茚三酮直接加入展开剂显色的探索

在纸层析和薄层层析中,经典显色法是用显色剂对晾干后的层析谱进行喷显。1984年,朱婉华用微晶纤维素薄层层析法分析氨基酸,将茚三酮直接加进展开剂内,在展开过程中显色,获得成功。最近,我们用纸层析     

氨基酸纸层析展层剂的改进

<正> 一、前言在利用离子交换树脂柱分离蛋白质水解液中的氨基酸时,常希望用单向纸上层析手段鉴定洗脱液中氨基酸的种类。然而目前使用的纸层析展开剂对于某些氨基酸的分离效     

氨基酸快速薄膜层析法

纤维素薄膜层析法是60年代发展起来的,用于分离和鉴定氨基酸,具有灵敏度高,分辨力强,操作简便等优点,比过去分析这类化合物使用的纸层析方法有了进一步的发展。我们采用微晶型纤维素粉,铺成的薄板应用于植物样品内氨基酸的分离和鉴定,性能良好,优点显著,在氨基酸的定性和定量分析工作上具有一定的成效。     

聚酰胺薄膜层析及其用于蛋白质化学分析

聚酰胺薄膜层析是1966年后发展起来的一种新层析技术。特别在用于分析氨基酸衍生物——DNS-氨基酸、DNP-氨基酸和PTH-氨基酸时,具有灵敏度高、分辨力强、速度快、操作方便等优点,超过了过去分析这类化合物使用的纸层析、纸电泳、硅胶薄板层析等方法。在蛋白质化学结构分析中,聚酰胺薄膜层析结     

HPLC法定量分析植物组织中ABA,IAA和NAA

近年来有关植物激素的提取、分离方法的报道时有出现,但大都是沿用80％甲醇(MeOH)从植物组织中提取IAA和ABA,用乙酸乙酯萃取酸化的提取液后得到粗提液,粗提液再经过纤维素薄层层析、硅胶层析、     

庆大霉素与西梭霉素的碳板层析

1963年Brodasky曾用活性炭层析法分离新霉素复合物得到满意结果。同年近藤信一等报道了氨基糖苷类抗生素的碳板层析。1977年Takashi等把Fortimicin同其它氨基糖苷类抗生素的碳板层析作了比较。这些结果表明碳板层析对于结构类似物质的分离鉴别效果是良好的。西梭霉素(Sisomicin)与庆大毒素(GM)C_(1a)的结构仅在于绛红糖胺上的一个双键之差。一般薄层层析和纸层析虽可分离开庆大霉素C_1、     

江苏省植生学会举办“植物激素实验技术培训班”

江苏省植物生理学会,委托南京林产工业学院植物生理教研组,于1983年10月15—25日,举办了“植物激素实验技术培训班”。这期培训班的主要特点是:1.时间短、内容多。在短短的10天内,学习了以嫩扁豆为材料的IAA、GA、CTK、ABA四种激素的提取分离、溶液萃取、离子交换、纸层析、薄层层析、生     

云南溪菜多糖的分离纯化及其性质研究

从云南溪菜中提取的水溶性胞外粗相糖（ＥＰＳ）,用Ｓｅｖａｇ法脱蛋白后,经ＤＥＡＥ－纤维素柱层析和葡萄糖凝胶Ｇ－２００柱层析可得到纯品。溪菜多糖复合物经碘试验证明含有少量淀粉,Ｂａｃｌ２试验检测出含有ＳＯ４＾２－,琼脂糖凝胶电泳显示含有糖类及蛋白南,且其组成不均一。用Ｌｏｗｒｙ法测得蛋白质含量为１３．５４％,苯酚－硫酸法测得糖含量为７８％,经薄层层析和纸层析鉴定,溪菜多糖复合物的酸水解物中含有大量Ｄ     

