不同培养基对白假丝酵母菌生物膜芽管形成的影响

目的评估不同培养基对产生物膜白假丝酵母菌芽管产生的影响。方法收集临床产生物膜的白假丝酵母菌20株,购买3株可以产生物膜的质控菌株。比较23株白假丝酵母菌在5种不同培养基(人血清、胰蛋白胨大豆肉汤、脑心浸液肉汤、RPMI 1640、NaHCO₃溶液)的出芽菌株数量和出芽率。结果在23株产生物膜的白假丝酵母菌中,人血清和脑心浸液肉汤培养基中23株(100.0％)全部产生芽管,NaHCO₃培养基18株(78.3％)、胰蛋白胨大豆肉汤培养基16株(69.6％)和RPMI 1640培养基15株(65.2％)。芽管生成试验阳性的白假丝酵母菌中,在5% CO₂培养条件下的酵母细胞出芽率更高(孵育2 h,出芽率78.0%),芽管长度更长。结论 脑心浸液肉汤可以代替人血清作为芽管试验的诱导剂,人血清(5% CO₂)可以促进芽管的生成以及延伸芽管的长度。     

噬菌蛭弧菌简易保存方法的研究

本文报道了噬菌蛭弧菌在自来水宿主软琼脂中,于4℃环境(冰箱)存活的时间.发现噬菌蛭弧菌在自来水宿主软琼脂中,于4℃冰箱中保存,至少可以存活3个月以上,一般为5～8个月左右,最长时间可达18个月。但在自来水宿主双层琼脂平板上形成的噬斑数目,随着保存时间的延长,则有不同程度的减少。     

肺炎球菌生长培养基和菌种保存方法的研究

肺炎球菌一般在含血液培养基上才能生长。本文对适合肺炎球菌生长的国外无血液半合成培养基“C+Y”进行改良和借鉴,研制出一种BYGP-glu代用培养基,其组分简单,操作方便,便于推广使用。肺炎球菌存在自溶酶,不易长期保存。本文还试验了在不同低温条件下,几种保护和保存菌种的效果。结果证明40%甘油在-20℃保存效果较好,可使肺炎球菌存活3个月以上。该法适于实验室保存和使用。     

支原体新培养基的效果观察

既往常规使用的支原体培养基主要成份为盐酸消化猪胃胨,牛肉浸液,马血清及酵母浸液。近几年采用猪肺消化液代替猪胃胨和牛肉浸液,卵黄液代替马血清组成新培养基。用上述两种培养基对四种支原体进行多次定性和定量的生长效果对照观察。结果表明新培养基的培养效果与常规培养基一致,而且较常规培养基来源方便,价格便宜。用新培养基制备的抗原质量更为理想。     

勿需培养基的微繁殖体的贮存和运输

National Clonal Germplasm Repository(夏威夷Hilo)的F.T.Zee和M.Munekata发现,微繁殖的凤梨小植株可以在25℃的1m1蒸馏水中保存12个月。以这种方式保存的小植株有81%存活,而且比培养在MS培养基上的小植株强壮。但要得到最佳存活和生长力,需要在含1/4量MS盐、全量有机物和3%蔗糖的固体保持培养基中培养。Zee和Munekata还发现离体培养的凤梨小植株能在空的无菌玻璃管内保存60天,而不丧失其生活力。     

噬菌蛭弧菌简易保藏方法的研究

本文报道了细菌寄生菌——噬菌蛭弧菌在自来水宿主软琼脂中于4℃冰箱至少可存活3个月以上,一般为5—8个月左右,最长可达18个月。但在自来水宿主双层琼脂平板上形成的噬斑数目,随着保存时间的延长,则有不同程度的减少。     

林生地霉培养基形态学观察及生理学实验

目的观察林生地霉在5种不同培养基中的形态;通过一些常规的生理学实验,初步了解林生地霉的生理学特征。方法将林生地霉分别接种在沙堡培养基(SDA)、马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)、麦芽汁琼脂(MEA)、玉米粉琼脂(CMA)和察氏琼脂(CZA)平皿培养基上,置37℃和27℃温箱培养2周,每天观察菌落生长情况。通过芽管试验、厚壁孢子试验、硝酸盐同化试验、放线菌酮耐受试验、尿素酶试验、糖发酵试验及API20C酵母系统等初步了解林生地霉的生理学特性。结果菌落在PDA、SDA和MEA培养基上生长较快、较好,在其他培养基上生长较差。芽管试验、硝酸盐同化试验、糖发酵试验均阴性;厚壁孢子试验、放线菌酮耐受试验阳性;尿素酶试验弱阳性;API20C酵母系统鉴定中葡萄糖、甘油、木糖、山梨醇为阳性,余为阴性。结论PDA、SDA和MEA较适合林生地霉生长;尿素酶试验可作为地霉属属内鉴定的参考依据。API20C鉴定结果及厚壁孢子试验可为其与毛孢子菌属的属间鉴别提供依据。     

