大鼠垂体促性腺激素细胞内cAMP的改变对LHβ mRNA表达的影响

目的 分析大鼠LHβ mRNA表达的促性腺激素释放激素(GnRH)受体后信号转导机制.方法 将体外培养的大鼠腺垂体促性腺激素(GTH)细胞用cAMP的兴奋剂FSK或抑制剂SQ22536处理后,再用高频GnRH脉冲刺激,然后用实时荧光定量PCR法测定细胞LHβ mRNA的Ct值,并与空白组比较.结果 LHβ mRNA的Ct值随着GTH细胞cAMP含量的增高而显著降低,随着cAMP含量的降低而显著增高.结论 cAMP是高频GnRH脉冲刺激所引起的LHβ mRNA表达的受体后的信号转导途径.     

促性腺激素释放激素类似物对长臀wei脑垂体促性腺激素分泌的影响

采用离体灌流孵育技术和促性腺激素的放射免疫测定方法,对长臀wei(Cranoglanis bouderius)脑垂体碎片促性腺激素的分泌进行了研究。结果表明：持续的促性腺激素释放激素类似物(GnRH-A)能显著刺激退化期的长臀wei离体脑垂体碎片促性腺激素(GTH)的分泌,并且长臀wei脑垂体碎片对持续的GnRH-A刺激未表现出脱敏性,该结果与胡子鲇和鲇鱼相似,而与金鱼和鲤科鱼类不同;重复脉冲GnRH-A刺激对长臀wei脑垂体碎片GTH分泌具有促进作用,而且存在剂量依存关系,与鲇鱼和鲤科鱼类相类似。上述结果表明在长臀wei的人工繁殖中可以用持续高浓度GnRH-A刺激对长臀wei进行催熟和催产。     

大鼠促性腺激素细胞内蛋白激酶C的改变对黄体生成素mRNA表达的影响

目的:分析大鼠黄体生成素(LH)表达的受体后信号转导机制。方法:促性腺激素(GTH)细胞内蛋白激酶C(PKC)兴奋或抑制后,用促性腺激素释放激素(GnRH)脉冲刺激,然后用实时荧光定量PCR方法测定细胞LH的β亚基(LHβ)mRNA的表达量,并与空白组比较。结果:LHβmRNA随着PKC活性的升高而显著升高,随着PKC活性的降低而显著降低。结论:GnRH脉冲刺激引起LHβmRNA表达,其受体后的信号转导是PKC-Ca2+途径。     

促性腺激素释放激素类似物对长臀(鱼危)脑垂体促性腺激素分泌的影响

采用离体灌流孵育技术和促性腺激素的放射免疫测定方法,对长臀(鱼危)(Cranoglanis bouderius)脑垂体碎片促性腺激素的分泌进行了研究.结果表明:持续的促性腺激素释放激素类似物(GnRH-A)能显著刺激退化期的长臀(鱼危)离体脑垂体碎片促性腺激素(GTH)的分泌,并且长臀(鱼危)脑垂体碎片对持续的GnRH-A刺激未表现出脱敏性,该结果与胡子鲇和鲇鱼相似,而与金鱼和鲤科鱼类不同;重复脉冲GnRH-A刺激对长臀(鱼危)脑垂体碎片GTH分泌具有促进作用,而且存在剂量依存关系,与鲇鱼和鲤科鱼类相类似.上述结果表明在长臀(鱼危)的人工繁殖中可以用持续高浓度GnRH-A刺激对长臀(鱼危)进行催熟和催产.     

鱼类促性腺激素受体研究进展

促性腺激素FSH/LH在脊椎动物的生殖调控中占据中心地位,其生理功能主要通过其特异性受体FSH-R/LH-R所介导.研究表明,鱼类FSH-R和LH-R主要在性腺表达,也在脑、肝脏、肾脏、脾脏等部位表达,主要调控生殖细胞的成熟和最后的排卵及排精.     

儿茶酚胺神经递质对促性腺激素释放激素分泌的影响

下脑脑儿茶酚胺神经递质是调节促性腺激素释放激素合成和分泌的重要因素。形态学和药理学证据以及离体实验都证明,儿茶酚胺类神经递质通过直接的突触联系或通过间接的途径影响ＧｎＲＨ释放,并参与ＧＧｎＲＨ的基因;儿茶酚胺的调节作用与体内类固醇水平有关。     

酪氨酸对男子血清促性腺激素和睾酮浓度的影响

给成年男子(n=5)口服酪氨酸300mg/日,共6天,第四天肌注 LRH-A 150μg/人,用RIA 法测定其血清 LH、FSH 和睾酮浓度。与对照组(n=5)相比,酪氨酸对 LH 和 FSH 的基础水平和 LRH-A 诱发的 LH 峰和 FSH 峰均无明显影响。睾酮的基础水平稍有升高,而酪氨酸对 LRH-A 引起的睾酮水平升高有明显的抑制作用。结果提示,酪氨酸可不通过垂体而直接作用于睾丸以影响睾酮的分泌。     

