胚中脑黑质移植入震颤麻痹模型大鼠脑内的实验研究

将6 - 羟基多巴胺(6 - OHDA) 分两点注入SD大鼠左侧中脑黑质内侧端,制成震颤麻痹模型,毁损后6 ～8 周,用胚龄14～16 天同种胚鼠中脑黑质细胞悬液植入模型鼠尾壳核。实验分正常对照组,模型对照组,单纯胚中脑黑质移植组(MS组) ,含层粘蛋白Laminin 胚中脑黑质移植组(LMS组) ,含雪旺氏细胞胚中脑黑质移植组(SMS组) 。于移植后2 ～4 个月分别测试旋转试验,MS组、LMS组及SMS组与模型组间均有显著差异(P< 0-01) 。动物经测试后处死。脑切片观察发现,损伤侧中脑黑质DA神经元95% 以上死亡,移植组织位于尾壳核背侧或突入侧脑室,LMS组移植区> SMS组移植区> MS组移植区。三个移植区均见TH、GABA 免疫阳性细胞,其形态及大小与正常对照侧中脑黑质所见相似。LMS组与SMS组多巴胺阳性细胞突起较MS组多且长。本实验证明中脑黑质移植物Laminin 与雪旺氏细胞均能促进DA能神经元突起生长。     

肾上腺髓质脑移植能改变痛觉感受

最近,Illinois 大学的 Sagen 等采用肾上腺嗜铬细胞脑移植的方法,试图改变病觉感受。选用肾上腺嗜铬细胞作为移植物是由于这些细胞可释放去甲肾上腺素、肾上腺素、甲硫-脑啡肽、亮-脑啡肽及其它神经肽等活性物质,从而作用于中枢神经系统调节痛敏。达些活性物质的释放可被类似于尼古丁样的药物激活。首先将成年大鼠的肾上腺髓质组织颗粒或牛肾上腺嗜铬细胞定位注入大鼠中脑中央导水管周围灰质部位,然后分别在1、2、4和8周时间内皮下注射低剂量尼古丁(0.1mg/kg)以刺激移植细胞释放神经活性物质;     

胎脑黑质脑内移植矫正PD鼠纹状体内脑啡肽mRNA过度表达

用６－ＯＨＤＡ损毁大鼠一侧黑质—纹状体通路可引起ＰＤ模型鼠脑纹状体内多巴胺匿乏．同时,亦可导致脑啡肽ｍＲＮＡ过度表达。我们用地高辛标记的ｃＲＮＡ探针对纹状体内脑啡肽ｍＲＮＡ含量进行了斑点杂交定量研究,发现损伤侧脑啡肽ｍＲＮＡ含量较健侧增高８０％,胎中脑移植到失神经支配的纹状体内,脑啡肽ｍＲＮＡ过度表达得以矫正至正常水平,说明胎多巴胺能神经元脑内移植能够调节脑啡肽基因表达,提供了移植物能与宿主发生神经整合、建立突触联系的间接证据。     

科技文摘

脑组织移置的新进展 1980年有人报道:发现移植了脑组织的老鼠,其移植物形成了自己的供血系统,并和原来的脑组织合成一体,有的存活了六个月之久。1984年初在英国国立医学研究所所召开的学术讨论会上,报道了他们关于脑组织移置的一些最新研究成果[《科学》(日)1984.4]。例如:他们为了治疗人体因中脑黑质损伤,多巴胺的合成减少而引起的帕金森氏症(震颤麻痹),而将老鼠胎儿的黑质组织,移植到由切断一侧黑质—纹状体通路而引起实验性帕金森氏症的老鼠脑中,使症状得到了改善;他们将老鼠胎儿的黑质组织,注入衰老老鼠的纹状体周围,使老鼠通过因衰老而不能通过的狭桥,而下掉的次数也减少,他们将正常鼷鼠的下丘脑组织移     

损毁和刺激下丘脑弓状核区对大鼠脑和脊髓内亮-脑啡肽、多巴胺、去甲肾上腺素含量的影响

本工作分别采用新生期大鼠注射谷氨酸-钠(MSG)损毁弓状核区及电刺激弓状核(ARC)区的方法,观察对脑和脊髓内亮-脑啡肽(LEK)、多巴胺(DA)和去甲肾上腺素(NE)含量的影响。MSG 大鼠脑和脊髓内 LEK、NE 含量较对照组无明显变化,但端脑内 DA 含量显著升高。刺激 ARC 区后脊髓内 NE 含量明显上升。上述结果提示:弓状核区对端脑 DA 能系统可能具有某种紧张性抑制作用,而刺激弓状核产生的镇痛效应可能和下行 NE 能系统有一定关系。     

