介绍衣藻的几种培养方法

一、藻种的采集每年的早春或晚秋常有纯群的衣藻生在有机质比较丰富的水坑、池塘等处,特别是在温室中的积水缸里常可采到比较纯的衣藻。采集前先用野外工作的显微镜对水中藻类进行检查鉴定、确为较纯的衣藻而且浓度很高,就直接用吸管将绿色水样吸入到300—500毫升的玻瓶中,以装至容积的2/5—1/2为宜,保证水中有足够的氧气。     

衣藻、水绵的采集和观察

要观察衣藻和水绵的结构特征,以及水绵接合生殖的过程,首先必须采集标本。淡水藻类繁多。采集时,要根据不同藻类植物、不同环境条件和生态特点,准确地采集所需要的标本。衣藻喜生于有机质较少的静水里,如果是在有机质较丰富的水体中采集标本,大多是眼虫而不是衣藻。水绵则常生活在酸性、缺钙的水中,如酸性的红壤土地带的积水、沼泽及水库下游积水处。     

衣藻的藻种保存`扩大培养和观察

衣藻属(Chlamydomonas)是常见的淡水绿藻。在生长季节里,衣藻常在营养特别是氮、磷较丰富的坑塘中有时长成纯群,但在池水或缓流中则常与其他藻类等混生,不易采集。在非生长季很难找到它们。这给教学和科研带来许多困难。几年来,我们对衣藻的藻种保存、扩大培养进行观察试验,总结出一些经验,现介绍如下:     

高中生物学植物实验五则

高中生物学中,第三章提到:衣藻的同配生殖,水绵的结合生殖,根霉的孢子生殖,苔藓植物与蕨类植物生活史等方面的内容,这部分材料中如衣藻的同配生殖、水绵的结合生殖、苔藓植物的原丝体,蕨类植物的原叶体在野外很难采集到,因此,组织学生观察有些难处,笔者在自巳的教学实践中,摸索出一些简易方法,提出来供参考。     

衣藻和水绵制片方法的改进

衣藻和水绵制片方法的改进在初一植物学《实验七》中,教材要求将衣藻和水绵分开制片和观察,这样做有许多弊病。我们在教学中,将衣藻和水绵合制成一块装片,观察起来效果更佳。方法是：先用吸管吸取含有衣藻的水,滴１滴在洁净的载玻片中央,再用镊子（或解剖针）取３～...     

增大培养液中衣藻密度的几种方法

在观察活体衣藻的实验中,如果培养液的衣藻密度比较小,那么用吸管移滴到载玻片的水滴,很难保证一定会有衣藻,容易造成空片观察,因此,提供密度较大的衣藻培养液,是学生分组实验顺利进行     

植物学实验教学的探索(续)

藻类植物时间 3月中旬第一课时课题绿藻——衣藻实验内容从绿色池水中寻找衣藻和其他绿色单细胞藻类。目的要求认识衣藻的形态结构和生活习性。第二课时课题绿藻——水绵实验内容 1.制作水绵装片进行观察;2.制作水绵接合生殖的装片进行观察。目的要求在观察过程中要求学生比较水绵与衣藻的异同;从相同点提出绿藻的特征,从不同点说明水绵是多细胞丝状体。第三课时课题其它藻类植物     

拟衣藻系统分类新证据

拟衣藻 (Chloromonas)与衣藻属 (Chlamydomonas)的亲缘关系及分类学位置在藻类学界一直没有定论。其重要原因是单细胞鞭毛类是否具有蛋白核这一特征在系统分类学上具有重要意义 ,而光镜形态与色素体上具 1到多个蛋白核的衣藻极其相似的拟衣藻 ,其不具蛋白核这一特征的稳定性受到许多学者的怀疑。本文观察并报道了中华拟衣藻 (ChloromonasSinica)的超微结构 ,通过对拟衣藻与衣藻超微结构的探究和比对 ,发现除了从孢子时期开始的整个生活史中 ,中华拟衣藻都不具蛋白核外 ,无论显微还是超微结构 ,拟衣藻与衣藻都显示出高度的相似性。从而提出在尚未获得更多资料之前 ,将拟衣藻从衣藻属分离出来成为独立的属较为合适     

