江浙蝮蛇毒溶血毒素晶体培养及初步晶体学研究

从江浙蝮蛇中分离纯化的碱性磷脂酶Ａ２在ｐＨ９．５,０．０５ｍｍｏｌ／ＬＣＨＥＳ缓冲液中,用汽相悬滴扩散的方法,获得了适用于高分辨率Ｘ射线结构分析的单晶．经Ｘ２００Ｂ面探测器分析,表明该晶体属于正交晶系,Ｐ２Ｉ２Ｉ２Ｉ空间群,晶胞参数为ａ＝９７．１３,ｂ＝１０３．６９,ｃ＝２３．２７．并收集了一套衍射数据,独立衍射点数１２００１个,数据完整度为８６．２％,Ｒｍｅｒｇｅ为０．０４５９．最高分辨率达２．０,根据分子量与晶胞体积估算,一个不对称单位含两个分子．     

单斜Al－（L－丙氨酸）胰岛素初步晶体学研究

用微量气相扩散方法在含酚的柠檬酸缓冲体系中,得到了可供Ｘ射线晶体学分析用的Ａｌ－（Ｌ－丙氨酸）胰岛素晶体,晶体衍射能力为２．５Ａ。经Ｘ射线衍射分析确定,该晶体属于单斜晶系,空间群为Ｐ２_１,晶胞参数：ａ＝６１．５Ａ,ｂ＝６２．２Ａ,ｃ＝４８．３Ａ,α＝γ＝９０．０°,β＝１１０．９°。晶胞中每个结晶学不对称单位含有一个Ａｌ－（Ｌ－丙氨酸）胰岛素六聚体。     

一种东亚钳蝎碱性神经毒素的纯化和初步晶体学研究

经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－５０和ＳＰ－ＳｅｐｈａｄｅｘＣ－２５两次柱层析,从河南淅川马氏钳蝎毒素中分得一种碱性神经毒素ＢｍＫＭＩ８．等电聚焦和ＳＤＳ电泳显示单一组分,其ｐＩ为９．１,Ｍｒ为７１００．毒性测试结果表明,该组分对小白鼠有较强的毒性,对昆虫也有一定的毒性,已获得该毒素的两种晶型的大单晶,并测定其空间群为Ｐ２＿１２＿１２＿１,晶胞参数为：ＢｍＫＭＩ８－Ａ：ａ＝３６．７,ｂ＝２６．６,ｃ＝５２．０,ＢｍＫＭＩ８－Ｂ：ａ＝３６．６４Ａ,ｂ＝３７．３１,ｃ＝３７．９５,已收集了ＢｍＫＭＩ８－Ｂ分辨率为１．７４的Ｘ射线单晶衍射数据。     

高分辨率高精度天花粉晶体结构研究 1．1分辨率衍射数据的收集

以同步辐射作为Ｘ射线源,在Ｓａｋｓｂｅ无屏Ｗｅｉｓｓｅｎｂｕｒｇ Ｘ－射线衍射数据收集系统上,应用磷光可逆成像屏作为记录装置,收集了天花粉蛋白正交晶体１．１Ａ分辨率的衍射数据。经ＷＥＩＳ程序处理和合并后,并获得独立衍射点６７．３２７个,占１．１Ａ分辨率范围应有反射总数的６９．８％;Ｒｍｅｒｇｅ＝５．９０％,表明数据的质量优良,这为特高分辨率天花粉蛋白的晶体结构研究奠定了坚实基础。     

高分辨率高精度天花粉晶体结构研究 1．1分辨率衍射数据的收集

以同步辐射作为Ｘ射线源,在Ｓａｋｓｂｅ无屏ＷｅｉｓｓｅｎｂｕｒｇＸ－射线衍射数据收集系统上,应用磷光可逆成像屏（ＩｍａｇｅＰｌａｔｅ）作为记录装置,收集了天花粉蛋白正交晶体１．１Ａ分辨率的衍射数据。经ＷＥＩＳ程序处理和合并后,共获得独立衍射点６７．３２７个,占１．１Ａ分辨率范围应有反射总数的６９．８％;Ｒｍｅｒｇｅ＝５．９０％,表明数据的质量优良。这为特高分辨率天花粉蛋白的晶体结构研究奠定了坚实基础。     

