效,实验组较对照组显著改善,差异有统计学意义(P0.05)。2治疗后两组患儿退热时间、淋巴结消退时间、异型淋巴细胞消失时间以及住院时间等比较,实验组明显较对照组短,差异有统计学意义(P0.05)。3治疗前,两组患者CD4+、CD8+以及CD4+/CD8+比值无统计学差异(P0.05);治疗后,患者CD4+及CD4+/CD8+比值呈现先升高再降低的趋势,CD8+则呈现下降趋势,与对照组比较,实验组治疗3天,10天及1个月CD4+以及CD8+下降明显,差异具有统计学意义(P0.05);CD4+/CD8+比值则较对照组升高(P0.05)。结论:采用阿昔洛韦能够更好的改善患者临床症状,影响CD4+、CD8+的变化,使紊乱的免疫系统较快的恢复。     

胎盘多肽对子宫肌瘤患者T 淋巴细胞亚群、NK细胞及炎症因子水平的影响

目的:探讨胎盘多肽对子宫肿瘤切除术后患者血清炎症因子变化和免疫功能的影响。方法:收集我院收治的子宫肿瘤切除术后患者57例,根据就诊先后顺序不同分为对照组和实验组,实验组采用胎盘多肽治疗,对照组采用常规治疗。检测两组患者CD3~+、CD4~+、CD8~+、NK细胞、CRP及IL-6水平,并比较两组的临床效果。结果:治疗后,两组患者血清CRP及IL-6水平均低于治疗前,且实验组明显低于对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。治疗后,两组患者CD3~+、CD4~+、CD4~+/CD8~+、NK细胞均高于治疗前,而CD8~+低于治疗前,差异具有统计学意义(P0.05);实验组患者治疗后CD3~+、CD4~+、CD4~+/CD8~+、NK细胞显著高于对照组,而CD8~+低于对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。与对照组相比,实验组患者的首次排气和排便时间明显较短,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:胎盘多肽能够明显改善子宫肌瘤切除患者的免疫功能,降低炎症反应,有助于患者术后康复。     

中药复方连黄对小鼠T淋巴细胞亚群CD4~+、CD8~+的影响

目的探讨中药复方连黄对小鼠T淋巴细胞亚群CD4+、CD8+的影响.方法 T淋巴细胞亚群测定采用单克降抗体直接免疫荧光技术,通过流式细胞仪测定.结果经统计学分析,与对照组比较,中药复方连黄能不同程度地使CD4+、CD4+/CD8+升高,而使CD8+下降.结果表明,中药复方连黄对细胞免疫功能具有调节作用.     

Use of human CD3 monoclonal antibody for accurate CD4+ and CD8+ lymphocyte determinations in macaques: phenotypic characterization of the CD3- CD8+ cell subset

Macaque monkeys are frequently used in models for studies of infectious diseases, immunity, transplantation and vaccine development. Such use is largely due to the conservation of functionally important cell surface molecules and the phylogenetic proximity of their immune systems to that of humans. Some monoclonal antibodies (mAb) raised against human leukocyte antigens can be utilized in the monkey. Until recently, many primate centers have utilized the CD2 monoclonal antibody to enumerate T lymphocytes. We have evaluated the anti-human CD3 mAb in macaques and sooty mangabeys. Using this monoclonal antibody, pigtailed macaques were found to have a much higher proportion of CD2+ CD3- CD8+ cells as compared with rhesus macaques and sooty mangabeys. Such cells comprised approximately one-half of all CD8+ cells in the pigtailed macaque, but only one-quarter of CD8+ cells in the rhesus, and one-fifth in the sooty mangabey. Use of the CD2 monoclonal antibody as the T-cell marker resulted in underestimating CD4/CD8 ratios compared with using the CD3 mAb in pigtailed macaques. Phenotypic characterization of this subset of CD3- CD8+ cells indicated that they are CD16+, CD45RA+, CD11b+, CD69+ and CD28-. This would indicate that these cells represent an activated natural killer cell subset.     

中药联合化疗对ALL患者CD4、CD25细胞调节及sE-cad的影响

目的:研究中药联合化疗方案对急性淋巴细胞白血病(Acute lymphocytic leukemia,ALL)患者CD4+、CD25+细胞调节的影响、血清s E-cad的影响以及临床意义。方法:选取我院血液科收治的急性淋巴细胞白血病患者60例,随机分为两组,其中对照组30例给予常规化疗方案治疗,中药组30例在常规化疗方案的基础上加用中药辅助治疗。对比治疗前后患者血常规、CD4+、CD25+细胞及血清s E-cad的改变。结果:1治疗后两组患者CD4+、CD25+T细胞较治疗前均显著下降,差异有统计学意义(P0.05),与对照组相比,中药组CD4+、CD25+T细胞下降明显,差异有统计学意义(P0.05);2治疗后两组患者血清s E-cad均改善,且中药组(55.58±10.47)较对照组(67.27±11.32)明显下降,差异有统计学意义(P0.05);3两组有效率比较重,中药组总有效率(86.67%)明显优于对照组(66.67%),差异有统计学意义(P0.05)。结论:中药联合化疗治疗急性淋巴细胞白血病CD4+、CD25+T细胞调节及血清s E-cad的改变明显,对临床具有指导意义。     

Variation in the CD4+ and CD8+ populations in lymph nodes does not reflect that in the blood during SIVMNE/E11S infection of macaques.

