肠黏膜屏障与肠道菌群的相互关系

人类肠道中微生物群与肠道环境相互作用以维持机体健康。肠黏膜屏障主要由黏液层、肠道菌群、肠道免疫系统和肠上皮细胞本身的完整性等构成。肠道作为直接与大量菌群接触的器官,其屏障功能在肠道健康中的作用尤为显著。肠道菌群与肠道屏障相互作用,保持肠道菌群与肠道屏障相对稳定,肠道菌群参与肠道免疫反应的建立,共同建立机体天然防御系统,在保持肠道免疫的动态平衡中具有重要作用。当两者之间的平衡被打破时,可诱发功能性胃肠病（如肠易激综合征）及免疫相关性疾病（如炎症性肠病）。本文主要阐述肠黏膜屏障与肠道菌群之间的相互关系以及与肠道屏障功能障碍相关的肠道疾病。     

肠黏膜屏障与病原细菌感染

人的肠道是一个非常复杂的环境,在这里存在有数量庞大的多种多样的微生物群落,它们的合集又通称为肠道菌群(gut microbiota)。通常情况下,人体与肠道菌群和平共处,互利互惠。肠道内环境与微生物的稳态主要依赖于肠黏膜的存在,它包括了上皮细胞层、固有层和黏膜肌层。肠黏膜协同其分泌的黏液层、黏膜免疫系统、以及其上依附的肠道菌群等一同组成了肠黏膜屏障,以抵御各种外界不利因素,尤其是病原细菌的侵袭。本文旨在概述肠道黏膜屏障与部分相关常见病原细菌感染机制的研究进展,并为科学研究和临床诊疗提供新思路。     

短链脂肪酸对肠黏膜屏障的影响

肠黏膜屏障具有将致病性抗原等肠内物质与内环境隔离的功能,以维持内环境的相对稳定和机体的正常生命活动。其功能的维持依赖于人肠黏膜上皮细胞、肠道内正常菌群、肠道内分泌物和肠相关免疫细胞之间的功能协调,而其功能的发挥又受体内许多信号分子的影响。短链脂肪酸（short-chain fatty acids,SCFAs）就是其中一种重要的信号分子。SCFAs是肠道菌群的主要代谢产物之一,是肠道菌群与宿主代谢相互作用的媒介。宿主体内的SCFAs主要来自肠道菌群对膳食纤维的酵解,越来越多的研究证实,SCFAs不仅可以被肠道菌群利用,还可调节肠黏膜屏障及多种组织器官的代谢。本文主要就SCFAs对肠黏膜屏障的影响进行综述。

     

肠道菌群和肠黏膜屏障在类风湿关节炎中的作用CSCD

类风湿关节炎（rheumatoid arthritis,RA）是一种自身免疫性疾病,致畸率与致残率较高,发病机制尚不清楚,目前尚未有特效药可完全治愈。近年来,国内外相关研究表明RA的发病机制与肠道菌群和肠黏膜屏障密切相关。积极调节肠道菌群和改善肠黏膜屏障可有效缓解RA的关节炎症状,这可能作为RA干预的新靶点。肠道菌群失调引起肠道微生态失衡,一系列有害物质侵入并诱发肠道炎症反应,导致肠道黏膜屏障功能障碍,可能参与RA的发病,但具体作用机制还需进一步明确。本文对肠道菌群和肠黏膜屏障在RA中的具体作用及影响进行总结归纳,以期为治疗RA提供新方向。     

四联活菌制剂对危重症患者肠屏障功能障碍的影响及疗效观察

目的探讨双歧杆菌、嗜热链球菌、保加利亚乳杆菌和嗜酸乳杆菌四联活菌制剂对危重症患者肠道屏障功能的影响及疗效观察。方法选择新疆维吾尔自治区人民医院重症监护室2014年5月至2015年2月收治的危重症患者中64例肠道屏障功能障碍的患者,按照随机数字表法随机分为观察组和对照组。两组患者均给予基础治疗加营养治疗。在营养治疗方面,对照组给予常规营养治疗,观察组在常规营养治疗的基础上加用四联活菌制剂,800mL/d。观察两组患者在治疗前及治疗后7、14d外周血二胺氧化酶(DAO),血浆D-乳酸,血清内毒素的变化;观察两组患者腹泻治疗情况。结果两组患者治疗后7、14d肠黏膜屏障功能3项指标有明显降低,观察组治疗14d后肠黏膜屏障功能3项指标较对照组降低幅度更大,差异有统计学意义(P0.01)。患者治疗腹泻总有效率观察组为96.7%,对照组为70.0%,两组间比较差异有统计学意义(P0.05)。结论四联活菌制剂可以明显改善危重症患者肠道通透性,同时改善肠道微生态平衡,修复肠黏膜屏障功能,对危重症患者腹泻有显著的治疗作用,进而改善患者的预后,提高临床疗效,应在临床上推广应用。     

