湖北麻鸭乙型肝炎病毒全基因组的克隆和序列分析

为了解湖北地区This finding was also Confirmed by the phylogenetic tree analysis.麻鸭中鸭乙型肝炎病毒(Duck hepatitis B virus,DHBV)自然感染状况以及湖北麻鸭所携带DHBV的基因结构特征,采集了70份成年麻鸭血清并应用PCR技术检测DHBV DNA,对其中一份DHBV DNA阳性血清进行DHBV全基因扩增,并进行克隆与序列测定分析.结果表明,湖北麻鸭DHBV自然携带率为10%;湖北DHBV分离株(GenBank登录号DQ276978)基因组的全长为3024bp,有编码P,S和C蛋白的三个开放阅读框;与GenBank中17株DHBV基因组比较,核苷酸同源性介于89.85%～93.29%之间;S蛋白、C蛋白和P蛋白结构功能区序列均高度保守;而对P蛋白标志性氨基酸和全基因进化树的分析表明,该分离株属于DHBV中国基因型中的一个亚型.     

湖北麻鸭乙型肝炎病毒全基因组的克隆和序列分析

为了解湖北地区Thisfindingwasalsoconfirmedbythephylogenetictreeanalysis.麻鸭中鸭乙型肝炎病毒(DuckhepatitisBvirus,DHBV)自然感染状况以及湖北麻鸭所携带DHBV的基因结构特征,采集了70份成年麻鸭血清并应用PCR技术检测DHBVDNA,对其中一份DHBVDNA阳性血清进行DHBV全基因扩增,并进行克隆与序列测定分析。结果表明,湖北麻鸭DHBV自然携带率为10%;湖北DHBV分离株(GenBank登录号DQ276978)基因组的全长为3024bp,有编码P,S和C蛋白的三个开放阅读框;与GenBank中17株DHBV基因组比较,核苷酸同源性介于89.85%~93.29%之间;S蛋白、C蛋白和P蛋白结构功能区序列均高度保守;而对P蛋白标志性氨基酸和全基因进化树的分析表明,该分离株属于DHBV中国基因型中的一个亚型。     

乙型肝炎病毒全基因序列的测定

测定７ 例慢性 Ｈ Ｂ Ｖ 携带者 Ｈ Ｂ Ｖ 基因组全序列,经同源性比较,确定基因型。２ 例基因型为 Ｂ 型,余均为 Ｃ 型;血清型ａｄｒ ４ 例,ａｄｗ ３ 例。各序列间 Ｘ 基因差异最大。未见 Ａ１８９６ 、 Ｔ１７６２ Ａ１７６４等重要位点的变异。结合已有的２ 株 Ｈ Ｂ Ｖ 中国流行株全基因序列,初步建立以中国流行株序列为基础的 Ｈ Ｂ Ｖ 标准序列,该标准序列与国外标准序列仅有２２ 个位点的差异     

抗病毒治疗后慢性乙型重型肝炎预后分析

目的分析慢性乙型重型肝炎抗病毒后影响预后的因素,探讨慢性乙型重型肝炎治疗策略。方法通过回顾性观察153例慢性乙型重型肝炎的临床资料,包括年龄、性别、白蛋白(ALB)、总胆红素(TB)、凝血酶原时间(PT)、甲胎蛋白(AFP)、胆碱酯酶(CHE)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、乙肝病毒核酸(HBV DNA)载量、是否存在肝硬化和是否存在并发症等情况,采用Cox比例风险模型对可能影响其预后的因素进行单因素和多因素回归分析。结果其中年龄、TB、PT、是否存在肝硬化、是否存在并发症是影响预后的独立因素。结论年龄、TB、PT、是否存在肝硬化、是否存在并发症对患者的预后有相关。     

探讨乙型肝炎病毒子宫内传播的病毒群演变

以６名ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ均阳性的女性携带者及其子宫内感染ＨＢＶ的６例胎儿为对象,探讨母儿间病毒群的演变,检测母儿所携ＨＢＶ Ｓ区４５１－６６０、Ｃ区２０２２－２３０１位核苷酸序列。结果表明了母儿间同源性９８％－１００％,检出５３０、５４６、５８１位点变异致使１２６、１３１、１４３位氨基酸替代。２对母儿Ｃ区同源性１００％,其中一对母儿均有原型株、变异株混合感染。结论子宫内感染大部分母亲将本身携带     

