用2种新型酶从淀粉中生产海藻糖

林原生物化学研究所通过新找出的作用于糖的2种酶,实现了用比以前低的成本生产功能性双糖——海藻糖的技术,从95年春开始正式生产。据说确立了与麦芽糖等淀粉糖制法几乎相同过程的低成本制作法,如能进行大量生产,就能供应食品级的海藻糖(1公斤200日元)。因价格低,能迅速扩大海藻糖的实际应用范围。作为糖质的制法改变显示了酶法的优越性。林原生物化学研究所今后不仅打算独占这项海藻糖制作技术,而且打算在得到各方面协助后积极普及这项技术。     

用模拟实验小鼠发现摄入海藻糖改善骨质疏松

《日经生物技术》１９９８年９月１４日号第１５页报道：林原研究所利用模拟实验小鼠发现经口服用海藻糖能改善骨质疏松症。将这次小鼠的实验结果用于人类,成人每天口服１０克～３０克就能改善骨质疏松状况。该公司认为海藻糖“作用于骨”的功能,可扩大海藻糖的市场需要...     

利用多糖的术后粘连预防法 尚需解决临床评价法的问题

日本东京大学和风险企业NEXT公司、林原生物化学研究所、大琢制药公司所组成的研究小组开发出了利用海藻糖（trehalose）和羧甲基纤维素（carboxyl metal cellulose）两种多糖的“减少术后粘连的技术”,其中海藻糖正准备进入临床研究阶段。NEXT公司社长铃木茂树说：“这项技术预计将于2010年进入实用化,按这个时间推断．全球范围内预防术后粘连的市场规模约为2000亿日元。我们希望这次开发的技术能赚取200亿日元。”     

信息库

信息库１．用固定化麦芽糖磷酸化酶和海藻糖磷酸化酶双酶系统生产海藻糖海藻糖（α－Ｄ－吡喃葡糖基－１,１－α－Ｄ－吡喃葡萄糖）是一种非还原二糖,作为储备代谢产物广泛分布于各种微生物,昆虫,植物,甚至哺乳动物中。这种甜味剂在食品和糖果加工,诊断和医药工业中...     

利用多糖的术后粘连预防法 尚需解决临床评价法的问题

日本东京大学和风险企业NEXT公司、林原生物化学研究所、大琢制药公司所组成的研究小组开发出了利用海藻糖（trehalose）和羧甲基纤维素（carboxyl metal cellulose）两种多糖的“减少术后粘连的技术”，其中海藻糖正准备进入临床研究阶段。NEXT公司社长铃木茂树说：“这项技术预计将于2010年进入实用化，按这个时间推断．全球范围内预防术后粘连的市场规模约为2000亿日元。我们希望这次开发的技术能赚取200亿日元。”     

利用谷氨酸生产菌大量生产海藻糖

味之素公司宣布确立了大量生产海藻糖的技术,从93年春开始销售其样品,这种海藻糖是用变异谷氨酸生产菌Brevibacterium,以40克/升以上的高浓度从原料糖蜜中生产的,所以成本低。这几年开发了用于医药品和化妆品、食品等的海藻糖。现有的从酵母中抽提的产品价格很高(1公斤3万日元),仅限于试剂水平使用。国内外企业竞相开发海藻糖的低价生产法并开拓市场。美国Calgene公司使用基因重组技术,开发由葡萄糖生产海藻糖的技术,与英国Quadrant Holdings公司设立了合资企业,打算主要事业化用于食品的海藻糖。味之素公司准备利用氨基酸发酵生产法与其对抗。海藻糖是味之素公司首先事业化的第一种糖制品。     

海藻糖的生物合成与分解途经及其生物学功能

海藻糖是一类在干旱、低温、热击或脱水等逆境环境下具有独特抗逆保护作用的二糖,广泛分布于藻类、细菌、真菌和动植物体内。近年来,随着对海藻糖研究的深入,海藻糖已经被广泛应用到食品、医药、化妆品和分子生物学研究等领域。该文简述了海藻糖在生物体内的代谢途径、生物学功能和研究进展,并对灭蚊真菌Pythiumsp.GY1938菌株海藻糖代谢酶基因的研究前景加以展望。     

海藻糖的生产制备及其应用前景

海藻糖是一种广泛分布于细菌、真菌和动植物体内的双糖。在生物体内 ,它不仅作为结构成分和能量物质存在 ,而且在热击和脱水等协迫条件下 ,对生物体和生物大分子起着良好的非特异性保护作用。由于其独特的生物学功能 ,它在食品、分子生物学、医药、化妆品、农业等方面具有广阔的应用前景。简述海藻糖的生产制备、应用研究及其前景展望。     

