沉香叶提取工艺及其抗氧化活性实验研究

采用单因素分析方法和正交试验法研究沉香叶提取工艺并评价沉香叶的体外抗氧化活性.沉香叶的最佳提取工艺为:以15倍量的60％乙醇为溶剂,超声提取40 min,提取1次.野生沉香叶和栽培沉香叶的氧化时间分别为(11.53±0.08)s和(9.98±0.16)s;超氧阴离子的清除率分别为(36.26±0.96)％和(35.67±1.25)％,总还原力的吸光度分别为0.188±0.008和0.129±0.011.该提取工艺简单、重复性好、提取液抗氧化活性强、工艺稳定、无污染;野生沉香叶和栽培沉香叶均具有较好的体外抗氧化活性.     

蚂蚁黑色素的提取、纯化及抗氧化活性研究

对黑蚂蚁采用盐酸水解、氢氧化钠溶液提取、盐酸沉淀,以及多种有机溶剂洗涤等工艺手段提取分离、纯化得到黑蚂蚁黑色素。研究发现黑蚂蚁黑色素溶于碱性溶液,不溶于水、酸及有机溶剂;其紫外吸收光谱与红外光谱具有吲哚型黑色素典型光谱性质。利用分光光度法测定了黑蚂蚁黑色素的总抗氧化能力、羟基自由基清除能力及还原力,试验结果表明:黑蚂蚁黑色素有一定的抗氧化能力,但在试验范围内其抗氧化能力比维生素C低。     

黄芪茎叶总黄酮提取工艺及其抗氧化活性研究

以黄芪茎叶为材料、总黄酮的提取率为指标,通过正交试验确定了醇提的最佳工艺：乙醇浓度90%、料液比1∶10、在60℃下提取15 h,黄芪茎叶总黄酮得率达382%。体外抗氧化活性研究发现,黄芪茎叶总黄酮对DPPH自由基、羟基自由基和超氧阴离子自由基均有较高的清除能力,并与总黄酮质量浓度呈一定的正相关关系。     

紫山药色素的提取工艺及抗氧化性能研究

研究紫山药色素的最佳提取工艺及其抗氧化性能。在单因素试验的基础上,采用L9(34)正交试验法,以pH示差法测定花色苷得率为考察指标,优化了溶剂提取法提取紫山药色素的工艺参数。通过DPPH体系测定该色素清除自由基能力。试验结果表明:紫山药色素属于花色苷类物质,优化的紫山药色素提取条件为:提取温度60℃,提取时间80 min,料液比1∶30,提取溶剂为0.5%盐酸乙醇溶液,提取液花色苷含量可达2.075mg/鲜紫山药g。紫山药色素提取液清除DPPH自由基的IC50为98.14μg/mL。紫山药具有开发功能性色素的潜力。     

向日葵花盘水溶性多糖提取工艺及抗氧化研究

目的:研究了向日葵花盘中水溶性粗多糖的提取工艺及抗氧化性能.方法:采用单因素试验和L_9(3~4)正交试验设计,对多糖提取工艺进行优化,并采用Fenton体系和邻苯三酚自氧化法评价了该提取物的体外抗氧化能力.结果:优化工艺条件为:提取温度95℃、料液比1:20、提取时间4h,向日葵水溶性粗多糖得率为9.73%,其中温度是影响粗多糖提取的重要因素.结论:结果表明向日葵水溶性粗多糖有较好的抗氧化活性.     

鸡桑叶总黄酮提取工艺优化及抗氧化活性研究

目的:为确定超声辅助提取鸡桑叶总黄酮的最佳工艺并考察总黄酮的抗氧化活性.方法:首先考察乙醇浓度、液料比、超声温度和超声时间4个单因素对鸡桑叶总黄酮提取率的影响,再通过Box-Behnken方法对影响鸡桑叶总黄酮提取率的工艺因素进行响应面优化,最后通过鸡桑叶总黄酮对DPPH·和·OH清除效果来评价其抗氧化活性.结果 最佳...     

