左卡尼汀联合蔗糖铁对血液透析患者肾性贫血及氧化应激的影响

目的:探讨左卡尼汀联合蔗糖铁对血透患者肾性贫血及氧化应激的影响。方法:抽选我院2010年3月-2013年5月行维持血透治疗的肾性贫血患者79例,采用数字表法分为对照组(39例)和观察组(40例),对照组采用促红细胞生成素(EPO)、单用蔗糖铁及常规对症治疗,观察组在对照组基础上联用左卡尼汀治疗。比较两组患者治疗前、治疗6个月后血红蛋白(Hb)、血细胞比容(Hct)、血浆铁蛋白(SF)、转铁蛋白饱和度(TSAT)、晚期蛋白质氧化产物(AOPP)及血丙二醛(MDA)水平,并对两组治疗开始时、治疗3、6个月时EPO使用剂量进行比较。结果:治疗6个月后,观察组患者Hb、Hct、SF、TSAT明显高于对照组(P0.05),AOPP、MDA明显低于对照组(P0.05);对照组从治疗开始到治疗6个月时一直维持较高的EPO使用剂量,而观察组EPO用量依次递减,至治疗6个月时EPO用量显著低于对照组(P0.05)。结论:左卡尼汀能联合蔗糖铁治疗肾性贫血的疗效显著,能有效缓解氧化应激反应,降低EPO用量,值得临床推广。     

转EPO基因成肌细胞移植治疗大鼠肾性贫血的实验研究

以产病毒包装细胞上清转染原代培养的大鼠骨骼肌成肌细胞和皮肤成纤维细胞 ,经G41 8筛选得到转染成功的阳性克隆 ,分别命名为Myo/EPO和Fib/EPO .将抗性克隆扩增并测定培养上清中EPO活性 ,供大鼠移植 .肾性贫血大鼠经乙醚麻醉后 ,通过多点肌注及皮下注射分别将Myo/EPO和Fib/EPO植入大鼠体内 ,动态检测各组大鼠外周血象 ,定期测定大鼠血清EPO含量及移植部位肌组织hEPO分泌情况 .结果表明 ,对照组 (Myo/X)大鼠血红蛋白 (Hb)和红细胞压积 (HCT)进行性降低 ,而治疗组大鼠 (Myo/EPO)的Hb和HCT在移植后 1 4d ,由移植前的 ( 92 .5± 3.0 )g/L和 0 .2 9± 0 .0 4升至 ( 1 0 3.8± 5 .0 ) g/L和 0 .32± 0 .0 4,之后逐渐下降 ,但仍高于或维持移植前水平达 90d ,Fib/EPO细胞移植的作用特点与Myo/EPO组类似 ;Myo/EPO细胞移植前大鼠血清EPO的浓度已测不出 ,移植后 30 ,6 0 d测得EPO的浓度分别为 ( 4.2± 1 .3)、( 3.3± 0 .9)mU/mL ;以PCR和免疫组化方法对移植后 6 0d大鼠肌注部位的肌肉组织进行检测证实 ,移植部位肌组织存在hEPOcDNA ,并且分泌EPO蛋白 .结论 :以大鼠骨骼肌成肌细胞作为EPO基因治疗的靶细胞进行大鼠体内移植 ,可以较持久地改善大鼠肾性贫血症状 ,具有潜在的应用价值 ,为临床上EPO基因治疗提供了实验依据     

Genetics Institute Inc.和Whitehead Institute发现EPO受体

两个研究机构的研究人员叙述了登在4月21日《CELL》杂成上的他们的发现。际为EPO的红细胞生成素,是由肾天然产生的激素,它的作用是调节人体细胞的产生。受体是附着在未成熟红细胞外表面的一种蛋白质。当EPO与其受体结合时,便触发了细胞对激素的反应。预测EPO受体的研究将有助于进一步了解红细胞成熟的过程,并能改进对患有威胁生命的血液病的儿童和成人的治疗方法。这一突破还使研究者得以鉴别激素的活性部位并有助于研制模拟EPO活性的底物。     

