酵母菌中超氧化物歧化酶的研究

首次提出了用甲苯破壁提取酵母菌中SOD的方法,此法提取SOD的含量分别为氯仿-乙醇法、酶裂解法和细胞自溶法的1.29、1.08和2.01倍.通过对5种酵母菌的测定,发现酵母菌对氧的抗性与其SOD含量密切相关;同时对一株SOD含量较高的卡尔酵母(Saccharomyces carlsbergensis)BY2菌株进行了营养和培养条件的研究,结果表明它们对该菌株SOD含量和SOD同功酶的影响较大.     

测糖微生物传感器的研究

由酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)和氧电极组成的微生物传惑器用于蔗糖等低分子糖的测定。响应动力学过程分析表明,动态测定法比稳态测定法优越。对醪液中蔗糖浓度铡定,响应时间小于Imin,线性范围0-100mg／L,相对误差为±4％,平均回收率为97％。乙醇和精氨酸对测定有较大干扰,22种氨基酸混合液对测定干扰不明显。传感器经连续使用一个月,500次测定,活力仍稳定,无线性漂移现象。该微生物传感器对低分子糖类的响应选择性顺序为：果糖>麦芽糖>葡萄糖>蔗糖,在以上述糖作为唯一生长碳源培养微生物时,可采用本方法测定其含量。     

一株甲醇利用菌的分离及其在甲醇测定中的应用

【目的】筛选能够利用甲醇的微生物菌株,并将其应用于甲醇测定的初步研究中。【方法】采用富集培养及固体平板分离法分离菌株;通过生理生化特征及16S rDNA序列分析进行菌株鉴定;以固定化细胞和溶氧仪组合成测定系统,测定了不同含量甲醇的响应时间以及溶氧变化与甲醇含量的关系。【结果】从山西清徐农用沼气池中分离得到一株能以甲醇为唯一碳源和能源生长的菌株M211,通过生理生化特征及16SrDNA序列分析,该菌株被鉴定为嗜有机甲基杆菌(Methylobacterium organophilium)。传感系统在0.02%-1%(V/V)甲醇含量范围内测定,响应时间小于20 min,检出限为0.27 mg/L,溶氧消耗量同甲醇含量呈线性关系,拟合系数(R2)为0.9986。该测定体系不易受其它干扰物质影响,检测结果与实际样品浓度一致。【结论】该测定体系具有较强的选择性,及良好的重现性和稳定性,具有较好的应用前景。     

超临界流体萃取——高效液相色谱法测定百合中秋水仙碱

分别用超临界二氧化碳流体和有机溶剂萃取百合中的秋水仙碱,然后用高效液相色谱法直接测定萃取物中秋水仙碱的含量,从而测得百合中秋水仙碱的含量。超临界流体萃取的条件是：用乙醇作提携剂,萃取压力为18MPa,萃取温度为40℃,高效液相色谱测定条件为：ODS柱,甲醇：磷酸二氢钾溶液作流动相,检测波长为220nm,此法快速,简便,准确,可应用于秋水仙碱原料,制剂及其它植物中秋水仙碱含量的测定。     

蛋白激酶C活力的非同位素酶解测定法

在磷脂酰丝氨酸和Ca²⁺存在下,活化的蛋白激酶C以ATP为磷的供体使组蛋白H1磷酸化。用Dowex-1柱层析分离反应后的ADP与ATP,再用酸性磷酸酶水解ATP的磷酸酯键,测定磷的含量,建立了蛋白激酶C活力的非同位素酶解测定法。此法可靠易行。CV=5.2％。     

快速测定BOD的微生物传感器

异常汉逊氏酵母菌(Hansenula anomala var schneggil)细胞经海藻胶固定,与氧电极组装成BOD传感器。采用恒容动态法,可在5分钟内完成一个样品BOD的测定。用于某些污水测定时,与BOD₅²⁰法有较好的相关性。传感器可使用90天和测定650次以上。     

甲醇营养型酵母高密度培养过程中甲醇和乙醇的GC快速检测

采用气相色谱法（GC）快速检测甲醇营养型酵母发酵液中的甲醇、乙醇含量,具有样品处理简便,测定时间较短,结果重视性好的特点。在1－10mg/mL范围内具有很好的线性关系。在毕赤酵母高密度表达发酵过程中应用此法对甲醇和乙醇进行实时监空,细胞终密度超过300g/L（干重）。本方法为甲醇营养型酵母工程菌的发酵中试工艺研究提供了重要 的发酵生化参数。     