The decline in the CD4% and CD4/CD8 ratios have been compared in lymph nodes and blood from SIVMNE/E11S infected rhesus macaques. The results indicate that loss from the LN CD4+ cell pool does not occur until CD4/CD8 ratios of less than 0.5 is reached in blood. These changes also correlate with the ability to isolate virus from the blood and the transition of CD45RAhi to highly activated CD45RAlo CD8+ cells both of which may play a role in eliminating CD4+ cells. In end-stage disease, CD8+ cells also decline in LN and mitogen responsiveness no longer exists in any nodes. Interestingly at this stage, the circulating CD8% increases significantly and represents the only source of functional T cells remaining in the body.     

CD8~+CD122~+T细胞在脑缺血过程中作用的研究

目的:探讨CD8+CD122+T细胞在脑缺血过程中的作用及其机制。方法:线栓法建立小鼠大脑中动脉栓塞模型(MCAO);激光共聚焦显微镜检测小鼠脑缺血组织中CD8+CD122+T细胞浸润情况;流式细胞仪检测脑缺血组织中CD8+CD122+T细胞/CD3+T细胞的比例及脾和胸腺中CD8+CD122+T细胞数量变化;RT-PCR方法检测CD8+CD122+T细胞对氧糖剥夺(Oxygen-glucose deprivation,OGD)条件下星形胶质细胞表达TNF-α,IL-1β,IFN-γ的影响。结果:各时间点脑缺血组织中均有CD8+CD122+T细胞浸润,且随脑缺血时间延长,缺血侧脑组织中CD8+CD122+T细胞/CD3+T细胞比例逐渐增加,5 d和7 d组差异显著,与非缺血侧相比,P5d0.05,P7d0.05;MCAO小鼠脾及胸腺中CD8+CD122+T细胞呈现先增高后降低的趋势。星形胶质细胞经OGD处理后,与对照组相比,IFN-γ、TNF-α、IL-1β表达显著增高,PIFN-γ0.01、PTNF-α0.001、PIL-1β0.01;CD122-blocked组与CD8+组相比,IFN-γ、TNF-α、IL-1β表达明显增高,PIFN-γ0.05、PTNF-α0.05、PIL-1β0.01;CD8+组与HBSS组相比,IFN-γ表达降低,P0.05;IL-1β表达有降低的趋势。结论:CD8+CD122+T细胞在脑缺血过程中发挥保护性作用,其保护作用通过CD122抑制星形胶质细胞TNF-α,IL-1β,IFN-γ炎症因子表达实现的。     

Decreased regulatory T‐cells and CD4+/CD8+ ratio correlate with disease onset and progression in patients with generalized vitiligo

The aim of present study was to evaluate CD4⁺/CD8⁺ ratio and CD4⁺CD25^hiFoxP3⁺ Tregs in GV patients with reference to their effect on disease onset and progression. Flow cytometry was used for determination of CD4⁺/CD8⁺ ratio and Tregs in 82 patients and 50 controls. CD8⁺ T‐cell counts were significantly higher in GV patients as compared with controls (p = 0.003). Active GV patients showed higher CD8⁺ T‐cell counts compared with stable GV patients (p = 0.001). The CD4⁺/CD8⁺ ratio decreased significantly in patients as compared with controls (p = 0.001). Moreover, the ratio in active GV patients significantly lowered as compared with stable GV patients (p = 0.002). Significant decrease in Treg cell percentage and counts in GV patients was observed compared with controls (p = 0.009, p = 0.008) with significant reduction in FoxP3 expression (p = 0.024). Treg cell percentage and counts were significantly decreased in active GV patients compared with stable GV patients (p = 0.007, p = 0.002). Our results suggest that an imbalance of CD4⁺/CD8⁺ ratio and natural Tregs in frequency and function might be involved in the T‐cell mediated pathogenesis of GV and its progression.     

HCV-specific interleukin-21+CD4+ T cells responses associated with viral control through the modulation of HCV-specific CD8+ T cells function in chronic hepatitis C patients

Interleukin-21 (IL-21)+CD4+ T cells are involved in the immune response against hepatitis B virus (HBV) by secreting IL-21. However, the role of IL-21+CD4+ T cells in the immune response against chronic hepatitis C (CHC) virus infection is poorly understood. This study aimed to investigate the role of IL-21+CD4+ T cells in CHC patients and the potential mechanisms. The study subjects included nineteen CHC patients who were grouped by viral load (low, < 10⁶ RNA copies/ml, n = 8; high, > 10⁶ RNA copies/ml, n = 11). The peripheral frequency of HCV-specific IL-21+CD4+ T cells was higher in the low viral load group and was negatively correlated with the serum HCV RNA viral load in all CHC patients. Meanwhile, IL-21+ cells accumulated in the liver in the low viral load group. In vitro, IL-21 treatment increased the expression of proliferation markers and cytolytic molecules on HCV-specific CD8+ T cells. In summary, these findings suggest that HCV-specific IL-21+CD4+ T cells might contribute to HCV control by rescuing HCV-specific CD8+ T cells in CHC patients.