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1.
镉诱导威廉环毛蚓(Pheretima guillelmi)金属硫蛋白的分离纯化及特性研究 总被引:1,自引:0,他引:1
蚯蚓威廉环毛(pheretima guillelmi)经皮下注射CdCl2溶液诱导后,整体匀浆,再经热沉淀、乙醇沉淀后,经凝胶过滤Sephadex G-50柱层析,得两个镉结合蛋白峰,分子量依次为43kD及19kD。这两个组份再分别经DEAE Sepharose Fast Flow柱层析,各得三个镉结合蛋白峰。根据光谱学特征、巯基含量及氨基酸组成等分析,表明凝胶过滤第二峰为金属硫蛋白(MT),其经DEAE柱层析所得三个峰为MT三个亚型,N末端分别为Lys、Ala、Ala。 相似文献
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对白颈环毛蚓与壮伟环毛蚓的体壁及内脏器官PTC-氨基酸的含量进行了初步分析,结果表明;两种蚯蚓具有15种氨基酸,8种必需氨基酸含量均较高。而壮伟环毛蚓的必需氨基酸总量均超过白颈环毛蚓,也大大超过国产或进口于粉氨基酸总含量;加上壮伟环毛蚓个体大,分布广,又耐污染,抗病能力强,所以这量种值得开发的动物蛋白的新资源。 相似文献
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镉诱导家兔肝脏含锌金属硫蛋白的纯化及鉴定 总被引:2,自引:0,他引:2
预先给家兔皮下注射CdCl_2四次,取肝脏经匀浆、离心、乙醇沉淀后,通过Sephadex G-50凝胶过滤层析,DEAE Sepharose Fast Flow离子交换层析和Sephadex G-25层析柱脱盐,得到MT的两个“亚型”—MT-1和MT-2,对其进行鉴定,其紫外扫描图谱示在280和250nm处无吸收峰,而最大吸收在220nm处。MT-1和MT-2均不含镉和铜,而每分子结合6个锌。用简化巯基试剂测定,MT-1含18.8个巯基,MT-2含19.1个巯基;HPLC分析MT主要以单体存在,也有少量二聚体。氨基酸组成与Cd-MT一致。整个纯化过程采用示波极谱法和火焰原子吸收光谱法测锌含量。结果表明前者可代替后者。 相似文献
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本文报道了青甘直隶环毛蚓Pheretimatschiliensiskokoana的生殖器官多态现象,因卵巢发育正常,属于孤雌生殖种类,并发现一新的中间型(I6型),即前列腺与受精囊之间的中间型。 相似文献
5.
镉诱导蚯蚓金属硫蛋白的分离纯化及其溶液构象的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
镉诱导蚯蚓匀浆液经热沉淀,乙醇沉淀后,经凝胶过滤SephacryS-200柱层析,得三个镉结合蛋白峰,分子量依次为40,17及9kD。这三个组份再分别经DEAESepharose Fast Flow柱层析,分别得三、三、二个镉结合蛋白峰。根据光谱学特征、巯基含量及氨基酸组成等分析,认为凝胶过滤第二峰为金属硫蛋白(MT),其经DEAE柱层析所得三个峰为MT三个亚型。对蚯蚓MT三个亚型在不同PH条件下 相似文献
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锌7—金属硫蛋白与镉7—金属硫蛋白抗羟自由基保护线粒 … 总被引:2,自引:0,他引:2
制备了Zn7-与Cd7-金属硫蛋白。分离出大鼠心肌线粒体。用电子自旋共振自旋标记方法测定线粒体膜脂流动性及膜蛋白构象,运动性,分析了线粒体Ca^2+-Mg62+-MATP酶活性及^45Ca摄入。羟自由基损伤使线粒体膜脂流动性下降,膜蛋白构象改变及运动性降低,线粒体Ca^2+-Mg^2+ATP酶活性降低及^45Ca的摄入活性下降。 相似文献
