瑞香狼毒提取物对试验动物急性毒性及活性的初步研究

采用急性经口、眼刺激、皮肤试验方法,研究了瑞香狼毒乙酸乙酯萃取物的急性毒性作用,同时以番茄晚疫病菌为供试菌,研究了瑞香狼毒提取物的抑菌活性.初步研究表明,瑞香狼毒乙酸乙酯萃取物对小白鼠经口急性毒性为低毒,对白兔的急性皮肤刺激属无刺激性,对白兔的眼刺激属轻度刺激性,对鲫鱼的毒性属于中毒级;瑞香狼毒乙酸乙酯萃取物及其分段物流分B、c、D对番茄晚疫病菌有较好的抑制活性,这为瑞香狼毒乙酸乙酯萃取物进一步开发为产品提供了毒理学依据.     

乙型肝炎疫苗-卡介苗联合疫苗动物安全性试验研究

为评价乙型肝炎疫苗-卡介苗联合疫苗的安全性,分别给豚鼠皮下注射、小鼠皮内注射乙型肝炎疫苗-卡介苗联合疫苗或卡介苗,豚鼠每2周称体重一次,观察6周,解剖检查其病理变化;小鼠也进行病理检查。结果乙型肝炎疫苗-卡介苗联合疫苗接种组和卡介苗接种组的豚鼠体重均增加,疫苗注射局部及各脏器病理改变相似;小鼠接种局部皮肤病理改变也未见差异。结论为乙肝表面抗原(HBsAg)没有促使卡介苗毒力增强,乙型肝炎疫苗-卡介苗联合疫苗接种实验鼠是安全的。     

用甘蔗渣生产单细胞蛋白的初步试验

本文报道利用微生物混合培养技术,以甘蔗渣为唯一碳源、生产单细胞蛋白的初步研究。将２株纤维单胞菌、３株霉菌、１株酵母进行分别培养和不同组合的培养,结果发现,混合培养较单株培养好。培养基在未经灭菌的情况下,以（ＮＨ４）２ＳＯ４为氮源,ｐＨ６．０,于３２℃振荡培养１０８ｈ,发酵产物的粗蛋白含量是甘蔗渣原材料的１２倍以上。     

AS 1398蛋白酶对各种不同蛋白底物特异性的研究

AS1398中性蛋白酶,主要用于皮革脱毛。胶原蛋白酶、弹性蛋白酶、糖苷酶是酶法生皮脱毛中所涉及到的最主要的蛋白水解酶。在目前的实际应用中,一般以Folin单位计量使用。对未经处理而合有多种酶的粗粉来说,是不易得到理想的试验结果的。本文报道以AS1398中性蛋白酶为材料,通过硫酸铵盐析的各组分对不同底物作用表现的活力的结果。     

基因转移治疗血友病B的动物试验和安全性探讨

本文报道了皮肤成纤维细胞基因治疗血友病Ｂ的新西兰大白兔试验及安全性检测。转有人凝血因子ＩＸｃＤＮＡ的兔皮肤成纤维细胞包埋于胶原基质中,然后进行不同方式的自体或同种异体移植,移植兔血浆中人ＩＸ因子蛋白有高水平的表达且持续稳定,腹腔移植有ＲＳＦ－ｐＣＭＶＩＸ转化细胞的兔血浆中人ＩＸ因子表达水平达１００ｎｇ／ｍｌ．持续５个月以上,腹腔移植有ＲＳＦ－ｐＣＭＶＩＸｌ转化细胞的兔血中人ＩＸ因子表达水平达２９５     

石油发酵生产AS.1.398蛋白酶的中试鉴定会

由北京市第一轻工业局主持,于1979年12月24日在北京召开了石油发酵生产AS.1.398蛋白酶的中型试验技术鉴定会。参加鉴定会的有来自全国13个科研和生产单位的22名代表。会议期间,北京市发酵工业研究所报告了利用AS.1.398菌株进行石油发酵生产蛋白酶的试验情况。     

西双版纳两栖纲及爬行纲动物初步调查

西双版纳两棲纲及爬行纲动物调查,自1957年2月8日开始工作,调查队从昆明出发经玉溪、元江、墨江、普洱等地(参考调查路线图),先后在版纳勐海即佛海(第一次2月16日至3月10日,第二次4月9日至4月11日)、橄榄坝(3月14日至3月22日)、版纳勐养(3月30日至4月11日)、尤景洪即车里(4月12日至4月18日)、思茅(第一次2月8日至2月14日第二次4月29日至5月9日),至1957年5月9日约计三个月左右的时间方调查完毕。     