多联益生菌对5-氟尿嘧啶诱发大鼠肠道菌群紊乱及 肠黏膜损伤的保护作用研究

摘要：目的 研究多联益生菌对5-氟尿嘧啶（5-Fu）诱发大鼠肠道菌群紊乱、肠黏膜损伤以及脾脏损伤的保护作用。方法 28只SPF级SD大鼠随机分为正常组、5-Fu+生理盐水组、5-Fu+低剂量益生菌组和5-Fu+高剂量益生菌组,每组7只。所有大鼠于化疗结束后第3天处死,应用PCR-DGGE技术测定肠道菌群变化,鲎试剂测定血浆内毒素含量,HE染色观察肠黏膜变化和脾脏变化。结果 与5-Fu+生理盐水组相比,经益生菌干预后的大鼠其肠道菌群失调和体重减轻症状有明显改善,血浆内毒素含量显著降低,肠黏膜损伤也得到了显著改善,脾脏淋巴细胞明显增多,脾脏损伤程度降低。结论 该多联益生菌制剂能有效减轻5-Fu对大鼠肠黏膜及肠道菌群的破坏,同时减轻其对脾脏的损伤,并且改善大鼠在化疗后的生存质量。     

肠道菌群与肠黏膜免疫

肠道不仅是吸收、消化和营养物质交换的重要场所 ,也是人体最大的免疫器官。人的肠黏膜面积巨大 ,约 2倍于皮肤的表面 ,每时每刻黏膜都要接触大量抗原 ,担负着重要的免疫功能。越来越多的证据表明肠黏膜免疫功能与寄居在肠道中为数众多的肠道菌群 (intestinalflora)有密切关系。本文就该领域的研究作一综述。1　肠道菌群的变迁与肠黏膜屏障人出生时肠道是无菌的 ,肠道菌群定植开始于出生后。菌群的发展和肠黏膜屏障的建立是一个渐进而互动的过程。母亲的肠菌群是新生儿肠道定植细菌的重要来源。定植也取决于环境因素。最初 ,任何厌氧菌都可…     

术前补充益生菌对肠道手术患者术后肠道菌群及肠黏膜屏障功能的影响

目的 探讨术前补充益生菌对肠道手术患者术后肠道菌群及肠黏膜屏障功能的影响。方法 选取肠道手术患者86例,随机分为观察组和对照组各43例。两组患者术前予以常规肠道准备,术后给予等营养支持及抗生素等治疗。观察组患者术前7 d开始加用双歧杆菌三联活菌胶囊温水口服,630 mg/次,2次/d。观察两组患者术后肠道功能恢复及感染并发症情况,并比较术前7 d及术后首次自然排便时两组患者肠道菌群数量及肠黏膜屏障指标变化。结果 观察组患者术后肠鸣音恢复时间、肛门排气时间、排便时间均短于对照组（均P0.05）。术后首次自然排便时两组患者血清D-乳酸和DAO水平高于术前7 d时（P<0.05）,且观察组患者术后D-乳酸和DAO水平低于对照组（P<0.05）。结论 肠道手术患者术前补充益生菌可调节肠道菌群,降低肠黏膜通透性,改善其肠道功能,减少术后感染并发症的发生率。     