中国团藻目研究（I）

为了配合中国孢子植物志《团藻目》编志的需要,作者到广西壮族自治区、内蒙古自治区、湖北省等地采集标本进行分类研究。文中报道了团藻目6个属的4个新种,1个新变种和9个中国新记录,其中拟衣藻属Chloromonas和朴罗藻属Provasoliella为我国新记录属,武汉朴罗藻、嗜碱衣藻、多粒衣藻、广西拟衣藻为新种,星状四鞭藻广西变种为新变种。     

中国团藻目研究(Ⅰ)

为了配合中国孢子植物志《团藻目》编志的需要 ,作者到广西壮族自治区、内蒙古自治区、湖北省等地采集标本进行分类研究。文中报道了团藻目 6个属的 4个新种 ,1个新变种和 9个中国新记录 ,其中拟衣藻属Chloromonas和朴罗藻属 Provasoliella为我国新记录属 ,武汉朴罗藻、嗜碱衣藻、多粒衣藻、广西拟衣藻为新种 ,星状四鞭藻广西变种为新变种。     

拟衣藻属一新种——中华拟衣藻及其生活史的研究

报道了团藻目衣藻科拟衣藻属一新种。此种从中国科学院武汉植物研究所一浇园粪缸中采得,在分离室内单种培养过程中,对其形态学和生活史进行了研究。营养细胞具有多个盘状色素体,与拟衣藻属已知的种类有明显的差别。经培养观察,作者发现除细胞分裂、无性生殖外,还有同宗异配式有性生殖,在生活史各阶段该藻中绿体中均未见蛋白核,因此,拟衣藻作为分类单元是一个有效的属。     

转衣藻染色质烟草细胞核的变化及衣藻核基因的表达

应用反复冻融法以衣藻原生质体为材料制备衣藻染色质,应用显微操作技术准确将衣藻染色质转移到烟草叶片外植体中,进行连续培养并镜检观察。结果表明,经染色质转移处理的烟草叶片外植体、衣藻细胞核与烟草细胞核均发生形态上的变化。同时烟草叶片外植体正常发芽并获得再生苗,经RT-PCR检测发现,有衣藻核基因(rbcs2)的表达。     

衣藻的细微结构

衣藻属于绿藻门、团藻目。它是绿藻中细胞结构特征的一个典型代表。大、中学植物教材中都以衣藻作为绿藻门的重要代表植物。本文根据目前电镜资料,描述如下。衣藻的细胞器衣藻虽然是较原始的单细胞真核藻类,但是它已具备了真核植物的各种细胞器。在光学显微镜下可以清楚地看到,在细胞壁内有包埋在细胞质中的大型杯状叶绿体和叶绿体腔内的细胞质及细胞核。在电镜下观察,细胞器与高等植物的相同。核膜具有双层膜结构、有核膜孔。细胞质中的内质网与核膜     

鱼池中营养盐与卵形隐藻数量消长的关系

隐藻是淡水鱼类的优质饵料。隐藻数量多少与鲢鱼的生长发育好坏以及产量高低有着密切关系。有关隐藻在鱼池中的消长变化的报道不多。本文探讨鱼池中营养盐与隐藻数量消长的关系。研究方法在距离鱼池岸边2m 左右的上风处和下风处各设一个采集水样点,上午10时左右,有时下午2时左右采集水样,将水样混合后,取回实验室。一部分水样以通用的比色法测定下列项目:铵盐、硝酸盐、亚硝酸盐、磷酸盐,当天测定完毕。另一部分水样用鲁哥氏(Lugol′s)液固定,沉淀浓缩后作定性、定量观察。一般每     

豆血红蛋白基因lba的克隆及其转化衣藻叶绿体

降低细胞内的氧气含量是提高莱茵衣藻产氢效率的重要手段之一。本研究首次尝试将豆血红蛋白基因lba转入衣藻叶绿体中表达,利用豆血红蛋白具有与氧可逆结合的特性,期望降低转基因衣藻细胞内的氧气含量,达到提高衣藻产氢效率的目的。实验结果证明,lba成功转入到衣藻叶绿体中,且对其生长没有产生显著影响,这为下一步调控Lba在衣藻叶绿体中表达活性和提高衣藻产氢效率奠定了实验基础。     