金黄色葡萄球菌培养基的筛选及发酵条件的优化研究

为提高金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)发酵产生的菌体及荚膜多糖产量,对4种不同培养基(THB肉汤、哥伦比亚液体培养基、营养肉汤和脑心浸出液)进行了筛选,利用单因素及正交试验对培养条件进行了优化,并通过透射电镜对优化前后细菌的荚膜进行了比较观察。结果表明,添加2%乳清的哥伦比亚液体培养基最适合金黄色葡萄球菌的生长,优化后的培养条件为发酵液p H 7.0,接种量1%,37℃、200 r/min培养至16 h。与优化前相比,菌体产量提高了20%;电镜观察表明,有荚膜菌体的数量增加且荚膜层增厚。本研究为后期多糖疫苗的研究提供参考。     

菠萝种质的离体保存研究

以菠萝品种巴厘"的组培苗为试验材料,在常温下通过改变MS培养基中无机盐和蔗糖含量,选择适合菠萝种质保存的培养基.对不同保存培养基中菠萝苗叶色的变化、小苗的生长及存活等进行了调查分析.结果显示,菠萝种质在M2(1/2MS 0.7%琼脂)中保存12个月存活率为92.2%,小苗的平均生长量只有1 cm左右;保存苗转入分化培养基后,很快恢复生长并分化出丛芽.在M2中保存18个月后仍有较高存活率(85.7%).表明M2是菠萝种质保存的最佳培养基.     

幽门,空肠弯曲菌长期保存前后染色体DNA酶切图谱的分析

对15株幽门弯曲菌及42株空肠弯曲菌,经6%羊血布氏琼脂培养后,于20%小牛血清布氏肉汤及全羊血中,在-70℃条件下,能保存3个月和10个月;并对其中的一些菌株,进行了研究,实验证明在保存前后,这些菌株的生物学性状和染色体 DNA 酶切图潜完全一致。     

多抗霉素链霉菌噬菌体的研究

从多抗毒素异常发酵液中分离出一种噬菌体P_sA。该噬菌体在电镜下观察呈蝌蚪形;在琼脂平板上呈圆形,边齐,透明噬菌斑。噬菌体原液在60℃、30分钟完全失活;pH4.0—9.0范围内较稳定,pH 10.0—14.0范围内仍不完全失活,pH3.0以下均失活。该噬菌体噬菌斑的形成需要Ca²⁺,仅感染多抗霉素链霉菌。对该噬菌体杀灭效果较好的消毒剂有新洁尔灭、漂白粉、甲醛、高锰酸钾、生石灰、来苏尔等。噬菌体原液在4℃冰箱保存两个月效价基本不变。     

人外周血B淋巴细胞在琼脂培养基内的增殖特性

近年来建立的淋巴细胞集落培养技术,无疑地将促进人们对于淋巴细胞的了解。J.Radnay 等于1979年用双层琼脂培养技术,以 Pokeweed 为丝裂原,获得人外周血 B淋巴细胞集落。Izssuirre 等将 B 淋巴细胞悬液接种到含有3×105/ml 受照射的自身或同种T 淋巴细胞、20%T 淋巴细胞条件培养基和0.8%甲基纤维素的培养体系内,用 Pokeweed作丝裂原,也培养出人的 B 淋巴细胞集落。本文将介绍以脂多糖(LPS)、小鼠红细胞(MRBC)及牛血清白蛋白(ESA)为丝裂原,用单层琼脂培养技术,研究人外周血 B 淋巴细胞在琼脂培养基内的增殖情况。     

测蔗糖复合酶电极的研究

采用酶电极流动注射分析系统(EFIA),由固定化酶膜包括蔗糖转化酶(INV),葡萄糖变旋酶(MuT)及葡萄糖氧化酶(GOD)与氧电极共同组成的复合酶电极用于蔗糖的快速测定。实验确定每张酶膜的最适酶量(Iu比)为lNV：MUT：GOD：72：48：2．4。酶经固定化后,INV与MUT的综合回收活力>42．9％。其最适pH为5．8—6．5。最适温度范围是35—45℃。动态法和稳态法测试的线性范围分别为：5×10^-4—10^-1和10-5—2×10^-3mol／L,响应时间分别<20s和<2 min。实验的重复性良好,变异系数<1．7％。用此酶电极测定以蔗糖为碳源的发酵液中的蔗糖含量,平均回收率达到98％。发酵液中的蔗糖分解产生的葡萄糖对本电极的干扰可通过平行运行的GOD电极来校正。连续使用的寿命至少为120h。比前年报道的14th有了显著的提高。酶膜显示了较好的保存稳定性(30天,保存于4℃蒸馏水中)和一定的抗热性(50℃,30min)。     

