山橙叶粗提物的杀虫活性研究

为探索山橙Melodinus suaveolens Champ.ex Benth作为生物农药的应用价值,本研究以山橙枝叶为研究对象,采用冷浸法提取山橙的甲醇粗提物,用同时蒸馏萃取法提取山橙叶精油;采用叶管药膜法和玻片浸渍法分别测定了山橙叶甲醇粗提物及精油对榕管蓟马Gynaikothrips uzeli Zimmerman和柑橘全爪螨Panonchus citri Mc Gregor的杀虫活性。结果表明,山橙叶甲醇粗提物对榕管蓟马具有显著的生物活性,处理后72 h的校正死亡率达到76.89%。进一步生物活性测定表明,对榕管蓟马具有生物活性的成分主要集中在乙酸乙酯萃取层,处理后24 h的LC50值为4.9507 mg/m L;山橙叶甲醇粗提物及精油对柑橘全爪螨均具有显著的杀虫活性,处理后24h的LC50值分别为5.5524、0.4142 mg/m L。本研究为进一步探究山橙中对榕管蓟马具有生物活性的天然产物提供了理论依据。     

八角叶片提取物对榕管蓟马成虫的生物活性

本文采用"Y"型管法和三角瓶熏蒸法研究了八角叶的4种溶剂提取物对榕管蓟马成虫的驱避和杀虫作用。结果表明,八角叶的4种溶剂提取物对榕管蓟马成虫均具有驱避和杀虫作用。其中,丙酮、无水乙醇和乙酸乙酯3种溶剂提取物的驱避和杀虫作用较强,浓度为1.60mg/cm2处理的驱避等级均达到Ⅳ级,而相同浓度石油醚提取物的驱避等级仅为Ⅱ级。在杀虫活性方面,用3.54mg/cm2提取物处理36h后,榕管蓟马成虫的校正死亡率除石油醚提取物外均达93.67%以上。另外,八角叶4种溶剂提取物对榕管蓟马成虫的LC50测定表明,丙酮提取物对榕管蓟马成虫的杀虫效果最好。本文结果将为榕管蓟马成虫的防治及植物源杀虫剂的开发提供实验基础。     

白肉榕叶提取物的生物活性及化学成分研究

本文以白肉榕叶为研究对象,采用药剂浸泡法和平板涂布法分别测定了白肉榕乙醇粗提物对蚕豆蚜、致倦库蚊和福寿螺的毒杀活性以及对蜡样芽胞杆菌、大肠杆菌、伤寒杆菌、痢疾志贺氏菌和金黄色葡萄球菌5种供试菌的抑菌活性。结果表明,白肉榕乙醇粗提物对蚕豆蚜、致倦库蚊和福寿螺有生物活性,而对上述5种供试菌没有抑菌活性。采用液-液萃取法对白肉榕乙醇粗提物进行萃取分离,并对得到的石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和水相3种不同极性部位进行生物活性测定。生物测定结果表明,白肉榕叶的活性成分主要存在于石油醚萃取物和乙酸乙酯萃取物中。从乙酸乙酯萃取物中进一步分离得到1个活性成分,经核磁共振氢谱(~1H NMR)和碳谱(~(13)C NMR)鉴定为桦木醇(betulin)。该化合物对致倦库蚊3龄幼虫具有较好的杀虫活性,24 h的LC50值为16.44 mg/L。     

阿维菌素与植物精油复配对朱砂叶螨杀螨的增效作用研究

为了得到对朱砂叶螨(Tetranychuscinnabarinus)具有较好杀螨活性的植物精油与阿维菌素复配配方,并为杀螨剂开发应用提供指导,本研究采用喷雾法测定了柠檬草、广藿香、山鸡椒、亚洲薄荷植物精油及阿维菌素对朱砂叶螨的毒力,分别采用共毒因子法和共毒系数法评价了山鸡椒和亚洲薄荷精油对阿维菌素的增效作用和复配最佳配比.结果表明,柠檬草精油和广藿香精油基本无杀螨活性,山鸡椒精油、亚洲薄荷精油处理朱砂叶螨24h后LC50分别为772.801mg/L和1040.187mg/L.阿维菌素与亚洲薄荷1∶272,1∶679复配具有增效作用.阿维菌素与亚洲薄荷1∶400复配时共毒系数最大,可达160.因此,阿维菌素与亚洲薄荷1∶400复配防治朱砂叶螨具有明显增效作用,这为杀螨剂的开发应用研究提供了参考.     