用电击孔法转染人红细胞生成素基因

用电击孔(electroporation)转染方法已成功地使化学合成的红细胞生成素(EPO)基因在猿猴肾细胞(COS-7)中表达。对转染条件、表达质粒(pSVL-EPO)DNA含量及转染后不同时间表达产率的观察和研究表明:电击孔缓冲液及相应电压的选择与表达产率有关,且表达质粒DNA量在50～100μg,转染细胞存活率在50％左右时,表达效果好。在转染后24h,便可在细胞上清液中测到EPO活性,48～72h达高峰,EPO活性可达9.7U/ml。     

低氧诱导因子-脯氨酸羟化酶轴在肾性贫血中的作用机制研究进展

肾性贫血是慢性肾脏病患者最常见的并发症之一,主要由促红细胞生成素(erythropoietin, EPO)缺乏和功能性铁缺乏(functional iron deficiency, FID)引起。低氧诱导因子(hypoxia-inducible factor, HIF)是体内参与细胞低氧应答的主要转录因子,而氧依赖性的脯氨酸羟化酶(prolyl hydroxylase, PHD)是HIF降解反应的限速酶,可羟基化HIF的脯氨酸残基,使HIF被蛋白酶体降解,这就是HIF-PHD氧传感途径,亦称HIF-PHD轴。贫血情况下组织缺氧,通过调节HIF-PHD轴可刺激EPO生成、调节铁代谢等,这已成为治疗肾性贫血的新方法。近年来,几种作为选择性HIF-PHD抑制剂的创新药物被成功开发,其中一些药物正在进行临床试验。本文就HIF-PHD轴的概念、调节机制及其在肾性贫血中的作用机制研究进展进行综述。     

重组人促红细胞生成素研究成果通过专家鉴定

重组人促红细胞生成素(EPO)是调节和维持红细胞生理循环的重要激素,对慢性肾性贫血有特效,并有可能在癌症、血液系统恶变、AIDS病等疾病所致的贫血治疗中开拓广泛的临床应用领域。目前国内使用的EPO制剂基本上全部从美国Amgen公司进口,为此每年要支付巨额外汇。我国促红细胞生成素的研究起步较晚,第二军医大学分子遗传学教研室在上海市科委的支持下,从1991年开始进行重组人促红细胞生成素高表达CHO细胞株     

促红细胞生成素的纯化

促红细胞生成素(Erythropoitm,EPO)是一种糖蛋白激素,正常条件下在血浆中浓度很低,当贫血或缺氧时,血浆中EPO浓度显著增加,并分泌到尿液里、EPO具有促进红系祖细胞的增殖、分化和成熟的作用,正是这一特性使它在某些贫血治疗中有着重要价值。为了研究EPO性状及临床应用,获得大量纯品EPO非常重要,1977年Miyake等人首先经过7步纯化从再障性贫血患者尿中获得毫克量级尿EPO(urme EPO,uEPO)。天然EPO源于正常人及患者尿液、血浆和胎盘浸出液。八十年代后朗编码人EPO基因被克隆,重组人EPO(recombinant human EPO,rhEPO)在哺乳动物细胞中成功表达,大大丰富了EPO来源,减小了纯化难度,使获得大量EPO纯品用于临     

促红细胞生成素治疗慢性心力衰竭156例临床观察

目的:观察EPO对慢性充血性心力衰竭(CHF)治疗效果。方法:选择CHF患者212例,随机分为非EPO治疗组(56例)和EPO治疗组(156例)。其中非EPO治疗组采用常规抗心衰治疗,EPO治疗组接受常规抗心衰治疗和EPO治疗,直至临床观察结束。治疗后观察心功能指标改变。结果:156例心衰患者经过EPO治疗后,左室射血分数,每搏输出量,每分输出量,心指数均较非EPO治疗对照组患者明显改善(P<0.05),其中尤以左室射血分数改善最为明显(P<0.01)。156例EPO治疗组患者中116例心衰伴贫血患者心功能各项指标的改善较40例心衰不伴贫血患者更为明显,具有显著统计学意义(P<0.01)。结论:EPO对CHF患者心功能的改善主要是因为EPO的促红细胞生成作用。EPO对于慢性心功能不全有独立于促红细胞生成以外的治疗作用。     

