大鹏湾维生素B1、B12与赤潮

海湾及近海水域 ,因某些浮游生物爆发性繁殖引起的赤潮异常现象时有发生 ,已构成水产资源的严重破坏。为弄清赤潮发生的机理 ,已有许多作者进行过研究 ,现已知水温、盐度、溶解氧、ｐＨ、Ｎ、Ｐ ,以及Ｆｅ、Ｍｎ、Ｓｅ等微量元素都是发生赤潮的重要环境因子[1 ]。近年来通过生态实验研究 ,发现维生素Ｂ1 、Ｂ1 2 (以下简称Ｂ1 、Ｂ1 2 )亦有促进赤潮生物生长繁殖的作用[2 ]。本文报道 1 991年对大鹏湾海域水样中Ｂ1 、Ｂ1 2 含量的测定结果 ,并对赤潮发生与其相关性进行探讨。1　采样布点和分析方法1 .1　采样布点大鹏湾盐田海域的Ｓ0 、Ｓ1…     

微生物传感器测定维生素B12的研究

将大肠杆菌(Escherichia coli)215用吸附法固定于醋酸纤维素膜上,与氧电极配合组成微生物电极,建立了对维生紊B₁₂的快速测定系统。测定浓度范围5×10^-6mg—2．5×10^-5mg／ml;测定温度范围在28—39℃;最适Ph为6．7—7．8,测定一个样品所需时间为2h,比常用的生物学测定方法所需时间缩短10倍以上。该系统对维生素B₁₂重复测定的相对误差为±3％。固定化菌体在－25℃保存25天后再进行测定,应答电流不低于初始值的92%。     

HPLC法测定B族维生素片中维生素B12的含量

目的:建立高效液相色谱法测定B族维生素片中维生素B12含量。方法:采用GRACE Alltima amino氨基柱(5μm,4.6*250mm),流动相为3%磷酸溶液-乙腈(25:75),检测波长361nm。结果:平均回收率为99.47%,RSD%为0.55%。结论:本方法操作简便、准确度高,耐用性好,可用于测定维生素B1 2的含量。     

芽孢杆菌B1、B2对豌豆尖镰孢菌抗菌机理的研究*

同、异步培养结果表明:芽孢杆菌B₁、B₂对豌豆尖孢镰孢菌(Fusarium oxysporum Schl f.sp.pisi)有很强的抑菌作用。经B₁、B₂无菌液处理后的病原菌由灰白色变为白色,气生菌丝增多且纠结成团。抗菌显微特征是:导致病菌孢子和菌丝体膨大、畸形、原生质凝聚、孢子不萌发或萌发异常、菌丝生长点产生大量泡囊、生长受阻,后期菌丝体断裂、泡囊破裂、原生质外泄。B_{1相似文献}   

荧光法研究维生素B6和芦丁与白蛋白的相互作用

芦丁是一些中药的有效成份。研究药物与白蛋白的作用能说明蛋白质的结构与功能的关系和药物的作用机制。本文应用荧光偏振和能量转移技术研究了药物Vit B₆和芦丁与白蛋白的作用。给出了这些药物分子与白蛋白的缔合离解常数,Vit B₆和芦丁在人血清白蛋白中的结合位置与第214位色氨酸残基的距离分别为23.4Å和24.02Å。     

维生素B12对大腸杆菌β-半乳糖苷酶合成的作用

(一)大腸杆菌Escherichia coli K12M-1 的营养试验及细菌细胞内游离氨基酸变化的分析,确定为稚生素B12缺陷型变种。 (二)在诱导形成β-牛乳糖苷酶时,甲硫氨酸为其必需的物质,如果同时加入B₁₂,则形成诱导酶的活力显著提高。 (三)当有甲硫氨酸存在于诱导系兢中时,a-硫代尿嘧啶有抑制大腸杆菌K12M-1菌株对β-半乳糖苷酶合成的作用,以B12代替甲硫氨酸,这种抑制作用不明显,如果甲硫氨酸与B12同时加入,则B₁₂有抵制a-硫代尿嘧啶对酶合成的抑制作用。 (四)应用标记甘氨酸-1-C14作试验,分析甲硫氨酸与B12对β一半乳糖苷酶合成的作用, 结果指出,甲硫氨酸或B12均能增加甘氨酸-1-C14的参入。如B12加入到含有甲硫氧酸的诱导系统中,则酶此活力较甲硫氨酸或B12单独存在时为高。     

