生殖支原体的分子生物学诊断方法研究进展

本文综述了生殖支原体的实验室诊断的分子生物学方法,特别是基因探针和聚合酶链反应（ＰＣＲ）等新的分子生物学技术在诊断生殖支原体感染方面的研究进展,着重讨论了ＰＣＲ技术在诊断生殖支原体方面的应用。     

多聚酶链反应技术诊断生殖支原体的研究进展

本文不近年来应用多聚酶链反应（ＰＣＲ）技术快速诊断生殖支原体（Ｍｇ）的研究进展作一综述,内容包括Ｍｇ的分子生物学特性、引物的设计、ＤＮＡ提取以及此法在检测Ｍｇ中的临床应用和注意事项。     

肺炎支原体检测技术研究进展

由于与病毒或细菌引起的呼吸道感染症状极为相似,对肺炎支原体感染易误诊进而失去最佳治疗时间,并且由于出现大范围的大环内酯类药物的耐药现象,因此开发快速、灵敏、高效的诊断方法极为重要。本文对目前肺炎支原体的检测诊断方法的相关文献进行综述,为诊断肺炎支原体感染提供参考。     

咽拭子快速培养在肺炎支原体感染中的临床应用价值

目的:探讨咽拭子快速培养在肺炎支原体感染中的临床应用价值。方法:收集2014年2月~2016年2月期间我院收治的呼吸道感染患儿220例,用肺炎支原体专用液体培养基进行肺炎支原体快速培养,用胶体金法检测肺炎支原体MP-Ig M。比较两种方法的阳性率。结果:咽拭子培养快速培养阳性率与血清MP-Ig M检测阳性率比较,差异无统计学意义(P0.05)。MP-Ig检测显示,≤1岁阳性率最低,其阳性率随年龄增加不断增高(P0.05)。肺炎支原体咽拭子培养显示,≤1岁阳性率最高,2~8岁最低(P0.05)。病程≤7 d患者肺炎支原体咽拭子培养阳性率(34.21%)显著高于肺炎支原体MP-Ig检测阳性率(14.04%)(P0.05)。病程7 d患者肺炎支原体咽拭子培养阳性率(11.32%)显著低于肺炎支原体MP-Ig检测阳性率(52.83%)(P0.05)。肺炎支原体咽拭子培养的灵敏度性以及特异性显著高于肺炎支原体MP-Ig检测,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:咽拭子快速培养对肺炎支原体感染的早期诊断有一定临床应用价值,方法简单,无创伤,值得临床进一步研究和应用。     

多聚酶链反应在肺炎支原体检验中的应用

多聚酶链反应（ＰＣＲ）用以检查肺炎支原体（ＭＰ）近年已成功地用于临床标本,用ＰＣＲ检测的灵敏度比普通培养法高１０－１００倍,特异性强,与其他支原体无交叉反应,为临床诊断提供了一种快速、准确的方法。     

商品化酶免疫检测试剂盒在支原体肺炎血清学诊断中的应用

肺炎支原体是引起儿童和成人支气管炎和原发性非典型肺炎的一种重要病原体,快速准确的确定病原体是诊断疾病的关键。本文就目前美国用于诊断支原体肺炎的5种商品化检测试剂盒检测结果作一简要评价。     

聚合酶链技术检测淋球菌、沙眼衣原体、解脲支原体感染的方法与分析

由淋球菌和沙眼衣原体、解脲支原体感染引起的特异性和非特异性尿道炎,临床上缺乏快速准确的诊断方法。近年来发展起来的聚合酶链反应技术,通过对每种病原体特有的DNA 序列进行体外特异扩增,可以快速准确鉴定之。本文用该技术对引起泌尿系统感染的三种病原体进行检测研究,它具有快速、特异、准确等优点,并检测123 例感染者,结果,淋球菌感染占74 % ,沙眼衣原体感染占39 % ,解脲支原体感染占30-9 % 。     

聚合酶链技术检验淋球菌,沙眼衣原休,解脲支原体感染的方法与分析

由淋球菌和沙眼衣原体、解脲支原体感染引起的特异性尿道炎,临床上缺乏快速准确的诊断方法。近年来发展起来的聚合酶链反应技术,通过对每种病原体特有的ＤＮＡ序列进行体外特异扩增,可以快速准确鉴定之。本文用该技术对引起泌尿系统感染的三种病原体进行检测研究,它具有快速、特异、准确等优点,并检测１２３例感染者,结果,淋球菌感染占７４％,沙眼衣原体感染占３９％,解脲支原体感染占３０．９％。     