孤束核内的去甲肾上腺素在阿片奖赏效应中的作用

长期药物滥用使吸毒者的中枢神经系统内出现一系列的神经生物化学的变化,包括脑内儿茶酚胺类的去甲肾上腺素（NE）和多巴胺（DA）的变化。在近几十年有关的研究中,脑内多巴胺的作用受到很大关注。相比之下,虽然已知去甲肾上腺素广泛参与阿片的戒断过程,但是在阿片引发的运动和奖赏效应中的作用所知甚少。     

新生小牛肾上腺髓质嗜铬细胞的原代培养及其儿茶酚胺的分泌

目的：原代培养新生小牛肾上腺髓质嗜铬细胞,观察离体条件下肾上腺髓质细胞的生长和儿茶酚胺的分泌特性。方法：密度梯度离心和差速贴壁法分离和纯化肾上腺髓质细胞,ELISA检测培养上清液中肾上腺素和去甲肾上腺素的浓度变化。结果：肾上腺髓质嗜铬细胞生长良好。4～6周起细胞出现终极分化。培养液中儿茶酚胺浓度在第2～8 d内稳定,第10 d开始明显下降。结论：应用单细胞培养法可以成功建立原代肾上腺髓质嗜铬细胞,并可在原代培养前8d内进行细胞行为学的研究。     

乙酰胆碱和A23187对离体大鼠肾上腺髓质细胞肾上腺素分泌的作用

通过胆碱能激动剂乙酰胆碱及离子诱导剂A23187（以下简称激动剂）作用于分离的肾上腺髓质细胞,以引起离体细胞的刺激－分泌耦联过程,运用细胞立体形态计量法计算分泌过程中的嗜铬颗粒数目的变化,运用电镜X射线显微分析法测量分泌过程中嗜铬颗粒内钙含量的变化,并运用高 液相色谱分析法测定离体细胞在激动剂作用后的肾上腺素分泌情况,结果发现,分离的肾上腺髓质细胞嗜铬颗粒内钙含量在激动剂作用10min时有明显下降,颗粒数目在激动剂作用过程中呈缓慢下降趋势,而细胞悬液中的肾上腺素含量在激动剂作用20min以后有明显的升高,激动剂作用引起的离体肾上腺髓质的细胞分泌时颗粒内钙含量的下降早于颗粒数目减少或肾上腺素升高,提示颗粒释放的Ca^2 可能是引起细胞分泌的原因之一。     

微电泳多巴胺对大鼠黑质—尾壳复合体单位放电的影响

形态学证实:脑内存在黑质-新纹状体多巴胺能系统。但对该系统在新纹状体内的作用迄今仍有争议。York等用细胞外记录的方法证明:发自黑质的多巴胺能系统对尾壳复合体的单位放电主要起抑制性调节作用。但Kitai等用细胞内的记录方法观察到该系统对尾壳复     

侧脑室注射肾上腺髓质素对大鼠脑内心血管相关核团儿茶酚胺神经元及c-fos表达的影响

目的和方法:利用Fos蛋白和酪氨酸羟化酶(TH)的双重免疫组化方法,观察侧脑室注射肾上腺髓质素对大鼠心血管相关核团中儿茶酚胺神经元及c fos表达的影响,以探讨肾上腺髓质素的中枢效应是否通过激活脑内儿茶酚胺能神经元而诱发。结果:①侧脑室注射肾上腺髓质素(3nmol/kg)诱发脑干、下丘脑及前脑等多个部位的心血管中枢出现大量Fos样免疫反应神经元。②侧脑室注射肾上腺髓质素引起最后区(AP)、孤束核(NTS)、巨细胞旁外侧核(PGL)和蓝斑核(LC)内Fos TH双标神经元明显增加。③降钙素基因相关肽受体拮抗剂CGRP8-37(30nmol/kg)可明显减弱肾上腺髓质素的效应。结论:肾上腺髓质素可兴奋脑干、下丘脑及前脑等多个部位心血管相关核团的神经元,其中枢效应通过激活儿茶酚胺能神经元而诱发,降钙素基因相关肽受体介导这一效应。     

