白及种子萌发与快速繁殖技术的研究

将不同胚龄的白及种子接种到不同培养基中进行培养,对白及种子萌发率、萌发时间、丛生芽增殖、生根等方面进行了研究。结果表明:白及种子萌发率与其胚龄及有胚率成正相关,萌发时间则与胚龄及有胚率成负相关;胚龄16周的种子在1 g/L花宝1号 2 g/L花宝2号的培养基上萌发率可达84%;胚龄等于或大于20周的种子萌发率不受培养基成分的影响,均可达100%,萌发时间只需7 d;丛生芽增殖的最佳培养基为1/2 MS 4.0 mg/L6-BA 0.2 mg/L NAA 100 g/L CM,其增殖倍数达4.41倍;诱导生根较好的培养基为1/2 MS 0.2 mg/L NAA,生根率达90%。     

田菁的组织培养（简报）

田菁种子在1/2MS NAA0.5mg/L琼脂的半固体培养基上诱导发芽;以种子苗的茎尖、叶、茎、子叶和下胚轴各切段为外植体,在1/2MS 6-BA 2.0mg/L NAA 0.25mg/L上可分化出丛生芽;在1/2MS NAA0.2mg/L生根培养基上,生根率达90%以上.上述培养基均添加25g/L蔗糖和7g/L琼脂,pH 5.8.     

4个甘蓝型油菜品种一步法快速繁殖体系的建立

采用单因子试验和植物组织培养方法,对4个甘蓝型油菜品种无菌体系的建立以及带芽茎段的增殖和生根进行初步研究。结果表明,4个品种油菜种子最佳的消毒方式为70%酒精消毒30s,再用0.1%氯化汞消毒8~10min;带芽茎段增殖的最佳培养基为MS+6-BA 2mg/L+NAA 1~2mg/L;最佳生根培养基为MS+NAA 2~5mg/L。     

不同浓度卡那霉素、潮霉素对楸树试管苗生长的影响

目的:将不同质量浓度的卡那霉素、潮霉素加入楸树培养基中,研究卡那霉素、潮霉素对楸树组培苗生长的影响,以确定抗生素对楸树茎段分化与生根的敏感质量浓度。方法:待楸树继代、生根培养基灭菌后温度降至30~50℃,将不同质量浓度的卡那霉素、潮霉素经抽滤式灭菌加入培养基中,在培养基中接入楸树组培无菌茎段培养,观测茎段继代(增殖芽数、芽长、叶数等)、生根(发根数、根长、芽长等)生长指标并统计分析。结果:楸树组培继代培养基添加卡那霉素质量浓度为100 mg/L时组培瓶苗生长缓慢,浓度为150 mg/L时叶片大部分发白并干枯,茎段基部无愈伤组织形成,瓶苗基本停止生长,楸树继代瓶苗对卡那霉素耐受性范围为100~150 mg/L;添加潮霉素质量浓度为5 mg/L时瓶苗生长较为缓慢,浓度为10 mg/L时叶片开始干枯,茎段基部愈伤组织较小,瓶苗基本停止生长,楸树继代瓶苗对潮霉素耐受性范围为10 mg/L左右。楸树组培生根培养基添加卡那霉素质量浓度为100 mg/L时大部分茎段干枯,少部分为绿但未分化芽与根,浓度为150 mg/L时大部分茎段干枯,极少上部为绿,基部干枯,但未分化芽与根,楸树组培瓶苗生根培养苗对卡那霉素耐受性范围为100~150 mg/L;添加潮霉素质量浓度为5 mg/L时少部分茎段干枯,浓度为10 mg/L时大部分茎段干枯,少部分为绿,茎段未出现芽的分化与根的萌发现象,楸树组培瓶苗生根培养苗对潮霉素耐受性范围为5~10 mg/L。结论:卡那霉素、潮霉素对楸树组培苗生长有明显的抑制作用且与抗生素浓度呈负相关,但低质量浓度(1 mg/L)的潮霉素对楸树继代分化芽数有促进作用;同一抗生素对楸树不同无性系间组培苗生长的影响无显著差异。     

