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曾凡济 《Virologica Sinica》1987,(3)
用具有特异性抑制蛋白质糖基化作用的含氨基葡糖的衣霉素Tunicamycin(TM)处理人胚包皮细胞(HEF)建立起人巨细胞病毒(HCMV)的潜伏性感染模型。观察了TM对HEF细胞及HCMV的毒性作用,当TM浓度大于500ng/ml时对单层细胞生长有影响;在TM浓度为500ng/ml时,细胞生长虽受一定程度的影响,但仍然逐步生长扩增;不同浓度的TM对HCMV有不同程度的影响,但不能将全部HCMV在短期内完全抑制,在TM含量1000ng/ml的维持液中处理5日的HCMV感染细胞培养物中未检出感染性病毒。感染HCMV的HEF单层细胞保持在含TM500ng/ml的维持液中于37℃培养7日,然后换加不含TM的维持液并改置40.5℃中培养,可保持HCMV以非感染性的病毒状态潜伏于HEF细胞内长达135日;在此潜伏期间如将细胞培养物由40.5℃再移置37℃中培养,HCMV能被激活为可检测到高滴度的感染性病毒。定期取在40.5℃中培养的HCMV潜伏感染细胞培养物进行感染中心测定(Infections Center Assays),感染中心滴度(Infectous Center Titer)为0.0004%~0.005%,只有很低的病毒重激活率。对潜伏性感染及TM引起疱疹病毒的潜伏性机理结合文献作了简要讨论。 相似文献
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人巨细胞病毒(HCMV)的潜伏感染在人群中极为普遍。在儿科学领域,潜伏感染的巨细胞病毒激活后,可能导致死胎、流产、胎儿畸形、生长发育迟缓等一系列严重后果。在病毒潜伏感染过程中,机体会通过免疫反应或诱导宿主细胞凋亡等方式清除病毒。然而,在病毒与宿主共同进化的漫长过程中,病毒会调控自身基因的表达、宿主细胞微环境及免疫杀伤作用,从而达到与长期宿主共存的目的。目前研究揭示,HCMV的潜伏感染可能与病毒立即早期启动子沉默、病毒干扰宿主细胞凋亡、病毒免疫逃逸及非编码RNA调控机制有关。本文将从以上四个方面对HCMV潜伏感染相关机制的研究进展进行总结。 相似文献
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人巨细胞病毒(HCMV)是疱疹病毒科中最大的病毒,结构复杂,其感染在人群中非常普遍,近年来免疫妥协(immunocompromised)群体尤其是移植群体中的HCMV潜伏感染和激活感染越来越受到临床重视。本文就HCMV的感染与免疫、HCMV的致病机制、宿主的抗感染与免疫、HCMV的免疫逃逸、HCMV的潜伏与激活及HCMV相关研究的困境与展望近年来此方面研究新进展作一简要综述。 相似文献
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该文通过建立人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)感染人单核白血病细胞(THP-1)的潜伏和激活细胞模型,研究转录因子GATA-1/2与HCMV LUNA(latency unique nuclear antigen)基因转录的关系。采用免疫印迹(Western blot)技术检测HCMV潜伏和激活感染组GATA-1/2蛋白质水平;染色质免疫共沉淀(chromatin immnuoprecipitation,Ch IP)技术检测GATA-1/2与LUNA基因5′上游序列结合情况;采用sh RNA干扰技术敲低THP-1细胞中GATA-1/2的表达后,检测潜伏和激活感染组HCMV LUNA基因m RNA水平。结果表明,HCMV潜伏感染组LUNA基因m RNA及GATA-1/2蛋白质水平均高于激活感染组,差异有显著统计学意义(P0.01);HCMV潜伏感染组转录因子GATA-1/2与LUNA基因5′启动子区域结合率低于激活感染组,差异有显著统计学意义(P0.01);sh RNA干扰技术敲低THP-1细胞GATA-1/2后,HCMV LUNA基因m RNA水平出现下调。研究结果表明,转录因子GATA-1/2在HCMV潜伏和激活感染THP-1细胞时与LUNA基因5′上游启动子区域存在结合,并与LUNA基因的表达有关。 相似文献
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人巨细胞病毒(HCMV)对人多为潜伏感染,但在免疫受损人群中,该病毒感染后会引起严重的后果.人巨细胞病毒感染人体后,可从多条途径干扰宿主细胞的生长、分化,诱导细胞恶变;人巨细胞病毒的IE基因具有抑制凋亡的功能.树突细胞是机体内功能最强的抗原呈递细胞,在免疫应答中发挥重要作用.HCMV感染后,能下调树突细胞表面的主要组织相容性复合物Ⅰ、Ⅱ类分子,CD80,CD86和CD40的表达,也使黏附分子如ICAM-3、ICAM-2等的表达发生改变.由此,人巨细胞病毒逃避了细胞免疫应答,引起持续感染或潜伏感染. 相似文献
