糖及其衍生物对胰岛素与其受体相互作用的影响

Cuatrecasas 报道除去细胞表面的神经氨酸并不影响被处理细胞与胰岛素的结合能力,但继神经氨酸后再除去半乳糖,就使被处理细胞与胰岛素的结合能力降低。前文报     

若干外源凝集素对胰岛素与其受体相互作用的影响

本文研究了若干外源凝集素对胰岛素与其脂肪细胞胰岛素受体相互作用的影响。结果表明与D-甘露糖和D-葡萄糖专一结合的外源凝集素,如ConA(伴刀豆球蛋白A)、豌豆及蚕豆凝集素可抑制~(125)Ⅰ-胰岛素与其受体的结合。与D-半乳糖专一结合的外源凝集素,如蓖麻凝集素Ⅰ和天花粉凝集素基本上不抑制~(125)Ⅰ-胰岛素与其受体的结合,在低浓度时有一定程度的促进胰岛素与受体结合的能力。另外两个和低聚糖专一结合的半夏凝集素和PHA(菜豆凝集素)的效应和蓖麻凝集素Ⅰ等类似。这些结果说明在胰岛素受体分子表面可能存在着与ConA等专一结合的糖,而且它们在胰岛素受体与胰岛素结合部位的附近。而和其他几个外源凝集素专一结合的糖或低聚糖链则和胰岛素受体与胰岛素结合的部位相距较远,并就这些凝集素对胰岛素与受体结合的促进作用进行了讨论。     

若干外源凝集素对胰岛素与其受体相互作用的影响

本文研究了若干外源凝集素对胰岛素与其脂肪细胞胰岛素受体相互作用的影响。结果表明与D-甘露糖和D-葡萄糖专一结合的外源凝集素,如ConA (伴刀豆球蛋白A)、豌豆及蚕豆凝集素可抑制~(125)I-胰岛素与其受体的结合。与D-半乳糖专一结合的外源凝集素,如蓖麻凝集素I 和天花粉凝集素基本上不抑制~(125)I-胰岛素与其受体的结合,在低浓度时有一定程度的促进胰岛素与受体结合的能力。另外两个和低聚糖专一结合的半夏凝集素和PHA (菜豆凝集素)的效应和蓖麻凝集素I 等类似。这些结果说明在胰岛素受体分子表面可能存在着与ConA等专一结合的糖,而且它们在胰岛素受体与胰岛素结合部位的附近。而和其他几个外源凝集素专一结合的糖或低聚糖链则和胰岛素受体与胰岛素结合的部位相距较远,并就这些凝集素对胰岛素与受体结合的促进作用进行了讨论。     

胰岛素作用原理的研究——Ⅰ.胰岛素及其类似物与其受体的相互作用

研究了一些胰岛素B链羧端肽段改变了的类似物与肝细胞及脂肪细胞的受体蛋白结合性质。这些结果说明,去B链羧端五肽胰岛素与胰岛素有相同的结合能力;去B链羧端六肽胰岛素及B_(23)被D-丙氨酸取代的去B链羧端六肽胰岛素有明显的结合;去B链羧端八肽胰岛素具极微的结合能力;胰岛素A链、促肾上腺皮质素、增血糖素不与胰岛素受体蛋白结合。在此基础上还讨论了B_(24)芳香环参与胰岛素结合部位的可能性,并假设B_(12),B_(16),B_(24),B_(25)疏水平面可能是结合部位的重要内容。而B_(20)～B_(23)U形转折及A_(21)…B_(22)盐键的作用是稳定疏水平面结构。胰岛素与受体的结合类似于胰岛素二体中两个单体的结合。     

生物功能化色谱技术研究胰岛素与其受体间的相互作用

生物功能化色谱技术是通过模拟细胞膜表面环境,在色谱系统内实现研究生物分子间相互作用过程的新技术。利用生物功能化色谱方法研究了胰岛素与其受体间的相互作用。将提取出的胰岛素受体混合物固定化在人工膜(Immobilized artificial membrane, IAM)的表面,并确定了固定化的最佳pH值为7.2,最佳离子强度为20 mmol,最佳有机溶剂浓度为2% (v/v)。通过区带洗脱法确定了胰岛素受体的存在及其与胰岛素间存在相互作用;通过前沿分析法确定了胰岛素受体与胰岛素间相互作用的结合常数大小约为0.701 nmol/L。     