迷迭香油和花椒油对朱砂叶螨的生物活性

【目的】明确室内条件下迷迭香油和花椒油对朱砂叶螨Tetranychus cinnabarinus (Boisduval)的生物活性。【方法】采用熏蒸法和驱避法测定迷迭香油和花椒油对5日龄朱砂叶螨雌成螨的熏蒸活性、产卵抑制活性和驱避活性;并采用EthoVision XT6分析亚致死浓度下两种精油对雌成螨行为的影响。【结果】分别将5日龄雌成螨熏蒸处理12, 24和48 h后,迷迭香油对朱砂叶螨的致死率均显著高于花椒油处理组（P＜0.05）,且随着熏蒸时间的延长或精油浓度的升高,其熏蒸活性均增强;不同浓度的迷迭香油处理朱砂叶螨雌成螨24 h后的产卵抑制率均显著高于花椒油处理组（P＜0.05）。迷迭香油和花椒油处理朱砂叶螨雌成螨24 h的LC₃₀分别为6.731和120.142 μL/L;迷迭香油对朱砂叶螨雌成螨的驱避活性明显高于花椒油处理组。两种精油亚致死浓度处理朱砂叶螨雌成螨后,其自发运动方式发生了明显变化,移动频率在LC₁₀ 时呈现最高;且迷迭香油对朱砂叶螨雌成螨自发运动能力的影响比花椒油处理的影响更为明显。【结论】迷迭香油对朱砂叶螨的生物活性明显高于花椒油,因此,迷迭香油对朱砂叶螨的生物防治具有较高的应用价值。本研究为绿色蔬菜植物源杀螨剂的研究提供了科学依据。     

栽培型和野生型黄花蒿提取物对朱砂叶螨杀螨活性比较

研究了野生型和栽培型黄花蒿叶丙酮提取物对朱砂叶螨的生物活性.结果表明:栽培型和野生型48 h的LC50分别为0.295和0.567 mg·ml-1,以栽培型的杀螨毒力较高;对2种提取物进行柱层析分离,野生型最终分离出19个馏分,栽培型分离出17个馏分,其中野生型的第11馏分与栽培型的第13馏分的杀螨活性在2.5 mg·ml-1,处理48 h的校正死亡率均为100%,与其他组分存在显著性差异;将杀螨活性较好的馏分进行毒力测定得出,处理48 h,野生型馏分11的LC50为0.120 mg·ml-1;栽培型馏分10、12和13的LC50分别为0.144、0.163和0.117 mg·ml-1.表明栽培型黄花蒿叶丙酮提取物对朱砂叶螨的触杀活性优于野生型.     

假臭草花精油的化学组成及对柑橘木虱的驱避和致死活性

【目的】为了让入侵植物假臭草Praxelis clematidea(Griseb)R.M.KingH.Rob.变废为宝,首次探讨了假臭草花精油对柑橘木虱Diaphorina citri Kuwayama的驱避和致死活性,以用于生物防治。【方法】采用水蒸气蒸馏法提取了假臭草不同部位的精油,并通过气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)分析花精油的化学成分,并检测了其对柑橘木虱的生物活性。【结果】假臭草花精油得率(0.31±0.03)%高于茎叶精油的得率(0.23±0.02)%;GC-MS检测显示,假臭草花精油至少含有25种化合物,其中β-荜澄茄油烯(43.85%)和β-石竹烯(30.34%)是其主要成分;花精油浓度为40和50μL·mL~(-1)处理30 min时,对柑橘木虱的驱避反应率均可达到100%。不同浓度的花精油对柑橘木虱具有明显的致死活性。当浓度为50μL·mL~(-1)的时候,浸液法处理九里香Murraya exotica L.嫩梢18 h时,柑橘木虱校正死亡率分别达到(56.25±4.79)%,LC50值为44.83μL·mL~(-1),而熏蒸法48 h时的柑橘木虱校正死亡率仅为(66.33±5.00)%,LC50为24.80μL·mL~(-1)。假臭草花精油对柑橘木虱的驱避和致死活性可能与其主要成分的作用有关。【结论】研究结果证明假臭草花精油对柑橘木虱具有良好的驱避和致死活性,具有开发成为柑橘木虱驱避剂及杀虫剂的良好潜能。     