酶法合成海藻糖研究的新进展

海藻糖（bondooe）是由两个葡萄糖残基经a－l,l键接的非还原二糖,广泛存在于细菌、酵母、真菌、藻类、昆虫中］。海藻糖具有独特而令人感兴趣的生物学功能。例如可以保护蛋白质、生物膜及敏感细胞的细胞壁免受干旱、冷冻、渗透压的变化等造成的伤害,用作不稳定药品、食品和化妆品的稳定剂,多种食品和药品的甜味剂,种子的包衣,冷冻干燥菌株的保护剂l’］等,最近报道海藻糖可保护DNA防止放射线引起的损伤［’］。海藻糖来源目前主要从酵母中提取,但收率较低,成本高,限制了其应用。以往的研究表明,海藻糖在真菌和细菌中的合成主要…     

一株转化淀粉或麦芽寡糖生成海藻糖的菌株D-97鉴定

由东北大田采集的土样中筛选到菌株D-97,该菌株胞内酶可以利用淀粉或麦芽寡糖合成海藻糖。通过生理、形态、结构特征分析及16SrDNA基因全序列与参比菌株的序列比较,菌株D-97与食尼古丁节杆菌的16SrDNA序列同源性高达97．98％,故将该菌株命名为食尼古丁节杆菌D-97（Arthrobacter nicotinovorus D-97)。我们还将D-97菌株与日本林原公司的海藻糖生产苗——节杆菌Q36的有关生理生化特征进行了比较。     

海藻糖生产菌株筛选过程中产物鉴定的研究

在海藻糖生产菌的筛选过程中,微生物胞内酶转化淀粉生成的产物复杂,将产物逐一纯化是非常烦琐的,但又必须确证产物中是否含有海藻糖。本文将薄层层析、高效液相电喷雾电离质谱联用及核磁共振等分析手段综合应用于海藻糖生产菌株的筛选,在酶反应产物不必被纯化的前提下,准确、快捷地鉴定了酶反应产物中的未知糖组分,最终证明食尼古丁节杆菌（Arthrobacter nicotinovorus）D97利用淀粉或麦芽寡糖的酶反应产物中含有海藻糖。该方法在筛选海藻糖及其它功能性葡二糖生产菌株时较为严密。     

海藻糖的长期毒性试验研究

海藻糖是一种由两分子葡萄糖缩合而成的非还原性二糖,它作为生物制品、医药及食品的保护剂和添加剂,已在国内外许多文献中报道。本文通过对大白鼠的长期毒性试验研究,表明海藻糖对人体无潜在危害,是安全的。     

一株转化淀粉或麦芽寡糖生成海藻糖的菌株D-97鉴定

由东北大田采集的土样中筛选到菌株D 97,该菌株胞内酶可以利用淀粉或麦芽寡糖合成海藻糖。通过生理、形态、结构特征分析及 1 6SrDNA基因全序列与参比菌株的序列比较 ,菌株D 97与食尼古丁节杆菌的 1 6SrDNA序列同源性高达 97 98% ,故将该菌株命名为食尼古丁节杆菌D 97(ArthrobacternicotinovorusD 97)。我们还将D 97菌株与日本林原公司的海藻糖生产菌———节杆菌Q36的有关生理生化特征进行了比较。     

海藻糖合酶的研究进展

海藻糖是一种天然存在的非还原性二糖, 对生物膜和蛋白质等大分子有独特的保护作用, 在食品、医药、化妆品等多个领域中都有广泛的发展空间。海藻糖合酶(TreS)是一类分子内转糖苷酶, 专一性地以麦芽糖为底物, 一步转化生成海藻糖, 操作工艺简单、底物价格低廉、应用前景良好。本文综述了海藻糖合酶的酶学性质、催化机理、基因工程以及目前存在的主要问题和拟解决方案。     

海藻糖的生物合成和相关酶的特性

海藻糖［‘］（tlehalose）是一种由两个葡萄糖分子通过a,a—l,l糖昔键连接成的非还原性二糖。海藻糖广泛分布于微生物、植物、动物体内,其含量随生物所处生活环境而变化,是一种典型的代谢应激物。海藻糖不仅可以作为碳源和能源,而且还具有保存生物活力的特殊功能,使生物在许多不利情况（高温、脱水、冷冻等）下,维持细胞膜和蛋白质的稳定,由此可以使食品保鲜,可防止由白蛋白导致的疫苗血源污染,若取代白蛋白,应用于各类疫苗、诊断用品、各种酶、蛋白质、细胞因子、干扰素等,于室温保存数年不失效,并且其价格低廉,故具有应用…     

食品上的应用

961959 将麦芽糖转变为海藻糖的一种新酶[英]/Nishimoto,T.…//Biosci.Biotechnol Biochem.-1995,59(11).-2189～2190[译自DBA,1996,15(2),96-01021] 从土壤中分离了一种能从麦芽糖生产海藻糖的细菌,Pimelobacter SP·R48。为了部分纯化形成海藻糖的酶,在100ml的液体培养基中,于28℃好氧培养R48两天。离心收获细胞并洗涤。将沉淀的细胞(2.5g)悬浮于相同的缓冲液中,超声破碎。离心去掉细     