Doppel蛋白及其对动物生殖的影响

Doppel(简称Dpl)是新发现的一种糖基磷脂酰肌醇锚定(GPI)结构糖蛋白, 在结构上与朊蛋白(Prion protein, PrP)相似, 其编码基因位于朊蛋白编码基因(Prion protein gene, PRNP)下游, 但在生理功能上两者差异较大。Dpl蛋白在成年动物体内的表达主要集中在睾丸组织, 对雄性动物精子完整性、活力以及维持正常受精能力等生殖功能具有重要作用。以下主要综述了Dpl蛋白的生物学特征、生理功能以及对雄性动物生殖调控的影响, 旨在为Dpl蛋白的功能研究和雄性动物生殖调控研究提供理论参考。     

家禽的无性杂交——移换蛋白试验初步报告

移换蛋自是家禽无性杂交的方法之一。根据米丘林学说关于有机体与其生活条件的统一性,生活条件的改变会引起生物相应的变异,所以把正在发育期的蛋白(营养物质)予以调换,使家禽的胚胎受生活环境的变换而发生性状改变、生活力加强,从而培育新品种,这是近年来苏联生物学家鲍哥留勃斯基((?)马施塔列尔((?))、鲁达科夫((?))等的实验所获得的辉煌成就。他们育成鸡的斯品种,在形态方面有了显著的变异,半岁鸡的体重达2,000克,同时杂种鸡的生活力加强了。     

对一未知动物材料Cytb基因分析及初步鉴定

采用通用引物L14724,H15149和PCR直接测序技术对一未知动物材料的Cytb基因进行分析,获得了425bp 的DNA序列,比较发现与獐亚科的獐只存在2个碱基差异,NJ和UPGMA法构建的分子进化树一致,均表明其首先与獐聚类,初步推测其为獐。     

动物蛋白资源的开发利用

蛋白质是生命的构成物质,蛋白资源不足是当今世界存在的四大危机之一。统计资料表明,全世界约有2/3的人缺乏蛋白质。我国蛋白质消耗水平更低,只有发达国家的一半,并略低于第三世界国家的平均水平。特别在人口急剧增长的趋势下,寻求蛋白质新资源以补充未来粮食的不足,成了摆在我们面前的一项迫切任务;随着养殖业的飞速发展,配合饲料工业的崛     

渝17S对低温胁迫的响应及耐冷机制初步研究

重庆及西南稻区水稻幼苗期倒春寒频发,常常导致秧苗生长迟缓,白化、烂秧等发生,制约了优质水稻安全生产和轻简化技术的应用.本研究以耐冷性较强的渝17S和对低温敏感的Y58S为材料,对比研究了3叶龄幼苗经4℃低温处理后,二者可溶性糖、海藻糖、脯氨酸、丙二醛和过氧化氢的含量,超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和抗坏血酸过氧化物酶的活性...     

ANKRD17蛋白抗体的制备、纯化及检测

目的：制备ANKRD17（P260）蛋白的兔多克隆抗体,以与抗原相结合的方法进行抗体的纯化,并利用纯化的抗体对该蛋白进行细胞内免疫荧光检测。方法：构建表达GST—ANKRD17C端融合蛋白的质粒,在大肠杆菌中诱导表达;制备GST—ANKRD17C端抗原融合蛋白后免疫家兔,对获得的兔多克隆抗血清进行亲和纯化;纯化后的抗体经过Western blot鉴定,用于细胞免疫荧光染色检测。结果：获得较高效价的血清抗体,并对血清抗体进行了纯化;利用纯化的抗体对ANKRD17蛋白进行了细胞内免疫荧光检测,发现改蛋白定位于细胞质中。结论：制备得到的纯化抗体为研究ANKRD17蛋白的功能打下了必要的基础。     

MiniSOG蛋白的单克隆抗体制备及初步研究

单线态氧产生者(mini singlet oxygen generator,miniSOG)是改造于拟南芥向光素2蛋白而获得的小分子荧光黄素蛋白,由106个氨基酸残基组成。miniSOG被广泛用于电镜及荧光显微镜,并被广泛用于发色团辅助的光灭活(Chromophore-assisted light inactivation,CALI)蛋白、DNA或RNA,并结合免疫光敏用于癌症的治疗,以及结合细胞消融用于神经科学、免疫生物学等。但是目前国内并无商品化的miniSOG抗体,为了辅助课题研究,制备抗miniSOG蛋白的单克隆抗体,本研究根据miniSOG基因的ORF区序列构建miniSOG-GST重组蛋白的原核表达载体PGEX-4T-1-miniSOG,然后将该重组质粒转化于BL21感受态大肠杆菌中,异丙基硫代半乳糖苷(Isopropylβ-DThiogalactoside,IPTG)诱导融合蛋白的表达,并经亲和层析方法进行纯化。将纯化后的重组蛋白免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术制备单克隆抗体。筛选获得稳定分泌抗miniSOG的单克隆抗体细胞株,最终选取性能最优的4F9细胞株进行小鼠腹水制备并纯化。单抗4F9亚型为IgG1/Kappa,腹水滴度达到1∶200 000,纯化抗体灵敏度达到5 ng/mL。并通过Western Blot、免疫荧光及免疫组化方法进行特异性鉴定,该单克隆抗体能特异性识别转染细胞和转基因小鼠脑组织中的miniSOG蛋白。本研究在国内首次制备了miniSOG单克隆抗体,将丰富其在其它方面的应用。     

