花生(Arachis hypogaea)叶片愈伤组织的诱导与植株再生

在农业生产上应用植物组织培养技术对有些作物来说,有可能加速良种的繁殖、优良突变体的选择以及克服一些常规育种难以解决的问题等等。因此,在农业生产上正在逐步为人们所接受,并在许多大田作物上成功地诱导出再生植株。本文报道花生叶组织诱导植株再生的结果,以探索组织培养在花生生产上应用的可能性。     

基因型对玉米花药和盾片离体诱导频率的影响

近年来随着玉米细胞和组织培养研究的进 展,已开始着手在细胞和组织水平上改良玉米。 Green等^[5]诱导玉米盾片愈伤组织首次获得体 细胞再生植株。Gengenbach等^[6]从诱导的体细 胞组织筛选获得抗大斑病的玉米品系。中国科 学院遗传研究所^[1][2]获得玉米花粉植株自 交结实,为快速培育玉米自交系开创了道路。吴 甲林等^[3]、陈力等[4]通过花粉培养获得优良自交 系而开始组配杂交种。这些报道均提到诱导及 诱导频率高低与基因型有关。用花药培养易于 和不易于诱导的玉米杂交种能否诱导出体细胞 再生植株？它们二者有无关系。本文报道这方 面的试验初步结果。     

马铃薯叶肉细胞再生植株研究初报

早在五十年代,人们就以消除病毒为目的 进行马铃薯茎尖培养。六十年代,花药培养技 术应用于作物育种,七十年代Y. Irikura等从野 生马铃薯花药获得（2,一12）单倍体植株^[7] J. F. Shapard, R. E. Totter等人通过马铃薯叶 肉细胞原生质体培养获得了再生植株^[8], P.Γ。 БyTeJKO , A. A. KyИKO。最近报道栽培马铃薯和 野生种叶肉细胞原生质体融合〔^[9]。我国黑龙江 克山农科所报道了马铃薯茎尖培养种薯^[2],最 近甘肃省农科院王玉娟等人获得栽培马铃薯花 药再生植株^[1],关于叶肉细胞培养再生植株的 研究尚未见报道。     

构祀下胚轴、茎端和幼嫩子房的愈伤组织诱导及其植株再生

宁夏拘祀是贵重的中药材,构祀子人药或 为酒料有坚筋骨、补肝肾、滋肾润肺的功能。拘 祀子还可以做为食品加工的原料,制成各式糕 点。我国所产拘祀子,特别是宁夏拘祀子,除国 内需用外,每年还大量出口。黑果病是拘祀子 主要病害,由于黑果病的危害,使其品质下降, 大幅度减产,严重时减产竟达50-80%^[1]。为 了筛选抗病突变体,我们从下胚轴、茎端和幼嫩 子房诱导愈伤组织,并使其再生植株。目前,国 内已有人做了叶片^[2][3]和花药^[4]组织培养并得 到植株,但尚未见由下胚轴、茎端和幼嫩子房培 养诱导形成完整植株的报道。     

花烟草原生质体的再生植株1)

花烟草（Nicotiana alata Link Otto）由于其 有明显的形态特点以及含有2n - 18个染色体 的细胞学特征易区别于普通烟草（2n=48)。这 种野生的烟草是组织培养及细胞杂交中的一个 有用材料。Bourgin, P.^[2]曾由此种烟草的单倍 体叶肉原生质体培养出再生植株,但其倍性变 化较多。我们选用N. alata的二倍体叶肉原生 质体进行分化培养,获得大量稳定的二倍体再 生植株。     

