基于铈元素的荧光侧向液流免疫层析用于降钙素原测定

基于铈元素(Ce)的荧光侧向液流免疫层析(lateral-flow immunoassays,LFIA)技术,开发一种用时短、检测限低的方法,定量测定降钙素原(procalcitonin,PCT),以满足临床检测和诊断的需求。经反向微乳化、氨基修饰、包被Ce,合成Ce微球;其经活化、洗涤,用PCT抗体标记结合和封闭制备微球悬浮剂,固化液相、固定包被和质控抗体、组装和切割等步骤制备PCT试纸条,检测PCT标准品;通过精密度、正确度、回收率、交叉反应和热稳定实验分析该PCT试纸条的临床价值。实验结果显示:用1%含量的Ce微球、100μg标记抗体、Blockmaster TM CE510封闭剂制备的PCT试纸条,采用LFIA法检测PCT,仅需4 min完成检测,大大缩短实验时间;检测限达0.10μg/L;且无边缘和钩状效应、交叉反应;成本低、精密度和准确度高、回收率佳、热稳定性好。因此,本实验基于Ce的LFIA法,成功研发了一种快速、灵敏的PCT床旁定量检测。     

血清降钙素原测定在ICU感染中的应用研究

目的探讨血清降钙素原测定在ICU患者感染诊断及预测中的应用价值。方法对我院ICU 2011年1月~2012年12月收治的102例患者进行病原学检查,并根据诊断结果,将患者分为感染组和非感染组,同时检测两组患者的血清PCT水平,并比较分析。另外,分别以0.5μg/L和0.2μg/L为阀值,观察不同阀值下血清PCT预测感染发生的灵敏度、特异性、阳性预测值和阴性预测值,以期探寻降钙素原预测细菌感染发生的准确阀值。结果 102例患者中,感染组患者62例,平均血清PCT水平为(4.35±2.33)μg/L;未感染组患者40例,平均血清PCT水平为(1.22±1.02)μg/L。两组患者的血清PCT水平比较差异具有统计学意义(P0.01)。当阀值为0.2μg/L时,血清PCT预测感染发生的灵敏度、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为77.42%、60%、75%、63.16%;当阀值为0.5μg/L时,依次为95.16%、85%、90.77%、91.89%。两个阈值比较,差异具有统计学意义(P0.01)。结论血清降钙素原水平升高可作为诊断ICU感染的重要敏感指标,当血清降钙素原阀值为0.5μg/L左右时,可提高血清PCT预测细菌感染发生的灵敏度、特异性。     

PCT与IL-6联合检测鉴别诊断脓毒性和非脓毒性全身炎症反应综合征的临床价值

目的:探讨降钙素原(PCT)与白细胞介素-6(IL-6)联合检测鉴别诊断ICU患者脓毒性和非脓毒性全身炎症反应综合征(SIRS)的临床价值。方法:选择2013年~2016年入住我院ICU的100例患者,包括61例非脓毒性SIRS患者与39例脓毒症患者,同时选择同期50例健康者作对照,分别设为非脓毒性组、脓毒血症组及对照组,采用电化学发光分析法检测三组血清PCT与IL-6水平,并以PCT为2μg/L和IL-6为50 ng/L为临界值来鉴别非感染性SIRS和脓毒血症,评价联合检测的临床诊断价值。结果:非脓毒性组PCT与IL-6最大值分别为0.91±0.54μg/L、62.77±11.75 ng/L,脓毒血症组为24.49±5.00μg/L、1542.69±361.66 ng/L,对照组为0.08±0.06μg/L、3.68±1.11 ng/L,非脓毒性组与脓毒血症组PCT与IL-6最大值均显著高于对照组(P0.05);与非脓毒性组比较,脓毒血症组PCT与IL-6均显著升高(P0.05)。非脓毒性组PCT2μg/L、IL-650 ng/L的占比分别为21.31%、65.57%,脓毒血症组为92.31%、87.18%,脓毒血症组PCT2μg/L、IL-650 ng/L的占比均显著提高于非脓毒性组(P0.05)。PCT的阳性预期值、灵敏度、特异度均显著高于IL-6,而联合检测的阳性预期值、特异度显著高于IL-6及PCT,联合检测的灵敏度显著高于IL-6,P均0.05。结论:PCT与IL-6联合检测有助于脓毒性和非脓毒性SIRS的鉴别诊断。     