高密度发酵重组大肠杆菌产海藻糖合成酶

酶法催化是目前生产海藻糖的主要手段。本文中,笔者通过高密度发酵重组大肠杆菌产海藻糖合成酶,进而以麦芽糖为底物,催化生产海藻糖。首先根据大肠杆菌高密度发酵条件要求,在揺瓶中对基因工程菌进行了培养基、发酵条件和诱导条件的逐一优化;然后在5 L和50 L发酵罐中进行批次补料发酵的放大实验;最后采用变指数-恒pH法的策略发酵重组大肠杆菌,结果OD_(600)达到97,海藻糖合成酶酶活达到(24 000±350) U/mL,实现了海藻糖合成酶的重组大肠杆菌高密度发酵生产,极大提高了海藻糖的生产效率。     

海藻糖介导的信号转导与植物抗逆性

海藻糖是一种非还原性二糖,它广泛存在于细菌、真菌、酵母、昆虫、无脊椎动物和植物等生物体内。海藻糖不仅作为碳水化合物的储备,而且还是一个多功能分子。海藻糖作为一种信号分子,启动信号转导级联反应,改变基因表达和酶的活性,与激素也有一定的关系。采用基因工程和通过外源施加的方法增加海藻糖在植物体内的积累可以提高植物的抗逆性,这为提高农作物的抗逆性提供了新的策略。     

海藻糖微生物酶法合成机制的研究

来源于嗜酸热古菌芝田硫化叶菌(Sulfolobus shibatae)B12的麦芽寡糖基海藻糖合酶(MTSase)和麦芽寡糖基海藻糖海藻糖水解酶(MTHase)基因在大肠杆菌中获得表达。将获得纯化的两个酶,分别以麦芽寡糖和淀粉为转化底物,在pH5.5,60℃条件下合成海藻糖。从反应产物分析结果可知,两个酶合成海藻糖时能利用的最小底物是麦芽四糖,海藻糖产率与麦芽寡糖链长正相关。同时还发现两个酶都具有轻微的α-1,4-葡萄糖苷酶活性,能在麦芽寡糖还原末端水解α-1,4糖苷键,生成葡萄糖分子,其反应最小底物分别是麦芽三糖和四糖。推测海藻糖合成酶可能有两个不同的催化活性中心。     

高温对家蚕三品系血淋巴中糖水平的影响（英文）

家蚕Bombyx mori的两个二化性品系热耐受型NB4D2和热敏感型CSR2均适合于温带气候,而多化性的PM（Pure Mysore) 品系适合于热带气候,将这3种品系5龄幼虫分别置于32℃和36℃的高温下,观察高温对其5龄幼虫至蛹期血淋巴中糖含量及海藻糖酶活性的影响。结果表明： PM幼虫和蛹的死亡率均小于NB4D2和CSR2。在蜕皮期间血淋巴海藻糖水平较高,而葡萄糖水平及海藻糖酶活性较低。32℃和36℃的高温下,幼虫蜕皮期间血淋巴中糖含量及海藻糖酶活性仅在其各自的水平上表现为小幅度的增加。蜕皮后幼虫血淋巴中海藻糖含量显著下降,而葡萄糖含量和海藻糖酶活性显著上升。在较高温度下,蜕皮后幼虫血淋巴中海藻糖含量下降幅度更大,而葡萄糖含量及海藻糖酶活性上升水平也更加显著。25±1℃下取食幼虫血淋巴中葡萄糖含量显著下降,海藻糖含量显著上升;3℃和36℃下PM 和NB4D2取食幼虫血淋巴葡萄糖和海藻糖含量以及海藻糖酶活性增加,而CSR2均减少或降低。吐丝幼虫血淋巴中葡萄糖含量及海藻糖酶活性显著下降,海藻糖小幅度下降。而在较高温度下,耐热型PM 和NB4D2吐丝家蚕血淋巴糖含量含量和海藻糖酶活性明显增加,而热敏感型CSR2的则明显下降。这3种品系蛹发育期的血淋巴糖含量及海藻糖酶活性均下降。在两较高温度下,PM蛹期血淋巴糖和海藻糖酶活性增加,而NB4D2 36℃时增加幅度小于32℃时。对于CSR2,32℃时观察到其血淋巴葡萄糖含量增加,但当环境温度增加到36℃时其血淋巴葡萄糖含量降至正常水平下。然而,当CSR2的蛹置于32℃和36℃时血淋巴海藻糖含量及其酶活性下降,且36℃时下降幅度更大。因此,桑蚕对高温的适应取决于家蚕的品系及发育阶段,并可通过其血淋巴糖及海藻糖酶活性水平进行验证。