肾上腺髓质切除对慢性间歇性缺氧大鼠的血管重塑作用

摘要 目的：探究肾上腺髓质切除对慢性间歇性缺氧（CIH）大鼠的血管重塑作用。方法：将32只大鼠随机分为慢性间歇性空气（CIA）假手术组、CIA手术组、CIH假手术组、CIH手术组。制备CIH模型，手术组在缺氧前行肾上腺髓质切除术，假手术组行相同操作但不切除肾上腺髓质。测量尾动脉血压；ELISA法检测血清肾上腺素（E）、去甲肾上腺素（NE）含量；HE、Masson染色和荧光显微镜观察胸主动脉形态，计算胸主动脉中膜厚度、胶原容积分数和弹性纤维紊乱断裂比例；IHC观察胸主动脉α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达；TUNEL观察胸主动脉细胞凋亡率；WB检测胸主动脉天冬氨酸半胱氨酸酶-3（Caspase-3）蛋白表达。结果：与CIA假手术组比较，CIH假手术组E、NE、尾动脉收缩压、舒张压、胸主动脉中膜厚度、胶原容积分数、弹性纤维紊乱断裂比例、α-SMA水平、细胞凋亡率、Caspase-3表达升高（P＜0.05）；与CIH假手术组比较，CIH手术组E、NE、尾动脉收缩压、舒张压、胸主动脉中膜厚度、胶原容积分数、弹性纤维紊乱断裂比例、α-SMA水平、细胞凋亡率、Caspase-3表达降低（P＜0.05）。结论：切除肾上腺髓质可改善由慢性间歇性缺氧引起的大鼠胸主动脉重塑。     

儿茶酚胺的生物合成与代谢

儿茶酚胺(catecholamines)是具有儿茶酚核的胺类化合物。已经发现,哺乳动物体内存在的儿茶酚胺有四种,即:去甲肾上腺素、肾上腺素、儿茶酚乙胺(dopamine)及异丙基去甲肾上腺素(isopropylnoradrenaline)。已证明,去甲肾上腺素是肾上腺素能神经的传递介质,可能还参予中枢神经系统的化学传递。它和肾上腺素都是肾上腺髓质分泌的重要激素。儿茶酚乙胺发现较晚,已知它是合成去甲肾上腺素的前体,在神经系统内含量较多;它本身可能也有重大的生理意义,例如,它可能与锥体外系统的功能有关。异丙基去甲肾上腺素系自猫、猴及人等的肾上     

两种吗啡依赖大鼠模型脑内单胺神经递质水平的比较

目的通过对吗啡诱导的躯体依赖与精神依赖两种大鼠模型脑内单胺类递质水平的比较,探讨其在吗啡依赖形成中的作用。方法采用剂量递增法复制吗啡依赖大鼠模型,然后用纳洛酮催促,引起躯体戒断症状。连续给予吗啡（5mg／kg,ip）6d,引起大鼠产生显著的条件性位置偏爱效应。脑组织去甲肾上腺素（NE）、5-羟色胺（5-HT）和多巴胺（DA）含量采用荧光分光光度法测定。结果吗啡依赖大鼠催促戒断后脑内NE和5-HT水平明显升高,DA水平下降。吗啡在引起大鼠明显位置偏爱的同时,使大鼠脑内DA和5-HT水平显著升高,NE无明显改变。结论吗啡依赖的形成和戒断与脑内单胺神经递质有密切关系,吗啡依赖的躯体戒断症状与NE升高有关,而吗啡诱导的精神依赖则与脑内DA水平升高有关。     

肾上腺素能受体

肾上腺素(E)是肾上腺髓质的主要激素,去甲肾上腺素(NE)是外周肾上腺素能神经冲动传递的主要介质。一般解释 E 和 NE 的作用是在效应器上有一种“受体(receptor)”。这种受体学说最早创始者 Ehrlich,经 Langley 在1905年应用于植物神经的药物,他认为:药物或神经末梢释放的介质与效应细胞上特殊受体或受点发生化学性的结合,通过     

自发性高血压大鼠中枢去甲肾上腺素与血管紧张素Ⅱ的含量及相互关系

用荧光分光与放射免疫法,分别测定自发性高血压大鼠(SHR)与正常血压 WKY:大鼠脑内不同部位的去甲肾上腺素(NE)与血管紧张素Ⅱ(AⅠ)的含量。用尾筒法测量清醒大鼠尾动脉压。结果发现第8周龄 SHR 的血压及延脑、脑桥、下丘脑与尾核 NE 与 A Ⅱ含量和同龄WKY 相比,无明显差异。第12周龄以后,SHR 的血压逐渐升高,至20周龄时不再升高,维持在接近16周龄时的水平。可是 WKY 的血压无明显变化。在血压升高的早期与后期SHR 延脑、脑桥、下丘脑及尾核内 AⅡ含量显著高于 WKY,但 NE 的含量变化却不同,在早期与 WKY 有明显差异,而在高血压的后期无明显差异。提示在 SHR 高血压的早期 NE与 A Ⅱ均起作用,而在后期只 A Ⅱ起作用。向 SHR 侧脑室分别注射 Captopril 与6-OHDA,均引起血压下降,延脑与下丘脑内 AⅡ与 NE 含量均下降,两者表现同向关系。SHR 脑内AⅡ与 NE 这种同向变化在高血压的发生中可能起重要作用。     