地衣芽胞杆菌BL63516对抗生素诱导的菌群紊乱小鼠肠黏膜屏障功能的影响

目的 探索地衣芽胞杆菌BL63516对肠道菌群和肠黏膜屏障功能调节的效果和可能机制,为临床疾病的治疗提供新思路。方法 采用健康清洁级雄性BALB/C小鼠30只构建动物模型,将小鼠分为3组（每组10只）,分别为对照组（CON组）、头孢曲松钠灌胃组（CS组）和地衣芽胞杆菌BL63516治疗组（BL组）,除CON组外其余两组小鼠给予300 mg/mL头孢曲松钠0.2 mL,2次/d灌服8 d,短期大量服用抗生素以建立肠道菌群紊乱模型。第9天起BL组小鼠给予地衣芽胞杆菌干预连续8 d。第17天摘眼球处死小鼠,取血、结肠、粪便样本。ELISA方法检测小鼠血清及肝脏组织中的细胞因子及LPS水平。PCR-变性梯度凝胶电泳方法及16S rRNA高通量测序测定小鼠肠道菌群结构。结果 地衣芽胞杆菌干预后小鼠血清LPS水平较模型组显著降低,屏障功能改善。且地衣芽胞杆菌治疗后BL组肠道菌群丰富度和多样性显著升高,菌群结构有所改变。结论 实验结果提示地衣芽胞杆菌BL63516可以有效改善抗生素所致的小鼠肠道菌群失调,对肠屏障功能有一定调节作用。     

溃疡性结肠炎患者肠道菌群和肠黏膜屏障的变化及益生菌的干预作用

目的 探讨溃疡性结肠炎（UC）患者肠道菌群和肠黏膜屏障的变化及益生菌的干预作用。方法 选取2014年1月—2017年12月内科门诊就诊活动期UC患者50例为观察组,予以双歧杆菌三联活菌胶囊2粒/次（210 mg/粒）,饭后30 min温水送服,2次/d,连用8周。检测观察组治疗前与治疗后肠道菌群数量及肠黏膜屏障指标的变化。另选择同期肠镜检查未见肠道病变的正常成人30例为对照组。结果 观察组患者治疗前双歧杆菌和乳酸杆菌的数量明显少于对照组,而大肠杆菌数量明显多于对照组（Ps<0.05）。治疗8周后,观察组患者双歧杆菌和乳酸杆菌的数量较治疗前明显上升（Ps<0.05）,但仍明显低于对照组（Ps<0.05）;而大肠杆菌数量较前明显下降（Ps<0.05）,但仍明显高于对照组（Ps<0.05）。同时观察组患者治疗前血清ET、D-乳酸和PCT水平明显高于对照组（Ps<0.05）。治疗8周后,血清ET、D-乳酸和PCT水平较治疗前明显下降（Ps<0.05）,但仍明显高于对照组（Ps<0.05）。结论 双歧杆菌三联活菌胶囊治疗活动性UC能纠正患者肠道菌群紊乱,修复肠黏膜屏障。     

纳米四君子汤对急性肝功能衰竭小鼠肠屏障功能的影响

目的探讨四君子汤常态制剂及纳米制剂对急性肝功能衰竭小鼠肠屏障功能的影响。方法 BALB/c小鼠经腹腔一次性注射D-GaIN/LPS,制备急性肝衰竭致肠屏障损伤模型,观察四君子汤常态制剂及其纳米制剂对肠道正常菌群,肠黏膜分泌型免疫球蛋白A（sIgA）含量,肠组织二胺氧化酶（DAO）活性及肝功能的影响。结果小鼠腹腔注射D-GaIN/LPS后,血清中ALT、AST活性显著提高（P〈0.01）;肠道内肠杆菌、肠球菌数量明显上升（P〈0.01）,乳酸杆菌、双歧杆菌数量明显下降（P〈0.05）;肠黏膜sIgA及肠组织DAO含量明显降低（P〈0.01）。治疗组上述指标均得到明显改善,与自然恢复组比较差异有统计学意义（P〈0.05,P〈0.01）;治疗组间比较四君子汤纳米制剂效果要好于常态制剂。结论急性肝功能衰竭时肠屏障明显受损,四君子汤常态制剂和纳米制剂均具有一定的保护作用,但纳米制剂效果优于常态制剂,且用药量小。     

基于网络药理学的四君子汤治疗阿尔茨海默病作用机制研究

基于网络药理学探讨四君子汤治疗阿尔茨海默病(AD)的作用机制.借助TCMSP数据库及Uniprot数据库筛选出四君子汤有效成分及靶点基因.通过Drugbank、Dis Ge NET和TTD数据库筛选出阿尔茨海默病的靶点基因;成分靶点与疾病靶点映射后使用Cytoscape 3.7.1软件构建药物有效成分-靶点蛋白相互作用...     