百里香杀螨活性成分的分离及鉴定

为了探讨百里香的杀螨活性成分,以山楂叶螨(Tetranychus viennensis)为供试对象,采用生物活性示踪法从百里香(Thymus mongolicus)乙醇提取物中分离纯化出5种活性成分,其化学结构经MS、1H-NMR、13C-NMR分析鉴定为百里香酚、香芹酚、松油烯-4醇、豆甾醇和β-谷甾醇.采用玻片浸渍法测试了5种化合物对山楂叶螨的触杀活性,结果表明,百里香酚和香芹酚对山楂叶螨有较强的触杀活性,12 h和24 h的触杀LC50值分别为0.103、0.135 mg·mL-1和0.048、0.096 mg·mL-1;松油烯-4-醇也有一定的杀螨活性,12 h和24 h的触杀LC50值分别为0.320和0.231 mg·mL-1;而两种甾醇类化合物β-谷甾醇和豆甾醇对山楂叶螨没有明显的触杀作用.分析认为百里香酚可能是百里香的主要杀螨活性成分之一.     

不同生长时期黄花蒿提取物对朱砂叶螨的生物活性

选用不同生长时期(4、5和6月)黄花蒿的根、茎、叶,采用30℃～60℃石油醚、60℃～90℃石油醚、乙醇、丙酮和水溶剂等溶剂,用顺序和平行提取方法获得81种提取物,测定其对朱砂叶螨的生物活性,同时,将81种提取物分别稀释至5mg.ml-1,测定其对朱砂叶螨的触杀毒力。结果表明:在杀螨活性方面,黄花蒿的杀螨活性随植株的生长呈增加的趋势,总体表现为6月>5月>4月。6、5和4月黄花蒿叶的丙酮平行提取物活性最强,5mg.ml-1浓度处理48h对朱砂叶螨的校正死亡率为74%～86%,它们对朱砂叶螨的致死中浓度(LC50)分别为0.84、0.94和1.38mg.ml-1;处理浓度为5mg.ml-1时,它们的致死中时(LT50)分别为24.61、27.63和37.23h。     

石菖蒲根茎甲醇提取物对谷蠹的生物活性

采用冷浸法和溶剂萃取法,研究石菖蒲(Acorus gramineus Soland)根茎甲醇提取物对谷蠹Rhizopertha dominica(Fabricius)成虫的生物活性。结果表明,石菖蒲甲醇提取物以石油醚萃取物的生物活性最强,水层次之。石油醚萃取物对谷蠹具有较高的触杀、熏蒸、种群抑制活性和防治效果,并具有一定的驱避活性。药膜法触杀处理72h后对谷蠹的LC50和LC95分别为8.30μg/cm2,51.75μg/cm2。药纸熏蒸法6.25μL/L处理120h后对谷蠹的校正死亡率为94.25%。饲料拌药法250mg/kg处理对谷蠹的防效与5mg/kg马拉硫磷效果相当,且对F1代的种群抑制效果显著高于5mg/kg马拉硫磷处理。     