肺炎支原体实验室检测方法研究进展

肺炎支原体(Mycoplosma pneumonia,MP)为人类非典型肺炎的病原体,是引起呼吸道感染的重要病原体。但是支原体肺炎与其他病原体感染的肺炎,在临床症状、影像学上并无特异性差别,且其对一般治疗肺炎、上呼吸道感染的药物有耐药性,因此肺炎支原体及时、准确的实验室检测对于支原体肺炎的诊断治疗显得尤为重要。目前MP的实验室检测方法不断推陈出新,但各种方法均有其优势与不足,临床可选择两种不同的方法同时检测。比如:血清学抗体的检测结合MP快速培养药敏的方法;血清学抗体的检测结合PCR的方法,不同方法相互补充为临床的早期诊断、治疗提供依据。而MP药敏试验的检测和耐药机制的研究对于临床用药方案的选择,减少耐药株的产生和流行具有重要意义。     

生殖支原体对宿主细胞黏附机制的研究进展

生殖支原体通过其黏附细胞器定植于人体相关组织,引发非淋菌性尿道炎等感染性疾病,但其具体的黏附过程可能相当复杂.探讨其黏附机制有助于了解其致病过程,以促进有关疾病诊断和防治等方面的研究.本文着重介绍了生殖支原体黏附细胞器的形态、结构,各种黏附蛋白的定位、功能及相关基因序列.     

重组酶聚合酶等温扩增快速检测肺炎支原体方法的建立和初步应用

摘要 目的：建立基于重组酶聚合酶扩增技术（RPA）技术快速检测肺炎支原体的方法。方法：本研究以肺炎支原体编码P1黏附蛋白为靶基因,利用Primer Premier 5软件进行引物、探针的设计,最终筛选出最佳引物。同时设计相应的实时荧光定量PCR（RT-PCR）引物用于后续的验证试验。对反应体系试剂比例、反应时间、反应温度、引物探针浓度进行确定。肺炎支原体、解脲支原体、人型支原体、肺炎克雷伯菌、肺炎双球菌、大肠杆菌和链球菌作为对照评估RPA检测肺炎支原体的特异性及敏感度。结果：RPA快速检测肺炎支原体方法仅需14 min,检测灵敏度达200 copies/mL;6种非肺炎支原体均不能扩增,特异性较高。结论：本研究建立了肺炎支原体的RPA快速检测方法,具有迅速、简便、经济等优势,为肺炎支原体的快速检测提供一个新的有利工具。     

一种快速判定细胞培养中支原体污染的方法——瓜氨酸测定法

目的：开发一种简便、快速、能及时发现细胞培养中支原体污染的方法。方法：用HPLC检测细胞培养中瓜氨酸是否存在及其量的大小。结果：当细胞培养被支原体污染时,培养基中精氨酸量明显下降,同时有瓜氨酸出现;当支原体被消除后,瓜氨酸即消失。结论：在细胞培养中瓜氨酸的出现与支原体污染的关系是特异的,用HPLC在2h内即可检出,表明该方法可靠、简便、快速,可作为细胞培养过程中支原体污染的常规监测手段。     

泌尿生殖道支原体三种检测方法的评价

目的 评价三种检测方法对非淋菌性尿道炎(NGU)检测解脲支原体(Uu)和人型支原体(Mh)的效果.方法 对我院2011年7月~2012年6月妇科、皮肤性病科门诊患者的分泌物标本采用PCR检测方法、液体培养基方法、免疫性检测法对解脲支原体和人型支原体进行检测,并对三种方法的检测结果进行分析.结果 PCR检测方法和液体培养基方法对非淋菌性尿道炎检测具有临床诊断意义.结论 PCR检测支原体灵敏度高、特异性强,适用于对非淋菌性尿道炎的诊断.     

支原体对大环内酯类抗生素耐药机制的研究进展

支原体是能独立生活的最小原核细胞微生物,分支原体和脲原体2个属.按照遗传物质(G C)%含量、基因组大小、培养时对胆甾体的需求以及其他生物学特性等的差异,支原体可分为肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,MP)、人型支原体(Mycoplasma hominis,MH)、解脲脲原体(Ureaplasma urealyticum,UU)、生殖支原体(Mlycoplasma genitalium,MG)、发酵支原体(Mycoplasma fermentans,MF)等100多种,其中前三者与人呼吸和泌尿生殖系统感染性疾病密切相关.     