HPLC法测定烟草不同部位、不同提取方法茄尼醇的含量

为了建立烟草不同部位、不同烟草原料中茄尼醇的含量测定方法,本文取烟草不同部位经甲醇超声提取及烟草不同提取方法的提取物,分别用高效液相色谱法测定茄尼醇的含量。结果显示,烟草茎及叶柄中茄尼醇含量极低,烤烟中的茄尼醇的含量：中部烟〉上部烟〉下部烟,烟叶档次越高茄尼醇含量越高。提取溶媒为石油醚〉丙酮〉乙醇。     

除草剂的生物发光测定法

在防止自然环境的污染中对土壤与水域中除草剂含量的监测是必不可少的。这种监测需要灵敏快速的分析方法,Tcban等曾用生物发光测定杀藻剂(Algicide)与除草剂,也有人将生物发光应用于物质的毒性分析。本文介绍应用生物发光测定除草剂的技术方法。     

光合放氧的电极电位测定法的研究

介绍了用电极电位法测定植物的光合放氧速率,由此可以测定其放氧活性,此法具有应用面广、设备简便、灵敏度高、反应快及可以连续记录的特点,是一种研究光合作用的新方法。     

以摇瓶所得摄氧率为基准进行发酵放大

通过设计特殊摇瓶,用亚硫酸盐法测出摇瓶口纱布层氧通透率的基础上,在实际发酵情况下通过测定瓶内气、液相氧的变化得出其发酵过程中的摄氧率(OUR)及氧传递系数(K_La)。以特制摇瓶取得的菌体CUR为基准进行发酵过程和发酵罐的放大。通过质谱仪在线检测及采样分析,研究了3种不同供气流量及搅拌转速下的放大结果。摇瓶与发酵罐在菌体OUR、菌体产量方面吻合很好,而在整个放大过程中,发现摇瓶与发酵罐内的氧传递系数(K_La)、溶解氧(C_L)差异较大。     

巴氏甲烷八叠球菌BTC菌株的鉴定

本文报告了巴氏甲烷八叠妹菌BTC菌株的鉴定结果。该菌株在生活周期内均呈大小不等的团块聚集,8个不规则的球形细胞聚集在一起是团块构成的基本单位,未见单细胞阶段。在紫外线照射下,菌落荧光为蓝绿色,菌体荧光为蓝白色,活细胞或干制标本均可发出荧光。在以甲醇为生长基质时,其倍增时间为9．85h。可以利用甲醇,乙酸钠、三甲胺及H2／CO：为碳源;不能利用甲酸、乙醇、丙醇和丁醇等。最适生长pH为7．0。DNA的G+c mol％含量为41.5％。该菌株与巴氏甲烷八叠球菌近似或相同,而与马氏甲烷八叠球菌不同。其倍增时间较巴氏甲烷八叠球菌227菌株短,DNA中G+C mol％含量也与巳报道过的各菌株有 所差别,所以定名为巴氏甲烷八叠球曲BTC菌株(Methanosarcina barketi BTC)。     

浓香型酒窖中生丝微菌的分离与特性*

从浓香型大曲酒发酵糟中,首次分离到一株能利用甲醇为唯一碳源和能源的生丝微菌Hy-phomicrobium sp M7。该菌具有独特的形态学特征:细胞顶端常生长一根菌丝结构。通过菌丝出芽而繁殖。细胞呈卵圆形,单独存在。菌落淡褐色。该菌对甲醇有较大的亲和力。在甲醇存在时,能以NO3-为电子受体进行厌氧生长。能利用甲醇、甲胺类化合物、乙醇、乙酸盐作为碳源生长,不利用C₂以上的有机物。在乙醇为碳源的培养基上,菌丝顶端常长出一种喇叭口结构。最适氮源为NH相似文献   