美洲黑杨(中嘉8号)离体叶片再生研究

用中嘉8号杨[Populus deltoids(I-63×I-69)]试管苗叶片作外植体,在添加不同生长素和细胞分裂素浓度配比的1/2(N)MS培养基上,筛选出叶片直接分化不定芽的最适培养基1/2(N)MS 0.2 mg/L BA 0.02 mg/LNAA 25 g/L蔗糖 7 g/L琼脂,不定芽分化率为85%。同时发现,一定浓度的KT对生根具有促进作用,最适生根培养基为MS 0.08 mg/L KT 0.02 mg/L NAA 25 g/L蔗糖 8 g/L琼脂,生根率为82.2%。     

洋甘菊组织培养及植株再生

洋甘菊种子灭菌后,置于MS 培养基上发芽形成无菌苗,发芽率可达80 %.适合洋甘菊种子的灭菌的方法是:75 %酒精30 s+3.5 %次氯酸钠15 min+2 %次氯酸钠10 min.在研究范围内,洋甘菊不定芽增殖的最佳培养基为MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L,碳源以蔗糖浓度3 %最佳.适宜洋甘菊生根的最佳培养基为MS+IBA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+6-BA 0.2 mg/L.     

中国石竹离体快繁与试管苗玻璃化研究

研究了培养基组成成分对中国石竹品种Diana F1 White组培程序中种子萌发、诱芽增殖、试管苗玻璃化及生根等重要环节的影响。结果表明:(1)种子适宜的萌发培养基为1/2MS,在此培养基中种子萌发率为83.33%,播种后30d时无菌苗高度达6.99cm,叶片数达26.7。(2)在芽诱导阶段玻璃化苗发生率最高可达53.85%。将光照强度提高至2000lx后,采用培养基MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.3mg/L+琼脂8.0g/L+蔗糖8.0g/L进行诱芽培养,玻璃化苗发生率降至3.33%,外植体出芽率达到90%,单个外植体出芽数达到7.2个。(3)适宜的生根培养基为1/2MS+1.0mg/LIBA+琼脂8g/L+蔗糖40g/L,培养30d时生根率为100%,平均根条数达到24.7条,平均根长度达到4.7cm。试管苗在消毒后的腐殖土中移栽,成活率达95%。该研究结果为DianaF1试管苗的快速繁殖提供科学依据。     

纹瓣兰的无菌播种与试管成苗

纹瓣兰作为一种野生的兰花资源有其重要的保护及保存意义,本试验以纹瓣兰的种子作为外植体对其进行无菌播种,并成功诱导出再生植株.试验结果表明,在添加椰子水和6-BA的1/2MS培养基中纹瓣兰的种子可以在较短的时间内形成原球茎,其中以添加6-BA 2.0 mg/L+10%椰子水诱导效果最佳.添加6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L的1/2MS培养基最有利于纹瓣兰芽的分化,在分化培养50 d时其分化率可达到100%,且芽生长健壮.当生根培养基为1/2MS+NAA 0.1 mg/L时,纹瓣兰的生根率达95%;生根培养30 d后移栽,幼苗成活率达90%以上.     

'早红'草莓高效遗传转化受体系统的建立

本文以草莓主栽品种'早红'组培苗离体叶片和叶柄为外植体,进行叶龄、暗培养、植物生长调节剂配比及抗生素敏感性研究,建立草莓高效遗传转化的受体系统.在含3.0 mg/L 6-BA与0.1 mg/L 2,4-D的MS培养基上,30 d叶龄的叶片再生频率高达98.31%,平均每叶片再生芽数5.09个,叶柄切段的再生频率为89.25%,平均每叶柄切段再生芽数4.92个,叶片的再生频率略高于叶柄;不定芽在含0.2 mg/L 6-BA与0.2 mg/L GA_3的MS继代培养基上培养成苗.将生长状态良好的不定芽转至含0.2 mg/L IBA的1/2 MS培养基上生根,生根率达100%,平均生根数量16.27条,平均根长1.85 cm.抗生素敏感性试验表明,草莓外植体适宜的卡那霉素选择压力为25 mg/L,头孢霉素的筛选浓度为300mg/L.本研究建立的再生体系可作为草莓遗传转化的受体系统.     