一种快速非同位素测定2',5'-寡聚腺苷酸合成酶活性的方法

介绍一种新的非同位素测定２′,５′－寡聚腺苷酸合成酶（２′,５′－ＯＡＳＥ）活性的方法．反应液经已糖激酶处理,点样于ＰＥＩ－纤维素薄层层析板上,经甲醇浸泡与预层析和在０．７５ｍｏｌ／ＬＫＨ２ＰＯ４（ｐＨ３．５）缓冲液中的层析可使ＡＤＰ和２′,５′－Ａｎ分离开,系统偏差和２′,５′－ＯＡＳＥ测活分析表明,本方法可用于粗酶液及部分纯化酶液的２′,５′－ＯＡＳＥ活性测定,并可用于临床生化分析     

白眉蝮蛇蛇毒神经生长因子的研究Ⅰ.神经生长因子(NGF)的纯化及其生物学活性鉴定

研究白眉蝮蛇蛇毒神经生长因子纯化方法并行生物学活性鉴定。方法从白眉蝮蛇乌苏里亚种蛇毒中,经硫酸胺分段盐析,提取含有神经生长因子的粗制品,再经二乙氨基乙基纤维素离子交换层析和羧甲基纤维素离子交换层析,分离出蛋白质纯品,经十二烷基磺酸钠——聚丙烯酰胺凝胶电泳进行鉴定,结果纯化的纯品为单一区带,分子量为４３ｋｕ。生物学活性鉴定证明分离出的该蛋白质纯品可促进神经细胞突起密集生长。     

白眉蝮蛇蛇毒神经生长因子的研究：Ⅰ.神经生长因子（NGF）的纯化及其生物学？

研究白眉蝮蛇蛇毒神经生长因子纯化方法并行生物学活性鉴定。方法 从白眉蝮蛇乌苏里亚种蛇毒中,经硫酸胺分段盐析,提取含有神经生长因子的粗制品,再经二乙氨基乙基纤维素离子交换层析和羧甲基纤维素离子交换层析,分离出蛋白质纯品,经十二烷基磺酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳进行鉴定。     

棉籽饼粕中氨基酸提取分离工艺研究

以棉籽饼粕为原料先制备棉籽蛋白和联产含蛋白质40%以上、棉酚仅0.003%的饲料添加剂,百分收率分别为18.7、54。棉籽蛋白再经酸性水解,水解液以活性炭层析——等电点沉淀——离子交换树脂层析工艺分离到苯丙氢酸、酪氢酸、谷氨酸、组氨酸、精氨溶、天冬氨酸、脯氨酸、各种氨基酸百分回收率分别为26.4、47.1、30.2、63.4、41.8、68.8。产品纸层析均为一个斑点,质量符合有关标准规定。     

一种快速非同位素测定2‘,5’—寡聚腺苷酸合成酶活性的方法

介绍一种新的非同位素测定２‘,５’－寡聚苷酸合成酶（２‘,５’－ＯＡＳＥ）活性的方法,反应液经已糖激酶处理,点样于ＰＥＩ－纤维素薄层层析板上,经甲醇浸泡与预层析和在０．７５ｍｏｌ／ＬＫＨ２ＰＯ２（ＰＨ３．５）缓冲液中的层析可使ＡＤＰ和２‘,５’－Ａｎ分离开,系统偏差和２‘,５’－ＯＡＳＥ测活分析表明,本方法可用于粗酶液及部分纯化酶液的２‘,５’－ＯＡＳＥ活性测定,并可用于临床生化分析。     

一种简便的肌醇磷脂微量分析方法

分析磷脂酰肌醇循环(PI cycle)的磷脂组分常采用双向薄层层析法．建立了一个简单快速的单向薄层层析分离肌醇磷脂方法．首先采用不同的有机溶剂体系分别提取非多磷酸肌醇磷脂和多磷酸肌醇磷脂,然后用不同的层析展开体系,对两部分磷脂进行单向薄层层析分离．采用无载体 ³²P标记实验对该方法分离效果进行了观察．此法适用于同位素标记和非标记样品中肌醇磷脂组分的比较分析及多磷酸肌醇磷脂的提取、纯化和定量．     

非盐依赖层析的研究与应用

在非盐依赖层析操作中,吸附介质的成分、结构、密度等性质得到改进,所以料液离子强度的变化不会明显影响吸附 . 与常用的离子交换层析、疏水层析、亲硫层析等方法相比,该类技术能够降低对料液预处理的要求,提高蛋白质的稳定性,同时简化层析操作、降低纯化成本,具有大规模分离纯化蛋白质的潜力 . 近年来开发的多种非盐依赖层析介质与方法,都已在蛋白质纯化中得到应用 .     