东莨菪内酯对朱砂叶螨的驱避和产卵抑制活性

本研究采用叶碟浸渍法测定了东莨菪内酯对朱砂叶螨Tetranychus cinnabarinus(Biosduvals)雌成螨的触杀活性,采用选择性的半叶法测定了驱避活性,同时采用非选择性的全叶法测定了产卵抑制活性。结果表明,东莨菪内酯对朱砂叶螨雌成螨具有较好的触杀活性,采用叶碟浸渍法处理48h后的LC50为0.297mg·mL-1,LC30为0.105mg·mL-1,LC10为0.023mg·mL-1。采用LC50、LC30和LC103个浓度的东莨菪内酯处理雌成螨后,发现东莨菪内酯对雌成螨没有表现出明显的驱避活性,处理区和对照区24h和48h的着螨率均为50%左右;采用LC50和LC102个浓度处理雌成螨后表现出了一定的产卵抑制活性,平均产卵抑制率分别为23.02%和13.23%,而LC30对雌成螨的产卵量表现出了促进作用,平均产卵抑制率为-8.25%,这可能是由于毒物兴奋效应所致。本研究旨在为东莨菪内酯的进一步开发和应用奠定理论基础。     

昆明山海棠的杀虫活性及有效成分

【目的】从天然产物尤其是植物中寻找杀虫活性物质是杀虫剂创制的重要途径。【方法】采用生物活性追踪、分离等方法,研究了昆明山海棠Tripterygium hypoglaucum (Levl.) Hutch对6种鳞翅目昆虫的杀虫活性及有效成分。【结果】昆明山海棠根皮石油醚提取物、甲醇提取物和乙酸乙酯提取物对粘虫3龄幼虫均具有拒食活性,24 h的拒食毒力AFC₅₀值分别为1 165.7 μg/mL、104.3 μg/mL和 47.3 μg/mL。昆明山海棠根皮甲醇提取物对粘虫4龄幼虫具有触杀活性,其LD₅₀值为100.4 μg/头。从昆明山海棠根皮甲醇提取物中分离出雷公藤春碱、雷公藤吉碱、雷公藤定碱和雷公藤榕碱 4个杀虫活性化合物,雷公藤春碱和雷公藤吉碱对粘虫具有胃毒麻醉活性,对粘虫3龄幼虫8 h的麻醉中量（ND₅₀）分别是18.1 μg/头和7.4 μg/头。雷公藤定碱和雷公藤榕碱对粘虫具有触杀麻醉活性,对粘虫4龄幼虫24 h的ND₅₀分别是0.33 μg/头和0.06 μg/头;对3龄小地老虎具有胃毒麻醉活性,24 h的麻醉中量ND₅₀分别是5.62 μg/头和1.24 μg/头。【结论】昆明山海棠对所测试的6种鳞翅目昆虫均有一定的杀虫活性,其主要杀虫活性成分为雷公藤春碱、雷公藤吉碱、雷公藤定碱和雷公藤榕碱4个化合物。     

生防放线菌Fq24代谢产物对朱砂叶螨的生物活性

菌株Fq24是从健康番茄植株分离得到的一株植物内生放线菌.为了研究它对朱砂叶螨生物活性的影响,通过萃取、柱层析、气相色谱-质谱(GC-MS)等技术对Fq24代谢产物中的杀螨活性物质进行了分离和结构鉴定,并采用玻片浸渍法和叶片残毒法测定了这些代谢产物的生物活性.结果表明:石油醚萃取物对朱砂叶螨具有较强的触杀和产卵忌避作用.触杀作用的LC50为52.57 mg·L-1,产卵忌避作用的ODC50为43.18 mg·L-1.经GC-MS分析,流份S11的主要化学成分为棕榈酸甲酯,分子式为C17H34O2,是代谢产物中的杀螨活性物质之一.质量浓度为5 mg·mL-1的棕榈酸甲酯对雌成螨的24h校正死亡率为78.3％,对雌成螨24h产卵驱避率为81.6％.     

链霉菌3704杀虫成分及对小菜蛾的毒力测定

为寻找新的高活性杀虫化合物,本研究以小菜蛾(Plutella xylostella)为靶标筛选出杀虫抗生素3704.室内生测试验表明:抗生素3704粗提物处理2龄小菜蛾幼虫24、48和72 h,LC5o分别为59.82842、38.66165和22.69325 μ/mL.盆栽试验表明:处理后48 h,500 μg/mL的杀虫素3704粗提物对小菜2龄幼虫的防治效果与8 μg/mL阿维菌素同期防效相当,但施药时间延长至72 h和96 h后,防治效果低于阿维菌素.分离纯化链霉菌3704杀虫活性物质,鉴定出其化学结构为已知杀螨剂哒螨酮(pyridaben),本研究首次报道从微生物次级代谢产物中分离出该化合物.     