促红细胞生成素和受体在前列腺癌组织中共同过表达的研究

目的:探讨促红细胞生成素(EPO)和受体(EPOR)在前列腺癌(PCa)组织中的表达,并进一步阐述EPO和EPOR在前列腺癌发生发展中所起的作用。方法:应用免疫组化SP法检测30例前列腺癌根治术组织标本中癌与增生(BPH)组织的EPO和EPOR表达及30例正常前列腺组织(NP)中的EPO和EPOR表达。前列腺癌分级采用Gleason评分。半定量EPO和EPOR评分分析免疫组化结果。同时根据细胞染色强度区分为过表达和正常表达。统计学分析采用配对样本比较Wilcoxon的秩和检验及线形回归分析。结果:大部分前列腺癌均可见EPO和EPOR同时过表达,但是前列腺增生组织只有EPO过表达;正常前列腺组织没有EPO和EPOR过表达。前列腺癌和良性前列腺增生的EPO免疫组化评分中位数为2.38和0.93(P<0.01);前列腺癌和良性前列腺增生的EPOR免疫组化评分中位数为2.50和0.68(P<0.01)。前列腺增生和前列腺癌的EPO和EPOR表达密切相关,但是前列腺癌的Gleason评分和EPO以及EPOR评分没有相关性(P值均>0.05)。结论:EPO和EPOR同时过表达促进前列腺癌发生发展,但是相对于EPO的过表达,EPOR过表达是前列腺癌发生更为重要的早期事件;前列腺癌组织中EPO和EPOR表达差异,提示除了缺氧外,可能还有其它机制参与EPOR的过表达。     

EPO治疗慢性肾衰患者对铁调素、FDP及红细胞免疫的影响

为了探讨促红细胞生成素(EPO)治疗慢性肾衰患者对铁调素、纤维蛋白原降解产物(FDP)及红细胞免疫水平的影响。选取我院2014年1月至2016年1月间收治的30例规律使用EPO治疗的肾功能不全肾衰期患者作为研究对象进行自身对照研究,患者使用EPO治疗12周,分别于治疗前、治疗后检测并比较血清铁调素、FDP、红细胞免疫水平等指标。研究显示,相较于治疗前,30例患者接受治疗后血清中的RBC、Hb、TRF、PA、血清铁和RBC-C3b RR比例均发生显著性提高,差异具有统计学意义(p0.05);而hs-CRP、FDP、铁调素水平以及RBC-ICR比例发生显著性降低,差异具有统计学意义(p0.05);但血清中Scr水平无明显变化,差异不具有统计学意义(p0.05)。因此,EPO治疗慢性肾衰患者能通过调节血清铁调素水平纠正肾性贫血,同时改善患者的红细胞免疫功能及营养状态。     

促红细胞生成素基因修饰的胎肝基质细胞促进脐血CD34 +细胞向红系分化

通过重组慢病毒系统感染人胎肝基质细胞(fetal liver stromal cells,FLSCs),建立了能够稳定高效表达促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)的细胞株EPO/FLSCs.从胎儿肝脏克隆EPO基因,构建重组慢病毒EPO的表达载体,感染FLSCs,根据荧光表达强弱进行流式分选,获得能够继续稳定传代的高表达EPO基因的FLSCs,RT-PCR和ELISA结果证实,细胞株中的EPO基因稳定表达.RT-PCR结果显示,FLSCs的EPO在mRNA水平的表达分别是未转染FLSCs和转染空载体FLSCs的5.63倍和5.71倍.ELISA法检测了转染重组慢病毒EPO表达载体的FLSCs EPO蛋白表达水平,结果显示EPO蛋白的表达水平也明显升高.收集EPO/FLSCs的条件培养基,体外诱导脐血CD34+细胞向造血细胞分化,结果显示向红系定向分化的细胞比例明显居多,有可能为临床细胞治疗提供稳定、高质量的细胞来源.     