四君子汤及其纳米制剂对微生态失调小鼠的调整作用

目的研究四君子汤水提液及纳米制剂对肠道微生态失调小鼠的调整作用。方法应用林可霉素灌胃建立小鼠肠道微生态失调模型,然后应用四君子汤水提液(常态中药)及其纳米制剂进行治疗,同时设正常、阳性对照及自然恢复组,于给药6 d后处死小鼠,进行肠道菌群检测、肠组织电镜检查及肝脏细菌易位检测。结果林可霉素灌胃3 d后,小鼠肠道菌群失调,肠黏膜损伤严重,肝脏有大量细菌易位。持续6 d治疗后,肠道双歧杆菌和乳酸杆菌菌量明显上升,损伤的肠黏膜基本修复,肝脏细菌易位数量大幅度下降。各治疗组间比较纳米中药组的效果要好于常态中药和丽珠肠乐组(P<0.001,P<0.01,P<0.05)。结论2种不同粒径的中药均能扶植肠道正常菌群生长,促进肠黏膜损伤修复,控制细菌易位。但纳米中药效果优于常态中药,且用药量小。     

纳米中药对小鼠肠道微生态失调的调整作用

本文研究了纳米中药及常态中药对肠道菌群失调小鼠的调整作用。经过组织病理学检查,肠道菌群和肝脏细菌易位检测发现,2种不同粒径的中药均能促进肠黏膜损伤修复,扶植正常菌群生长和控制细菌易位。但纳米中药用量小,且效果优于常态中药,从而节省了中药资源。     

高原缺氧与肠黏膜屏障损伤研究

高原环境具有气压低、氧分压低、辐射强、寒冷、风大、湿度低、灾害天气多等特点,这种急剧变化的气候环境是导致肠黏膜损伤的关键因素。肠黏膜屏障作为机体发挥防御功能的防线之一,可以保护机体不受内源性微生物及其毒素的伤害。研究高原缺氧下肠黏膜损伤的机制,将有助于高原胃肠道疾病的诊治。多数研究结果表明,高原缺氧环境下肠黏膜的损伤可能与交感神经兴奋、遗传、氧自由基生成、自噬、微生态失衡等因素有关,以下就此进行概述。     

葛根芩连汤对泄泻肠道湿热证小鼠肠道双糖酶活性的影响

目的探究葛根芩连汤对泄泻肠道湿热证小鼠肠道双糖酶活性的影响。方法采用“高糖高脂+高温高湿+白酒复合灌胃冰水”的方法制备泄泻肠道湿热证小鼠模型,并运用葛根芩连汤进行干预治疗。分别在干预的第0、2、4、6天无菌采集各组小鼠肠黏膜,运用DNS法测定蔗糖酶活性,ONPG法测定乳糖酶活性,观察葛根芩连汤对泄泻肠道湿热证小鼠肠道双糖酶活性的影响。结果经肠道湿热泄泻造模后,小鼠肠道前段和后段黏膜的乳糖酶和蔗糖酶活性均显著下降,与正常组小鼠相比差异有统计学意义(均P<0.01)。随着治疗时间的延长,治疗组小鼠肠道乳糖酶和蔗糖酶活性与正常组相比有显著的提高(均P<0.05),治疗6 d后,肠道前段黏膜蔗糖酶和乳糖酶活性恢复至正常组水平(P>0.05)。肠道后段乳糖酶活性在第4天时最高,后段黏膜蔗糖酶活性在第6天时最高,与正常组和自愈组相比差异有统计学意义(均P<0.05)。结论泄泻肠道湿热证造模使小鼠肠道黏膜蔗糖酶、乳糖酶等双糖酶的活性显著下降,葛根芩连汤能调节泄泻肠道湿热证小鼠肠道黏膜乳糖酶和蔗糖酶的活性,从而发挥治疗泄泻肠道湿热证的疗效。     