成纤维细胞生长因子与其受体相互作用及其抑制剂的研究进展

成纤维细胞生长因子（FGF）有许多重要的生理功能，并与肿瘤的形成有关.为了弄清FGF与成纤维细胞生长因子受体(FGFR)相互作用的机制，人们对FGF和FGFR的各个结合结构域进行了深入、细致的研究，定位了aFGF、bFGF的肝素结合区、bFGF的受体结合区、FGF受体的肝素结合区、配体结合区和FGF受体相互结合区，提出了两个FGF与FGFR相互作用的模型，在此基础上设计了FGF的核酸类、糖类和多肽类抑制剂，为寻找新一代抗癌药物打下了理论基础.     

不同种属红细胞胰岛素受体与胰岛素的相互作用

前文报道的两种主要胰岛素靶组织——肝和脂肪——的受体分析方法,由于取材困难不适宜应用于临床研究。近年来,Gambhir等和Gingberg等分别证明在人类和火鸡的红细胞上具有胰岛素受体。虽然红细胞不是胰岛素的典型靶细胞,对于红细胞胰岛素受体的生理意义还不清楚,但由于取材方便,生理条件下存活时间长以及对红细胞     

不同种属红细胞胰岛素受体与胰岛素的相互作用

前文报道的两种主要胰岛素靶组织——肝和脂肪——的受体分析方法,由于取材困难不适宜应用于临床研究。近年来,Gambhir 等和Ginsberg 等分别证明在人类和火鸡的红细胞上具有胰岛素受体。虽然红细胞不是胰岛素的典型靶细胞,对于红细胞胰岛素受体的生理意义还不清楚,但由于取材方便,生理条件下存活时间长以及对红细胞膜的研究已经比较深入等有利条件,红细胞是研究胰岛素受体比较好的材料,尤其适合于临床胰岛素受体的研究。     

含RGD的配基与其受体相互作用研究进展

RGD配基与其受体相互作用目前已成为一个研究热点, 许多粘附蛋白是通过RGD序列与其整合素结合的, 它参与许多生物学过程. 文章主要就RGD序列肽与糖蛋白Ⅱb／Ⅲa的相互作用及其在抑制血小板聚集上进行了较为全面的综述, 并介绍了RGD序列肽在基础科学及医疗上的应用前景.     

成纤维细胞生长因子与其受体相互作用及其抑制剂的研究进照

成纤维细胞生长因子(FGF)有许多重要的生理功能,并与肿瘤的形成有关.为了弄清FGF与成纤维细胞生长因子受体(FGFR)相互作用的机制,人们对FGF和RGFR的各个结合结构域进行了深入、细致的研究,定位了aFGF、bFGF的肝素结合区、bFGF的受体结合区、FGF受体的肝素结合区、配体结合区和FGF受体相互结合区,提出了两个FGF与FGFR相互作用的模型,在此基础上设计了FGF的核酸类、糖类和多肽类抑制剂,为寻找新一代抗癌药物打下了理论基础.     

一些(糖)蛋白对胰岛素和其受体结合的影响——胰岛素和非受体蛋白结合的可能性

前文曾报道若干外源凝集素和糖苷对~(125)I-标记胰岛素和其受体结合有影响,并认为在胰岛素受体分子表面可能存在能与伴刀豆球蛋白A等外源凝集素专一结合的糖基(如甘露糖基),而且这些糖基可能参与了和胰岛素的结合。我们也曾观察到牛血清白蛋白存在时,标记胰岛素的凝胶过滤图谱中可出现两个放射活性峰,犹如胰岛素和其受体结合的图谱。为了进一步探讨胰岛素和其受体相互作用的原理,以及牛血清白蛋白中是何种组分和胰岛素结合,本文研究了一些糖蛋白和不含糖基的蛋白对标记胰岛素和人胎盘细胞膜结合的影响;并用高纯度的人胎盘白蛋白代替牛血清白蛋白作保护剂观察标记胰岛素的凝胶过滤行为。人胎盘细胞膜的制备按前文报道。~(125)I-胰岛素的制备见前文。结合实验按前文,37℃保温30分钟后迅速置冰水浴中冷却,4℃保温24小时。表1是一些糖蛋白和不含糖基的蛋白对标记胰岛素和人胎盘细胞膜结合的影响。在     