多巴胺能药物对鲤鱼促性腺激素分泌活动的影响

研究多巴胺（ＤＡ）及其激动剂阿扑吗啡（ＡＰＯ）和拮抗剂Ｄｏｍｐｅｒｉｄｏｎｅ（ＤＯＭ）对不同性腺发育时期和不同年龄雌鲤促性腺激素（ＧｔＨ）分泌活动的影响。结果表明：鲤鱼基础ＧｔＨ分泌具有明显的季节性变化,表现为血清ＧｔＨ含量在性腺发育早期较低,性腺成熟期升高,到性腺退化期又降低。ＤＡ和ＡＰＯ对ＧｔＨ分泌的抑制作用及ＤＯＭ对ＧｔＨ分泌的刺激作用在不同性腺发育时期为：性腺发育早期〉性腺成熟期〉性腺退化     

米非司酮对恒河猴促性腺激素分泌水平的抑制作用

目的分析米非司酮（RU486）对恒河猴促性腺激素分泌水平的影响,探讨RU486影响恒河猴促性腺激素分泌的可能机制,为临床安全用药提供理论依据。方法采用生物测定法测定恒河猴促性腺激素,比较在不同情况下恒河猴促性腺激素的分泌水平。结果实验表明：不同时间（0、0.5、1、2、4、8、12、244、8 h）用药后,RU486对恒河猴促黄体激素（LH）、促滤泡激素（FSH）分泌水平的影响,在用药0.5、1、24、h后,对LH、FSH分泌均有抑制作用,其中在用药4 h时,LH、FSH分泌水平均有显著的降低,而用药81、2、244、8 h后,LH、FSH浓度没有显著差异。在月经周期的不同时期一次用药后发现,卵泡期：RU486对LH、FSH分泌水平影响较小;排卵期：RU486对LH、FSH峰的发生延迟现象;黄体期：观察到RU486对FSH、LH基础分泌水平及脉冲的幅度出现下降。结论RU486对恒河猴的LH、FSH分泌水平,在不同情况下有显著差异。     

多巴胺、雌二醇及睾酮对虎纹蛙离体脑垂体促性腺激素分泌的影响

为了解虎纹蛙促性腺激素分泌的调节机理,用离体静态培育系统和放射免疫测定法,研究了多巴胺（ＤＡ）、雌二醇（Ｅ２）和睾酮（Ｔ）对雌性虎纹蛙离体脑垂体薄片促黄体激素（ＬＨ）和促卵泡激素（ＦＳＨ）分泌活动的影响。结果表明：０．１～１０μｍｏｌ／Ｌ的ＤＡ对成熟前期和冬眠期虎纹蛙离体脑垂体型薄片的ＬＨ及ＦＳＨ的释放都有抑制作用,并且随着ＤＡ浓度的增加,抑制作用逐渐增强。１和１０μｍｏｌ／Ｌ的Ｅ２显著刺激成熟前     

牛促卵泡激素在毕赤酵母中的表达

目的:实现重组牛促卵泡激素在毕赤酵母中的表达。方法:依据毕赤酵母的密码子偏爱性设计并利用PCR方法合成了牛促卵泡激素的α亚基和带有6×his-tag的β亚基相应的DNA序列,构建表达载体pHIL-S-bFSH,转化毕赤酵母,表达蛋白进行ELISA定量和Western blot鉴定。结果:重组牛促卵泡激素的表达量为0.26mg/L,Western blot鉴定分子量为35kDa。结论:在毕赤酵母中实现了具有免疫源活性的重组牛促卵泡激素的表达。     

双峰驼血浆促卵泡素的放射免疫分析法

用单峰驼促卵泡素标准品（ＣａｍＦＳＨ）,ｈＦＳＨ抗血清和＾１２５Ｉ－ｈＦＳＨ建立了测定双峰驼血浆ＦＳＨ的放射免疫分析方法,并通过一系列实验证明,该方法可以用于测定双峰驼血浆ＦＳＨ,是研究双峰驼生殖内分泌学的可靠手段之一。     