HSV-1特异转移因子活性成分的化学本质

亲和色谱法分离TF_(HSV-1)特异活性成分,该成分在高效液相层析(包括离子交换层析和反相层析)产生一个紫外吸收峰,簿层层析后有一个荧光胺显色点而无254nm吸收点。在等电点聚焦分析中该成分为一条考马斯亮蓝染色带。凝胶层析测定特异成分的分子量为12,870 dalton。特异成分不含DNA和游离氨基酸,与Orcinol反应阴性,其水解物含16种氨基酸。实验结果表明,TF_(HSV-1)特异成分是12,870 dalton的多肽。     

核酸碱基薄层层析双波色谱扫描分析

核酸组成成分及衍生物的分析除常用的电 泳、纸层析和薄层层析洗脱比色法外,近年来 又出现了双波长色谱扫描法和高压液相层析 法^[2,3]。但已报道的双波长色谱扫描法测定的 碱基种类不多,在测定DNA (G + C）克分 子外方面,尚未见报道。我们在实验中摸索出 分离核酸碱基效果好的硅胶薄层析,并考查了 双波长色谱扫描分析法的准确度。     

银杏种仁中一种抗氧化活性蛋白的纯化及性质

银杏种仁经破碎,提取缓冲液4℃浸取后离心得上清液。上清液经硫酸铵沉淀,DEAE-52离子交换层析,MonoQ离子交换层析,UltroGelACA-54凝胶过滤层析后,分离得到一种具有抗氧化活性的蛋白。该蛋白经UltroGelACA-54凝胶过滤层析测定分子量为60 kD,经PAGE和SDS-PAGE鉴定均为单一蛋白质条带。SDS-PAGE测定其亚基分子量为10 kD。该蛋白具有一定的还原能力和清除超氧阴离子自由基及DPPH自由基能力,并在30～60℃温度下具有良好的稳定性。     

黑曲霉Tx-78耐酸性α-淀粉酶的分离纯化及其性质研究

从酒由中选育得到产耐酸性α-淀粉酶的嗜酸性黑曲霉菌株Tx-78,经酒精沉淀,CM52和DE52纤维素离子交换层析对该酶进行纯化,通过SDS-PAGE检验其纯度并测得其分子量为74 ku.该耐酸性α-淀粉酶具有显著的热稳定性及酸稳定性.其最适反应温度与pH分别为70℃和pH 4.0.当反应温度低于60℃时,该酶在pH 4.0条件下可保持稳定活性达3 h以上.Ca2 、Ba2 对提高酶活力具有明显作用.薄层层析表明该酶制剂水解淀粉最终产物主要为麦芽糖和葡萄糖.     

一种黑豆蚜储存蛋白质的分离纯化及其亚基的性质

从黑豆蚜 (AphiscraccivoraKoch)血淋巴中经DE5 2纤维素离子交换层析、SephadexG 15 0凝胶过滤以及在FPLC上QSepharose分离出一种蛋白质。该蛋白质经SDS PAGE测定在非还原和还原条件下分子量均为 6 0kD左右 ,等电聚焦电泳测得其等电点约为 5 .0 ,为糖蛋白。若蚜期间该蛋白质在蚜虫体内积累 ,羽化至成蚜时含量明显减少 ,为蚜虫提供发育所需氨基酸 ,在成蚜期间仍以低浓度存在。根据其分子量和氨基酸组成与含量变化动态应属不完全变态昆虫的一种持续性储存蛋白质。