黑老虎叶总黄酮提取工艺及其抗氧化活性研究

为探讨超声波辅助提取黑老虎叶总黄酮的最佳提取工艺条件及其抗氧化活性,该文以黑老虎叶为研究对象,采用超声波提取法提取黑老虎叶总黄酮,通过单因素试验研究提取时间、乙醇浓度、提取温度、料液比对黑老虎叶总黄酮提取率的影响在单因素试验的基础上,采用正交试验优化其提取工艺条件,测试了最优条件下提取的黑老虎叶总黄酮对DPPH自由基、·OH自由基及超氧阴离子的清除能力。结果表明:黑老虎叶总黄酮超声辅助提取最佳提取条件为提取时间35 min、乙醇浓度80%、提取温度50℃、料液比1:20g·mL^-1最佳条件下提取率为4.83%。抗氧化活性测试结果显示,黑老虎叶总黄酮表现出较好的清除DPPH自由基、·OH自由基及超氧阴离子能力,其抗氧化能力为清除DPPH自由基能力>清除超氧阴离子能力>清除·OH自由基能力。在浓度为0.8 mg·mL^-1时,黑老虎叶总黄酮清除DPPH自由基、·OH自由基及超氧阴离子的能力相当于同浓度下Vc的97.6%、82.1%、95.5%,黑老虎叶总黄酮是天然抗氧化剂的良好来源。上述结果为黑老虎叶活性成分的提取及开发利用提供了理论基...     

艾叶中总黄酮和总多糖提取工艺及抗氧化活性的研究

艾叶是一类传统的中药,本文研究了从艾叶中提取黄酮类和多糖类化合物的方法,并以比色法测定其含量及提取液的抗氧化活性。结果表明,艾叶中含有丰富的黄酮类、多糖类化合物,具有很强的抗氧化活性,可以认为艾叶具有很大的开发应用价值。     

西兰花类胡萝卜素的提取及其抗氧化活性研究

在单因素试验基础上,通过正交试验初步优化确定了西兰花中类胡萝卜素提取的最佳工艺条件为：用无水乙醇作为提取液、料液比1∶60、提取时间180min、提取温度55℃,提取率可达268.26mg/100g。同时通过水杨酸法测定类胡萝卜素粗提物清除羟基自由基的能力,证实西兰花类胡萝卜素具有较强的抗氧化能力。     

麻栎叶黄酮的提取及其抗氧化活性研究

在单因素试验的基础上,对麻栎叶黄酮提取工艺进行优化,并研究了麻栎叶黄酮类化合物的抗氧化活性.结果显示,麻栎叶黄酮提取的最佳工艺是以60％乙醇为提取剂,提取物固液比1∶20,提取温度60℃,提取次数2次,微波功率640W、微波时间2 min,提取时间60 min,黄酮提取率为6.06 mg/g,回收率为96.5％.麻栎叶黄酮类化合物对自由基DPPH·、·OH以及亚硝酸盐的清除率分别达到97.7％、97.6％和94.4％.试验结果表明提取工艺合理,黄酮提取率高,麻栎叶黄酮提取液具有很好的抗氧化活性.     

免培养法对大鲵肠道微生物多样性的研究

【目的】了解大鲵肠道内生细菌的组成及多样性。【方法】采用美国Mo Bio公司试剂盒提取大鲵肠道内容物总DNA,选用细菌通用引物799F和1492R对总DNA进行16S rRNA基因特异性扩增,构建大鲵肠道内容物内生细菌16S rRNA基因克隆文库,对阳性克隆进行限制性内切酶片段长度多态性(PCR-RFLP)分析,并对HaeⅢ酶切带谱不同的菌液进行测序,构建系统发育树。【结果】根据酶切带谱分析和测序结果的不同,将随机挑取的101个阳性克隆归为28个不同的可操作分类单元(OTUs),系统发育分析表明这些克隆序列分别属于变形菌门(Proteobacteria)、梭菌门(Clostridia)、芽孢杆菌门(Bacilli)和衣原体门(Chlamydiae)4个门。其中,变形菌门(Proteobacteria,占克隆总数的92.08%)为最优势类群。序列比对结果表明这些克隆序列分别与已报道的20个属具有较高的相似性。此外,还有一个OTU在系统发育树上形成独立分支且未能确定其分类。【结论】大鲵肠道内生细菌多样性丰富,并且可能存在新的分类单元。     

池养大鲵的人工催产研究

本文报道了人工培育大鲵亲本的繁殖结果。在养殖条件下,大鲵的性腺可正常发育,大鲵的性成熟年龄为5龄,性周期为一年一次,群体的繁殖高峰期出现在每年的6—8月。使用LRH-A或HCG均可诱导大鲵产卵和排精。群体的性腺发育进程存在明显的个体差异,雄性比雌性的发育时间长10—20d。在繁殖盛期进行人工催产,获产率为60%左右。人工繁育的子代,在培育为亲本时,其性腺发育的个体差异仍然存在。养殖的性成熟个体,在没有受到外源激素作用时,将不会发生自然排卵现象,雄鲵不能挤出精液。在20—23℃下,雌性大鲵的效应时间约为96—120h,雄性可在80h后挤到精液。大鲵的产卵量为400—500粒,平均为430粒。多次产卵个体的产卵量多于初次产卵个体。低剂量的药物催熟,未发现对性腺发育进程和产卵结果有明显的促进作用。     