量子点免疫层析快速定量检测HCG

近年来,量子点以其独特的光学性质被广泛应用到医学检测上.血清中人绒毛膜促性腺激素(HCG)的含量是诊断早期妊娠的常用指标,也可用于异常妊娠性疾病的早期发现和鉴别诊断.本文采用超声乳化法制备了高质量的亲水性量子点,并将其与免疫层析试纸条技术相结合,在此基础上自主研发了用于试纸条检测的量子点免疫荧光检测仪,对血清中HCG的含量进行了高灵敏度的快速定量检测.结果表明,对于血清中的HCG含量检测,最优检测条件为加样体积50μl,反应时间15 min,检测的灵敏度达到0.85 U/L,高于商品化的胶体金试纸条.这种检测技术简单、快速、灵敏,有望在其他蛋白质类标志物的检测中得到广泛应用.     

降钙素原在糖皮质激素治疗后白细胞增高个体中的检测意义

目的探讨血清降钙素原(PCT)检测对判断糖皮质激素治疗个体外周血白细胞升高是由于糖皮质激素作用还是发生细菌感染的意义。方法采用双抗夹心免疫荧光法检测血清PCT。结果抗生素治疗72h前,PCT为(6.08±4.39)×106μg/L,治疗后PCT为(0.52±0.24)×106μg/L,治疗前后对比,PCT明显下降,差异有统计学意义(t=30.848 5,P0.01)。结论 PCT可以作为鉴定糖皮质激素治疗个体感染性或非感染性白细胞升高的重要辅助指标,可以早期发现感染,连续监测血清PCT水平可以指导抗生素用药并且能判断疗效和预后。     

血清降钙素原鉴别病毒性感染、一般性细菌感染和重症细菌性感染的临床应用价值

目的:研究血清中降钙素原在病毒性感染、一般性细菌感染和重症细菌性感染患者中的应用价值。方法:选择2014年6月~2016年12月在我院重症医学科进行诊治的感染患者60例,按照患者感染的严重程度分为病毒性感染患者(A组)15例,一般细菌感染组(B组)22例以及重症细菌性感染组(C组)23例。三组患者均采取纠正水电解质平衡、抗生素抗感染和营养支持等对症治疗,并在入院后第1、3、5、7 d检测患者的血清降钙素原水平,比较三组治疗前后血清降钙素原水平的差异,观察三组血清降钙素原≥0.5μg/L的例数。结果:B组血清降钙素原≥0.5μg/L的例数为20例,占90.91%,C组血清降钙素原≥0.5μg/L的例数为21例,占91.30%,B组和C组之间相比无明显差异(P0.05),但A组血清降钙素原≥0.5μg/L的例数为3例,占20.00%,明显低于B组和C组血清降钙素原≥0.5μg/L的例数,差异均具有统计学意义(P0.05);C组入院后第1、3、5、7 d的血清降钙素原水平均明显高于B组的血清降钙素原水平,差异均具有统计学意义(P0.05);重症细菌性感染患者中,血清降钙素原≥0.5μg/L的患者存活率明显低于血清降钙素原0.5μg/L的患者(P0.05)。结论:血清中降钙素原水平对于重症感染患者的临床诊断和治疗具有较好的应用价值,对于医生判断重症感染患者的预后情况具有很好的效果,值得临床广泛应用推广。     

CA19-9时间分辨荧光免疫层析检测方法的建立

本研究旨在建立一种定量检测血清中CA19-9含量的时间分辨荧光免疫层析检测方法。采用双抗体夹心法与荧光免疫层析技术,以羧基荧光微球和NC膜为载体将CA19-9配对抗体进行标记和包被,制备CA19-9检测试纸条。通过标记、包被抗体量对工艺进行优化,并通过线性范围、最低检出限、精密性等性能指标对CA19-9时间分辨荧光层析检测方法进行评价。最终确定20μL荧光微球的标记抗体量为80μg,检测线包被抗体浓度为1.5 mg/mL时,检测时间为15 min,线性范围为12.5–800 U/mL,最低检出限为6.32 U/mL,批内精密性与批间精密性均小于15%,平均回收率为101%,与罗氏电化学发光检测试剂盒平行检测50份临床样本,两者相关系数为0.980 6。初步建立了定量检测血清中CA19-9的荧光免疫层析检测方法,有较好的临床应用前景。     

