葡萄抗病无核胚挽救育种及分子标记辅助选择

以欧洲葡萄无核品种为母本,中国野生葡萄双优、欧山杂种北醇及8个欧洲葡萄品种为父本共进行了16个组合的杂交,通过胚挽救技术获得胚挽救苗55个株系。利用无核基因特异引物GSLP1、抗黑痘病和抗炭疽病基因RAPD标记对杂种株系进行分子检测,杂种中检测出拥有无核基因RAPD标记的22株、拥有抗黑痘病基因RAPD标记的16株、拥有抗炭疽病基因RAPD标记的9株。在这些胚挽救杂种苗中,同时拥有无核、抗黑痘病、抗炭疽病基因RAPD标记的胚挽救苗4株,同时拥有无核和抗黑痘病基因RAPD标记的胚挽救苗9株,同时拥有无核、抗炭疽病基因RAPD标记的胚挽救苗1株。     

大花、重瓣型非洲紫罗兰组培苗移栽技术的研究

本文主要探讨了基质种类、光照强度、空气湿度和炼苗时间对移栽成活率的影响,旨在建立大花、重瓣型非洲紫罗兰组培苗稳定的移栽技术体系。结果表明:移栽基质最佳配比为泥炭土︰糠壳灰︰珍珠岩=1︰2︰1;适宜的光照强度为移栽后选用2层遮阴网,移栽成活率最高;空气湿度控制在70%~90%,组培苗生长旺盛;将组培苗在室外炼苗处理7d再进行移栽,成活率最高,达95%。     

辣木组培苗移栽驯化

对印度改良辣木Moringa oleifera PKM2组培生根苗的培养时间及炼苗时间、移栽驯化时间、移栽基质等因素进行研究。结果表明,组培苗移栽前生根培养15 d、炼苗4 d成活率最高,达90.67%;移栽驯化最佳时间为10月份;移栽驯化基质以水藓泥炭+珍珠岩(4∶1)最为适宜。     

无核香味葡萄胚挽救育种研究

为创制无核香味葡萄新种质,该研究以7个无核葡萄品种为母本,4个玫瑰香味品种为父本,配置了9个杂交组合。田间杂交后,通过胚挽救技术离体培养杂种胚珠,使胚珠中幼胚继续发育,继而在幼胚萌发成苗后利用无核标记对F1代株系进行无核性状的早期检测,同时对杂种幼苗进行温室炼苗,最终移栽大田。结果表明:(1)利用胚挽救技术获得365个胚挽救株系,移栽大田并成活182株杂种苗。(2)对其中72个株系利用无核基因探针GSLP1-569与无核分子标记SCF27-2000进行无核性状检测,分别检测出8个和38个杂种后代携带无核特异性条带,初步确定为无核株系。(3)杂交组合中以‘红宝石无核’、‘火焰无核’、‘昆香无核’为母本的组合成苗率相对较高,较适宜做母本;香味品种中‘玫瑰香’更适合做为父本选育香味无核种质。(4)以‘火焰无核’和‘昆香无核’为母本的杂交组合分别在授粉后的43d和51d采样,胚发育率(6.96%~8.54%和16.92%~18.13%)和成苗率(6.45%和8.75%~10%)较高;‘红宝石无核’ב玫瑰香’、‘莫莉莎无核’ב玫瑰香’和‘波尔莱特’ב玫瑰香’3个组合分别在授粉后59~60d、54d、52d采样,胚挽救育种效果较好;杂交组合‘克瑞森无核’ב巨玫瑰’和‘奇妙无核’ב昆香无核’胚败育时期分别为授粉后39d和48d。(5)幼胚发育至子叶型胚时最易成苗,延长胚珠离体暗培养时间显著增加了畸形胚比率。研究认为,葡萄胚挽救育种过程中,胚珠离体培养时间在8~10周为宜。     

葡萄试管苗光自养培养快速繁殖

葡萄是世界上栽培面积和总产量都占第一位的果树。有关葡萄茎尖培养、侧芽培养和无 病毒苗的试管繁殖都有报道。但是试管苗移栽成活率一般较低而且很不稳定,这就使葡萄试管苗(特别是脱病毒试管苗)快速繁殖在生产上的应用受到很大限制。本试验利用光自养培养获得的葡萄试管苗生长发育正常,移栽前练苗时培养基不易污染,可适当延长练苗时间,并且,此试管苗对移栽后的环境条件具有很强的适应能力,成活率高,生长速度快。我们     

核桃胚培养快速成苗技术初探

以核桃品种‘香玲’的成熟种胚为试材,分别以带2片子叶、带1片子叶和不带子叶的胚接入MS培养基上的成苗情况和比较Hgcl2消毒2min、5min、NaClO消毒10min3种消毒的灭菌效果表明：HgCl2消毒5min的效果最佳,1周后的材料污染率仅为7％;采用MS为基本培养基,不附加任何生长调节物质,以不带子叶的胚培养4周后即可成苗,未经过煅炼的苗直接移栽到装有蛭石的营养钵中,其最终成活率可达84．6％。     