凝集素及其受体相互作用对人红细胞变形性的影响

研究红细胞变形性,无论在理论研究还是临床实践中均具重要意义。它对于认识不同因素如外界物质、细胞膜及骨架、不同病理状态等对细胞结构及功能的影响有一定帮助,也为深入研究不同因素对细胞作用的机制及某些疾病的诊断提供线索和依据。     

视黄酸对胰岛素受体表达的影响

ＳＭＭＣ－７７２１细胞经１０μｍｏｌ／Ｌ视黄酸（ＲＡ）处理１－５天后,完整细胞或纯化胰岛素受体（Ｉｎｓ－Ｒ）对胰岛素（Ｉｎｓ）的结合容量逐日降低。＾％３５Ｓ－甲硫氨酸参人Ｉｎｓ－Ｒ明显减少,特别是β亚基。部分纯化Ｉｎｓ－Ｒ的酷氨酸蛋白激酶（ＴＰＫ）活力也随ＲＡ处理时间延长而逐步降低。结果表明ＲＡ降低Ｉｎｓ－Ｒ的表达。但ＲＡ并不改变Ｉｎｓ－Ｒ与Ｉｎｓ结合的亲和力和它的负协同效应。     

胰岛素作用原理的研究 Ⅵ.胰岛素片段与胰岛素受体的相互作用

研究了用胰凝乳蛋白酶限制性酶解和化学合成方法所获得的若干胰岛素片段与脂肪细胞胰岛素受体的结合。它们在低浓度时几乎观察不出与胰岛素受体结合,而在高浓度时除五肽HTyr·Thr·Pro·Lys·AlaOH外都有明显的专一性结合。说明它们具有部分与胰岛素受体的结合部位。与前文关于胰岛素结合部位设想是一致的。讨论了胰岛素结合部位的性质,并讨论了五肽HArg·Gly·Phe·Phe·TyrOH加强胰岛素与其受体亲合力的可能性。     

胰岛素作用原理的研究 Ⅵ.胰岛素片段与胰岛素受体的相互作用

研究了用胰凝乳蛋白酶限制性酶解和化学合成方法所获得的若干肤岛素片段与脂肪细胞胰岛素受体的结合。它们在低浓度时几乎观察不出与胰岛素受体结合,而在高浓度时除五肽HTyr·Thr·Pro·Lys·AIaOH 外都有明显的专一性结合。说明它们具有部分与胰岛素受体的结合部位。与前文关于胰岛素结合部位设想是一致的。讨论了胰岛素结合部位的性质,并讨论了五肽HArg·Gly·Phe·Phe·TyrOH 加强胰岛素与其受体亲合力的可能性。     

肿瘤坏死因子与其受体相互作用的计算机模拟研究

利用同源模建方法,以ＴＮＦＲ５５受体胞外区的晶体结构为参考模板,预测了ＴＮＦＲ７５受体胞外区Ｃｙｓ１８～Ｐｈｅ１４７片段的三维结构．根据Ｒ５５受体胞外区与ＬＴ相结合的复合物的晶体结构,预测了ＴＮＦ与Ｒ５５及Ｒ７５胞外区的复合物的三维结构,模拟了ＴＮＦ与受体之间的相互作用．由于ＴＮＦ与受体的作用形式是三聚体对三聚体,因此在模拟ＴＮＦ与受体相互作用时选择了包括一个非对称的ＴＮＦ三聚体和一个受体（Ｒ５５或Ｒ７５）单体的模拟系统．结合已有的突变体实验结果,利用计算机模拟分析手段,发现了一些ＴＮＦ突变体之所以具有受体选择性的三维结构基础和发挥了关键作用的氨基酸残基以及这些残基之间的主要作用形式．研究深化了对已有的突变体实验结果的认识,建立了不同的实验结果之间的内在关联,为以后有目的的新型突变体设计和实验研究打下了基础．     

