赤霉素固体发酵研究

赤霉素固体发酵研究张志群,王兰,娄莉青（辽宁省分析测试研究中心沈阳,１１００１５）项勇,奚若明（沈阳药科大学）赤霉素（Ｇｉｂｂｅｒｅｌｌｉｎ）是由水稻恶苗病菌（Ｇｉｂｂｅ,ｅｌｌａｆ。ｊｉｂ。ｒｏｔ）产生的多组仿植物生长激素,具有刺激细胞伸长作用等一...     

水稻恶苗病拮抗菌的筛选、鉴定及其抑菌活性

从水稻根际土壤中筛选出拮抗水稻恶苗病的菌株,初步研究其抑菌作用及生防效果。采用平板稀释法从水稻根际土壤中分离获得菌株,以水稻恶苗病菌为靶标菌采用平板对峙法筛选出拮抗菌;通过形态学特征、生理生化特征及16S r DNA序列分析对筛选出的拮抗菌进行鉴定;检测拮抗菌无菌发酵液对水稻恶苗病菌菌丝生长的影响,同时测定拮抗菌的抑菌谱及进行盆栽实验。分离得到6株拮抗菌,其中有一株对水稻恶苗病菌拮抗作用较强的菌株SH15,经鉴定菌株SH15为多粘类芽孢杆菌。菌株无菌发酵液对水稻恶苗病菌菌丝生长有显著抑制作用;菌株SH15抑菌谱广,对水稻恶苗病菌、层出镰孢菌、棉花枯萎病菌、辣椒疫病菌、棉花黄萎病、黄瓜黑斑病菌均有一定的抑菌活性。水稻盆栽实验表明,接种多粘类芽孢杆菌SH15可显著降水稻恶苗病的发病指数,平均防效高达65.68%。因此,多粘类芽孢杆菌SH15在水稻恶苗病的生物防治方面具有一定的应用价值。     

一株抗真菌内生多粘芽孢杆菌的分离鉴定及对水稻恶苗病菌的抑制作用

目的：从番茄叶片中筛选具广谱抑真菌活性的拮抗内生细菌,研究其对水稻恶苗病菌的抑制作用。方法：采用对峙培养法筛选拮抗内生细菌,根据菌株形态、生理生化特性结合16S rRNA基因序列分析鉴定菌株;采用硫酸铵沉淀法提取抗菌粗蛋白,研究其对水稻恶苗病菌菌丝生长和孢子萌发的影响。结果：从番茄叶片中筛选到一株抗真菌内生多粘芽孢杆菌（Paenibacillus polymyxa）SD-6,该菌株具有广谱抑菌活性,对供试的13种植物病原真菌均具较强的抑制作用;该菌株产生的抗菌粗蛋白能够显著抑制水稻恶苗病菌菌丝生长和孢子萌发,并能导致萌发孢子畸形和破裂。结论：从番茄叶片中分离到一株能产生抗真菌蛋白并具有广谱高效抑真菌作用的内生多粘芽孢杆菌,该菌株及其抗菌蛋白具有防治水稻恶苗病的潜力。     

杜仲内生真菌DZJ03发酵液生物活性的研究

测定处于不同生长期的杜仲内生真菌DZJ03胞外多糖含量、发酵液中3种核苷含量,并对其菌株发酵液抑菌效果进行了研究,按50μg/mL的浓度测定了发酵液的石油醚、乙酸乙酯和甲醇等3种提取物对水稻恶苗病菌、棉花枯萎病菌2种植物病原菌以及烟草青枯病菌、金黄色葡萄球菌的抑制活性。结果表明:内生真菌DZJ03胞外多糖含量最高可达到2.0410g/L,其发酵液中所含腺苷、尿苷以及鸟苷的含量分别为1.2647 mg/g、0.8586 mg/g、1.0493 mg/g;发酵液乙酸乙酯相具有较强的抑菌活性,其对水稻恶苗病菌的抑制率为71.92%,抗烟草青枯病菌的抑菌圈直径达到19.21 mm。     