非洲猪瘟病毒内囊膜蛋白p17与宿主互作蛋白的初步鉴定

非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)的感染导致猪的死亡率高达100%,给养猪业造成毁灭性灾难。因此,开展针对ASFV感染复制的研究有着重大的意义。目前发现ASFV有超过150个开放阅读框,其中D117L基因编码的内囊膜蛋白p17参与病毒二十面体结构的形成,但是对p17调控宿主细胞功能的机制知之甚少。研究通过免疫沉淀技术联合蛋白质谱分析,初步筛选出与ASFV p17潜在的宿主互作蛋白。通过进一步免疫共沉淀技术和激光共聚焦实验确认了p17与线粒体外膜蛋白TOMM70(translocase of outer mitochondrial membrane 70)、热休克蛋白HSPA8(heat shock 70 kDa protein 8)的互作。该研究为进一步探索p17在ASFV感染过程中的功能提供了重要信息。     

Cry2Ab蛋白对龟纹瓢虫的安全性研究

【目的】转基因作物对非靶标昆虫的影响是转基因作物环境安全评价的重要内容,研究Cry2Ab蛋白对龟纹瓢虫的影响,对转基因作物的环境安全评价具有重要意义。【方法】采用实验动物学、分子生物学等方法,研究Cry2Ab蛋白对龟纹瓢虫发育历期、成虫体重、雌雄比例及体内氨基酸种类和含量的影响。【结果】与蔗糖对照组相比,Cry2Ab蛋白对龟纹瓢虫不同龄期的发育历期、成虫体重和雌雄比例均无明显差异,对体内氨基酸种类和含量也没有显著差异。【结论】Cry2Ab蛋白对龟纹瓢虫的生长发育及代谢无显著影响。     

水通道蛋白对动物机体健康影响研究进展

水通道蛋白(aquaporins, AQPs)是一种重要的跨膜通道蛋白,在动物机体不同组织器官(脑、肝脏、肾脏、肠道等)中先后被发现,并具有特殊生物学功能.研究表明, AQPs不仅承担着动物机体内水和部分小分子物质的运输,而且在动物腹泻、便秘、应激和免疫等方面也发挥着关键作用.目前,关于AQPs的研究主要集中于对AQPs结构功能的挖掘,用敲除小鼠构建AQPs缺失模型并探讨其对人类机体健康的作用机制,以及AQPs对畜禽健康作用效应的探讨.本文主要综述了近年来AQPs对动物机体健康影响的研究进展,特别是对畜禽健康的营养调控策略进行了前景展望.同时结合生物信息学的方法预测畜禽与鼠AQPs基因和蛋白的同源性,以期为AQPs在动物营养研究及科学应用上提供理论参考.     

阴香内生真菌Y-74鉴定及其次级代谢产物的初步研究

本研究主要是对阴香内生真菌菌株Y-74进行鉴定并对其次生代谢产物进行分离。运用ITS r DNA分子鉴定法鉴定菌株。通过对菌株Y-74进行发酵,经反复硅胶柱层析、葡聚糖凝胶柱层析从发酵液活性组分中分离得到一化合物,标为化合物(1)。采用GC-MS确定了该化合物的纯度,通过理化方法、1H NMR、13C NMR等手段鉴定其化学结构。分离纯化得到的化合物(1)为橘霉素A,相关文献表明橘霉素A具有一定的抗肿瘤活性,为进一步研究代谢物及其活性奠定了基础。     

风疹病毒衣壳蛋白与宿主细胞相互作用蛋白的初步筛选及分析

风疹病毒(Rubella virus,RV)的衣壳蛋白(Capsid protein,CP)不仅是病毒颗粒的重要组成部分,而且还可以通过与宿主蛋白之间的相互作用来调控病毒的转录和复制.为了系统研究衣壳蛋白与宿主蛋白之间的相互作用关系,我们从RV基因组中克隆获得衣壳蛋白基因序列,将该序列导入含有eXact-6His串联亲和纯化标签的慢病毒表达载体中,并构建了稳定表达eXact-6His-Capsid融合蛋白的293T细胞系.通过eXact和6His标签的两次亲和纯化获得衣壳蛋白相互作用蛋白复合物,质谱检测并筛选后发现22个可能与衣壳蛋白相互作用的宿主蛋白.随后构建衣壳蛋白的相互作用网络并进行功能学分析,发现其相互作用蛋白主要参与病毒感染、RNA剪切、细胞凋亡及酶相关通路等过程.