香蕉组织培养过程中内生菌污染的控制

研究了体外培养一种孟加拉传统香蕉(Musa spp.Cv. Kanthali)的茎尖组织。茎尖的原始细胞表面经无菌处理(0.1%HgCl2处理12min) ,接种6~15d后外植体地下茎部分仍有微生物污染(大部分是细菌) ,杀死了85%的外植体。为确定无污染培养基,将等量外植体分别浸泡在含400mg/L氨苄青霉素和200mg/L庆大霉素(两种光谱抗生素)的培养基中1h。结果表明,经抗生素处理的外植体完全没有污染,但培养3周后不能再生。进行二次继代培养后,其中一部分外植体吸收了培养基并胀大,颜色由苍白转变成浅绿或深绿。三次继代培养后数天,不再观察到外植体的生长,所有经抗生素处理过的外植体都开始死亡。在未经抗生素处理的活外植体中,单个茎发育的最佳培养基是:MS 4.0mg/L BA 0.5mg/L KT 15% CW,平均生长时间为18~21d,但再生率很低,只有30%。茎细胞增殖的最佳培养基是:MS 4.0mg/L BA 2.0mg/LIAA 15% CW,每个茎平均只萌发3~4个芽。最后,在添加0.5mg/LIBA的一半浓度的MS培养基中,体外培养茎最大生根率达到90%。     

青钱柳组培快繁体系的初步研究

以青钱柳成熟胚为实验材料,对建立青钱柳组培快繁技术体系进行初步研究.结果表明,离体胚在添加30 g/L蔗糖、6.5 g/L琼脂的培养基中培养60 d,成苗率可达到72.67%.通过正交试验筛选出丛生芽诱导增殖的最佳培养基为WPM+0.5 mg/L 6-BA+0.01 mg/L IBA+30 g/L蔗糖,适宜的继代周期为40 d,丛生芽诱导率可达到93.33%,增殖系数最高为4.75,3种激素对丛生芽增殖系数的影响程度依次为IBA>6-BA>KT,其中IBA有显著影响.培养基中添加适当浓度的烯效唑和稀土镧对试管苗的壮苗和生长均有促进作用,其最适浓度分别为0.1 mg/L和5 mg/L.适宜浓度的IBA对试管苗生根有一定促进作用,采用WPM+0.2 mg/L IBA+20 g/L蔗糖培养基进行诱导,生根率为16.67%,经过15 d暗诱导处理,生根率可提高到23.33%.     

草果组织培养快速繁殖育苗研究

以草果（Amomum tsao-ko Crevost et Lemaire）茎尖为外植体,MS为基本培养基,探讨不同浓度的培养基因子,对草果不定芽的诱导、增殖分化、生根情况和试管苗移栽成活率的影响.结果表明：①以MS＋6-BA 6 mg/L＋NAA 0.1 mg/L＋TDZ 0.05 mg/L的培养基对不定芽增殖分化效果较好,增殖倍数达到2.34,不定芽叶色绿,苗粗壮,整体感最好.②糖浓度对草果不定芽分化增殖有一定影响,以糖浓度为30～35g/L增殖分化效果较好.③在草果不定芽生根中,以1/2MS＋IBA 0.2 mg/L、1/2MS＋NAA 0.2 mg/L效果较好.出根率较高,须根最多,平均根数最多,移栽成活率为100%.     