水稻恶苗病菌对苯并咪唑类杀菌剂抗药性分子机理研究初探

用真菌β－微管蛋白基因的丰余寡聚核苷酸引物Ｂ１和Ｂ３,扩增了一段８７１ｂｐ的水稻恶苗病菌Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｍｏｎｉｌｉｆｏｒｍｅ的β－微管蛋白基因片段,进行了克隆和ＤＮＡ序列测定,并根据该序设计了Ｆ．ｍｏｎｉｌｉｆｏｒｍｅ β－微管蛋白基因的特异性测序引物。经过对恶苗病菌对多菌灵具有不同抗性水平菌株的β－微管蛋白基因核苷酸序的比较研究,表明Ｆ．ｍｏｎｉｌｉｆｏｒｍｅ的β－微管蛋白的１６５,１９８。     

赤霉素对植物生长与发育的影响

由于研究寄生于水稻植株而引起“疯长”或“恶性苗”病害的真菌 Gibberella fujikuroi Saw.分泌物,从而发现了赤霉素;赤霉素系具有调节特性与高度生理活性的一种新类型的物质。“恶性苗”的早期病症是水     

一种新的水稻生长抑制物质

植物病原菌所产生的代谢产物不仅直接引起植物病害,有的还能阻碍或促进植物的生长和发育。从水稻恶苗菌中分离出的赤霉素可以促进植物的生长。近代研究发现,引起植物叶枯病的几种病原菌,如水稻白叶枯病、稻瘟病、胡麻叶斑病、玉米小斑病、甘蔗叶枯病、高粱叶斑病等的病原菌都能产生代谢产物,给农业带来危害。     

口蘑中生长素类物质的提取与分离

自从1926年黑泽英一,1935年薮田真次郎从台湾省水稻恶苗病原菌Gibberella fujikuroi中发现赤霉素以来,微生物作为植物激素的产生菌受到了重视。现在已从某些细菌、放线菌及真菌的次级代谢产物中检出植物激素及其他生理活性物质。有人认为,微生物已经作为植物激素的来源并将继续作为激素的来源。     

羊草WRKY40的克隆及其转基因烟草抗病性分析

为了培育抗白叶枯病菌（Xanthomonas oryzae pv. oryzae）、纹枯病菌（Rhizoctonia solani）、稻瘟病菌（Magnaporthe oryzae）以及恶苗病菌（Fusarium fujikuroi）等病菌的水稻品种,通过挖掘抗病基因选育抗病品种。利用RT-PCR方法从羊草（Leymus chinensis）叶片中克隆LcWRKY40基因（登录号：MN187915）,其CDS全长1 053 bp,编码350个氨基酸,分子质量为38.1 kDa。生物信息学分析结果表明：LcWRKY40一级结构包含WRKY结构域,并且存在锌指蛋白结构域以及核定位序列。系统进化树的构建及基序分析发现LcWRKY40和HvWRKY38亲缘关系接近。烟草（Nicotiana tabacum）亚细胞定位结果表明LcWRKY40蛋白定位于细胞核中,验证了软件预测。经qRT-PCR组织特异性表达分析表明LcWRKY40基因在羊草的根、茎、叶、叶鞘、稃和花药中都有表达,但表达量在叶中最高,稃中最低。利用水稻的白叶枯病菌、纹枯病菌、稻瘟病菌以及恶苗病菌对转基因LcWRKY40烟草植株与野...     