乙型肝炎病毒基因分型的研究进展

对乙型肝炎病毒的研究发现,病毒变异导致的不同基因型具有不同的临床意义。病毒基因型间的氨基酸差异可导致病毒复制水平的不同,会影响患者的抗病毒治疗效果以及耐药现象的产生,故及时检测患者感染的病毒基因型对指导临床工作、预测感染的结果尤为重要。乙型肝炎病毒基因分型技术已成为迫切需要进行研究和普及的重要内容;     

干扰素γ和白介素10在慢性乙型重型肝炎中的变化

目的：探讨INF-γ和IL-10在慢性乙型重型肝炎中的作用。方法：搜集不同患者血样,提取血清,使用ELISA方法检测不同患者不同时期的血清INF-γ和IL-10水平,并进行相关统计。结果：本研究发现,和其它肝炎对照组及健康对照组相比,慢性乙型重型肝炎患者的血清INF-γ水平显著升高,IL-10水平显著降低。尽管在不同预后的患者中,INF-γ水平差异并不明显,但是随着治疗生效,INF-γ水平会出现明显的下降。结论：慢性乙型重型肝炎和其它慢性肝炎相比,INF-γ和IL-10表达存在着差异,而且INF-γ可能是一种比较有效的监控慢性重型肝炎病程以及疗效的指标。     

干扰素γ和白介素10 在慢性乙型重型肝炎中的变化

目的:探讨INF-γ和IL-10在慢性乙型重型肝炎中的作用。方法:搜集不同患者血样,提取血清,使用ELISA方法检测不同患者不同时期的血清INF-γ和IL-10水平,并进行相关统计。结果:本研究发现,和其它肝炎对照组及健康对照组相比,慢性乙型重型肝炎患者的血清INF-γ水平显著升高,IL-10水平显著降低。尽管在不同预后的患者中,INF-γ水平差异并不明显,但是随着治疗生效,INF-γ水平会出现明显的下降。结论:慢性乙型重型肝炎和其它慢性肝炎相比,INF-γ和IL-10表达存在着差异,而且INF-γ可能是一种比较有效的监控慢性重型肝炎病程以及疗效的指标。     

乙型肝炎病毒（HBV）核心基因的变异及分析

对１８份不同类型的乙型肝炎病毒感染者血清及４份肝癌组织,用套式ＰＣＲ扩增ＰｒｅＣ／Ｃ基因,结果１５份标本可供进行核苷酸序列分析。１２例血清标本在Ｃ区均出现点突变并导致氨基酸改变。１份肝癌患者的血清及癌组织与另１份癌组织中获得的Ｃ基因克隆有２１３－３２４个核苷酸缺失。     

两株乙型肝炎病毒基因组结构分析及其复制和抗原表达特性的比较

为从全基因组水平研究乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）的核苷酸结构及复制和抗原表达特性,分别从２例ＨＢｓＡｇ和ＨＢｅＡｇ阳性、ＨＢＶ ＤＮＡ滴度为１０＾１４和１０＾１３拷贝／ｍｌ的慢性乙型肝炎患者（编号为５６和２－１８）血清中扩增、克隆了ＨＢＶ全基因组,并测定了核苷酸序列。两株病毒基因组转染ＨｅｐＧ２细胞的培养上清中ＨＢｓＡｇ水平基本相同,但＃５６毒株表达的ＨＢｅＡｇ约为＃２－１８株的３倍,Ｓｏｕｔｈｅｒｍ印     

Complete Genomic Sequence of a Chinese Isolate of Duck Hepatitis Virus

The complete genomic sequence of Duck hepatitis virus 1(DHV-1) ZJ-V isolate was sequenced and determined to be 7 691 nucleotides(nt) in length with a 5'-terminal un-translated region(UTR) of 626 nt and a 3'-terminal UTR of 315 nt(not including the poly(A) tail).One large open reading frame(ORF) was found within the genome(nt 627 to 7 373) coding for a polypeptide of 2 249 amino acids.Our data also showed that the poly(A) tail of DHV-1 has at least 22 A's.Sequence comparison revealed significant homology(from 91.9% to 95.7%) between the protein sequences of the ZJ-V isolate and those of 21 reference isolates.Although DHV-1 has been classified as an unassigned virus in the Picornaviridae family,its genome showed some unique characteristics.DHV-1 contains 3 copies of the 2A gene and only 1 copy of the 3B gene,and its 3'-NCR is longer than those of other picornaviruses.Phylogenetic analysis to do sequence homology based on the VP1 protein sequences showed that the ZJ-V isolate shares high sequence homology with the reported DHV-1 isolates(from 92.9% to 99.2%),indicating that DHV-1 is genetically stable.     

