一测多评法测定番石榴叶中6种黄酮类成分的含量

为建立同时测定番石榴叶中6种黄酮类成分(金丝桃苷、异槲皮苷、瑞诺苷、番石榴苷、萹蓄苷、槲皮素)的一测多评法。本研究以金丝桃苷为内参物,采用HPLC法,确定金丝桃苷与另外5种成分的相对校正因子,并通过获得的校正因子计算后5种成分的量;同时采用外标法测定11批番石榴叶的含量。结果表明11批番石榴叶的QAMS法与外标法测定结果间无显著性差异,证明该法可用于番石榴叶6种黄酮类成分的定量分析。     

“一测多评”法测定卷叶贝母中生物碱类成分含量

采用HPLC-ELSD建立卷叶贝母的"一测多评"法,同时测定其中贝母乙素和贝母甲素。以贝母乙素(Peimi-nine)作为内标物建立贝母甲素(Peimine)的相对校正因子,采用校正因子计算卷叶贝母中贝母甲素的含量;同时采用外标法测定贝母乙素和贝母甲素,以验证"一测多评"法的准确性和适用性。结果表明卷叶贝母中"一测多评"法的计算结果与外标法的实测值之间没有显著性差异,实验所得的校正因子可信。因此,在对照品缺乏时,"一测多评"的质量评价模式在卷叶贝母的多指标质量评价中得到验证,可以用于贝母类药材的含量测定。     

一测多评法测定不同产地巴戟天中4种环烯醚萜含量

建立同时测定不同产地巴戟天中4种环烯醚萜类成分(水晶兰苷、去乙酰基车叶草苷酸、车叶草苷酸和车叶草苷)的一测多评法。实验以去乙酰基车叶草苷酸为内参物,基于HPLC法建立去乙酰基车叶草苷酸与其它成分的相对校正因子,并用校正因子计算4种成分的含量;使用外标法和一测多评法同时测定11批不同产地的巴戟天样品中这4种成分的含量,结果表明外标法与一测多评法结果之间无明显差异,说明了一测多评法的准确性和可行性。因此在缺乏对照品的情况下,以去乙酰基车叶草苷酸为内参物同时测定水晶兰苷、车叶草苷酸和车叶草苷的含量是可行的。该方法可用于巴戟天的质量控制。     

TLCS法测定不同月份血水草中四种生物碱的含量

本文以薄层扫描(TLCS)法测定了1996年3月至9月采集的血水草地下部分四种主要生物碱,即血根碱(Ⅰ)白屈菜红碱(Ⅱ),原阿片碱(Ⅲ)和α-别隐品碱(Ⅳ)的含量.结果表明:血水草中总生物碱的含量3月和9月最高,6月、7月和8月最低.四种生物碱之间,又以Ⅱ含量最高,Ⅰ和Ⅳ次之,Ⅲ含量最低.各生物碱含量高峰期也不一致,Ⅰ和Ⅱ为3月和9月,Ⅲ为7月,Ⅳ为3月和7月.     

南五味子药材UPLC指纹图谱及一测多评法研究

建立南五味子药材超高效液相色谱(UPLC)指纹图谱和6种木脂素类成分一测多评法(QAMS),为南五味子药材质量标准提高提供参考。采用UPLC法建立南五味子药材指纹图谱,运用聚类分析(HCA)和正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)对指纹图谱进行分析;以五味子酯甲为内参物,建立五味子酯丙、五味子酯乙、安五脂素、五味子甲素和五味子酯丁的一测多评法,并与外标法(ESM)测定结果对比,判断方法的准确性。14批南五味子药材指纹图谱确定了15个共有峰,通过对照品比对指认了其中7个成分,分别为原儿茶酸、五味子酯丙、五味子酯甲、五味子酯乙、安五脂素、五味子甲素、五味子酯丁,其指纹图谱相似度均在0.95以上;通过聚类分析(HCA)和正交偏最小二乘法-判别式分析(OPLS-DA)可以将南五味子药材分为4类,峰1(原儿茶酸)、峰2、峰4、峰6、峰7(五味子酯乙)、峰8、峰9、峰12、峰15共9个成分是导致产地差异性的主要标志物。一测多评法与外标法测定的五味子酯丙、五味子酯乙、安五脂素、五味子甲素和五味子酯丁含量结果无显著差异。所建立的方法简便、可靠,为南五味子药材质量评价提供参考。     

基于HPLC指纹图谱结合一测多评法的葛花质量控制研究

建立葛花药材的指纹图谱,并同时建立其中10个主要黄酮类成分含量的一测多评分析方法(QAMS),用于不同产地葛花药材整体质量评价。采用高效液相色谱法(HPLC)对不同产地葛花中主要化学成分进行分析,确定最佳色谱条件,建立指纹图谱;在此基础上,以葛花苷为参照峰,建立QAMS测定葛花10个黄酮类成分含量;并与外标法(ESM)测定结果比较,验证QAMS的准确性。建立了葛花药材指纹图谱,20批葛花和10批粉葛花药材的相似度均大于0.85,标定共有峰分别为18和27个。以葛花苷为参照峰,各个成分校正因子的重复性、耐用性均良好;应用一测多评法测定10个成分的含量,与外标法测定结果比较,含量无明显差异(P>0.05),相对偏差<3.0%。不同产地来源的葛花药材中10个成分含量均存在较大差异,说明应提高葛花药材的质量控制标准。所建立的指纹图谱结合一测多评分析方法简便、可行,可客观、有效的用于不同产地葛花药材质量评价,可以为葛花质量标准修订、优质葛花种质资源的选育和育种提供参考。     

