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钙调素(calmodulin,CaM)在Ca2+存在下能激活多种依赖CaM的靶酶.本研究对钙调素激活乳酸脱氢酶(lactatedehydrogenase,LDH.EC1.1.1.27)活性进行了探讨,其激活性质为非竞争性激活,并据此设计一种简便测定CaM的方法.1材料和方法1.1动物与制剂心肌和脑组织取自新生一周雄性小牛,NAD+(上海酵母综合厂),乳酸钠(北京化工厂),DEAE-Cellulose、QAE-CelluloseA-50(上海化学试剂采购供应站),NADH、氯丙嗪(chlorpromazine,CPZ)(Sigma).1.2LDH的提取参照张龙翔[1]法略修改,将牛心肌粗提取液经DE… 相似文献
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用生物素标了己了花椰菜CaM。生物素标记的CaM具有与天然CaM相似的Ca2+依赖电泳特性,可激活CaM依赖性磷酸二酯酶,能够检测出50ng的磷酸二酯酶。利用它建立了检测植物CaM结合蛋白的生物素-覆盖法(Biotin-overlay)并证实酶标亲和素可与胡萝卜愈伤组织内64kD蛋白质非特异结合,因此将此法运用于植物材料时必需设置酶标亲和素处理的对照。用生物素-覆盖法检测胡萝卜愈伤组织形成过程中的CaM结合蛋白时可检出2,4-D诱导的CaM结合蛋白。 相似文献
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小麦黄化胚芽鞘经苯基琼脂糖亲和层析提取和纯化,其细胞壁CaM在有钙和缺钙时SDS电泳呈现不同的迁移率;依赖Ca~(2 )与苯基疏水结合;在紫外吸收光谱上具有五个特征峰;对PDE的激活剂量反应曲线和从非活性状态向活性状态转变时所需的Ca~(2 )浓度均和胞内CaM相同,说明细胞壁CaM和胞内CaM具有相同的基本理化特性。采用CaM琼脂糖亲和层析,发现在小麦细胞壁中存在CaM结合蛋白,其中以分子量为40.7 kD的 CaM结合多肽为主。细胞壁CaM结合蛋白不具有过氧化物酶、ATP酶或酸性磷酸酯酶的活性。 相似文献
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生物素标记钙调素用于植物钙调素结合蛋白的检测 总被引:4,自引:0,他引:4
用生物素标记了花椰菜CaM。生物素标记的CaM具有与天然CaM相似的Ca^2+依赖电泳特性,可激活CaM依赖性磷酸二酯酶,能够检测出50ng的磷酸二酯酶。利用它建立了检测植物CaM结合蛋白的生物素-覆盖法并证实酶标亲和素可与胡萝卜愈伤组织内64kD蛋白质非特异结合,因此将此法运用于植物材料时必要设置酶标亲和素处理的对照。用生物素-覆盖法检测胡萝卜愈伤组织形态过程中的CaM结合蛋白时可检出2,4-D 相似文献
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钙调素与细胞增殖的调控 总被引:7,自引:0,他引:7
CaM是Ca~(2+)的重要受体。大量事实表明,Ca~(2+)-CaM参与了细胞增殖的部分调控。其调控机理较复杂,主要通过以下3个环节实现:即促进G_1/S期过渡、G_2/M处期过渡和促进细胞进入有丝分裂后期。研究CaM对细胞增殖的调控具有重要的理论和实际意义。 相似文献
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钙调素对细胞周期的调节 总被引:6,自引:0,他引:6
RC3细胞是一种用真核表达载体P^cam转染NIH3T3细胞建成的可调钙调素(Calmodulin,CaM)高表达细胞模型。通过分子杂交及蛋白免疫印迹方法证实在地塞米松(Dexamethasome,DXM)作用下,RC3细胞可高表达CaM.CaM拮抗剂三氟拉嗪(trifluoprazine,TFP)则使G1期细胞增加,S期细胞减少。高表达CaM使细胞分裂指数提高,G2期细胞减少,有丝分裂前期细胞 相似文献
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植物钙调素结合蛋白研究进展 总被引:23,自引:0,他引:23
钙调素(CaM)作为最重要的一类Ca2 传感蛋白可以通过与其下游CaM结合蛋白(CaMBP)作用而调节细胞的生理功能.因此,对CaMBP的研究是揭示CaM作用机制的重要内容,是探明Ca2 -CaM信号转导系统的关键.该文从CaMBP和CaM的结合特性、植物CaMBP的分布以及植物CaMBP的生物学功能等方面综述了植物CaMBP的研究现状和最新进展. 相似文献