西瓜组培苗嫁接技术的研究

西瓜组培苗往往不易移栽成活,且生长差。通过砧木嫁接的方法,可提高苗的成活率并改善苗的生长状况。实验研究了接穗炼苗的天数、接穗叶片数、接口用不同外源激素处理与嫁接成活率的关系。条件优化后,嫁接后成活率可达85％,为西瓜优良品种的快速繁殖以及西瓜抗虫、抗病、品质改良等基因工程的研究奠定了基础。     

山新杨组培苗生根移栽方法

从炼苗,保湿,防污染等方面,研究出一种新型高效的山新杨组培苗生根移栽方法。首先,获取山新杨组培苗,将其用液体生根培养基在大试管中生根12~15 d;再放入无菌自来水中水培炼苗2 d;之后将幼苗移栽入土,上扣透明塑料水杯保湿,15 d后移去水杯;带土移栽到大田中。此法可使组培苗移栽成活率提高至98%以上,且本法经济简便,规模小,效率高,也适用于其它木本植株,便于推广。     

转基因棉花高效定植方法的研究

通过根癌土壤杆菌介导法将外源抗虫基因导入4个陆地棉(GossypiumhirsutumL.)栽培品种。对转基因再生植株的移栽和嫁接研究发现,不同的定植方法对成活率和植株生长状态有显著的影响。直接移栽法、蛭石炼苗法和水培法的定植成活率均较低,缓苗时间也相对较长。而嫁接能够极大地提高再生植株的定植成活率并有效地缩短了缓苗时间,从而克服了棉花再生植株不易定植成活的困难,为基因工程乃至其他生物技术能够顺利地应用于棉花遗传改良奠定了基础。     

金桂快速繁殖炼苗技术的研究

通过不同生根培养基、炼苗预处理、移栽基质以及叶面施肥等对金桂品种微繁苗炼苗的影响开展试验研究,为目标品种的壮苗快繁提供炼苗的技术支撑。通过对金桂快速繁殖关键技术研究,结果表明,金桂微繁苗生根率和生根数的最佳处理组合为A_3B_2C_3,即B_5基本培养基+2 mg·L^-1NAA+0. 10 mg·L^-16-BA,其生根率、平均生根数分别为:91. 11%、3. 83条/株。炼苗的最佳处理组合为A_3B_2C_3,即以苗圃土∶珍珠岩∶腐殖土=2∶3∶7为炼苗基质,金桂微繁苗炼苗的成活率和苗木增长率分别达到82. 2%、42. 2%。     

一种崂山百合的离体快速繁殖技术

以崂山百合的鳞茎为外植体,通过植物组织培养技术成功获得了再生植株,建立了该植物的快速无性繁殖体系。整个组织培养过程分为芽的诱导、根的诱导和移栽三个阶段。适合芽诱导的最佳外植体是：鳞茎基部,最适培养基是：1／2MS＋0．5mg／LNAA＋0．8mg,LKT＋3％蔗糖。用于生根的最佳培养基是：1／2MS＋0．4mg/LIBA＋3％蔗糖。最适培养温度为25℃．不同基质对组培苗移栽的成活率有一定影响,其中在珍珠岩上的移栽成活率为98％。     

铁皮石斛组培苗移栽驯化过程中叶片光合特性、 超微结构及根系活力的变化

研究了铁皮石斛(Dendrobium candicum Wall.ex Lindl.)组培苗在移栽驯化(即试管苗移栽大田)过程中,移栽0、1、2、4d和20d(已移栽成活)时叶片光合特征参数、叶绿素荧光特性及叶绿体超微结构,光合色素含量、可溶性糖含量、根系活力和硝酸还原酶活性等生理特征的变化,以阐明铁皮石斛组培苗在移栽驯化过程中发生的适应性变化。结果表明:铁皮石斛幼苗在移栽驯化过程中叶片表观量子效率、最大净光合速率、羧化速率以及PSⅡ的最大光化学效率和表观光合电子传递速率均在移栽驯化过程中不断升高并于20d时达到最大;而暗呼吸速率和叶绿素b的含量在移栽20d时显著降低。驯化过程中叶片光合机构遭到破坏,但移栽20d时叶绿体内淀粉粒和嗜饿小体体积变大,片层结构清晰、完整且有序。根系活力和硝酸还原酶活性均在移栽20d时显著增大。铁皮石斛组培苗在移栽驯化过程中叶片光合特性、超微结构及根系活力都发生了一定的适应性变化,随着移栽时间的延长,石斛叶片的光合效率明显提高,并有大量的光合产物积累;同时根系吸收水分、养分的能力及抗逆能力都明显增强,到移栽20d时组培苗已完全适应大田环境。     