垂叶榕榕管蓟马空间分布型及其抽样模型

榕管蓟马（Gynaikothrips uzeli）是观赏植物垂叶榕（Ficus benjamina）的重要害虫。通过对垂叶榕不同方位和高度的随机取样,运用5种聚集度指标以及Taylor幂法和Iwao回归模型分析和测定了榕管蓟马的种群空间格局。结果表明：榕管蓟马虫瘿主要分布于垂叶榕的中、下层,且下层4个方位的虫口密度差异均不显著。榕管蓟马虫瘿在垂叶榕上的理论分布型符合负二项分布,各项聚集度指标均满足CA＞1、IDM＞0、m*/m＞1,且0＜K＜8,表明该蓟马在垂叶榕上的空间分布型为聚集分布,其聚集分布的原因与自身营虫瘿生活及喜阴习性有关。应用Iwao理论抽样模型确定了榕管蓟马不同种群密度与不同精度要求下的理论抽样数。     

广藿香精油的杀虫作用及其活性成分分析

采用室内生物活性测定方法,研究了广藿香〔Pogostem on cablin(B lanco)Benth.〕全草精油的杀虫活性及其活性成分。结果表明,广藿香精油和广藿香酮对菜粉蝶(Preris rapaeL.)和小菜蛾(Plutella xylostellaL.)幼虫有较好的防治作用。使用2.5~40.0 mg.mL-1广藿香精油和1~10 mg.mL-1广藿香酮分别对菜粉蝶和小菜蛾幼虫进行饲喂实验,均表现出较强烈的拒食作用;广藿香精油和广藿香酮对4龄菜粉蝶幼虫毒杀作用的LC50值分别为104.28和32.20μg.mL-1。活性跟踪实验确证广藿香酮为广藿香精油的有效杀虫成分。     

山萘杀线虫活性成分的分离及鉴定

采用超声波提取法,用甲醇作溶剂对山萘进行粗提,分别测定了山萘提取物对松材线虫和南方根结线虫的毒性,结果显示,1 000 mg/L山萘甲醇粗提取物处理松材线虫和南方根结线虫,24 h校正死亡率均达到100%.采用活性追踪和柱层析法,以5种植物病原线虫为对象,提取、分离、纯化出山萘根中的活性成分,结果显示,在正己烷萃取组分中,得到活性较高的化合物A、B;用化合物A处理南方根结线虫、松材线虫、马铃薯腐烂茎线虫、海南根结线虫、象耳豆根结线虫72 h后,其LC50分别为17.79、29.70、43.21、57.64和36.94 mg/L;用化合物B处理72 h后LC50分别为1.49、2.81、10.09、26.67和14.47 mg/L.化合物A和B经1H-NMR、13C-NMR、GC-MS分析鉴定表明,A为肉桂酸乙酯,B为对甲氧基肉桂酸乙酯.     