肿瘤坏死因子与其受体相互作用的计算机模拟研究

利用同源模建方法,以肿瘤坏死因子(TNF)R55受体胞外区的晶体结构为参考模板,预测了TNFR75受体胞外区Cys18-Phe147片段的三维结构。根据R55受体胞外区与LT相结合的复合物的晶体结构,预测了TNF与R55及R75胞外区的复合物的三维结构,模拟了TNF与受体之间的相互作用。由于TNF与受体的作用形式是三聚体对三聚体,因此在模拟TNF与受体相互作用时选择了包括一个非对称的TNF三聚体和一个受体(R55或R75)单体的模拟系统。结合已有的突变体实验结果,利用计算机分析手段,发现了一些TNF突变体之所以具有受体选择性的三维结构基础和发挥了关键作用的氨基酸残基以及这些残基之间的主要作用形式。研究深化了对已有的突变体实验结果的认识,建立了不同的实验结果之间的内在关联,为以后有目的的新型突变体设计和实验研究打下了基础。     

结合铁及其他金属离子的转铁蛋白与其受体的相互作用

比较了结合不同金属离子的人转铁蛋白(HTf)与人胎盘转铁蛋白受体的结合能力,结果表明Cu~(2+)-、Mn~(2+)-、Co~(3+)-和Al~(3+)-HTf与人胎盘转铁蛋白受体的结合能力与结合铁的HTf相类似,提出转铁蛋白可能参与从母体向胎儿运输金属离子的作用。     

Swainsonine对胰岛素受体功能影响的研究

以Ｓｗａｉｓｏｎｉｎｅ（Ｓｗ）作为高尔基体付糖链加工酶系中α－甘露糖苷酶Ⅱ的特异抑制剂,研究Ｎ－糖链结构和胰岛素受体（Ｉｎｓ－Ｒ）功能的关系．发现Ｓｗ不影响细胞生长和３Ｈ－亮氨酸参入ＳＭＭＣ７７２１细胞,但明显促进３Ｈ－甘露糖参入细胞总糖蛋白和表面糖蛋白,并使后者的ＣｏｎＡ强结合组分显著增加,提示Ｓｗ使Ｉｎｓ－Ｒ的Ｎ－糖链变成杂合型及高甘露糖型。胰岛素结合试验后作Ｓｃａｔｃｈａｒｄ分析：发现Ｓｗ不改变Ｉｎｓ－Ｒ的结合容量和每个细胞表面的结合位点数,也不改变结合动力学。再用部分纯化的Ｉｎｓ－Ｒ研究自身磷酸化和对外源底物的酪氨酸蛋白激酶活力,也未发现Ｓｗ处理和对照细胞间的明显区别,表示Ｓｗ也不影响Ｉｓｎ－Ｒ的跨膜信息传递,结合已报道的衣霉素使细胞表面Ｉｎｓ－Ｒ减少的结果,提示Ｉｎｓ－Ｒ运送至细胞膜需要Ｎ－糖链存在,但糖链的类型对ＩＮＳ－Ｒ的代谢和结合动力学并不重要     

Swainsonine对胰岛素受体功能影响的研究

以Ｓｗａｉｓｏｎｉｎｅ（Ｓｗ）作为高尔基体Ｎ－糖链加工酶系中α－甘露糖苷酶ＩＩ的特异抑制剂。研究Ｎ－糖链结构和胰岛素受体（Ｉｎｓ－Ｒ）功能的关系,发现Ｓｗ不影响细胞生长和３Ｈ－亮氨酸参入ＳＭＭＣ７７２１细胞,但明显促进３Ｈ－甘露糖参入细胞总糖蛋白和表面糖蛋白,并使后者的ＣｏｎＡ强结合组分显著增加,提示Ｓｗ使Ｉｎｓ－Ｒ的Ｎ－糖链变成杂合型及高甘露糖型,胰岛素结合试验后作Ｓｃａｔｃｈａｒｄ分析,发现Ｓ