慢性心力衰竭患者内源性促红细胞生成素的改变及临床意义

目的：探讨内源性促红细胞生成素（EPO）在慢性心力衰竭（CHF）及CHF贫血发病中的作用及临床价值。方法;采用放射性免疫分析法测定117例CHF患者和40例非CHF患者血浆EPO水平,分析EPO水平与心功能分级、贫血以及CHF患者预后的关系。结果：心功能II-IV患者EPO水平显著上升,与对照组比较均有显著性差异（P〈0．05）;EPO水平随着心功能分级增高而逐渐上升,在各级间比较有显著性差异（P〈0．05）;CHF伴贫血患者EPO水平随着心功能分级增高和贫血程度的加重而逐渐上升,在各级间比较有显著性差异（P〈0．05）;死亡组EPO水平显著高于存活组,而Hb水平显著低于存活组,相比较有显著性差畀（P〈0．05）。结论：CHF患者和CHF伴贫血患者内源性EPO水平升高,EPO水平的上升与CHF患者病情严重程度有关,并且是CHF患者预后不良的预测指标。     

慢性心力衰竭患者内源性促红细胞生成素的改变及临床意义

目的:探讨内源性促红细胞生成素(EPO)在慢性心力衰竭(CHF)及CHF贫血发病中的作用及临床价值。方法:采用放射性免疫分析法测定117例CHF患者和40例非CHF患者血浆EPO水平,分析EPO水平与心功能分级、贫血以及CHF患者预后的关系。结果:心功能II～IV患者EPO水平显著上升,与对照组比较均有显著性差异(P<0.05);EPO水平随着心功能分级增高而逐渐上升,在各级间比较有显著性差异(P<0.05);CHF伴贫血患者EPO水平随着心功能分级增高和贫血程度的加重而逐渐上升,在各级间比较有显著性差异(P<0.05);死亡组EPO水平显著高于存活组,而Hb水平显著低于存活组,相比较有显著性差异(P<0.05)。结论:CHF患者和CHF伴贫血患者内源性EPO水平升高,EPO水平的上升与CHF患者病情严重程度有关,并且是CHF患者预后不良的预测指标。     

促红细胞生成素的最新研究进展及临床应用

促红细胞生成素(EPO)是调节红细胞产生的主要细胞因子,EPO具有促进红细胞生成、抗炎反应、增强免疫等多种功效,但EPO作为多功效细胞因子,有多重器官靶向位点,也为广泛临床应用的提供理论支撑。目前,针对EPO的产生及细胞内的信号转导机制也提出了更全新的认知。本文在EPO临床应用广泛性及产生、转导机制上进行概述。     

促红细胞生成素与肿瘤

长期以来,促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)仅仅被认为对造血系统有着自己独特的作用。近年来,越来越多的研究表明,EPO及其受体在非造血系统,特别是对肿瘤的发生发展也起着作用。在肿瘤细胞的侵袭、转移、肿瘤血管形成过程中,EPO及其受体都有促进作用,而缺氧环境是肿瘤的一个重要的特征,缺氧诱导因子也可以促使EPO的释放。本文就EPO及其受体对肿瘤发展的影响作综述,为临床更好的利用EPO提供一定的理论基础。     