关于四个酵母菌种对乙醇耐受性的研究

本文报道了从存活,生长,发酵能力和氢离子渗漏等角度研究和比较四种酵母菌(Zygosaccharomyces bailii NCYC 1427,Saccharomyces cerevisiae NCYC 431,Harisenula anomala NCYC 711和 Kloeckera apiculata NCYC 468)对乙醇的耐受性。乙醇对酵母在上述特性的抑制程度,取决于乙醇的浓度。Z．Bailii NCYC 1427是四个酵母中乙醇耐受性最强的。在2M的乙醇溶液中,其存活率与无乙醇的对照组一样高。在低于1.5M的乙醇中,其生长率高于 S．Cerevisiae NCYC 431,氢离子渗入细胞的速率增长则低于 S．Cerevisiae 和 H．Anomala。S．Cerevisiae NCYC 431对于乙醇抑制生长的效应耐受性很强,在低于IM的乙醇溶液中,其发酵能力下降得较为缓慢,存活率几乎没有变化。H．Anomala NCYC 711在生长、发酵能力和氢离子渗漏方面对乙醇的抑制作用均表现敏感,但其存活率变化却与S．Cerevisiae NCYC 431很相似。K．Apiculata NCYC 468在存活、生长和发酵能力方面对乙醇的效应是四个菌种中最敏感的。研究结果还表明,乙醇对生长、发酵能力和氢离子渗漏的作用比它对存活的影响大得多。环境条件也影响酵母对乙醇的耐受性。     

交联脲酶聚集体的制备和初步应用

为提高游离脲酶的稳定性,将游离脲酶用硫酸铵沉淀下来后,以戊二醛作为交联剂对其进行化学交联,制备新型的固定化脲酶交联脲酶聚集体,并对其酶学性质进行研究。交联脲酶聚集体的最适pH、最适温度和K_m值分别为：pH 8.0、70℃和0.021 mol/L。在对交联脲酶聚集体的热稳定性,储存稳定性,和对抗蛋白水解酶的能力的研究中,交联脲酶聚集体均显示了比游离脲酶更高的稳定性。为考察其使用效果和稳定性,将其与包醛氧淀粉联合,用于慢性肾衰动物模型的口服治疗。以腺嘌呤灌胃法(每天300mg/kg, 共30d)制备慢性肾衰动物模型,将23只大鼠随机分为模型对照组(每天以10mL/kg蒸馏水灌胃)、单纯包醛氧淀粉组(给予含包醛氧淀粉饲料,10mL/kg蒸馏水灌胃)和包醛氧淀粉+交联脲酶聚集体组(给予含包醛氧淀粉饲料,交联脲酶聚集体悬浮液10mL/kg灌胃),经2周治疗后, 模型对照组、治疗对照组和治疗组实验前后的肌酐含量均有小幅下降,但差异不显著(P值分别为0.922、0.972和0.225＞0.05)。模型对照组的尿素氮含量变化不明显(P=0.211＞0.05)。治疗对照组和治疗组实验前后的尿素氮含量均明显下降(P值分别为0.004和小于0.001,均小于0.01)。治疗对照组和治疗组实验前后的尿素氮含量下降量比较,有显著性差异(P=0.016＜0.05)。治疗组尿素氮含量下降更明显。说明交联脲酶聚集体和包醛氧淀粉联合使用时,对尿素的清除效率比单纯使用包醛氧淀粉更高。     

粗糙脉孢菌（Neurospora crassa）木糖发酵的研究

研究了不同通氧条件和培养基初始pH等对粗糙脉孢菌（Neurospora crassa）AS 3.1602木糖发酵的影响。结果表明,粗糙脉孢菌具有较强的发酵木糖产生乙醇及木糖醇的能力。通气量对木糖发酵有较大的影响。乙醇发酵适合在半好氧条件下进行,此时乙醇的转化率达到63.2%。木糖醇发酵适合在微好氧的条件下进行,转化率达到31.8%。木糖醇是在培养基中乙醇达到一定浓度后才开始积累。培养基的初始pH对木糖发酵产物有较大的影响,乙醇产生最适pH5.0,木糖醇产生最适pH4.0。在培养基pH为碱性条件时,木糖发酵受到很大的抑制。初始木糖浓度对产物乙醇及木糖醇的产率有很大的影响。葡萄糖的存在会抑制木糖的利用,对乙醇和木糖醇的产生也有很大的影响。     