水杉愈伤组织诱导及植株再生

通过愈伤组织诱导器官发生途径, 建立了水杉(Metasequoia glyptostroboides)的植株再生体系, 探讨了不同外植体 (种胚、幼叶切块、茎段、根段)和植物生长调节剂对不定芽直接再生和愈伤组织诱导器官发生的影响。结果表明: 以种胚、无菌苗叶片、茎段和根作为外植体, 在MS补加2,4-D、NAA和6-BA不同组合的培养基上都能诱导得到愈伤组织, 其中种胚诱导愈伤组织效果最好, 诱导率可达100%, 茎诱导效果次之, 诱导率为97.1%。诱导愈伤组织效果较好的培养基有:MS+1.0 mg·L^–1 2,4-D + 0.5 mg·L^–1 6-BA、MS + 0.1 mg·L^–1 6-BA + 1.0 mg·L^–1 NAA、MS + 0.5 mg·L^–1 6-BA+1.0 mg·L^–1 NAA、MS+1.0 mg·L^–1 6-BA+1.0 mg·L^–1 NAA、MS+0.5 mg·L^–1 6-BA+2.0 mg·L^–1 NAA、MS+1.0 mg·L^–1 6-BA + 2.0 mg·L^–1 NAA和MS + 0.5 mg·L^–1 2,4-D + 0.5 mg·L^–1 NAA。以愈伤组织在MS培养基上植株再生效果最好, 再生率为62.5%。     

粉兰烟草原生质体再生植株

原生质体培养成再生植株是植物休细胞杂 交的关键环节。烟草是原生质体培养和体细胞 杂交的常用材料。烟草属的几个种已能成功地 由原生质体培养成再生植株。野生的粉兰烟草 (N. glazsca)由于具有染色体数目（2n一24）比 普通烟草（2n=48）少的优点,并已成功地被 用车体细胞杂交的亲木之一^[3,4]。本文介绍粉兰 烟草从原生质体游离到植株再生的实验结果。     

离体培养的玉米花药及花粉植株后代过氧化物酶同工酶的分析

近年来,同工酶技术在生物学研究中已得 到广泛的重视与应用^[8,9,11,12]。一些研究表明, 同工酶可以用于预测杂种优势^[3,4]、筛选抗病品 种^[2]鉴定远缘杂交种和花药培养获得的花粉 植株^[10]。我们对玉米不同材料、未培养与培养 的花药以及花粉植株后代的过氧化物酶同工酶 的表现进行了研究,以便探明过氧化物酶同工 酶在不同材料上的差异;在培养过程中酶的变 化以及与花粉植株后代的遗传学表现之间的关 系。本文将报道上述实验结果。     

菠萝幼果的诱导和植株的再生

菠萝[Ananas comosus (L.) Merr.)是畅销国内外名果之一,不论是鲜食或罐藏均受人们欢迎。关于菠萝组织培养的研究国内外已有不少成功的报道,但多数以叶鞘为材料。1978年广西农学院林惠端等以叶鞘作材料诱导出再生植株并移植成活[1]。至于菠萝幼果离体培养再生植株,日本虽已有报道,但培养程序很繁琐,国内则尚未见正式报道。     

水稻花粉愈伤组织在继代培养中的分化能力及其染色体变异

在植物组织和细胞培养中,普遍存在着随 继代培养时间的延长,离体培养组织和细胞的 分化和再生植株的能力逐渐下降以至完全消失 的问题,阻碍了组织培养技术的应用。据国内 外报道,胡萝卜（Sgono,1965)、烟草（Murashige 和Nakano, 1965）和水稻(Oono,1975）在继 代培养数代后再生植株的能力完全消失。但谷 明光等用玉米花粉愈伤组织继代培养两年以上 仍具有很强的再生植株的能力^[1]     

怀山药类原球茎的诱导形成与植株再生

为提高山药离体繁殖的速度, 缩短繁殖周期, 以铁棍山药(Dioscorea opposita cv. ‘Tiegun’)带腋芽茎段为材料, 对类原球茎的诱导、增殖、分化与植株再生进行了研究。结果表明, 铁棍山药类原球茎诱导的最适培养基为MS+1.0 mg·L^-1 TDZ+30 g·L^-1蔗糖, 增殖的最适培养基为MS+9 mg·L^-1 6-BA+30 g·L^-1蔗糖, 分化的最适培养基为MS+2 mg·L^-1 KT+0.02 mg·L^-1 NAA+30 g·L^-1蔗糖, 最适生根培养基为1/4MS+0.05 mg·L^-1 NAA+1.0 mg·L^-1 PP333+15 g·L^-1蔗糖, 生根率达80%, 移栽成活率可达85%。类原球茎的诱导形成及植株再生体系的建立为怀山药种苗的快速繁殖提供了一条新途径。     