感染伤寒期间抗体对沙门氏伤寒菌脂多糖和蛋白质抗原的反应——Ⅰ、放射免疫测定血清抗体

作者收集24名成人血培养伤寒菌阳性病人血清及20名健康成人对照血清,用固相放射免疫测定对伤寒菌脂多糖和蛋白质抗原的反应,并用传统的肥达氏试验进行了比较。抗原为新分离伤寒菌培养于心脑浸液琼脂上一夜,用盐水洗下培养物,加     

急性肠道传染病实验手册(续一)——(腹泻病控制计划——CDD83.3)

<正>4、抗菌药物敏感性试验 下法常用于对抗菌药物的抗性试验。 稀释试验:为定量测定抗菌素活性,可把抗菌素稀释入肉汤或琼脂培养基中,然后接种试验菌株。过夜培养后能阻止活菌生长的抗菌素最小浓度,作为该药物的最小抑菌浓度(MIC)。 扩散试验:在均匀混入试验菌株的琼脂培养基上放上抗菌素浸泡过的纸片或药片。在纸片周围生长的细菌受到抑制,抑制距离大小同该菌的敏感性相关,从而形成了抗菌药物的浓度梯度。     

肉毒梭菌培养条件的初步比较试验小结

为了配合肉毒梭菌检验工作的开展,我们用实验室保存的各型(A～F)肉毒梭菌菌种对培养基的类型、培养温度及培养时间等条件进行了生长与产毒的初步比较试验。权衡各个因素,我们认为采用明胶琼脂半固体培养基和30℃的培养温度这个统一条件较好;培养3至5天,对于所有各型的生长或产毒,均可获得符合检验要求的结果。     

三疣梭子蟹幼体和幼蟹的温度适应性

本文研究了不同温度对三疣梭子蟹（Portunus trituberculatus Miers）幼体发育和幼蟹存活及摄食的影响,试验结果表明：21—27℃有可能出苗,但21℃幼体发育相当慢;24—27℃是适宜育苗温度,27％是最佳育苗温度。蟹幼体在30℃以上仅发育至Z4,18℃以下,仅发育至Z3。温度骤变5d后,幼蟹在10—30℃存活100％,35℃存活75％,5℃以下仅能存活4h。存活幼蟹,20—30℃摄饵正常,日平均摄饵量达4．64g以上。5℃／d的温度渐变时,幼蟹在10—35℃存活100％,5℃存活25％,40℃存活不超过6h。存活幼蟹,30℃摄饵最佳,日平均摄饵量达9．80g;20—35℃摄饵正常,日平均摄饵量达5．1g以上;15℃和10℃摄饵很少,日平均摄饵量分别为0．5g和0．1g;5℃以下及40℃不摄饵。     

分离和鉴别脑膜炎球菌的培养基

一般认为脑膜炎球菌必须在含有天然动物蛋白(血液、血清、腹水及鸡蛋)的培养基上才能生长。而我们用黄豆代替动物蛋白用于脑膜炎球菌培养和鉴别,结果满意。培养基制备方法分离用培养基(黄豆—玉米淀粉抗菌素培养基):(1)基础培养基(g):胰胨6、胨6、牛肉膏3、氯化钠3、葡萄糖1、琼脂25、蒸馏水800ml,加热溶化。(2)玉米淀粉液:玉米淀粉3g(或玉米粉5g),用10ml蒸馏水拌成糊状,再用90ml煮沸的蒸馏水边倒边搅拌,微     

巴尔通体分离培养特性观察

从鼠类血液中分离巴尔通体(Bartonella),观察其分离培养特性。被检鼠血为2004年收集自云南省的4个县,采用含5%去纤维兔血脑心浸液琼脂培基置于35℃含5%CO2培养箱中分离培养巴尔通体,进行观察,涂片革兰染色镜检,疑似菌落用巴尔通体属特异性引物进行聚合酶链反应(PCR)扩增特异基因片段[枸橼酸合酶基因(gltA)的379 bp片段],电泳图中出现目标带即判断为阳性菌株。从397份鼠血分离到巴尔通体47份,分离率为11.8%。阳性菌落长出时间最早为3 d,多数为1~2周,占70.2%(33/47)。阳性菌落形态随培养时间延长而改变,特点多样。PCR阳性的菌经革兰染色,镜下均可见革兰阴性小杆菌。结果可见,可先用涂片革兰染色镜检,对疑似菌落进行初筛,巴尔通体种类多、形态多样,培养时间延长,菌落形态可能发生变异,有待进一步探索。     

噬菌蛭弧菌在灭菌自来水中存活时间的研究

本文报道了噬菌蛭弧菌用灭菌自来水于4℃保存,可存活4个月以上,最长可达8个月以上;25℃保存不及4℃.定时添加宿主菌和不加宿主菌对噬菌蛭弧菌的存活时间无显著影响。该菌的存活数随保相聚时间的延长而减少。