大鲵肝脏组织定向cDNA文库的构建及鉴定

目前关于大鲵的胚胎发育、繁殖育种及养殖条件的优化等已有不少研究(李峰等,1 998;张育辉等,1 999) ,此外也有一些学者研究了大鲵的习性与生理生化特点(杨国华等,2 0 0 1 ;乔志刚等,2 0 0 3)。但这些研究仍停留在组织和细胞水平,加之大鲵取材来之不易,使研究具有一定的局限性。最近有学者分离了大鲵线粒体基因组全长并完成了测序工作,对于两栖类的遗传多态性研究有重要意义(Zhangetal.,2 0 0 3)。目前有关大鲵的遗传学背景资料仍然缺乏,尚未见特异的大鲵相关基因的报道,相应的遗传学工程课题更是无法开展。随着分子生物学技术的发展和人类…     

Physicochemical characterization and antioxidant activity of melanin from a novel strain of Aspergillus bridgeri ICTF-201

Aims: The aim of the study is to isolate and characterize a melanin pigment from a new strain of Aspergillus bridgeri isolated from rhizosphere soil of Eucalyptus tree and to investigate its antioxidant activity. Methods and Results: The extracellular pigment was alkali soluble, acid‐resistant and insoluble in organic solvents and water. The pigment was precipitated on treatment with FeCl₃, ammoniacal AgNO₃ and potassium ferricyanide and was bleached in the presence of oxidants and reductants. It was confirmed as melanin based on the Fourier transform infrared and electron paramagnetic resonance spectroscopy techniques apart from chemical analysis. Inhibition of melanin production by inhibitors like tricyclazole, 6‐hydroxyflavanone, 4‐hydroxy‐7‐methoxy‐3‐phenyl‐coumarin, 7‐hydroxy‐4‐phenyl‐coumarin and 7‐hydroxy‐3,4,8‐trimethylcoumarin confirmed that melanin produced by A. bridgeri is synthesized by 1,8‐dihydroxynaphthalene (DHN)‐melanin pathway. The melanin showed good free radical scavenging activity by DPPH method with an EC₅₀ of 54·12 μg ml^?1. Conclusions: The results of the study indicate that the melanin produced by the newly isolated A. bridgeri strain is a member of DHN melanin family and exhibited significant free radical scavenging activity. Significance and Impact of the Study: This is the first report on characterization of DHN melanin produced by a novel strain of A. bridgeri and may find potential application as a natural antioxidant in the cosmetic and pharmaceutical industries.     

大鲵保护生物学及其研究进展

大鲵（Andrias davidianus)为我国特有的珍稀两栖动物,已列入国家二级保护动物名录,并列入CITES公约附录Ⅰ中。自20世纪50年代起,由于过度收购、非法捕杀和栖息地丧失等原因,大鲵种群数量下降极为严重,湖南、安徽等地的大鲵产量在20世纪50年代至70年代下降超过80％,分布区也极度萎缩,形成了12块岛屿状区域,目前分布于以我国中部山区的长江流域为主的17个省区。部分已建立的大鲵保护区经费短缺,人员不足,管理不力,状况不容乐观。非法捕捉和栖息地丧失仍是威胁大鲵生存的主要因素,保护管理力度还需进一步加强。     

Telocytes in ileum of the Chinese giant salamander: ultrastructural evidence

Telocytes (TCs) and their telopodes (Tps) have been found in various organs of many mammals, including in lower animals. However, knowledge of TCs in lower animals is still very limited. This study identified TCs and their Tps in the ileum of the Chinese giant salamander, Andrias davidianus (Amphibia: Caudata), by transmission electron microscopy. The TCs/Tps were found near epithelial cells, glandular cells and unmyelinated nerve fibres. Moreover, exosomes were also found to be present in between TCs/Tps and these cells.     