椪柑营养诊断的DRIS初步标准

自1973年Beaufils提出综合诊断施肥法(Diagnosis and Recommendation Integrated System,简称DRIS)^[1]后,Sumner等人相继制订了大豆^[2]、玉米^[3]、甘蔗^[4]、马铃薯^[5]和小麦^[6]等农作物的DRIS标准,并在生产中获得了广泛的应用。但在柑桔生产中,直到1984年Beverly等人才建立伏令夏橙的DRIS标准^[7]。而对椪柑的DRIS标准则至今尚未见报道。本文根据庄伊美等报道的福建省24个高产(亩产2000-5000公斤)椪柑园的资料^[8],试图制订椪柑的DRIS初步标准,以供生产上应用之参考。     

地皮消愈伤组织诱导及植株高效再生体系的建立

以地皮消(Pararuellia delavayana)无菌实生苗带叶茎尖和带节茎段为外植体, 探讨不同植物激素种类及组合对愈伤组织诱导、芽丛发生及植株再生的影响。结果表明, 地皮消组织培养和植株再生的适宜外植体为带节茎段, 其在MS+1.0 mg·L^-1 6-BA+0.5 mg·L^-1 NAA+0.1 mg·L^-1 KT培养基中培养17天后, 约85.38%的外植体产生出分化能力较强的愈伤组织; 25天后约97.55%的愈伤组织开始分化出绿色芽丛; 30天后不定芽分化系数可达15.38。不定芽增殖继代6次后出现玻璃化现象, 且随着继代次数的增加, 玻璃化现象加重, 增殖率明显下降; 采用MS和B₅培养基交替使用可改善试管苗玻璃化现象并保持较高的增殖率。不定芽生根的适宜培养基为MS+0.5 mg·L^-1 NAA, 生根率可达100%。再生苗移栽成活率达95%以上。该研究建立了地皮消无性快速繁殖体系, 为保护地皮消野生资源及种苗繁育提供了有效途径, 也为其遗传转化研究奠定了基础。     

高等植物基因组结构

高等植物基因组结构的研究是当前植物分子生物 学研究的一个重要领域。1976年Walbot和Dure报 道了棉花DNA复性动力学研究结果^[26],同年Flavell 和Smith发表了小麦方面的工作^[12] 迄今为止已报 道的经DNA复性动力学方法系统研究过的高等植物 还有： 烟草^[29],豌豆^[22,]大豆^[1,15],蚕豆^[27]黑 麦^[25]欧芹^[29],绿豆^[23],玉米^[16],花生^[8],粟^[28],亚 麻^[6]等。从已发表的情况来看,高等植物基因组结构 在主要方面都和已知的动物方面的情况相仿,下面我 们分几个方面逐项加以讨论。     

羊草成熟胚诱导愈伤组织及植株再生系统的优化

羊草(Leymus chinensis)为异源四倍体禾本科牧草, 利用成熟胚诱导愈伤组织获得再生植株的效率极低, 难以运用遗传转化方法进行品种改良。我们以羊草成熟胚为外植体, 使用适宜羊草愈伤组织生长的新型培养基配方, 筛选诱导愈伤组织、不定芽分化及生根阶段的最适植物激素浓度、光照和温度条件, 从而优化羊草成熟胚的组织培养方案。研究结果表明, 羊草成熟胚诱导阶段2,4-D的最适浓度为2.0 mg·L ^-1, 变温暗培养, 诱导率可达74.1%; 分化阶段6-BA和NAA的最适浓度均为1.0 mg·L ^-1, 分化率可达57.1%; 生根阶段NAA的最适浓度为0.25 mg·L ^-1, 移栽后成活率为100%。     