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目的:由于采用新的分类体系,国内外学者通过形态学特征对直隶环毛蚓(Pheretima tschiliensis tschiliensis,Michealson,1928)的分类地位一直存在争议,该文的目的在于将此种给予明确的划分。方法:用采自不同地区的直隶环毛蚓COI基因(534bp)及结合其相应的氨基酸(178个),以陆正蚓(Lumbricus tereistial)为外群,用最大简约法和贝叶斯法构建进化树的方法,结果:试验结果表明,构建的系统树将直隶环毛蚓与腔蚓属聚为一族,并得到很好的支持(BP>76,pp≥0.94),种间校正基因距离介于0.006~0.263,种内校正基因距离介于0.000~0.162,结论:因具有交配腔,故分子生物学和形态学特征均表明,直隶环毛蚓应属于腔蚓属而不是远盲蚓属。其学名应为Metaphire tschiliensis tschiliensis(Michealson,1928)。 相似文献
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采用体外暴露染毒法,研究了不同浓度与时间条件下,镉诱导河南华溪蟹(Sinopotamon henanense)金属硫蛋白(metallothionein,MT)在肝胰腺、肌肉、鳃和卵巢中的表达差异。镉浓度分别为0、14·5mg/L、29mg/L和58mg/L;处理时间依次为1d、3d和5d。利用镉血红蛋白饱和法和火焰原子吸收分光光度法(AAS)测定MT的蛋白含量。结果显示,用不同的染毒浓度和处理时间,镉在组织中诱导产生MT的含量有较大差异,其中肝胰腺MT的诱导量最大,变化规律也最明显;肌肉中也有较大量MT的表达;而鳃和卵巢MT的诱导量均较低。此外,本文分析了镉的浓度与时间梯度对诱导MT表达的影响与毒性效应机制。结论:组织不同,染毒浓度及时间不同,镉诱导MT的表达也不同,具有一定的组织差异性和规律性。 相似文献
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夏威环毛蚓纤溶酶的分离纯化及部分性质研究 总被引:6,自引:0,他引:6
以夏威环毛蚓(Pheretima hawayana)为材料,采用磷酸盐缓冲液抽提、(NH4)2SO4分段盐析,离子交换树脂 D290、 Sephadex G-100和 DEAE-sephadex A-50三种连续柱层析方法得到一种在 PAGE上显示单一区带的纤溶酶组份。采用凝胶柱层析和 SDS-PAGE测其分子量为 12 000和 12300,由一条肽链组成。该酶具有强烈的纤溶活力和水解BAEE的活力,能直接作用纤维蛋白和间接激活纤溶酶原。其最适反应温度为45℃,最适反应pH为8.0。该酶水解BAEE的活力可被Na+、K+、Mg2+、Hg2+、金属离子和EDTA、巯基乙醇抑制,Ca+则有激活作用。该酶中性糖含量为5%,氨基酸组成中Arg、Len含量较多. 相似文献
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金属硫蛋白融合蛋白的分离纯化 总被引:2,自引:1,他引:1
采用IPTG诱导新1#菌BL21(DE3)(pET21a-MT)高效表达Balb/C小鼠金属硫蛋白融合蛋白,并采用包涵体分离纯化方法及Sephadex G-75柱层析得到SDS-PAGE电泳为一条带的金属硫蛋白融合蛋白收集液。 相似文献
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由健康小鼠通过皮下注射一定量的氯化镉,取肝脏匀浆,离心,经SephadexG-50和DEAE-Sephadex A-50柱层析分离,即可获得MT-Ⅰ和MT-Ⅱ两种金属硫蛋白。经鉴定:两个分子各含18个巯基,结合4个Cd原子和3个Zn原子,无金属蛋白质Thionein的分子量约为6kD,半胱氨酸含量约占氨基酸总量的28%,所提取到的MT-Ⅰ和MT-Ⅱ经氨基酸组成,HPLC和PAGE分析皆证明为高度均一的,且与有关文献报道基本相符。其中MT-Ⅱ已获得晶体。 相似文献
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柱状田头菇(茶薪菇)金属硫蛋白的分离纯化与特性研究 总被引:9,自引:0,他引:9