黑杨胚抢救技术体系优化

采用组织培养技术进行黑杨胚抢救和比较不同黑杨派树种杂交组合以及不同胚抢救时间的结果表明黑杨胚抢救的最佳时间范围为授粉后30-35d。已长有3支以上须根的胚培苗进行移栽时保持的温度为20-25℃,湿度为70％左右,3d可成活,1周即可完全适应外界环境。     

普通小麦与粗山羊草正,反交的育性研究

普通小麦与粗山羊草杂交需借助幼胚培养方可获得杂种,取授粉１２～１６天的幼胚进行拯拯救,成苗率较高,效果较好。而不同杂交方式对共杂种成胚率、成苗率及思胚拯救率影响很大。以普通小麦为母本,粗山羊草为父杂交时,１５个杂交组合平均杂种成胚率,成苗率及幼胚拯率分别为５．３５％和５８．７３％,而在１２个反交组合中,其平均成胚率,成苗率及幼胚拯救率分别为９８．８８％、１７．１０％和２４．４４％。由此可见,普通小     

猕猴桃不同季节的嫁接法比较试验

在湖北的试验表明,猕猴桃春季嫁接以切接法较好,夏秋季嫁接则以单芽枝腹接法较好;嫁接后采用遮阳网遮荫可以显著提高嫁接成活率,但对出圃率无明显影响。     

斑花杓兰试管苗根茎繁殖

为保护斑花杓兰Cypripedium guttatumu种质、实现栽培,以其根茎为材料,采用组织培养方法,进行试管苗培养、根茎继代繁殖培养、试管苗扦插和定植研究。结果表明：1/2MS＋蔗糖16 g/L＋ABT 2号10 mg/L＋IAA 0.4 mg/L是根茎试管苗培养的理想培养基,且这种以炉灰渣为支持物的培养基也是试管苗根茎继代繁殖培养的理想培养基;在温室苗床上试管苗根茎段扦插成活率为96.5%,繁殖速度比移栽提高2.2倍;根茎扦插试管苗定植的成活率为96.8%。定植成活的根茎试管苗保持了野生斑花杓兰的所有植物学性状。     

茎杆的第一节间离体再生空心菜

以空心菜（Ipomoea aquatica Forsk.）品种‘白骨柳叶’为材料,通过筛选植物外植体和调整培养基激素配比等方法,首次建立了茎秆第一节间为外植体的空心菜离体再生体系。结果表明,在MS基本培养上添加0.05% 的植物组织培养抗菌剂PPM可获得大量空心菜无菌苗;植株子叶和下胚轴的切段均未诱导出不定芽,而茎秆第一节间为外植体能成功诱导出不定芽,诱导成功率为20%,最佳培养基配方为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IAA;不定芽诱导生根的最佳培养基配方为1/2 MS+0.1 mg/L NAA,生根率为100%。诱导成功后,将完整的再生苗移栽至基质土中,成活率可达100%。     

姜花属种间杂交胚拯救研究

为提高姜花属种间杂交胚挽救中幼胚萌发率,以白姜花×金姜花的胚珠为试材,研究不同胚珠发育时期、不同培养基及低温处理果实对幼胚萌发率的影响.结果表明,白姜花×金姜花胚挽救的适宜培养基是MS+0.1 mg/L BA十0.1 mg/L NAA;接种时期以60 d的幼胚培养效果最佳;低温处理果实3～6 d能有效提高幼胚的萌发率.     

Assessment of polyembryony in lemon: rescue and in vitro culture of immature embryos

The 27 lemon cultivars analysed could be considered slightly or moderately polyembryonic, with 25 to 43% of seeds being polyembryonic and from 1.3 to 1.6 embryos per seed. On this basis, it is necessary to rescue zygotic embryos at an immature stage. Rescue and in vitro embryo development have been studied in two Citrus limon polyembryonic cultivars. Sucrose (50 and 70 g/l) was combined with Murashige and Skoog and Gamborg’s B5 media and tested for optimal growth response. An important effect of genotype was observed: embryos from cultivar ‘Eureka’ had greater survival, germination percentage, and radical development. While the sucrose concentration in the medium did not have an effect on germination, the medium affected the embryo survival and root development of the seedlings, Gamborg’s B5 medium giving the best results. The ability to form plants in vitro was affected by an increase of embryo developmental stage. The germination and seedling height were greater with embryos of seeds collected 135–150 days after anthesis.     

兰属种间杂交胚拯救研究初报

取兰属大花蕙兰为母本、墨兰为父本进行种间杂交并进行杂种胚拯救研究。结果显示,子房离体培养明显优于胚珠离体培养,是胚抢救培养的有效手段。不同取材时间及在不同培养基中子房培养情况差异明显。在授粉后60 d子房离体培养即可获得成功,但以授粉后90 d子房离体培养最佳,萌发率高,达80%。子房培养的最适培养基为VW+BA 0.2 mg/L+NAA 0.2 mg/L+蛋白胨3 g/L+水解酪蛋白500 mg/L+椰子汁10%。