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人巨细胞病毒Human Cy tomegalo-virus(HCMV)感染非常普遍,常引起不显性感染或潜伏感染;但当器官移植者、早产儿、早期孕妇、免疫抑制和免疫缺陷患者受到CMV感染后可出现明显的临床症状和严重后果。目前探求一种敏感、 相似文献
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人巨细胞病毒(HCMV)为DNA双螺旋病毒,属疱疹病毒科β亚科,是疱疹病毒科中基因组最大的病毒。HCMV通常呈隐性感染,正常人感染HCMV并无临床症状,一旦人体的免疫机能发生变化(如肿瘤、AIDS、妊娠、新生儿和器官移植),HCMV即从潜伏态转化为原发性或继发性的增殖感染,引起严重的临床症状甚至死亡。因此,HCMV的预防和治疗越来越受到关注,就CMV感染的预防及治疗方法进行了综述。 相似文献
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巨细胞病毒(CMV)属β疱疹病毒亚科,普遍存在于自然界.人巨细胞病毒(HCMV)是对人类具有致病性的CMV,在人群中的感染非常普遍,但大多数呈临床不显性感染或潜伏感染.CMV感染机体后,可调动多种机制逃逸正常机体的免疫监视,建立潜伏感染[1,2],这些机制包括下调MHC-Ⅰ和MHC-Ⅱ类基因的表达,编码MHC-Ⅰ同源物抑制NK细胞活性,以及编码趋化因子(chemokines,CKs)及其受体(chemokine receptors,CKPs)同源物干扰机体正常的免疫应答等. 相似文献
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人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)是β疱疹病毒家族成员,全世界70%以上人口感染过该病毒。HCMV通常以潜伏感染形式存在于宿主体内,并产生了逃避宿主免疫系统识别和清除等多种能力,可通过表达HCMV基因及蛋白发挥肿瘤调节作用,干扰细胞代谢过程,促进肿瘤的发生和发展。乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,而HCMV在非肿瘤和乳腺癌患者乳腺上皮细胞中的阳性检出率较高,同时有研究表明晚期暴露于HCMV可引起乳腺癌。近期新型抗HCMV药物对乳腺癌靶向治疗的临床有效性也再次提示,HCMV可能与乳腺癌的发生和发展密切相关。本文主要综述了HCMV的致癌潜能及其与乳腺癌发生和发展的潜在关联。 相似文献
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本研究用克隆的HCMV AD169株DNA片段,制备了生物素标记的DNA探针,建立了检测临床脐带血、尿标本中HCMV DNA的核酸探针杂交方法。该探针可测出100pg同源DNA,不与人胚肺细胞、Hep-2细胞DNA以及其他疱疹病毒的DNA发生反应。用核酸杂交方法检测了30份脐带血标本,有11例阳性,阳性率为33%。10例孕妇尿标本中,3例阳性,阳性率为30%。检测结果表明:我们建立的生物素标记的HCMV DNA探针的点杂交法,具有高度的特异性、敏感性,比分离病毒法更迅速,可用于HCMV感染的临床标本的病毒核酸检测。 相似文献
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人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)在老年人群中感染普遍。现已发现,HCMV感染可加速老年人群免疫衰老的进程。免疫风险表型(immunological risk phenotypes,IRP)是一组评价机体免疫功能的指标,与HCMV等病毒感染密切相关;该指标的变化不仅可以反映老年人群的免疫状态,而且通过对其指标,如CD4/CD8比例、CD28分子的监测可以提前预测疾病的发生,为延缓免疫衰老、免疫干预等提供客观依据。因此,该指标日益受到广泛关注。HCMV长期潜伏感染可导致机体的免疫功能低下,尤其对于老年人来说,HCMV感染通常可以导致多项IRP指标的改变,这种改变有可能是引起多种老年性疾病的原因。本文就近年来关于HCMV感染与IPR之间的关系研究进展情况作一综述。 相似文献
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为了评估目前常用的去白细胞滤器去除血液成分中人巨细胞病毒( HCMV) 的效果, 我们在献血员中筛选获得HCMV-IgG、pp65 皆阴性的血液, 分离外周血单个核细胞( PBMC) , 将HCMV 感染的人成纤维细胞与PBMC 共培养, 感染HCMV 的PBMC 经抗人成纤维抗体和抗CD45 磁珠2 次分选纯化后, 将CD45 + 单核细胞加回原全血中, 建立HCMV 潜伏感染的模型, 再用去白细胞滤器过滤。用实时聚合酶链反应( PCR) 定量测定过滤前、后血液样本中的病毒载量, 残留成纤维细胞所含的HCMV 通过定量反转录PCR( RT - PCR) 扩增脯-4-羟化酶exon12a mRNA 来校正。结果显示, 使用去白细胞滤器后, 每单位( 200 ml) 全血血液中, 白细胞的去除率为99. 98% 。全血中平均HCMV 病毒载量从3 742 拷贝/ μl 降至22. 57 拷贝/ μl, 降低2. 50 log10 , 说明去白细胞滤器虽然可明显减少全血中HCMV 病毒的载量, 但并不能完全去除病毒。 相似文献