高活力胰岛素研究：B3—Lys猪胰岛素的结晶及初步晶体学分析

用化学半合成方法制备的Ｂ３—Ｌｙｓ猪胰岛素（Ｂ３ＫＰＩ）具有与天然猪胰岛素相同的体内生物活力,但其体外生物活力及受体结合活力比天然猪胰岛素高。本文报道Ｂ３ＫＰＩ的晶体生长,初步晶体学分析及衍射数据与处理。Ｂ３ＫＰＩ晶体的衍射分辨率可以达到２．１Ａ（１Ａ＝０．１ｎｍ）,空间群为Ｒ３,晶胞参数为：ａＨ＝ｂＨ＝８２．２３ＡＣＨ＝３４．１７Ａ．收集了一套２．１Ａ分辨率的衍射数据,数据完全度为８１％,Ｒｍｅｒｇｅ为２．９％。     

斑头雁脱氧血红蛋白的晶体生长及X射线晶体学的初步研究

报导了以Ｎａ２Ｓ２Ｏ４为还原剂制备脱氧血红蛋白,并以聚乙二醇溶液为沉淀剂,在ｐＨ７．２,蛋白浓度２０ｍｇ／ｍｌ条件下培养出适合于Ｘ射线分析用的斑头雁脱氧血红蛋白晶体,经Ｘ射线平面探测仪收集衍射强度数据和处理。确定晶体属三斜晶系,空间群Ｐ１,晶胞参数α＝７．０９ｎｍ,ｂ＝９．５４ｎｍ,ｃ＝５．８７ｎｍ,α＝７２．８°,β＝６５．９°,γ＝８２．０°,ｖ－３４６．１ｎｍ３,每个不对称单位包含２个四聚体分子,共收集２．８分辨率的独立衍射点３０６５４个,Ｒｍ因子为５．１４％。     

三叶木通染色体组型研究

用ＡＳＧ法对三叶木通（Ａｋｅｂｉａ ｔｒｉｆｏｌｉａｔａ）根、茎尖细胞进行染色体制片,探讨其染色体组型。结果表明：三叶木通核型为２ｎ＝２Ｘ＝１６＝１０Ｍ＋２ＳＭ＋２ＳＴ＋２Ｔ,Ｘ＝８;２Ｂ类型,第２号染色体上有一对随体。三叶木通细胞中存在有混倍性现象,实生苗中２ｎ＝４Ｘ＝３２的四倍性细胞占７．９％;秋水仙素诱变苗、根茎占３１．８％～３７．９％。     

桐粮间作林带的配置方式与农作物产量关系的研究

以桐粮间作为例,研究了林带的不同配置结构、林带冠覆盖率及小麦产量之间的关系。结果表明,林带距（Ｘｄ）、小麦相对产量（Ｙ）及间作年（Ａ）之间的关系为：Ｙ＝９０．３２９０－１．９９８２Ａ＋１．１９２４Ｘｄ－０．３３４９Ａ＾２＋０．２９１０ＡＸｄ－０．００３２ＡＸｄ＾２;林带冠覆盖率（Ｘｃ）与小麦相对产量（Ｙ）之间的关系为：Ｙ＝－０．０４６Ｘｃ＾２＋１．１５３９Ｘｃ＋９８．１７３（Ｘｃ≤２８％）,Ｙ＝ｅ     

Al-(L-丙氨酸)胰岛素晶体学研究

应用微量过饱和静置法在含柠檬酸钠和氯化钠的晶体生长体系中得到适合Ｘ射线衍射分析用的Ａｌ－（Ｌ－丙氯酸）胰岛素单晶体。晶体属于三方晶系,空间群为Ｒ３晶体衍射分辨率可达１．８Ａ以上。晶胞参数：ａＨ＝８０．８９Ａ,ｂＨ＝８０．８９Ａ,ｃＨ＝３７＼６４Ａ,α＝β＝９０°,γ＝１２０°。每个结晶学不对称单位含有两个Ａｌ－（Ｌ－丙氨酸）胰岛素分子。     