EPO/EPOR 在非小性细胞肺癌发展中的作用研究

目的：研究促红细胞生成素（erythropoietin, EPO）及其受体（EPOR）在非小性细胞肺癌中的生物学作用。方法：收集27 例非小 性细胞肺癌（NSCLC）,免疫组织化学方法检测肺癌组织中EPO 和EPOR的表达;观察人源重组EPO（rhEPO）对HCC15 和 HCC1819 细胞活力和细胞周期的影响;分析缺氧对NSCLC细胞EPO 及EPOR 表达的影响。结果：27例非小细胞肺癌的组织标 本中13 例表达EPO,表达率为48 %,25 例表达EPOR,表达率为92 %。rhEPO明显增加了高表达EPOR 的HCC1819 细胞克隆 数,而对低表达EPOR 的HCC15 细胞的克隆形成没有影响。rhEPO增强了HCC1819 的细胞活力,但以siRNA干涉HCC1819 EPOR后,EPO对HCC1819 细胞活力增强作用消失。rhEPO 明显增加了HCC1819 细胞的细胞周期。缺氧促进了HCC1819 细胞的 EPO 的表达,增强了细胞活力。结论：EPO 和EPOR在非小性细胞肺癌中表达增高,EPO 通过EPOR 促进了NSCLC 细胞的增殖, 缺氧诱导了NSCLC 细胞EPO的表达。     

中国人促红细胞生成素cDNA的克隆及其在COS-7细胞中的表达

利用PCR技术。以中国人促红细胞生成素(EPO)次全基因组为模板,进行了基因修补和重组．克隆出EPO cDNA全序列。同时发现中国人EPO cDNA与国外的克隆比较有一个核苷酸的差异,导致第62位氨基酸是丝氨酸．不是亮氨酸。将人EPO cDNA基因插入表达载体pSV2-dhfr中的不同克隆位点,构建了6种不同的转移载体质粒,即psV2 dhfr／F1,pSV2／F2,pSV2 dbfT／F3,pSV2 dhfr／F4,pSV2-dhfr／G1和psV2 dhfr／G3。将它们分别转染导人COS-7细胞,结果表明6种转移载体质粒转染的细胞上清液都有明显的EPO活性。人EPO cDNA基因转移载体质粒在COS-7细胞中的表达水平高于人次全EPO基因组转移载体质粒。     

中国人促红细胞生成素cDNA的克隆及其在COS—7细胞中的表达

利用PCR技术,以中国人促红细胞生成素(EPO)次全基因组为模板,进行了基因修补和重组,克隆出EPO cDNA全序列。同时发现中国人EPO cDNA与国外的克隆比较有一个核苷酸的差异,导致第62位氨基酸是丝氨酸,不是亮氨酸。将人EPO cDNA基因插入表达载体pSV2-dhfr中的不同克隆位点,构建了6种不同的转移载体质粒,即pSV2-dhfr/F1,pSV2/N2,pSV2-dhfr/F3,pSV2-dhfr/P4,pSV2-dhfr/G1和pSV2-dhfr/G3。将它们分别转染导入COS-7细胞,结果表明6种转移载体质粒转染的细胞上清液都有明显的EPO活性。人EPO cDNA基因转移载体质粒在COS-7细胞中的表达水平高于人次全EPO基因组转移载体质粒。     

EPO,EPOR及其信号传递研究进展

EPO(Erythropoietin,促红细胞生成素)是促进哺乳动物红系祖细胞增殖和分化的主要细胞团子。EPO与红系祖细胞表面的EPOR(EPO Receptor)结合后,通过信号传递使细胞核内特定基因转录发生改变。与其它造血生长因子不同,EPO主要作用于相对成熟的红系细胞。近年来,随着对人和动物的EPOR分子克隆以及EPOR突变体分析,使我们对EPO与EPOR的相互作用及其信号传递路径有了比较深入的了解。     

促红细胞生成素的抗炎症作用研究进展

促红细胞生成素是一种造血因子,临床中广泛应用于治疗各种原因造成的贫血。近年的研究发现,EPO具有多种非造血生物作用．其中对各组织以及全身炎症反应的保护作用已成为目前的研究热点之一。但目前EPO抗炎症作用相关的机制尚不明确。本文对EPO的抗炎症作用及其可能机制作一综述,并对EPO在临床中的应用前景进行了展望。