玉米再生植株移栽的研究

玉米在农业生产和遗传学研究中占有重要地位,组织培养再生的植株可用于品种改良和遗传学研究。如何提高玉米再生植株移栽成活率,是一个十分重要的问题。有关试管苗移栽的研究,国内外已有一些报道。我们连续三年进行了玉米试管苗移栽研究。材料为生产上推广的玉米自交系黄早4,B73,单交种烟单14、鲁玉7和鲁单40。     

沙田柚不同外植体离体培养与植株再生的研究

利用组织培养进行柑桔良种的快速繁殖可以克服常规方法费时的缺点 ,为进一步进行无病原体苗木繁育、诱变育种及遗传转化创造有利条件。目前我国开展此项工作较为广泛 ,已先后在红江橙 [1 ]、柠檬 [2 ]、金柑 [3]、甜橙 [4]及蕉柑 [5]等柑桔类中建立了组织培养的再生体系 ,但在柚类中相关的研究较少。笔者以沙田柚为材料 ,在离体培养条件下 ,成功诱导上下胚轴、根段及子叶的不定芽形成和植株再生。1 　材料与方法1 .1 　植物材料沙田柚种子 ( Citrus grandis Osbeck cv.Shatian Yu)经表面消毒后黑暗培养无菌苗 ,当苗长至 2 0 d左右时 ,将上…     

微型月季愈伤组织诱导及植株再生

选取微型月季(Rosa hybrida)幼嫩离体叶片(叶龄12天)为外植体, 以MS为基本培养基, 研究不同配比的植物生长调节剂对愈伤组织诱导、不定芽诱导和生根培养的影响。结果表明: (1) 诱导愈伤组织的最佳培养基配比为1.0 mg·L^–16-BA+3.0 mg·L^–12,4-D, 诱导率为100%; (2) 6-BA在微型月季不定芽诱导中起着关键作用, 诱导不定芽产生的植物生长调节剂配比为1.0 mg·L^–16-BA +(0.05–0.5) mg·L^–1NAA+(0.02–0.2) mg·L^–1TDZ, 其中最适配比1.0 mg·L^–16-BA+0.1 mg·L^–1NAA+0.02 mg·L^–1TDZ的愈伤组织再分化率达到92.6%; (3) 生长素对微型月季的生根有重要影响, 以1/4MS+0.1 mg·L^–1NAA为生根培养基可获得100%的生根率。实验最终建立了微型月季组织培养和高频离体再生体系。     

莲胚愈伤组织诱导及植株再生的研究

关于莲胚组织培养国内外有过研究,但迄今利用组织培养技术从莲胚诱导愈伤组织形成再生植株的成功例子尚未见有报道。     

大花蕙兰‘黄金小神童'胚性愈伤组织诱导及植株再生研究

为解决大花蕙兰园艺品种‘黄金小神童’（Cymbidium Golden Elf ‘Sundust’）人工繁育周期长、系数低等问题,该研究以其侧芽茎尖为外植体,在1/2MS+1.0 mg·L^-1 NAA+50 g·L^-1香蕉泥+15 g·L^-1蔗糖中培养60 d后,以获得的愈伤组织与原球茎混合物为材料,通过L₉ （3）⁴正交与完全组合实验研究不同因素及组合对‘黄金小神童’胚性愈伤组织和原球茎发生及增殖的影响,进而建立‘黄金小神童’高效、稳定的丛芽增殖和植株再生体系。结果表明：（1）在MS+2.0 mg·L^-1 6-BA+150 mL·L^-1椰汁+20 g·L^-1蔗糖中,培养70 d后增殖系数达8.13,同时可获得桑葚状原球茎团。（2）原球茎团在MS+1.0 mg·L^-1 6-BA+1.0 mg·L^-1 NAA中培养70 d后,原球茎发育为幼芽,丛芽发生系数可达5.36;此...