异育银鲫幼鱼对饲料中维生素B6需求量的研究

通过8周的生长实验,研究饲料中维生素B6的含量对异育银鲫(Carassius auratas gibelio)(初始体重3.3 g)生长、饲料利用及生化指标的影响。配制7组等氮等能的饲料,饲料中维生素B6的含量分别为0、1.11、3.29、5.41、12.7、13.3和27.3 mg/kg。实验结果表明,饲料中缺乏维生素B6会显著降低异育银鲫的特定生长率、饲料转化效率、蛋白质效率、存活率、肝体指数,但对摄食率没有显著影响。饲料中维生素B6的含量为12.70 mg/kg时,肝脏谷草转氨酶活性(GOT)活性最强,并且显著高于对照组(P<0.05)。在饲料中维生素B6含量为5.41 mg/kg时,肝脏谷丙转氨酶活性(GPT)活性显著提高。当饲料中维生素B6含量为12.7 mg/kg时,肝脏中维生素B6的沉积最高。通过折线法,根据特定生长率和饲料中维生素B6含量的关系,得出异育银鲫最大生长时饲料维生素B6的适宜含量为0.95 mg/kg;而以肝脏GOT和GPT活性为指标时,其饲料维生素B6的适宜含量分别为11.36和7.62 mg/kg。     

饲料中黄曲霉毒素B1、G1和棕曲霉毒紊A的薄层层析测定法

饲料样品25g,用100 ml乙睛:4%氯化钠溶液(9:1)抽提,吸取25 ml提取液,以石油醚脱脂二次,加0.1mol/L碳酸氢钠溶液12.5ml后,用氯仿提取二次,氯仿层放入蒸发皿中,于60℃水浴挥干,残渣以苯乙睛溶解定容为1ml,供测定黄曲霉毒素B₁、 G₁。碳酸氢钠水层中加1mol/L盐酸1ml左右调节pH值为4-5,再以氯仿提取二次,氯仿层放人蒸发皿中,于60℃水浴挥干,残渣以苯乙酸溶解定容至1ml,供测定棕曲霉毒素A。黄曲霉毒素B₁、 G₁的薄层板以乙醚横展、丙酮氯仿纵展。棕曲霉毒素A的薄层板以丙酮氯仿横展,甲苯乙酸乙醋90%甲酸纵展。展板后分别在波长为365nm和254nm的紫外光下观察。如为阳性样品,标记后用薄层扫描仪定量。棕曲霉毒素A阳性样品应先喷碳酸氢钠乙醇溶液后再扫描。本测定方法对三种毒素的最低检出量均为0.2ng/点,最低检出狠量均为3.2ppb。     

高效液相色谱法分离和鉴定腐马素B1

腐马素是由串珠镰刀菌产生的真菌毒素,其中腐马素B1可引发马脑白质软化症等疾病。本文用高效液相色谱法从串珠镰刀菌玉米培养物中分离出了腐马紊B1并通过紫外光谱和快原子轰击质谱进行了鉴定。     

脱氮假单胞菌生产维生素B12过程中粪卟啉Ⅲ的测定及发酵调控

脱氮假单胞菌发酵生产维生素B₁₂过程中,副产物粪卟啉Ⅲ的积累对产物的代谢合成和分离提取有很大的影响。建立了发酵液中粪卟啉Ⅲ的HPLC快速测定方法,发酵液处理后直接进样测定,检测线性范围为12~275 μg/ml,重复性好。研究了不同供氧水平、二氧化碳浓度和pH值对发酵过程中维生素B₁₂和粪卟啉Ⅲ代谢合成的影响,并在120吨发酵罐中进行了发酵过程优化控制。结果表明:在发酵过程产物的合成期控制适当的供氧水平、控制二氧化碳浓度在8.6±0.8%、维持pH值在7.0±0.12能明显抑制卟啉Ⅲ的生物合成,同时使维生素B₁₂产量提高15%。     

碱提水溶性安络小皮伞多糖的研究——B1与B2的分离纯化及结构研究

从曾用水提取过水溶性多糖的安络小皮伞残渣中用稀碱液提取了二种水溶多糖B₁和B₂。它们分别给Sepharoe 4B柱,2B柱层析,超离心分析,醋酸纤维薄膜电泳鉴定,表明B₁和B₂均为纯多糖。采用气相色谱,红外光谱,淀粉酶解,甲基化分析等方法确定了它的基本结构。     