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目的 通过测定患者单份血清人巨细胞病毒(HCMV)pp65特异性IgM抗体和IgG亲和指数(AI),建立HCMV原发感染的临床判断标准.方法 从临床收集40份患儿血清和尿标本,以本室自制的pp65为抗原,运用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清标本中HCMV pp65特异性IgM抗体;同时通过尿素变性实验,以6M尿素作为温和蛋白变性剂,测定HCMVpp65 IgG AI.尿标本常规处理后接种人胚成纤维(HF)细胞进行病毒分离,观察HCMV特异性细胞病变效应(CPE),聚合酶链反应(PCR)试验检测细胞培养物UL83基因,间接免疫荧光试验检测细胞玻片HCMV抗原.并将病毒分离结果 同血清学方法 进行比较.结果 40例标本中,IgM阳性13例,IgG阳性30例,其中,仅IgM阳性4例,病毒分离结果 亦为阳性,可诊断为原发感染;30例IgG阳性标本中,2种抗体均为阳性9例(A组),其中,5例AI<50﹪,病毒分离结果 均为阳性,判断为原发感染;1例AI在50﹪与60﹪之间,为可疑原发感染,需要进一步鉴定;3例AI>60﹪,判断为继发感染.IgG阳性21例(B组),其中仅3例(14.29﹪)AI<50﹪,但病毒分离结果 为阴性,提示患者不久前曾发生HCMV原发感染,特异性IgM抗体已经转阴,病毒进入潜伏状态;余18例患者AI均>60﹪,判断为继发感染;2种抗体均为阴性的标本有6例,病毒分离结果 亦为阴性,说明患者未被感染.统计学分析,A组与B组之间差异有统计学意义(P<0.05).血清学方法 与病毒分离比较,一致率为75.49﹪,该方法 灵敏度为100﹪,特异度为87.10﹪,准确度为90.00﹪.结论 以HCMV pp65重组蛋白为抗原检测特异性抗体以及相应IgG AI的ELISA,可快速诊断HCMV原发感染和继发感染;该方法 具有高度特异性与敏感性,操作简便,重复性好,具有良好的临床应用前景. 相似文献
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为探讨BST-2蛋白是否参与人巨细胞病毒(HCMV)感染导致的恶性胶质瘤细胞增殖和迁移,以HCMV AD169株感染U251细胞,通过细胞划痕愈合实验检测HCMV感染对U251迁移的影响;通过Western-blot方法检测HCMV感染对BST-2蛋白表达的影响;通过CCK-8、细胞划痕愈合和transwell方法检测HCMV感染后下调BST-2对U251细胞增殖和迁移能力的影响。结果显示,HCMV感染可促进U251细胞迁移并高表达BST-2,沉默BST-2后可抑制由HCMV感染诱导的细胞增殖和迁移。结果证实HCMV感染可促进胶质瘤细胞U251增殖迁移,BST-2参与了HCMV感染导致的恶性胶质瘤细胞增殖和迁移。 相似文献
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人巨细胞病毒(human cytomegalovirus, HCMV)是疱疹病毒β亚科中的代表成员之一,是一种具有囊膜包裹的DNA双链病毒,对免疫耐受群体和先天性感染的婴幼儿具有很高的发病率。HCMV具有潜伏感染和裂解感染两种感染状态。这两种感染过程中均有不同的miRNA表达模式。这些miRNA不仅参与胞内宿主或病毒自身基因表达调控与病毒复制,也能调节胞内物质的转运和病毒感染状态的转变等过程。本文就HCMV编码的miRNA,其生物合成机制和生物学功能进行简要综述,为深入研究其生物功能和作用机制奠定基础。 相似文献
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应用抗巨细胞病毒(HCMV)蛋白抗原(分子量为20千道尔顿)的单克隆抗体(McAb-20k)和HCMV IgG特异性阳性血清以间接免疫荧光试验检测28例器官移植病人尿标本接种人胚肺细胞后的HCMV感染情况,结果前法于接种后48小时检测到HCMV阳性病人9例,后者于接种6天检测到阳性病人11例。与病毒分离结果相比较,两法的敏感性分别为81.8%和90.9%,特异性相应为100%和94.12%,符合率均为92.9%,比病毒分离提前数天至数周作出诊断,重复性良好。因此,抗HCMV蛋白抗原的单克隆抗体间接免疫荧光法是一种有效的、早期快速而又敏感特异的诊断方法,操作简便,既使没有单抗,可用HCMV IgG阳性血清代替,也可取得较好效果,值得在一般实验室推广应用。 相似文献