芽殖和／或附属物细菌群中的一个新属

从我国江苏省如东县掘东垦区大米草根内分离到一体氧化型革氏兰氏阴性细菌。编号4088。该菌株具有两种出芽繁殖方式：子细胞主要从母细胞两端长出柄状附属物,这种附属物末端膨大形成细胞和直接母细胞上生长出子细胞(约占2 0％）。细胞内有聚β-羟基丁酸盐颗粒。细胞外有荚膜。菌落产生β-葫萝卜素黄色素。;呼吸型代谢。从不发酵。好氧生长,无氧情况下行微好氧生长。能沉淀铁锰。能固定大气中的氧,有机化能营养。从糖类和酵类产碱而不产酸。不利用甲醇、甲酸为唯一碳源。DNA中G+C含量为70．1—7 0．4mol％。根据以上特性4088菌株与芽菌和/或附属物细菌群中的某些属相近,但出芽繁殖方式不同于已知属。因此,将4087菌株归属于芽殖和/或附属物细菌群中的一个新属——双殖菌属(Diparefarma gen .nov.Zhou et al.)．模式种为米草双殖菌(Dipareforma spartinacae sp．nov. Zhou et al.) 菌种保藏于中国科学院微生物研究所菌种保藏室。 菌株编号为As1·1 762。     

供氧对产丙三醇假丝酵母产丙三醇发酵研究

研究了产丙三醇假丝酵母(Candidaglycerolgenesis)产丙三醇及副产物与氧供给的关系。摇瓶试验发现其它营养条件一定,玉米浆添加量决定酵母量。在04%的玉米浆和装液比008时产丙三醇最高,副产物乙醇、乙酸和乙酸乙酯最小,玉米浆和装液比影响丙三醇和副产物的形成。在5L的反应器中以搅拌转速控制供氧水平,菌体生长阶段比耗氧速率为28mg/(g·h),在发酵阶段比耗氧速率16mg/(g·h)。适量供氧能得到高产率的丙三醇,而只产生微量的乙醇、乙酸和乙酸乙酯。     

真眼点藻类色素的提取与测定方法

分别采用甲醇、乙醇和丙酮3种有机溶剂提取7种真眼点藻的色素,比较3种有机溶剂提取色素的效果,测定3种有机溶剂色素提取液的吸收光谱,利用分光光度法计算藻的叶绿素a和类胡萝卜素的含量,并比较甲醇和乙醇色素提取液在A₄₇₀和A₆₆₆的最大吸收峰。结果表明:使用乙醇比甲醇和90%丙酮操作更简便、快捷并且毒害低。3种有机溶剂色素提取液的叶绿素a和类胡萝卜素的含量均无显著性差异(P>0.05),提取率基本一致。色素在3种有机溶剂中的吸收光谱相似,甲醇和乙醇的色素提取液在A₄₇₀和A₆₆₆的最大吸收峰并无显著性差异(P>0.05)。乙醇色素提取液可使用Lichtenthaler的公式计算色素含量。     

叶面喷施甲醇和乙醇对万年青生理特性的影响

为了比较甲醇和乙醇对植物生理特性的影响,分别用5％(V/V)的甲醇和乙醇均匀喷洒于温室条件下盆栽培养的万年青叶片上,以喷施蒸馏水的植物为对照,每周喷施2次,喷施3周后分析这两种醇对万年青叶片生长、生理特性及相关光合基因表达的影响.结果表明,喷施甲醇和乙醇均增加了万年青叶片鲜重、可溶性总蛋白质含量、气孔导度、蒸腾速率、胞间CO2浓度、净光合速率、叶绿素a、b及总叶绿素的含量,降低了过氧化氢的含量,提高了质膜H+ ATPase及H+泵活性,并且乙醇的作用效果比甲醇更加明显.RT-PCR分析结果表明,光合作用相关基因叶绿素a/b结合蛋白基因(Cab)和铁氧还蛋白-2编码的基因(2-FdO)在处理12h时被甲醇抑制但却被乙醇诱导,72 h时被甲醇诱导但却被乙醇抑制;两种醇均诱导光系统Ⅱ反应中心PsbP家族蛋白编码基因(PsbP)的表达.由此推测甲醇和乙醇可能在植物中作为信号分子起作用,且乙醇的刺激效果比甲醇更加显著.