中国衣藻属研究（I）

报道了衣藻属（Chlamydomonas）的9个新种：近条纹衣藻、具孔衣藻、顶角衣藻、近环形衣藻、具粒衣藻、近具喙衣藻、不整衣藻、疣突衣藻、倒卵形衣藻,以及4个新变种：阿美衣藻大型变种、似博泡衣藻大型变种、侏儒衣藻陈氏变种和锥形衣藻胶被变种。     

中国衣藻属研究(Ⅰ)

报道了衣藻属(Chlamydomonas)的9个新种:近条纹衣藻、具孔衣藻、顶角衣藻、近环形衣藻、具粒衣藻、近具喙衣藻、不整衣藻、疣突衣藻、倒卵形衣藻,以及4个新变种:阿美衣藻大型变种、似博泡衣藻大型变种、侏儒衣藻陈氏变种和锥形衣藻胶被变种。     

以川陕哲罗鲑为目标物种的水样环境DNA分析流程的优化

水样环境DNA分析包括水样采集、DNA提取和分析等流程,已成为监测濒危水生生物种群分布调查的重要手段.为减少在监测目标物种尤其濒危物种中的不确定性,对水环境DNA分析流程的优化至关重要.本研究以川陕哲罗鲑为目标物种,采用滤膜法采集养殖池中的水样,设计了 250 mL、500 mL、1 L和2 L等4种水样采集量,分别采用 PoweWater DNA Isolation kit和DNeasy Tissue and Blood DNA extraction kit 提取水样环境DNA(eDNA),使用物种mtDNA D_loop区特异性引物进行PCR扩增,通过研究滤膜法、水样采集量和水样DNA提取方法对水样eDNA中目标基因检出率的影响,探索适宜的eDNA分析操作方案.结果表明: 使用DNeasy Tissue and Blood DNA extraction kit提取的水样DNA中目的基因的检出率为100%,效果明显优于PoweWater DNA Isolation kit(目标基因的检出率为0);目标基因扩增条带的亮度随水样采样量的增加而增加,其中2 L水样目标基因的扩增效果较理想;序列比对结果显示,本试验从水样DNA中成功扩增得到了川陕哲罗鲑mtDNA Dloop区部分序列.表明DNA提取方法和水样采集量对目标物种的检出率有显著的影响,滤膜法、2 L水样采集量、DNeasy Tissue and Blood DNA extraction kit更适宜进行水样的DNA分析,mtDNA D-loop区可作为川陕哲罗鲑识别的特异性分子标记.     

衣藻鞭毛永久装片的简便方法

鞭毛是衣藻在水中的运动器官.衣藻的鞭毛很纤细,不经染色,难以在普通显微镜下观察.观察衣藻的鞭毛,通常用鲁哥氏液染色,虽然这种方法很简便,但用此法染色后,经过脱水,鞭毛的颜色就会复失.为了制成永久装片长期观察,我们认为用以下方法制作手续比较简单,鞭毛的染色效果也较好.具体做法是:     

小G蛋白BBS3b的原核表达纯化及其多克隆抗体制备

[目的]制备莱茵衣藻小G蛋白BBS3b的多克隆抗体。[方法]利用莱茵衣藻bbs3b基因的c DNA序列分别构建了带有GST和6×His标签的原核表达载体p GEX-2T-BBS3b和p ET-28a(+)-BBS3b并转化至大肠杆菌BL21(DE3)诱导表达,以12%SDS-PAGE鉴定。用纯化的GST-BBS3b融合蛋白免疫新西兰大白兔,采集第4次免疫后血液并分离血清,利用间接ELISA法进行效价测定,并将抗血清依次经过Protein A纯化和硝酸纤维素膜纯化,用Western Blotting检测抗体特异性。[结果]GST-BBS3b和6×His-BBS3b融合蛋白的分子量分别为46、20 k Da。用ELISA的方法测定抗血清效价为512 000,Western Blotting检测结果显示制备的多克隆抗体能够特异性识别莱茵衣藻BBS3b蛋白。[结论]制备的多克隆抗体效价为512 000,能够特异性识别莱茵衣藻中BBS3b蛋白,为利用莱茵衣藻作为模式生物进行BBS3b在纤毛信号传导中的作用机理研究奠定了基础。