红掌茎段侧芽离体快繁技术研究

以红掌嫩茎为外植体,诱导侧芽萌发,并进行增殖和生根培养,研究不同生长调节剂浓度配比对茎段侧芽萌发、增殖、无菌苗生根的影响以及增殖培养过程中愈伤组织的抑制等因素。结果表明,侧芽诱导的适宜培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L,萌发率达87.5%;最适增殖培养基为MS+6-BA 0.8 mg/L+NAA 0.2 mg/L+VB2 8.0 mg/L,增殖系数3.8;最适生根培养基为1/2MS+NAA 0.5 mg/L,生根率98%;在增殖培养基中添加适量VB2能较好地抑制愈伤组织的生成,防止愈伤组分织分化形成芽,从而达到以芽繁芽的目的。     

香蕉组织培养过程中内生菌污染的控制

研究了体外培养一种孟加拉传统香蕉（Musa spp. Cv. Kanthali）的茎尖组织。茎尖的原始细胞表面经无菌处理（0.1% HgCl₂处理12min）,接种6～15d后外植体地下茎部分仍有微生物污染（大部分是细菌）,杀死了85％的外植体。为确定无污染培养基,将等量外植体分别浸泡在含400mg/L氨苄青霉素和200mg/L庆大霉素（两种光谱抗生素）的培养基中1h。结果表明,经抗生素处理的外植体完全没有污染,但培养3周后不能再生。进行二次继代培养后,其中一部分外植体吸收了培养基并胀大,颜色由苍白转变成浅绿或深绿。三次继代培养后数天,不再观察到外植体的生长,所有经抗生素处理过的外植体都开始死亡。在未经抗生素处理的活外植体中,单个茎发育的最佳培养基是：MS+4.0mg/L BA+0.5mg/L KT+15% CW,平均生长时间为18～21d,但再生率很低,只有30％。茎细胞增殖的最佳培养基是：MS+4.0mg/L BA+2.0mg/L IAA+15% CW,每个茎平均只萌发3～4个芽。最后,在添加0.5mg/L IBA的一半浓度的MS培养基中,体外培养茎最大生根率达到90％。     

杂种白杨离体再生体系的建立

以杂种白杨'717杨'(Populus tremula×Populus alba)和'353杨'(Populus tremula×Populus tremuloides)的叶片为材料,研究不同基因型、激素组合对叶片分化和不定芽生根的影响.结果表明:'717杨'叶片最适分化培养基是MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA,'353杨'叶片最适分化培养基是MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+0.01 mg/L TDZ;最佳生根培养基为1/2 MS+0.2 mg/L IBA+0.2 mg/L NAA,生根率达100%;叶片培养的最佳位置是自茎尖展叶的1～3片叶;20 mg/L卡那霉素可以抑制'717杨'和'353杨'叶片的诱导分化,40 mg/L卡那霉素可以抑制'717杨'和'353杨'不定芽的生根.     

不同植物生长调节剂对铁皮石斛(Dendrobium candidum)再生的影响

本实验以铁皮石斛无菌苗茎段为外植体,通过添加不同浓度的植物生长调节剂,诱导铁皮石斛愈伤组织形成与分化,建立铁皮石斛组织培养再生体系。结果表明,外植体接种5 d后,在改良MS培养基上添加2 mg/L PBU和0.05 mg/L IAA,可达到100%的愈伤诱导率。将愈伤组织接种在MS培养基上,添加0.1 mg/L NAA和0.5 mg/L 6-BA,不定芽诱导率为90.8%。适合铁皮石斛芽增殖培养基为:MS+7 g/L琼脂+30 g/L蔗糖+100 mg/L Vc+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA。PBU浓度为0.5 mg/L,NAA浓度为0.05 mg/L时,芽苗生长情况良好,最适合用于不定芽伸长。铁皮石斛最适生根的培养基为:MS+7 g/L琼脂+30 g/L蔗糖+100 mg/L Vc+0.5 mg/L IBA,生根率可高达94.1%。本研究成功建立了铁皮石斛高效再生体系。     