赤霉酸

虽然真菌马鹿苗病菌(Gibberella fugikuroi)的代谢产物对植物生长有显著的效应已经知道了约三十年之久,但是,比较最近才被公认而被详细地探讨。研究中已确定了这个生物的活性物化学面貌,并阐明了它对植物生长的效应。虽然赤霉酸的性质曾经引起对它在农业上实际应用的许多希望,但尚未找到它主要用途。前言在所有的栽培水稻的国家里,曾经报导过一种由土壤带来的病是由於真菌马鹿苗病菌(分生孢子期为串珠镰刀菌"Fusarium moniliforme”所致。在很     

水稻应用赤霉素的试验研究 Ⅰ.水稻生殖生长期应用赤霉素的效果

为了配合应用赤霉素于水稻的群众性科学实验运动,以探求赤霉素在水稻生产中的应用价值。自1970年以来,我们进行了赤霉素对水稻作用的研究。本文介绍水稻生殖生长期应用赤霉素的增产效果、有效条件、应用技术以及影响增产效果的生理原因。     

水稻恶苗病菌对苯并咪唑类杀菌剂抗药性分子机理研究初探

用真菌β-微管蛋白基因的丰余寡聚核着酸引物B1和B3,扩增了一段871bp的水稻恶苗病菌Fusariummoniliforme的β微管蛋白基因片段,进行了克隆和DNA序列测定,并根据该序列设计了Fmoniliformeβ-微管蛋白基因的特异性测序引物。经过对恶苗病菌对多菌灵具有不同抗性水平菌株的β-微管蛋白基因核着酸序的比较研究,表明Fmoniliforme的β微管蛋白的165,198,200和257位置氨基酸末发生突变,在克隆的片段内也未发现能引起氨基酸改变的核着酸突变。说明该菌对多菌灵产生抗性的分子机理与目前已知的其他真菌有所不同,有待进～步研究。     

枯草芽孢杆菌TF26抗菌蛋白抑菌活性的初步研究

目的:研究枯草芽孢杆菌TF26抗菌蛋白的抑菌活性和生物稳定性,为菌株及抗菌蛋白的应用提供理论依据.方法:采用硫酸铵盐析方法提取抗菌蛋白,采用菌丝生长速率法检测其对13种植物病原真菌的抑菌活性,采用抑菌圈方法对其生物稳定性进行分析.结果:抗菌蛋白粗提物能够抑制13种植物病原真菌的生长,平皿抑制率为74.3％ ～91.3％,对葵花菌核病菌、番茄和黄瓜枯萎病菌、黄瓜菌核病菌和立枯病菌、水稻恶苗病菌和大豆根腐病菌抑制作用较强.抗菌蛋白在100℃以下,pH＜ 10范围内抑菌活性稳定,对紫外线照射不敏感,室温(20℃)和4℃储存150d抑菌活性稳定.结论:抗菌蛋白具有较强的热、酸碱、紫外和储存稳定性以及广谱的抑菌活性.     

解淀粉芽孢杆菌TF28抗菌蛋白AP1的表达、纯化与抑菌活性

本研究采用人工合成方法合成抗菌蛋白基因AP1,连接到p ET32a(+)表达载体,导入E.coli BL21菌株进行原核表达,表达产物经HIS柱纯化和肠激酶切割后测定抑菌活性。人工合成了分子量为321 bp的抗菌蛋白基因AP1,获得了p ET32a(+)-AP1-BL21基因工程菌株,该菌株在0.1 mmol/L IPTG,25℃诱导2 h,蛋白表达率为43.2%,HIS柱纯化后获得SDS-PAGE电泳一条带分子量为27 k D的融合蛋白,其含量为124.82 mg/L,收率为92%,肠激酶切割后的蛋白能抑制大豆根腐病菌和水稻恶苗病菌的生长。获得高效表达抗菌蛋白AP1的工程菌株,该菌株表达的抗菌蛋白纯化后具有抑菌活性,在植病生防方面具有应用潜力。     