肺炎支原体ELISA检测试剂盒的临床应用

目的评价肺炎支原体ELISA检测试剂盒在临床应用的效果。方法用肺炎支原体ELISA检测试剂盒检测呼吸道感染患儿的咽拭子标本,并以肺炎支原体快速检测培养基试剂做同步盲法对照试验,分析该试剂盒的准确性及批内、批间产品的稳定性。结果在100例呼吸道感染患儿咽拭子标本中,肺炎支原体ELISA检测法阳性率为38%,肺炎支原体快速检测培养基法阳性率为37%,两种方法阳性结果符合率为97%。同步盲法试验结果显示,肺炎支原体ELISA检测试剂盒批内、批间产品阳性结果的一致率均为100%。结论该试剂盒具有较好的准确度和特异性,并且操作简便、快速,临床可推广应用。     

儿童肺炎支原体咽拭子快速液体培养结果分析

目的分析儿童肺炎支原体（MP）咽拭子快速液体培养的结果及与患儿年龄以及季节的关系,为临床诊断、治疗肺炎支原体感染提供依据。方法选取深圳市宝安区人民医院1217例急性呼吸道感染的患儿,采用咽拭子快速液体培养基进行筛查,观察其阳性率。结果在1217例患儿中,共检出阳性281例,阳性率为23．09％。〈1岁、1～3岁、3～6岁和6～14岁各年龄组的阳性率分别为15．13％、26．52％、28．31％和18．07％;不同季节MP感染率分别为春23．75％,夏20．11％,秋18．61％,冬29．72％。1～3岁,3—6岁小儿感染率明显高于6—14和〈1岁儿童（P〈0．01）;冬春季阳性率较夏秋季高。结论MP快速液体培养鉴定对MP诊断具有重要的临床诊断价值。肺炎支原体感染全年均可发病,好发于冬季,以3—6岁小儿多见。     

支原体、军团病菌的DNA探针快速诊断

<正>肺炎支原体是极易引起上呼吸道感染、支气管炎、和肺炎的病原体,患者可同时伴随迂延性、重症性呼吸系统和神经系统合并症。军团病菌亦是常见的引起肺炎的病原体,广泛的存在于自然环境中,当感染防御能力低下时,或是免疫缺陷症患者极易感染。在各种常见病的入院患者中,肺炎支原体和军团病菌引起的肺炎非常多见。因此,早期诊断和普及诊断检查法是非常必要的。然而,目前肺炎支原体和肺炎军团病菌的分离需要数日,而且分离培养需特殊的培养基,手续繁杂及多种培养检查设施,给快速诊断带来困难。     

酶促重组等温扩增实时荧光法快速检测肺炎支原体方法的建立及应用北大核心CSCD

利用酶促重组等温扩增(enzymatic recombinase amplification,ERA)技术建立快速检测肺炎支原体的实时荧光检测方法。针对肺炎支原体P1基因设计特异性引物和探针,优化反应条件,分析其敏感性和特异性,并对临床样本进行验证。ERA实时荧光法在25-40℃均具有扩增能力,在35℃条件下对肺炎支原体的扩增效果最好,20 min内可完成扩增;该法对肺炎支原体的检出限为10^(3) copies/μL;并对其他6种呼吸道病原体进行检测,均无扩增曲线产生,有较好的特异性;以荧光定量PCR法检测结果为标准,ERA实时荧光法对34份临床样本的检测结果的诊断敏感度为96.15%、特异度为100%、阳性预测值为100%、阴性预测值为88.89%。本研究构建的ERA实时荧光法可以快速简单、灵敏和特异地检测出肺炎支原体,满足现场检测的需求。     

肺炎支原体的分离和鉴定

肺炎支原体是使人致病的九种支原体中唯一能引起呼吸道感染的一种。它不仅引起咽炎、气管炎等上呼吸道感染,还可引起非典型肺炎或支原体性肺炎。过去对非典型肺炎只依据临床和冷凝集试验进行诊断。但近年发现冷凝集试验特异性不高,因此国外已广泛开展病原分离和血清学特异诊断方法。国内1978年上海市防疫站首次分离到肺炎支原体地方株。我们为了搞清肺炎支原体在东北的存在及致病情     

泌尿生殖系统感染支原体培养及药敏结果分析

目的 :了解解脲支原体和人型支原体在泌尿生殖系统感染中的致病作用和对抗生素的药敏情况。方法 :对 5 87例泌尿系感染患者进行支原体培养 ,并对阳性标本行 12种抗生素药敏试验。采用支原体培养、鉴定、药敏一体化试剂盒进行检测。结果 :5 87例患者中支原体阳性 16 4例 ,感染率为 2 7 9% ,解脲支原体 (Uu)、人型支原体 (Mh)及Uu +Mh混合感染的阳性率分别为 2 1 3%、1 5 %和 5 1%。女性感染率显著高于男性 (P <0 0 1)。支原体对 12种抗生素敏感性最高的是交沙毒素 (92 7% ) ,其次为可乐必妥(85 4 % )、司帕沙星 (84 8% )。结论 :泌尿生殖系统感染者支原体感染率为 2 7 9% ,主要由解脲支原体引起 (占 76 2 % ,12 5 / 16 4 ) ,泌尿生殖系感染支原体患者应首选交沙霉素治疗。