八角莲组织培养研究

以八角莲种子为外植体,MS为基本培养基,通过不同的激素种类和浓度配比,对八角莲进行组织培养研究。结果表明:种子在MS+BA1.0mg/L+IBA0.5mg/L+GA34.0mg/L培养基上容易萌芽,发芽率为72.4 %;培养基MS+BA10.0mg/L+GA30.5 mg/L可诱导种子幼苗形成丛生芽;继代繁殖在MS+BA(8.0～10 .0)mg/L+GA32 .0mg/L与低浓度BA或无BA的培养基上进行循环培养效果较好;MS+NAA1.0 mg/L+AC0.2g/L适宜诱导生根获得再生植株,生根率100%。带叶叶柄在MS+BA1.0mg/L+2-ip(0.5～1.0) mg/L+NAA0.02 mg/L培养基上可诱导愈伤及根,直接形成再生植株。生根苗移栽成活率90 %。     

大叶种胡椒实生苗茎尖培养和合子胚培养研究

利用各种表面消毒方法对采自海南岛三个地区的胡椒大田植株的外植体进行消毒试验,由于内源性污染,除胡椒成熟种子外,其它各种大田外植体的表面消毒均未能成功。以胡椒成熟种子无菌萌发的实生苗茎尖作外植体,在1/2MS(MS或B5)+1.5mg/LBA+0～0.2mg/LIAA(或NAA)上可实现丛生芽增殖。茎尖水平或竖直接种方法显著影响茎尖的增殖;水平接种茎尖的生长和增殖效果优于竖直茎尖接种方式。茎尖增殖率随BA浓度的增加而提高,但BA浓度大于2.0mg/L时会使苗芽的质量降低,愈伤组织产生严重,苗芽细小,抽出不明显,颜色发黄甚至变白。附加或不附加100mg/LAdSO4对丛生芽增殖没有明显影响。生根培养基以1/2MS+1.0mg/LIBA+0.5～1.0mg/LIAA为最优,生根率可达100%;在细沙∶土∶椰糠(1∶1∶1)的基质中常规炼苗,成活率可达98%以上。液体纸桥法对胡椒种胚进行培养,在不附加任何生长调节物质的培养基(MS、B5或SH)上只产生单苗,而在附加不同种类和不同浓度的生长调节物质的培养基上则诱导形成愈伤组织,但未能实现分化;以胡椒无菌萌发的实生苗胚轴和叶片切段作外植体进行培养,较易诱导产生愈伤组织,但难以实现分化。     

叶子花的组织培养与微繁技术研究

叶子花茎尖、茎段接种在MS附加不同浓度组合的6-BA、IAA、IBA、NAA培养基上可诱导茎尖及腋芽的生长而获得无性系芽,无性系芽茎尖和茎段在MS附加6-BA0．5mg／L,NAA0．05mg／L进行继代培养,一般不形成丛生芽,以茎尖生长和腋芽萌生增殖,增殖系数为2．73;高度大于3cm的增殖芽在1／2 MS附加IAA lmg／L、IBA lmg／L、NAA0．2mg／L培养基上生根率为80．5％,生根苗用“二步法”移栽成活率在97％以上。无性系芽的幼叶、茎段在MS附加6-BA和NAA、2,4-D培养基上能高频产生愈伤组织,但愈伤组织在所试验的所有培养基上均无不定芽或胚状体的分化。     

甜菜叶柄高效直接再生体系的建立

通过预试验,从4中不同基因型甜菜中选取KWS-9103作为试验材料,建立其叶柄高效直接再生体系。通过种植无菌苗、预培养、诱导分化培养,获得了再生植株,建立了甜菜快速繁殖体系。结果表明,甜菜种子经过消毒处理后培养,取幼苗在MS附加6-BA 0.5 mg/L和NAA 0.05 mg/L的培养基中预培养,再取叶柄作为外植体转入诱导培养基MS附加6-BA0.5 mg/L和NAA0.05 mg/L中诱导不定芽,不定芽诱导率为50%以上。在MS附加IBA2.0 mg/L生根培养基中生根,诱导生根率在90?以上,移栽成活率高达95%。