戊型肝炎病毒细胞分离株部分核苷酸序列分析

用抗原捕获／多聚酶链反应（ＡＣ／ＰＣＲ）对戊型肝炎病毒（ＨＥＶ）细胞分离株ＭＪ９０和Ｒ２５基因组的部分核苷酸序列进行扩增,获得了与ＨＥＶ缅甸株ＥＴ１·１相同的ｃＤＮＡ扩增带。该ｃＤＮＡ扩增带纯化后用双脱氧核苷酸ＤＮＡ链末端终止法测序,ＣＪ９０、Ｒ２５株的核苷酸和氨基酸序列与ＥＴ１·１克隆的同源性分别为９９．６％、１００％和９９％、９９％,从而证明ＭＪ９０和Ｒ２５毒株为ＨＥＶ．     

乙型肝炎病毒受体研究进展

肝细胞是乙型肝炎病毒(HBV)感染的主要靶器官,病毒黏着并进一步侵入肝细胞是感染启动的关键步骤。近几年的研究发现,肝细胞膜上的受体在病毒感染中起着至关重要的作用。我们对近年来几种可能的HBV受体的研究情况进行综述,对阐明HBV入侵肝细胞的机制具有一定的意义。     

Complete Genome Sequence of a Variant Porcine Epidemic Diarrhea Virus Strain Isolated in China

Since October 2010, an outbreak of porcine epidemic diarrhea (PED) has been observed in some provinces of China. Here we report the complete genome sequence of porcine epidemic diarrhea virus (PEDV) strain LC, which was recently isolated from sucking piglets that suffered from severe watery diarrhea in Guangdong. It will help in understanding the epidemiological and molecular characteristics of PEDV in China.     

Interference of Hepatitis B Virus with Cellular Signaling

The presence of hepatitis B virus (HBV) proteins leads to changes in the cellular gene expression. As a consequence, the cellular signaling processes are influenced by the actions of HBV proteins. It has been shown that HBV nucleocapsid protein and the amino-terminal part of polymerase termed as terminal protein (TP) could inhibit interferon signaling. Further, the global gene expression profiles differ in hepatoma cells with and without HBV gene expression and replication. The expression of interferon (IFN) stimulated genes (ISGs) was differently regulated in cells with HBV replication and could be modulated by antiviral treatments. The HBV TP has been found to modulate the ISG expression and enhance the HBV replication. The modulation of the cellular signaling processes by HBV may have significant implications for pathogenesis.     

双剪接型2.2kb乙型肝炎病毒基因组剪接变异体编码蛋白可反式激活GAL4反应元件

为研究双剪接型2.2kb乙型肝炎病毒(HBV)基因组剪接变异体特异性新蛋白—yTPds的功能,以酵母双杂交系统的诱饵质粒pGBKT7克隆yTPds基因并转化酵母细胞AH109获得相应重组子,滤纸法及液相分析法测酵母转化子内β-半乳糖苷酶(-βgal)的活性,证实yTPds蛋白可反式激活酵母GAL4反应元件(GAL4 responsive ele-ment)。在此基础上,为进一步探讨该蛋白反式激活作用的功能区域,以pGBKT7分段克隆yTPds基因,分别编码yTPds蛋白N端47个氨基酸(yTPds-N47)、N端75个氨基酸(yTPds-N75)、中部28个氨基酸(yTPds-M28)、C端92个氨基酸(yTPds-C92)、C端64个氨基酸(yTPds-C64)以及去除中部28个氨基酸的融合蛋白(yTPds-Fusion)。各重组载体转化酵母细胞AH109获得相应转化子。滤纸法定性检测酵母转化子内-βgal活性,结果显示yTPds-N75、yTPds-M28、yTPds-C92蛋白可反式激活GAL4反应元件,液相分析法显示酵母转化子内-βgal活性强弱为yTPds-M28>yTPds-N75>yTPds-C92>yTPds,提示yTPds蛋白反式激活作用的功能区域是其中部28个氨基酸,该区域对应于HBV preS1蛋白反式激活功能域。此研究证实双剪接型2.2kb乙型肝炎病毒(HBV)基因组剪接变异体特异性新蛋白具有反式激活作用,提示其可能具有重要的致病意义。