应用快速灌注色谱系统首次从经Cd^2 诱导的柱状田头菇(茶薪菇)Agrocybe Cylindracea(DC.:Fr:)R.Maoire菌丝体中分离得到一种镉结合蛋白。通过Sephadex G-75凝胶过滤层析,原子吸收光谱分析(AAS),巯基含量测定及紫外吸收光谱分析表明这种镉结合蛋白具有金属硫蛋白(metallothionein,MT)的理化性质:即分子量为6kDa、每分子MT含18个半胱氨酸残基并结合7个镉原子、具有镉硫金属簇的特征紫外吸收光谱,初步鉴定为茶薪菇Cd—MT。 相似文献
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脱金属硫蛋白与镉离子的络合作用及构象研究 总被引:1,自引:0,他引:1
用圆二色(CD)谱地研究兔肝脱金属硫属蛋白的两个亚型与Cd^2+的络合作用及对重组MT构象的影响。观测了apo-MT垢巯基在空气和室温下的稳定性。在PH4.71,镉重组MT1的CD谱特征峰在257nm(+),238nm(-),226nm(+)与镉诱导的天然MT1相同。在空气存在和PH7.90的CD谱只有243nm(+)一个峰。向两亚型分别加入7eqCd^2+测定CD谱随PH值的变化,发现在PH2. 相似文献
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柱状田头菇(茶薪菇)金属硫蛋白的分离纯化与特性研究 总被引:1,自引:0,他引:1
应用快速灌注色谱系统首次从经Cd2+诱导的柱状田头菇(茶薪菇)Agrocybecylindracea(DC.:Fr:)R.Maoire菌丝体中分离得到一种镉结合蛋白。通过SephadexG-75凝胶过滤层析,原子吸收光谱分析(AAS),巯基含量测定及紫外吸收光谱分析表明这种镉结合蛋白具有金属硫蛋白(metallothionein,MT)的理化性质:即分子量为6kDa、每分子MT含18个半胱氨酸残基并结合7个镉原子、具有镉硫金属簇的特征紫外吸收光谱,初步鉴定为茶薪菇Cd-MT。 相似文献
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金属硫蛋白(metallothionein,MT)是一类低分子量、富含半胱氨酸的金属结合蛋白.MT几乎广泛分布于所有生物,包括哺乳动物、两栖动物、鱼、植物、真菌和蓝细菌.不同生物金属硫蛋白理化特性和其氨基酸序列及中心片段的比较研究,对研究MT的结构和生物功能及生物的分子进化提供重要依据.哺乳动物MT研究较多,爬行动物鳖MT的研究尚属空白,本文报道鳖肝的金属硫蛋白.中华鳖 (Pelodiscus sinensis) 分别经皮下注射ZnSO4、CuSO4和CdCl2 溶液诱导后,取乙醇沉淀的肝脏无细胞提取液再经Sephadex G-50、DEAE-SepharoseCL-6B 及SephadexG-25凝胶过滤和离子交换柱层析分离,自鳖肝脏中分别获得Zn-MT、Cu-MT和Cd-MT,未经诱导的鳖肝脏中无MT.质谱和HPLC分析其分子量约为6 300 dalton.根据氨基酸组成分析,鳖肝脏MT含61个氨基酸残基,其中MT的典型氨基酸Cys含量占17%.Lys、Glu和Asp含量较高,而芳香族氨基酸和组氨酸含量极低.从紫外光谱特性分析,Zn-MT、Cu-MT、Cd-MT紫外吸收肩分别在220 nm、270 nm和250 nm.表明确为鳖肝脏MT.从氨基酸残基数和分子量看,鳖肝脏MT与哺乳动物MT类似;而从氨基酸组成和结合金属离子的量看,又与低等生物蚯蚓及酵母菌的MT类似.鳖MT的特性介于哺乳动物MT与低等生物MT之间,体现了鳖这种生物进化的特点. 相似文献
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酿酒酵母BD101诱导产生的金属硫蛋白的分离纯化及鉴定 总被引:4,自引:0,他引:4
从酵母菌中分离出拮抗重金属、经铜诱导产生金属硫蛋白的酿酒酵母(Saccharo-mycescerevisiae)BD101。无细胞抽提液经SephadexG-50、DEAESepharoseCL-4B、SephadexG-25三次凝胶及阴离子交换柱层析分离纯化得到两个金属硫蛋白亚型。Mr约为7kD,由60个氨基酸组成,其中半胱氨酸含量占10%,每分子金属硫蛋白(Cu-MT)含6个分子Cys,可结合4个铜原子。 相似文献