水稻白叶枯病抗性基因的研究与分子育种

由革兰氏阴性菌黄单孢水稻变种（Ｘａｎｔｈｏｍｏｎａｓ ｏｒｙｚａｅ ｐｖ．ｏｒｙｚａｅ,Ｘｏｏ）引起的白叶枯病是世界水稻生产中最严重的细菌性病害。白叶枯病是一种维管束病害,自然条件下,病菌通常由水孔或伤口侵入,沿叶脉产生灰白色病斑。田间常在分蘖期观察到病症,并随植株的生长而发展,至抽穗期达到高峰。水稻遭受白叶枯病后,一般减产２０％－３０％,严重时甚至绝收。白叶枯病最早于１８８４年在日本福岗地区发现     

影响水稻稻瘟病菌侵染过程的生态因子研究

通过田间和室内模拟等方法研究了水稻生长阶段,品种抗性,温度,降雨量和施N量等因子对稻瘟病菌侵染过程的影响。结果表明,水稻叶表单位面积病菌孢子附着量与水稻不同生长阶段呈负相关关系。稻瘟病潜育期与温度关系密切,在10℃-33℃范围内,以28℃条件下潜育期最短,小于℃,大于28℃的潜育期相应延长;病菌孢子侵染比值与水稻生长阶段呈负相关关系;稻叶表病菌孢子附着率在孢子与叶表接触后的5h内,与降水强度和降水持续时间密切相关,5h后影响变小;在一定条件下,稻瘟病扩展性病斑与非扩展性病的比值,扩展性病斑扩展的最大面积与水稻品种抗性和当时病斑所处叶位有关。     

壳聚糖对几种植物病原真菌的作用

在马铃薯葡萄糖琼脂 ( PDA)上测定了酸溶性壳聚糖 ( S- )和 2种水溶性壳聚糖 ( S- 和 S- )对 15种植物病原真菌的作用 ,结果表明 ,三种壳聚糖对供试的 15种植物病原真菌均有一定程度的抑制作用 ,抑制强度因壳聚糖的理化性质以及不同的病原真菌而有较大差异。水溶性壳聚糖 S- 可明显抑制水稻恶苗病菌分生孢子的萌发。壳聚糖的抑菌作用机制与其增加菌丝细胞膜的透性有关。     

赤霉素的生产及其生理效应試驗工作報告

赤霉素是一种新型的植物生長激素,它具有促进开花、打破休眠、單性結实等作用,尤其是促进植物营养体,如莖叶的長大,具有非常的效果,在农业增产上有很大的潜力。赤霉素同青霉素、金霉素等一些抗菌素相同,是微生物醱酵作用中的代謝产物。这种微生物是使水稻發生“恶留     

赤霉素水稻幼苗鉴定法的改进

本文报告了一个简易可靠的赤霉素的生物鉴定方法。应用水稻幼苗为材料,在处理了7天后卽可获得测定的结果。幼苗高度与赤霉素浓度的对数(10~(-1)—10~2ppm)成直线关系。与其他生物鉴定方法的比较,指出本方法的特点是:所需样品量较微(1毫升),可测赤霉素浓度范围较广(0.1—100ppm),且选苗严格,因而可提高此方法的灵敏度及可靠性,因此三年来我们用这个方法作赤霉素类似物质活性的常规鉴定方法。     

77种植物提取物对植物病原菌的生长抑制作用

以稻瘟病菌(Pyricularia grisea),水稻恶苗病菌(Fusarium moniliforme),玉米大斑病菌(Exserohilum turci-cum)等12种植物病原菌为供试菌种,采用生长速率法对77种植物的95%乙醇提取物在200μg/mL下进行室内抑菌试验。结果表明有15种植物提取物对植物病原菌有抑制作用,其中华山姜、硬骨藤、龙舌兰、红蒜、大花哥纳香、海南草珊瑚对至少一种菌的抑制率在50%以上,版纳青梅、大果巴戟、华山姜等8种植物提取物对至少三种病原菌均有不同程度的抑制作用。红蒜提取物对百合炭疽病菌、海南草珊瑚提取物对番茄灰霉病菌,以及龙舌兰提取物对玉米大斑病菌的抑制率分别为61.4%、70.7%、76.6%,与阳性对照抑制率相比效果明显。