黑曲霉对黄曲霉生长、产毒及黄曲霉毒素B1的影响

目的研究黑曲霉对黄曲霉生长、产毒的抑制作用及对AFB1的降解作用。方法将黑曲霉分别与黄曲霉、AFB1共同培养,定期测定培养液pH、菌丝体干重、黄曲霉孢子数、AFB1含量。结果黑曲霉与黄曲霉混合培养时,黄曲霉孢子数、AFB1含量均比单独培养的低,2组之间差异有统计学意义(P<0.05),抑制率达到68.06%~91.52%;加入黑曲霉后,AFB1含量降低,实验组与对照组之间差异有统计学意义(P<0.05),降解率为46.19%。结论黑曲霉既能抑制黄曲霉生长、产毒,又能降解AFB1。     

Recent advances in microbial production of δ-aminolevulinic acid and vitamin B12

δ-aminolevulinate (ALA) is an important intermediate involved in tetrapyrrole synthesis (precursor for vitamin B₁₂, chlorophyll and heme) in vivo. It has been widely applied in agriculture and medicine. On account of many disadvantages of its chemical synthesis, microbial production of ALA has been received much attention as an alternative because of less expensive raw materials, low pollution, and high productivity. Vitamin B₁₂, one of ALA derivatives, which plays a vital role in prevention of anaemia has also attracted intensive works. In this review, recent advances on the production of ALA and vitamin B₁₂ with novel approaches such as whole-cell enzyme-transformation and metabolic engineering are described. Furthermore, the direction for future research and perspective are also summarized.     

黄曲霉毒素B1的免疫检测I．抗原的制备*

黄曲毒素B₁(aflatoxln B₁,简称 AFB₁)抗原的制备是AFB₁免疫检测研究的第一步。研究了回流温度和时间对黄曲霉毒素B₁肟(aflatoxin B₁ Oxime,简称AFB₁O)产生的影响,通过统计分析得到85℃,回流2h AFB₁O的产率最高,为89％。在此基础上进一步研究了AFB₁O与载体蛋白——牛血清蛋白(BSA)反应的起始摩尔比对产物摩尔比的影响,随着反应起始摩尔比的增加,产物的摩尔比也稍有增加,但是增加幅度不显著,而AFB₁O的利用率则随着起始摩尔比的增加而减少。选择20：1为AFB₁O与牛血清蛋白BSA的反应起始摩尔比,得到摩尔比为6.3:1的AFB₁O与BSA的连接物。     

基于宏基因组研究植物乳酸菌或博落回提取物对山羊回肠微生物合成维生素B12的影响

【目的】探索研究反刍动物胃肠道微生物合成维生素B₁₂的方法,并评估植物乳酸菌或博落回提取物对断奶山羊回肠食靡微生物合成维生素B₁₂的影响。【方法】选取体重相近年龄相仿的断奶黑山羊20只,随机分为对照组(CON, n=7)、乳酸菌组(LAC, n=7)和博落回组(MAC, n=6)。CON组饲喂普通的日粮,LAC组饲喂基础日粮+10 g/d的植物乳酸菌(Lactobacillus plantarum P-8 strains, 4.0×10⁹ CFU/g),MAC组饲喂基础日粮+0.3 g/d的博落回提取物(Macleaya cordata 3.75%)。试验结束后,采集回肠中段食靡样品。利用宏基因组测序技术,比对最新功能基因数据库VB12Path和公共数据库KEGG,分析植物乳酸菌和博落回提取物对山羊回肠食靡微生物合成维生素B₁₂的影响。【结果】结果显示,比对VB12Path数据库共注释到55个与维生素B₁₂合成相关的基因。与CON组相比,LAC组和MAC组中合成维生素B₁₂基因的丰富度和均匀度降低(P<0.05）。3组间基因的β多样性也有显著的差异(P<0.05);比对KEGG数据库共注释到49个与维生素B₁₂合成相关的基因,LAC组的多样性与CON组没有差异,但MAC组的α多样性显著降低(P<0.05)。值得注意的是,比对VB12Path数据库和KEGG数据库均发现LAC组和MAC组中参与前咕啉2合成途径、参与无氧合成途径、有氧合成途径、参与重排转换途径以及腺苷钴胺素合成途径的部分基因(gltX、cbiT、cobT和btuD等)的丰度均显著地高于CON组(P<0.05)。【结论】2个数据库比对后的相似结果表明博落回提取物在对断奶山羊回肠微生物合成维生素B₁₂相关代谢上与植物乳酸菌的作用相似,均可以通过改变其多样性和提高部分关键基因的丰度,从而影响微生物合成维生素B₁₂的潜能,为后期博落回提取物和植物乳酸菌在畜牧养殖中的运用提供一定的理论支撑。此外,2个数据库比对的差异提示未来研究胃肠道微生物维生素B₁₂相关代谢时,应用多个数据库比对,能更全面精确地进行评价,为后期分析过程奠定研究基础和提供新的思路。