纤维素酶-超声波协同提取黑木耳黑色素工艺及其抗氧化活性分析

黑色素是黑木耳的主要活性成分之一,在黑木耳的药理活性上发挥着重要作用。为了提高黑木耳黑色素的提取得率,实验采用正交法和响应面法对纤维素酶-超声波协同提取黑木耳黑色素的提取工艺进行了优化,并对最优条件下提取的黑木耳黑色素体外抗氧化活性进行了分析。实验结果表明,纤维素酶-超声波协同提取黑木耳黑色素的最优条件为:酶添加量12mg,酶解温度40℃,酶解pH 5.0,酶解时间120min,NaOH浓度1.27mol/L,料液比1:40,超声功率300W,超声时间52min,超声温度60℃。在最优条件下,黑木耳黑色素提取得率可达到10.48%,相比于实验设置的未添加纤维素酶的超声波组黑色素提取得率提高了12.93%。抗氧化结果表明,采用纤维素酶-超声波协同提取的黑色素相比于未加纤维素酶提取的黑色素清除ABTS、DPPH和羟基自由基的能力更强。研究结果为黑木耳黑色素的高效提取及其产品的应用开发奠定了基础。     

一株自中国大鲵的副炭疽芽孢杆菌分离和鉴定

[目的]对陕西某大鲵养殖场患病的中国大鲵腹水中分离培养得到的一株蜡样芽孢杆菌群细菌疑似菌株进行鉴定,明确该菌生长特性和种类。[方法]无菌解剖患病大鲵,取肠道、腹水、皮肤等各部位的样品均质稀释并分离纯化,从腹水中获得疑似蜡样芽孢杆菌群细菌的纯菌株,命名为SHOU-BC01。对该菌株进行形态与染色特性、培养与生化特性、生物膜形成能力、芽孢形成、药敏检测、全基因组测序等试验鉴定,并根据测序结果进行平均核苷酸相似度(average nucleotide identity,ANI)、数字DNA-DNA杂交(digital DNA-DNA hybridization,dDDH)、多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)、全基因组SNP聚类和毒力因子分析。[结果]菌株SHOU-BC01为革兰氏阳性杆菌,表面粗糙;具有蛋白酶、卵磷脂酶和溶血酶活性;能够发酵L-阿拉伯糖、D-核糖、D-木糖等多种糖类,能利用色氨酸、丙酮酸盐等;有较强生物膜形成能力;120 h的芽孢形成率达到70.60%;该菌株对青霉素G、头孢噻吩、万古霉素等15种抗生素耐药,对哌拉西林、头孢唑啉、庆大霉素等25种抗生素敏感;根据生物学特性结合ANI、dDDH及全基因组SNP聚类分析,鉴定菌株SHOU-BC01为副炭疽芽孢杆菌(Bacillus paranthracis),经MLST分型,该菌株属于ST205序列型;该菌株含有鞘磷脂酶、CytK和NheC毒素、多糖荚膜、PlcR-PapR群感效应系统及Ⅶ型分泌系统等毒力因子。[结论]成功从中国大鲵腹水中分离出副炭疽芽孢杆菌,丰富了大鲵副炭疽芽孢杆菌数据。     

患病中国大鲵中分离到一株虹彩病毒及其特性的研究

从陕西某大鲵养殖场患病的大鲵体内分离到一株病毒。患病大鲵以体表溃疡,特别是肢体远端溃烂为主要临床特征。该病毒于10℃~30℃能在BF-2(Caudal trunk cells of blue-gillfry)、CO(Gorad cells of grass carp)、CHSE(Embryo cells of Chinook salmon)、FHM(cells of fathed minnow)等细胞中较好地增殖,最适生长温度为25℃~30℃。病毒对氯仿、热、pH3、pH10敏感,DNA抑制剂5-氟-2′-脱氧尿苷(5-fluro-2-′deoxyuridine,FUDR)能抑制病毒在细胞中的增殖,提示该病毒是有囊膜的DNA病毒。经电镜观察,在感染了病毒的细胞切片中可见到大量直径约130~150 nm有囊膜的六角形病毒颗粒成晶格排列在细胞质里,病毒呈典型的虹彩病毒形态。抽提病毒核酸后进行PCR扩增,用已知蛙病毒主要衣壳蛋白(MCP)基因的保守序列设计的引物能扩增出431bp的片段。扩增的片段测序后,和已知的几种蛙病毒属成员的主要衣壳蛋白基因中的相应片段进行比对,相似性在96%以上。血清学试验结果显示该病毒和IPNV(Infectious pancreatic necrosis virus,IPNV)、GCRV(Grass carp reovirus,GCRV)、SVCV(Spring viraemia of carp virus,SVCV)I、HNV(Infectious hematopoietic necrosis virus,IHNV)在血清学上没有相关性。以上结果提示该病毒可能是虹彩病毒科蛙病毒属的成员,暂时命名为大鲵虹彩病毒(Andrias davidianus iridovirus,ADIV)。该病毒与大鲵发病的关系有待进一步研究。