不同波段电磁辐射对大鼠Sertoli细胞雄激素受体和卵泡刺激素受体表达的影响

探讨不同波段电磁辐射对大鼠睾丸Sertoli细胞雄激素受体(androgen receptor,AR)和卵泡刺激素受体(follicle stimulating hormone receptor,FSHR)表达的影响。原代培养的Sertoli细胞分别经场强6×104 V/m的电磁脉冲(electromagnetic pulse,EMP)、平均功率密度为100 mW/cm2的S波段微波(S-band high power microwave,S-HPM)和X波段微波(X-bandhigh power microwave,X-HPM)辐射4 min。应用real-time RT-PCR和Western blot方法检测Sertoli细胞AR的表达,结果显示具有不同程度的降低(P<0.05,P<0.01);Wistar大鼠分别经S-HPM、X-HPM和EMP照射20 min,应用免疫组化方法检测睾丸组织AR的表达,发现辐射后7 d有显著降低(P<0.05,P<0.01)。三者比较,AR的表达总体呈EMP>X-HPM>S-HPM的趋势,而FSHR的表达无明显变化。Sertoli细胞AR表达的变化,可能参与了电磁辐射致...     

OCT4 介导卵泡刺激素对永生化人卵巢上皮细胞株增殖、 凋亡和侵袭能力的影响

目的:探讨OCT4基因对卵泡刺激素作用下的永生化人卵巢上皮细胞株(Moody细胞)增殖、凋亡和侵袭能力影响。方法:将不同浓度的FSH(0、25、50、100mIU/ml)作用于Moody细胞48小时,应用Western-blot技术检测OCT4表达情况。采用慢病毒介导将重组质粒OCT4稳定转染至人卵巢上皮细胞株中,应用Western-blot法鉴定OCT4蛋白表达情况。FSH以50 mIU/ml作为工作浓度,实验对象分为4组:①siCon组,转染空载体的阴性对照组;②OCT4组:稳定转染OCT4基因的Moody细胞组;③FSH+siCon组:以FSH处理的siCon组;④FSH+OCT4组:以FSH处理的OCT4组。采用MTT比色法检测各组细胞的增殖情况,流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况,Transwell侵袭实验检测各组细胞侵袭能力的变化。结果:(1)随着FSH浓度的增加,Moody细胞中OCT4蛋白表达逐渐增高,在FSH浓度为50 mIU/ml时达最高;(2)OCT4基因成功转染至Moody细胞中,经Western-blot检测该基因在细胞中进行蛋白高表达;(3)FSH+OCT4组细胞增殖活性明显增高,同时凋亡率降低,与另外三组相比差异具有统计学意义(P<0.05);(4)在FSH作用下,转染OCT4后明显增强了细胞的侵袭能力,与另外三组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:OCT4介导了FSH对人卵巢上皮细胞增殖、凋亡、侵袭活性的调控。     

促排卵周期中未破裂黄素化卵泡综合征与性激素的关系探讨

目的:对未破裂黄素化卵泡综合征(LUFS)周期及正常排卵周期患者在不同时间性激素进行测定与比较,探讨LUFS的发生与性激素的关系。方法:对自然周期有排卵障碍的患者使用克罗米芬+HCG促排,分别在月经周期的第3天(C3)、第10天(C10)、卵泡成熟日(CM)(卵泡直径≥18mm)、尿LH阳性或注射HCG后48小时(CL)进行性激素测定,根据患者是否有排卵分为:正常排卵组(A组);未排卵出现LUFS组(B组)。选择同期自然周期正常排卵者为对照组(C组),同上法进行性激素测定。对A、B、C组患者不同时间的血清性激素进行比较。结果:1、FSH:在CM日A、B两组的促卵泡成熟激素(FSH)均低于C组(P<0.01)。2、LH:在C3、C10、CL日测定的A、B组LH值均高于C组(P<0.01),在CM日测定的A、B组LH值低于C组(P<0.01)。3、P:在CM日A、B两组的孕酮值低于C组(P<0.01);4、E2:在C3日测定的B组E2值低于C组(P<0.01),在CL日测定的B组E2值高于C组(P<0.01);5、PRL:在不同时间各组的PRL值均无显著性差异(P>0.05)。6、T:在不同时间各组的T值均无显著性差异(P>0.05)。结论:性激素在LUFS的发生中起重要作用,但以C3日E2值与LUFS的发生的关系最大,E2值低者易发生LUFS。     

促甲状腺激素单克隆抗体的制备

获得了抗促甲状腺激素(TSH)单克隆抗体杂交瘤细胞20株,其中T₇₄A₁₀小鼠腹水滴度为1:50 000,亲和常数为7.15×10⁹L/mol,T₇₁B₁₁小鼠腹水滴度为1:150000,亲和常数为8.75×10⁹L/mol.两个抗体与人绒毛膜促性腺激素(HCG)、促卵泡激素(FSH)和促黄体生成激素(LH)的交叉反应分别小于1.1×10^-6%、0.01%和0.016%.将T₇₄A₁₀和T₇₁B₁₁应用于TSH免疫放射分析中,得到了满意的结果.