中国四种龟的细胞遗传研究

本文研究了我国四种龟类动物的核型、Ｃ带和Ａｇ－ＮＯＲ＿ｓ。结果表明金头闭壳龟的核型２ｎ＝５２（１４Ｍ＋２ＳＭ＋４ＳＴ＋６Ｔ＋２６ｍ）,ＮＦ＝７２,核型模式为８＋５＋１３,一对次缢痕位于Ｉ组的Ｎｏ．１ｐｉｎｔｅｒ;三线闭壳龟核型２ｎ＝５２（１２Ｍ＋４ＳＭ＋４ＳＴ＋６Ｔ＋２６ｍ）,ＮＦ＝７２,８＋５＋３,黄缘盒龟的核型　２ｎ＝５２（１６Ｍ＋４ＳＴ＋６Ｔ＋２６ｍ）,ＮＦ＝７２,８＋５＋１３,一对次缢痕位于Ｉ组Ｎｏ．１ｐｉｎｔｅｒ;黄额盒龟２ｎ＝５２（１６Ｍ＋２ＳＭ＋４ＳＴ＋６Ｔ＋２４ｍ）,ＮＰ＝７４,９＋５＋１２,有４对次缢痕,分别位于Ｉ组的Ｎｏ．１ｐｉｎｔｅｒ,Ｎｏ．３ｐｐｅｒ,Ｎｏ．７ｐｐｅｒ和Ｎｏ．６（Ｘ染色体）ｑｐｅｒ。黄额盒龟有１对异型（ＸＹ型）性染色体,其余３个种没有。这四种龟的全部染色体都出现着丝粒区Ｃ带正染。它们都仅出现１对ＡｇＮＯＲｓ,其中黄额盒龟的Ａｇ－ＮＯＲｓ。位于ＩＩ组的Ｎｏ．５ｑｐｅｒ,其余３个种的Ａｇ－ＮＯＲ＿ｓ位于Ｉ组的Ｎｏ．７ｑｔｅｒ。本文还阐述了近缘种间核型的演化机制和黄额盒龟性染色体分化的途径。     

热稳定和抗氧化的枯草杆菌蛋白酶E双突变体(M222A,N118S)的结晶和初步晶体学研究

对具有热稳定和抗氧化性质的枯草杆菌蛋白酶Ｅ双突变体（Ｍ２２２Ａ,Ｎ１１８Ｓ）进行了初步晶体学研究。应用悬滴式汽相扩散法生长出了该酶突变体的单晶体,蛋白酶抑制剂对防止酶自溶、稳定蛋白质构象和生长出合用的单晶体起到了重要作用。该晶体的空间群为Ｐ２１,晶胞参数为ａ＝５３．０５,ｂ＝７４．８４,ｃ＝６８．７４,β＝９７．２４°,每个不对称单位里含两个分子。已用面探测器衍射仪收集了一套２．５分辨率的Ｘ射线衍射数据。     

人纤溶酶原激活剂抑制物2型(PAI-2)在Pichia pastoris中的表达

用ＰＣＲ方法从ｐＰＡＩＪ．７中扩增人纤溶酶原激活剂抑制物２型（ＰＡＩ－２）基因,与ｐＰＵＣ１８重组,经限制性内切酶片段分析与核苷酸序列分析,获得全长人ＰＡＩ－２基因．ＰＡＩ－２基因与表达载体ｐＰＩＣ９重组,构建受乙醇氧化酶１基因（ＡＯＸ１）启动子与转录终止区控制的酵母表达质粒,转化ＧＳ１１５宿主菌,经表型筛选和ＰＣＲ扩增筛选阳性克隆,用甲醇诱导表达,重组ＰＡＩ－２以分泌型表达,占分泌总蛋白的３０％,具ＰＡＩ－２抗原性,与低分子量尿激酶形成了抗ＳＤＳ复合物,具抑制纤溶的活性（９１．４ＡＩＵ／ｍｌ）．对培养条件也进行了探讨．     

清栓酶治疗脑梗塞疗效与血浆血栓素A2及前列环素之间的关系

应用清栓酶治疗不同病期脑梗塞３８例,总有效率８６．７％,发病后治疗时间越早,疗效越好。治疗前病人均有不同程度的ＴＸＡ２升高,ＰＧＩ２下降,急性期更为明显,治疗后ＴＸＡ２下降,ＰＧＩ２上升,使失调的ＰＧＩ２－ＴＸＡ２平衡得以恢复     

北京鸭(Anas platyrhynchos)氧合血红蛋白的晶体生长和X射线晶体学的初步研究

北京鸭氧合血红蛋白晶体在以聚乙二醇６０００为沉淀剂,在ｐＨ７．１,血红蛋白浓度为２５ｍｇ／ｍｌ条件下采用一批结晶法培养得到,并且适合于Ｘ射线衍射分析。经Ｘ射线平面探测仪收集衍射强度数据和处理,确定晶体属四方晶系,空间群为Ｐ４２２１２,晶胞参数为ａ＝ｂ＝８．１１３ｎｍ,ｃ＝１０．７０７ｎｍ,α＝β＝γ＝９０°,每个不对称单位中包含半个四聚体分子。进一步得到北京鸭氧合血红蛋白高分辨率晶体结构,通过与其高海拔同类－斑头雁分析比较深入研究斑头雁血红蛋白分子的高氧亲和性机制。     