整肠生对溃疡性结肠炎小鼠肠上皮屏障的保护作用

目的 探讨整肠生对溃疡性结肠炎小鼠肠道紧密连接蛋白表达以及对氧化应激反应的影响。方法 选用雄性8~10周龄C57BL/6小鼠40只,随机分为4组：对照组、模型组（3% DSS）、5-ASA组（3% DSS+5-ASA 200 mg/kg灌胃）和整肠生组（3% DSS+联合整肠生及5-ASA灌胃）,每组10只,造模7 d。观察各组小鼠便血程度、组织学损伤情况,通过投射电镜观察各组肠道上皮间紧密连接改变情况,应用Western blot和RT-PCR的方法,检测小鼠结肠黏膜紧密连接蛋白Occludin、ZO-1、Claudin-2的表达情况。结果 （1）与模型组比较,5-ASA组和整肠生组小鼠便血程度明显减轻,DAI评分显著降低（P<0.05）。整肠生组与5-ASA组比较,便血减轻,DAI评分降低（P<0.05）。（2）电镜显示,对照组肠上皮间紧密连接呈一条致密条带,结构完整,见细胞桥粒,微绒毛光滑、排列整齐,细胞间隙狭窄;模型组肠上皮间紧密连接结构松散、模糊、密度降低,桥粒结构消失,微绒毛稀疏,短缩且长短不一,细胞间隙增宽;各治疗组的紧密连接的破坏情况较模型组有不同程度的改善,整肠生组紧密连接清晰,细胞间隙缩窄,微绒毛排列整齐,出现细胞桥粒。（3）应用Western blot和Real time-PCR法检测,与正常组相比,模型组Occludin、ZO-1蛋白和mRNA表达显著下降,Claudin-2表达显著上调（P<0.05）;各治疗组较模型组Occludin、ZO-1蛋白表达上调,Claudin-2蛋白表达下调（P<0.05）,整肠生组较单用5-ASA组更明显提高Occludin、ZO-1蛋白和mRNA表达。（4）与正常组相比,模型组MDA含量增高,SOD活性降低,与5-ASA组相比,整肠生组能更显著地降低MDA含量,提高SOD活性（P<0.05）。结论 联合应用整肠生通过调节紧密连接蛋白Occludin、ZO-1的表达和降低氧化应激反应,来改善溃疡性结肠炎小鼠肠上皮屏障功能。     

甘草泻心汤对抗生素诱导肠道菌群失调小鼠 肠道主要菌群及sIgA的影响

摘要：目的 探索甘草泻心汤对抗生素诱导肠道菌群失调小鼠肠道主要菌群及sIgA的影响。方法 将40只实验小鼠随机分为4组：正常对照组、模型对照组、甘草泻心汤组和思连康组,每组10只,给予除正常对照组以外的其他组小鼠盐酸林可霉素7 d进行造模。造模成功后,甘草泻心汤组小鼠给予10.16 g/kg体重的甘草泻心汤浓缩液灌胃,思连康组小鼠给0.68 g/kg思连康灌胃。正常对照组及模型对照组小鼠给予10 mL/kg的生理盐水代替,14 d后收集小鼠新鲜粪便采用平皿计数法进行肠道菌群检测,并采用免疫组化法检测肠道sIgA的表达情况。结果 甘草泻心汤以及思连康均能降低肠道菌群失调小鼠肠道内大肠埃希菌、肠球菌的数量,增加双歧杆菌、乳杆菌的数量,促进肠道内sIgA的表达,甘草泻心汤疗效优于思连康（P＜0.001）。结论 甘草泻心汤及思连康均能够纠正小鼠肠道菌群失调状态,甘草泻心汤疗效优于思连康,其调节机制可能是通过促进肠道内sIgA的表达来实现的。     

Role of serotonin in the intestinal mucosal epithelium barrier in weaning mice undergoing stress-induced diarrhea

Stress-induced diarrhea is a frequent and challenging threat to humans and domestic animals. Serotonin (5-HT) has been shown to be involved in the pathological process of stress-induced diarrhea. However, the role of 5-HT in stress-induced diarrhea remains unclear. A stress-induced diarrhea model was established in 21-day-old ICR weaning mice through an intragastric administration of 0.25 mL of 0.4 g/mL folium sennae and restraint of the hind legs with adhesive tape for 4 h to determine whether 5-HT regulates the mucosal barrier to cause diarrhea. Mice with decreased levels of 5-HT were pretreated with an intraperitoneal injection of 300 mg/kg p-chlorophenylalanine (PCPA), a 5-HT synthesis inhibitor. After 5 days of treatment, the stress level, body weight and intestinal mucosal morphology indexes were measured. Compared to the controls, the mice with stress-induced diarrhea displayed a stress reaction, with increased corticosterone levels, as well as increased 5-HT-positive cells. However, the mice with stress-induced diarrhea exhibited decreased body weights, villus height to crypt depth ratios (V/C), and Occludin and Claudin1 expression. The PCPA injection reversed these effects in mice with different degrees of stress-induced diarrhea. Based on these findings, inhibition of 5-HT synthesis relieved the stress response and improved the health of the intestinal tract, including both the intestinal absorption capacity, as determined by the villus height and crypt depth, and the mucosal barrier function, as determined by the tight junction proteins of epithelial cell.