夹竹桃叶乙醇提取物对斑马鱼的毒性评价

研究表明, 夹竹桃(Nerium indicum Mill.)及其提取物对多种害虫具有较强的毒杀作用, 已在害虫生物防治中显示出较大作用。为了合理开发夹竹桃植物, 需要进一步评价夹竹桃植物对水生生物的安全性和对动物的毒理学。文章利用索氏提取法提取夹竹桃叶乙醇粗提物, 并进一步用氯仿萃取浓缩、硅胶柱层析方法提取分离乙醇精提物, 经鉴定为强心甙组分。在此基础上, 委托浙江省医学科学院评价了乙醇粗提物对实验动物的毒理学, 并采用静态法评价了这二种提取物对斑马鱼(Brachydanio rerio)的急性毒性和慢性效应。结果表明: 夹竹桃叶乙醇粗提物的提取率为45%, 乙醇精提物(主要成分为强心甙组分)的提取率为0.25%。乙醇粗取物对大鼠经口和经皮毒性为低毒级, 对家兔皮肤和眼无刺激, 对豚鼠的致敏反应属弱致敏性。这说明夹竹桃叶乙醇粗提物对哺乳动物十分安全。在急性毒性试验中, 发现斑马鱼的死亡率与提取物处理浓度和处理时间均呈明显的正相关。处理浓度越大, 斑马鱼的死亡率越高; 同一浓度处理时间越长, 死亡率越高。用24 mg/L 乙醇粗提物处理6、12、24 和48h 的死亡率分别为26.67%、60%、91.11%和95.56%; 用0.5 mg/L乙醇精提物处理12、24、48、72 和96h 的死亡率分别为6.25%、33.33%、52.08%、54.17%和60.42%; 用24 mg/L 乙醇粗提物处理96h 或32 mg/L 处理48h, 或者用1 mg/L 乙醇精提物处理24h, 斑马鱼全部死亡。在慢性毒性试验中, 用3.33-10.0 mg/L 乙醇粗提物处理斑马鱼28d, 其死亡率为12%-20%。乙醇粗提物处理斑马鱼后, 急性毒性LC50=12.52 mg/L(药后96h)10 mg/L, 慢性毒性LC50=199.51 mg/L(药后28d); 乙醇精提物处理斑马鱼后, 急性毒性LC50=0.46 mg/L(药后96h)1 mg/L, 根据《化学农药环境安全评价试验准则》(1990)中农药对鱼类的毒性分级标准, 说明夹竹桃叶乙醇粗提物对斑马鱼的毒性属于低毒, 比较安全; 乙醇精提物对斑马鱼的毒性则为高毒, 十分不安全。       

木鳖子提取物对朱砂叶螨的触杀活性

测定了木鳖子提取物对朱砂叶螨的触杀活性。用甲醇、氯仿、石油醚3种不同极性的溶剂提取,石油醚提取率最高为30.79%,且对朱砂叶螨成螨和卵的触杀活性均高于其他两种溶剂的提取物,24 h校正死亡率分别为77.52%和72.04%。用甲醇对石油醚提取物萃取,发现甲醇萃取物活性明显高于石油醚部分,对成螨和卵处理24 h后的校正死亡率分别为89.60%和74.65%,产卵抑制率为62.74%,驱避率为58.23%。柱层析对甲醇萃取物进行分离得到10种组分,组分5活性最高,浓度为2 mg/mL时,24 h校正死亡率为86.15%。用薄层层析和气相色谱质谱联用仪分别检测组分5纯度和主成分,初步确定活性成分为α-菠菜甾醇。     

姜黄素类化合物对朱砂叶螨的生物活性

分别用玻片浸渍法和叶片浸渍法测定了从姜黄中分离的姜黄素(curcumin,CCM)、去甲氧基姜黄素(demethoxycurcumin,DMC)和双去甲氧基姜黄素(bisdemethoxycurcumin,BDMC) 3种天然姜黄素类化合物对朱砂叶螨Tetranychus cinnabarinus Boisduval的成螨、若螨、卵的触杀活性以及对成螨产卵的抑制作用。结果表明：3种化合物对朱砂叶螨的生物活性大小依次为BDMC>DMC>CCM。3种化合物对朱砂叶螨成螨触杀活性最高者为BDMC,处理24 h和48 h其LC₅₀分别为1.18和0.51 mg/mL。对若螨触杀活性的大体趋势与对成螨的相同,其中处理48 h,BDMC对若螨的LC₅₀最小,为2.48 mg/mL。3种化合物对朱砂叶螨卵的触杀毒力也同样表现为BDMC>DMC>CCM。3种单体化合物都表现出一定的对朱砂叶螨雌成螨的产卵抑制作用。对姜黄素类化合物构效关系的初步研究,明确了甲氧基在姜黄素模板上对杀螨活性的贡献,对于开发具经济价值的叶螨类杀螨剂或者筛选先导化合物模板,具有一定的参考价值。