一测多评法测定蒙成药三子散中4种成分的含量

采用高效液相色谱法(HPLC),以栀子苷为对照品,外标法测定其在三子散中的量,并分别测定栀子苷与没食子酸、绿原酸、诃黎勒酸的相对校正因子,并通过相对校正因子计算后三种成分的含量,实现一测多评;同时,采用外标法测定三子散中没食子酸、绿原酸、诃黎勒酸的含量,并比较2种方法所得计算结果的差异,10批三子散中4种成分的外标法测定结果与相对校正因子法计算结果无显著性差异,说明一测多评法可以应用于三子散的多指标质量评价。     

HPLC指纹图谱结合一测多评法的睡莲花药材质量分析CSCD

建立睡莲花药材HPLC指纹图谱及7种成分一测多评的含量测定方法。采用如下色谱条件建立HPLC指纹图谱:Phenomenex Gemini NX-C 18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相乙腈-0.2%磷酸水溶液梯度洗脱,流速1.0 mL/min,柱温30℃,检测波长266 nm。对数据进行相似度分析、主成分分析和聚类分析。同时以没食子酸为内参物,建立没食子酸甲酯等6种成分的相对校正因子。结果显示17批睡莲花药材与参照图谱S16的相似度在0.901~1.000之间,并明确了11个共有峰,对7个共有峰进行了指认;2批市售图谱与S16图谱相似度为0.568和0.730,说明栽培和野生睡莲花药材与市售样品之间化学信息差异较大。主成分分析、聚类分析法、偏最小二乘-判别分析结果证明了这一结论。一测多评结果显示,没食子酸甲酯、睡莲酚、老鹳草素、鞣花酸、烟花苷和1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖的相对校正因子分别为0.9650、0.9740、1.2013、0.1754、1.1603、2.1173,RSD分别为0.37%、0.38%、0.32%、1.76%、0.37%和0.08%(n=8)。一测多评法测定结果与外标法测定结果接近。建立的HPLC指纹图谱结合一测多评含量测定法简便可行,在部颁标准的基础上为睡莲花药材质量控制方法的提升提供了参考依据。     

一测多评法测定茶多酚中6种儿茶素类含量

采用HPLC法,以表没食子基儿茶素没食子酸酯(EGCG)为对照品,外标法测定其在茶多酚提取物中的量,并分别测定EGCG与表没食子儿茶素(EGC)、儿茶素(C)、表儿茶素(EC)、没食子基儿茶素没食子酸酯(GCG)和没食子酰表儿茶素(ECG)的相对校正因子,用获得的相对校正因子计算后5种成分的量,实现一测多评;同时,用外标法测茶多酚提取物中EGC、C、EC、GCG和ECG的量。向量夹角余弦法分析,表明外标法的测定值与采用相对校正因子的计算值之间无显著性差异,说明一测多评法可以应用于茶多酚提取物及其制剂的多指标质量评价。     

基于UPLC特征图谱和一测多评法的马鞭草质量评价及其标准汤剂量值传递规律研究

建立马鞭草UPLC特征图谱和5-羟基马鞭草苷、马鞭草苷及毛蕊花糖苷含量的一测多评分析方法。对不同产地18批马鞭草进样分析,共确定5个特征共有峰,指认其中3种成分,18批样品相似度均大于0.830。一测多评法与外标法测定结果比较,误差均小于3%,18批标准汤剂中5-羟基马鞭草苷、马鞭草苷及毛蕊花糖苷的含量范围分别为17.36～51.34 mg/g、7.76～72.85 mg/g、1.15～15.44 mg/g; 18批马鞭草饮片到标准汤剂5-羟基马鞭草苷、马鞭草苷及毛蕊花糖苷的转移率分别为35.0%～113.4%、52.1%～109.2%、7.9%～36.3%;所建立的特征图谱结合一测多评含量测定法简便可行,研究结果可为马鞭草及马鞭草中药制剂质量评价提供参考。     

Telomere length analysis of human mesenchymal stem cells by quantitative PCR

Human mesenchymal stem cells (hMSCs) have attracted much attention for tissue repair and wound healing because of their self-renewal capacity and multipotentiality. In order to mediate an effective therapy, substantial numbers of cells are required, which necessitates extensive sub-culturing and expansion of hMSCs. Throughout ex vivo expansion, the cells undergo telomere shortening, and critically short telomeres can trigger loss of cell viability. Telomeres are nucleoprotein structures that cap the ends of chromosomes, and serve to protect the DNA from the degradation which occurs due to the end-replication problem in all eukaryotes. As hMSCs have only a finite ability for self-renewal like most somatic cells, assaying for telomere length in hMSCs provides critical information on the replicative capacity of the cells, an important criterion in the selection of hMSCs for therapy. Telomere length is generally quantified by Southern blotting and fluorescence in situ hybridization, and more recently by PCR-based methods. Here we describe the quantification of hMSC telomere length by real-time PCR; our results demonstrate the effect of telomere shortening on the proliferation and clonogenicity of hMSCs. Thus, this assay constitutes a useful tool for the determination of relative telomere length in hMSCs.