一种改良的用Ag+和双硫腙测定微量蛋白质的比色方法

本文介绍一种在Boratynsk法基础上改良的蛋白质测定方法。蛋白质在含有氯化物和Triton X-100的碱性溶液中用Ag⁺和双硫腙检测。与原法比较,本法省去离心一步,但需要加入聚乙二醇(PEG)～6000作为保护剂。用本法可测定蛋白质含量低至0.2μg/ml的样品。本法操作简单、快速、经济,具有较好的可重复性。     

β_2微球蛋白的微量测定和应用

β_2微球蛋白(简称β_2mG)分子量小,因电泳显于β_2区带而得名,广泛存在于人各种体液中,是免疫球蛋白和移植抗原的一个组成成分,在生物学、免疫学和医学中已日益受到重视。本室建立血清β_2mG 放射免疫分析法(RIA),方法简便、特异性、灵敏度和重复性符合要求,对研究β_2mG的生理代谢及临床上诊断肾脏、肝脏及血液系统疾病是一种有用的辅助指标。一、材料和方法 1.人β_2mG 的提纯肾移植急、慢性排异期患者尿液,经硫酸铵粗提和凝胶 G100 层析、DE52 离子交换层析,收集洗脱液,     

应用液体闪烁计数器测定微量血液淋巴细胞转化的方法

本文介绍关于微量血液淋巴细胞转化的放射性测量法:指尖采血0.05毫升,全血培养37℃,94小时,收获细胞前16小时加入氚-胸腺嘧啶核苷(~3H-TdR)0.6微居里。培养结束时洗脱培养液中游离的放射性,然后用三氯醋酸提取细胞中的DNA,用液体闪烁计数器测定其中所含的~3H-TdR 的放射性,即可反映淋巴细胞转化。在125人次的测定中,初步得出输血者淋巴细胞转化的正常值,并发现某些血液病人及肿瘤病人的淋巴细胞转化能力明显降低,电离辐射对它亦有抑制作用。     

用DANS反应-聚酰胺薄膜层析-荧光方法对小鼠尾壳核γ-氨基丁酸和牛磺酸的超微量测定

本工作将DANS反应和微量薄膜层析技术与荧光测量加以修改后联用,并注意了组织样品的去蛋白和DANS-牛磺酸洗脱剂的改进,获得了满意的定量测定氨基酸的结果。GABA、牛磺酸的浓度(GABA:0—60×10~(-12)克分子;牛磺酸:0—300×10~(-12)克分子)与其相应的DANS衍生物的荧光强度成线性关系。回收率分别为95—113％和82—94％。灵敏度比原有荧光方法提高了近100倍(10~(-12)克分子数量级)。用此法测得小鼠尾壳核中的GABA和牛磺酸分别为1.26±0.06和15.5±1.0微克分子/克湿重,组织样品只需0.5毫克或更少些。这为测定微量神经组织中的自由氨基酸提供了一种简便的超微量方法.     

EPA方法的改进及其在测定熟鱼片和生鱼片中微量元素的应用

文章结合国外方法 EPA200.11与EPA6020建立了适用于处理生物样品的实验方法,采用ICP-MS测定了4种生鱼片和相应熟鱼片中14种微量元素(Cr、Co、Ni、As、Se、Cd、Pb、Zn、Cu、Mo、Ag、Be、V、Ge)的含量,结果发现Pb、Cd和Cu元素的含量均低于标准(GB2762-2012)限量值,同时进行了Pb、Cd和Se元素的EWI值计算,得出Pb、Cd元素的EWI值均低于PTWI值,结果表明食用生鱼片和熟鱼片均对人体无害。采用SPSS11.5对鱼样品中的14种微量元素进行主成分分析,得出Ge、As、Co、Mo和Se(P0.0500)和V(P0.0500)元素为所测鱼样品中的主成分元素,并且进行熟鱼片和生鱼片中主成分元素的比较分析,可见蒸煮可以作为降低鱼肉中有害元素含量的一种重要途径。     

小麦脱水素基因wzy2表达量实时荧光定量PCR方法的建立和应用

以陕合6号小麦品种为材料,用SYBR GreenⅡ染料,参照小麦脱水素wzy2和-βactin基因序列设计引物,建立小麦wzy2基因的实时荧光定量PCR分析方法.结果表明:通过对标准品标准曲线和熔解曲线分析,其标准曲线的Ct值检测范围为12~30,PCR扩增效率高达111.3%;不同的标准品扩增曲线的间距为3.078,接近于理想值3.32,且可显示产物特异的单峰,引物的特异性扩增强.小麦脱水素基因wzy2表达量实时荧光定量PCR的测定结果表明,小麦脱水素基因wzy2在胁迫24 h的表达量明显高于胁迫12 h的表达量.     

应用两种不同的酸水解方法水解纯蛋白质、食物和饲料时氨基酸的测定

<正> 为比较快速酸水解(由Gehrke推荐)和经典的酸水解方法,对含有不同量的蛋白质与非蛋白质组分的十五种动物和植物来源样品,用6N HCl 110℃24小时和145℃4小时两种酸水解方法进行了氨基酸测定。因高温、短时水解(HTST)方法曾仅用于纯蛋白质,此项工作的目的是证实这一水解方法能够应用于任何物质,特别是食物和饲料,