血清PCT在老年社区获得性细菌性肺炎的临床应用价值

目的分析血清降钙素原(PCT)对老年社区获得性细菌性肺炎的诊断价值及对抗生素药物使用的指导作用。方法将我院确诊为社区获得性肺炎的老年患者100例根据致病菌的不同分为细菌组60例、病毒组20例和支原体组20例,比较三组血清降钙素原、C-反应蛋白和白细胞计数的水平差异。细菌组的60例中30例患者(PCT组)根据血清降钙素原的水平变化来指导抗生素的应用,另外30例患者(常规组)采用常规方法使用抗生素,比较两小组临床治疗效果和炎性指标的变化。结果细菌组患者的血清降钙素原水平[(1.73±0.43)μg/L]明显高于病毒组[(0.12±0.03)μg/L]和支原体组[(0.19±0.05)μg/L](P0.05);血清降钙素原对老年社区获得性细菌性肺炎的诊断特异性(96.67%)明显优于C-反应蛋白(66.67%)(P0.05)。细菌组治疗后,PCT组各项指标明显好于常规组,差异有统计学意义(P0.05)。结论血清降钙素原诊断老年社区获得性细菌性肺炎的特异性较高,对抗生素药物的应用具有指导应用,避免了细菌耐药的发生,建议在临床上广泛使用。     

多枝状胶体金免疫层析试纸条定量检测猪尿中沙丁胺醇

以65 nm多枝状胶体金(金纳米花,Au NFs)为新型探针,建立了检测猪尿中沙丁胺醇(SAL)的免疫层析新方法。采用吸附方法将抗SAL单克隆抗体标记在Au NFs上制备检测探针,以牛血清白蛋白-SAL偶联物及羊抗鼠二抗喷涂在硝酸纤维素膜上形成试纸条检测线(T线)和质控线(C线),建立了基于T/C比值法定量检测猪尿中沙丁胺醇的新方法。Au NFs免疫层析试纸条检测SAL的定量线性范围为0.05~1.0 ng/m L(y=-21.4 ln x+10.407,R~2=0.995),半数抑制浓度(IC_(50))为0.143 ng/m L(n=5),检测猪尿中SAL的最低检测限为0.027 ng/m L。单个样品定量检测时间12 min。加标回收实验显示,试纸条批内加标回收率为101.53%~110.68%,批间加标回收率为98.86%~110.50%,批内、批间实验相对标准偏差(RSD)均小于10%。将Au NFs免疫层析试纸条与商业化酶联免疫试剂盒同时检测50个SAL加标的猪尿样品,两种方法检测结果具有良好的相关性(R~2=0.955)。     

血清PCT联合痰培养检测在呼吸道感染疾病中的应用

目的:研究血清降钙素原(PCT)联合痰培养检测在呼吸道感染疾病中的应用价值。方法:选择2012年1月至2014年12月在我院接受治疗的呼吸道感染患者100例进行研究。分析痰培养菌群的分布情况以及PCT的检测结果,对比痰培养细菌感染者及真菌感染者的菌种分类及PCT检测结果。结果:检出病原菌的患者PCT水平均分别显著高于正常菌群及未见细菌生长的患者,差异均有统计学意义(均P0.05)。细菌感染PCT阳性比例与真菌感染相比,差异无统计学意义(P0.05)。细菌感染中,革兰氏阳性菌的PCT水平(0.74±0.33μg/L)与革兰氏阴性菌(0.72±0.24μg/L)对比,差异无统计学意义(P0.05)。真菌感染中,白假丝酵母菌及烟曲霉菌的PCT阳性比例最高,分别为60.00%及80.00%。结论:血清PCT与痰培养检测应用于评价有呼吸道感染的患者病情,具有一定的反馈意义,但无法确定患者的呼吸道感染究竟是细菌感染亦或是真菌感染。     

Recent advances in the study of Kaposi's sarcoma-associated herpesvirus replication and pathogenesis

It has now been over twenty years since a novel herpesviral genome was identified in Kaposi's sarcoma biopsies. Since then, the cumulative research effort by molecular biologists, virologists, clinicians, and epidemiologists alike has led to the extensive characterization of this tumor virus, Kaposi's sarcoma-associated herpesvirus(KSHV; also known as human herpesvirus 8(HHV-8)), and its associated diseases. Here we review the current knowledge of KSHV biology and pathogenesis, with a particular emphasis on new and exciting advances in the field of epigenetics. We also discuss the development and practicality of various cell culture and animal model systems to study KSHV replication and pathogenesis.     