黑质内微量注射P物质对大鼠旋转行为的影响

研究表明 ,帕金森病 (ＰＤ)的发生是因中脑黑质多巴胺 (ＤＡ)能神经元变性 ,导致纹状体内ＤＡ释放量减少所致。目前有补充ＤＡ ,应用Ｍ受体阻断剂 ,脑内刺激及基因移植等治疗方法 ,但不能缓解所有症状。有人证明帕金森病时 ,黑质内Ｐ物质和ＧＡＢＡ的浓度明显低于正常 ,且降低幅度与发病的严重程度呈平行关系。说明帕金森病的发生可能还与黑质 纹体 黑质之间的其它神经递质作用失衡有关。黑质是Ｐ物质和ＧＡＢＡ含量很高的核团之一 ,对黑质的功能有重要的调节作用。本研究采用黑质网状部微量注射方法 ,观察不同浓度的Ｐ物质对ＡＰＯ诱发的…     

脑室注射6-羟多巴胺对黄鼠冬眠入眠的影响

采用脑室内注射化学去交感药物6-羟多巴胺(6-OHDA)的方法,观察了人为地降低脑内去甲肾上腺素(NE)系统活动对达乌尔黄鼠入眠的影响。结果表明:脑室注射100-200μg6-OHDA使脑内NE含量减少50％以上,明显促进黄鼠入眠,平均入眠诱导期比自然冬眠动物明显缩短,整个冬眠季内冬眠时间延长,冬眠黄鼠仍具有正常的入眠觉醒周期。这些结果提示脑内NE系统活动水平降低是触发动物入眠的重要因素之一。     

DJ-1保护大鼠中脑黑质多巴胺能神经元抵抗鱼藤酮损伤的研究

目的:探讨过表达DJ-1蛋白能否保护大鼠中脑黑质多巴胺能神经元抵抗鱼藤酮所致的急性损伤.方法:构建表达DJ-1基因的腺相关病毒载体(rAAV-DJ-1)并转染HEK-293细胞,进行腺相关假病毒颗粒包装,所得假病毒颗粒注射到大鼠脑内感染黑质神经细胞;4周后,注射鱼藤酮于大鼠黑质相同脑区;通过免疫组织化学和免疫印迹试验鉴定TH蛋白表达情况,采用动物行为轨迹分析软件计算大鼠30 min内运动距离以及强迫游泳试验鉴定大鼠精神症状.结果:与对照组相比,过表达D J-1组大鼠运动损伤症状较轻,精神症状改善明显;损伤侧黑质TH阳性神经元数目和TH蛋白表达水平显著高于对照组.结论:过表达DJ-1蛋白能保护大鼠黑质多巴胺能神经元抵抗鱼藤酮所致的急性损伤,延缓多巴胺能神经元的退行性变,提示DJ-1可能对帕金森病的治疗有较好的应用前景.     

区分大白鼠肾上腺髓质内去甲肾上腺素细胞的一种有效方法

本文介绍一种适用于光镜和电镜观察大白鼠肾上腺髓质去甲肾上腺素细胞(NA)和肾上腺素细胞(A)的方法。通过光镜明、暗视野对比观察,发现在暗视野下,不仅易于区分肾上腺髓质 NA 和 A,而且可以指导同一组织块进一步定位超切做电镜观察。该方法简便,实用。     

大鼠第三脑室及中脑水管多巴胺能触液神经元的分布

目的观察大鼠第三脑室、中脑水管及中缝背核内多巴胺能触液神经元的分布情况.方法应用CB逆行追踪、TH免疫组织化学和CB/TH免疫荧光双重标记技术,观察多巴胺能触液神经元在间脑及中脑内的分布情况.结果 TH免疫阳性触液神经元分布在第三脑室尾侧部和中脑水管全程的腹侧室管膜上及室管膜内,其胞体呈倒置梨形、圆形或椭圆形、多角形和梭形;在中缝背核内可见少量CB/TH免疫荧光双重标记的远位触液神经元;另在正中隆起部位TH免疫阳性神经末梢含量丰富.结论大鼠第三脑室、中脑水管及中缝背核内存在多巴胺能触液神经元,其在脑-脑脊液之间的信息传递中有着重要的作用.