反相高效液相色谱法测定平邑

用高效液相色谱法（ＨＰＬＣ）分析平邑甜茶内源ＡＢＡ、ＩＡＡ,选用Ｓｐｈｅｒｉｓｏｒｂ Ｃ１８反相柱,用ＵＶ检测器进行检测,使ＡＢＡ、ＩＡＡ得到很好的分离,测定方法迅速简便,流动相为甲醇、乙酸和水,系统研究了ｐＨ值、纯化方法对测定结果的影响,确定适合平邑甜茶ＡＢＡ、ＩＡＡ提取的分离条件。方法的精密度为：变异系数分别为２．８３和２．７９,最低检出限（信噪比＝２）分别为３．２７和３．２６ｎｍｏｌ／Ｌ,线     

北京鸭(Anas platyrhynchos)氧合血红蛋白的晶体生长和X射线晶体学的初步研究

北京鸭氧合血红蛋白晶体在以聚乙二醇６０００为沉淀剂,在ｐＨ７．１,血红蛋白浓度为２５ｍｇ／ｍｌ条件下采用一批结晶法培养得到,并且适合于Ｘ射线衍射分析。经Ｘ射线平面探测仪收集衍射强度数据和处理,确定晶体属四方晶系,空间群为Ｐ４２２１２,晶胞参数为ａ＝ｂ＝８．１１３ｎｍ,ｃ＝１０．７０７ｎｍ,α＝β＝γ＝９０°,每个不对称单位中包含半个四聚体分子。进一步得到北京鸭氧合血红蛋白高分辨率晶体结构,通过与其高海拔同类－斑头雁分析比较深入研究斑头雁血红蛋白分子的高氧亲和性机制。     

青霉素G酰化酶制备,晶体生长及初步晶体学研究

用基因工程菌Ｅ．ＣｏｌｉＡＥ１０９生产了青霉素Ｇ酰化酶,该酶经分离纯化后,摸索了晶体生长条件。用ＰＥＧ８０００作为沉淀剂以两种方法获得了晶体。晶体衍射能力超过２．０,初步晶体学研究显示晶胞参数ａ＝５２．１９,ｂ＝６９．３５,ｃ＝７３．９０,α＝６８．８０°,β＝７１．４０°,γ＝７４．２０°,空间群Ｐ１,收集了一套２．５分辨率的数据。     

B链氨端去－肽（B1）羧端去五肽（B26—30）猪胰岛素的初步晶体学研究

应用悬滴气相扩散法在含６％氯化钠和１２．５％丙酮的柠檬酸缓冲体系中,获得可供Ｘ射线结构分析用的Ｂ链氨端去－肽（Ｂ１）羧端去五肽（Ｂ２６－３０）猪胰岛素单晶体。晶体属四方晶系,空间群为Ｐ４１２２或Ｐ４３２２,晶胞参数为：ａ＝ｂ＝３６．０Ａ,ｃ＝１２０．０Ａ,α＝β＝γ＝９０度。单位晶胞中每个结晶学不对称单位含有２个ＤｅｓＢ１－ＤＰＩ分子。     

宝铎草和长穗开口箭的核型

本文对湖南产的宝锋草（ＤｉｓｐｏｒｕｍｓｅｓｓｉｌｅＤ．Ｄｏｎ）和广西产的长穗开口箭（ＴｕｐｉｓｔｒａｌｏｎｇｉｓｐｉｃｇＹ．ＷａｎｅｔＸ．Ｈ．Ｌｕ）的核型作了分析。前者的核型公式为２ｎ＝１４＝４ｇ＋１０ｓｍ（２ｓａｔ）,核型类型属于３Ａ;后者的核型公式为２ｎ＝３８＝２４ｍ＋６ｓｉｎ＋８ｓｔ．核型具有明显的二型性,属于２Ｃ型。此外还讨论了宝锋草的核型变异以及开口箭属和蜘蛛抱蛋属（Ａｓｐｉｄｉｓｔｒａ）的关系。