The structure, reproduction and taxonomy of Vidalia and Osmundaria (Rhodophyta, Rhodomelaceae)

Comprises species occurring mostly in subtidal habitats in tropical, subtropical and warm-temperate areas of the world. An analysis of the type species, V. spiralis (Sonder) Lamouroux ex J. Agardh, a species from Australia, establishes basic characters for distinguishing species in the genus. These characters are (1) branching patterns of thalli, (2) flat blades that may be spiralled on their axis, (3) width of the blade, (4) primary or secondary derivation of sterile and fertile branchlets and (5) position of sterile and fertile branchlets on the thalli. Application of the latter two characters provides an important basic method for separation of species into three major groups. Osmundaria , a genus known only in southern Australia, was studied in relation to Vidalia , and its separation from the Vidalia assemblage is not accepted. Species of Vidalia therefore are transferred to the older genus name, Osmundaria. Two new species, Osmundaria papenfussii and Osmundaria oliveae are described from Natal. Confusion in the usage of the epithet, Vidalia fimbriala Brown ex Turner has been clarified, and Vidalia gregaria Falkenberg, described as an epiphyte on Osmundaria pro/ifera Lamouroux, is revealed to be young branches of the host, Osmundaria prolifera.     

New or rare chromosome counts in Artemisia L. (Asteraceae, Anthemideae) and related genera from Kazakhstan

Fifteen chromosome counts of six Artemisia taxa and one species of each of the genera Brachanthemum, Hippolytia, Kaschgaria, Lepidolopsis and Turaniphytum are reported from Kazakhstan. Three of them are new reports, two are not consistent with previous counts and the remainder are confirmations of very scarce (one to four) earlier records. All the populations studied have the same basic chromosome number, x = 9, with ploidy levels ranging from 2x to 6x. Some correlations between ploidy level, morphological characters and distribution are noted.     

肝癌中HBV和HCV基因和抗原的分布及意义

采用原位分子杂交方法检测HCV RNA及HBV X基因;采用免疫组织化学方法研究HCV核心抗原,非结构区C33c抗原及HBxAg在肝细胞肝癌中的定位及分布.结果表明(1)HCV RNA、HBV X基因在肝细胞肝癌组织检出率分别为40%(55/136)和82%(112/136).HCV RNA定位于癌细胞的胞浆内,阳性细胞呈散在、灶状及弥漫分布三种形式;HBV X基因在肝癌细胞中的分布呈胞浆型、核型及核浆型,阳性细胞也呈上述三种分布形式;(2)HCV C33c抗原、核心抗原在肝细胞肝癌中的阳性率为81%(133/164)及86%(141/164).C33c抗原定位于癌细胞及肝细胞的胞浆内;核心抗原既定位于癌细胞核中,又可定位于胞浆中.C33c抗原阳性细胞以灶状分布为主;而核心抗原阳性细     

Selection with two alleles and complete dominance

For a plant selection model with frequency-independent viabilities, fertilities and selfing rates, it is shown that apart from global fixation, for certain parameter combinations a protected polymorphism and facultative fixation (either allele may become fixed according to initial frequencies) may both occur. Facultative fixation requires different selling rates for the dominant and recessive type. Protection of the polymorphism requires resource allocation for male and female function. In this connection the problem of purely genetically caused population extinction is discussed.
For general frequency dependence and regular segregation, the chances for establishment of a completely recessive gene are compared to those of a completely dominant gene. It is proven that the process of establishment of the recessive gene, despite a fitness advantage, may be considerably endangered by drift effects if random mating prevails. The recessive gene may reach the same effectivity in establishment as a dominant gene, only if the recessive homozygote mates exclusively with its own type during the period of establishment.