甲状腺素及维甲酸对成骨样细胞甲状旁腺素受体的调节作用

研究了甲状腺素（T3／T4）及维甲酸（RA）对大鼠成骨样细胞ROS17／2．8细胞林甲状旁腺素（PTH）受体的调节作用．实验结果表明：细胞经T3／T4处理后,可显著增高PTH受体结合率及碱性磷酸酶活性,以及PTH受体mRNA的表达．细胞经RA处理后,则相反地降低PTH受体结合率及碱性磷酸酶活性．     

肿瘤坏死因子α对大鼠成骨样细胞增殖与甲状旁腺素受体表达的影响

大鼠成骨样细胞ＲＯＳ１７／２．８经肿瘤坏死因子α处理后,发现其ｃ－ｍｙｃ,ｃ－ｆｏｓ,ｃ－ｊｕｎ等原癌基因ｍＲＮＡ的表达降低,细胞增殖明显受到抑制;同时,其ＰＴＨ受体的表达以及ＰＴＨ经受体刺激后引起的细胞内ｃＡＭＰ的增加也受到抑制。提示ＴＮＦα可抑制大鼠在骨要细胞ＲＥＯＳ１７／２．８的增殖和分化。     

RFP_（134）对UMR106细胞EGF受体酪氨酸蛋白激酶的调节作用

以大鼠成骨肉瘤细胞（ＵＭＲ１０６）为模型,研究了表皮生长因子（ＥＧＦ）对其受体酪氨酸蛋白激酶（ＴＰＫ）的调节作用。以本实验室从植物中提取纯化的二萜类活性物质（ＲＦＰ１３４）为诱导分化剂,观察了ＲＦＰ１３４对ＵＭＲ１０６细胞ＥＧＦ受体ＴＰＫ的活性和磷酸化作用的影响,并与ＲＡ和ＲＦＰ１３４＋ＲＡ处理细胞做了比较,结果显示ＥＧＦ与其受体结合后能激活ＴＰＫ,使ＴＰＫ活性增加２倍．ＲＦＰ１３４,ＲＡ,ＲＦＰ１３４＋ＲＡ处理细胞后,分别降低ＥＧＦ诱导的受体ＴＰＫ活性５０％,４３％,５５％,降低磷酸化ＴＰＫ含量５５％,３６％,５３％。从结果中发现无ＥＧＦ刺激的细胞也具有受体ＴＰＫ磷酸化作用,用ＲＦＰ１３４,ＲＡ,ＲＦＰ１３４＋ＲＡ处理细胞,分别降低受体磷酸化ＴＰＫ含量５９％,４０％,５７％,而且我们发现用ＥＧＦ诱导的细胞受体ＴＰＫ含量高于无ＥＧＦ作用的细胞．提示ＵＭＲ１０６细胞本身可能具有受体ＴＰＫ活性,能够引起细胞受体自动磷酸化,ＥＧＦ刺激后ＴＰＫ的磷酸化作用增强,可见ＲＦＰ１３４对ＥＧＦ诱导的ＴＰＫ磷酸化和无ＥＧＦ诱导的受体自动磷酸化都具有明显的抑制作用,（并强于ＲＡ）这可能与在第二信使水平上阻抑ＰＴＰＫ活性密切相关     

甲状旁腺素对成骨样细胞增殖的调节作用

甲状旁腺素（ＰＴＨ）是调节钙磷代谢的经典激素,有报道ＰＴＨ对其靶细胞－成骨细胞有促增殖分化作用。经多层次、多水平的实验研究证实,ＰＴＨ对成骨样细胞ＲＯＳ１７／２．８确有促增殖作用。（１）细胞计数、ＭＴＴ［３－（４,５－ｄｉｍｅｔｈｙｌｔｈｉａ－ｚｏｌ－ｚ－ｙｉ）２,５－ｄｉｐｈｅｎｙｌｔｅｔｒａｚｏｌｉｕｍｂｒｏｍｉｄｅ］测定及ＳＲＢ（ｓｏｄｉｕｍｒｈｏｄａｍｉｎｅＢ,ＳＲＢ）染色均显示经ＰＴＨ（１０－９ｍｏｌ／Ｌ）处理的细胞,其数目明显增加;（２）３Ｈ－ＴｄＲ参入增加;（３）与增殖相关的原癌基因（ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｊｕｎ、ｃ－ｋｉ－ｒａｓ和ｃ－ｍｙｃ）的表达增强;（４）成骨细胞特征性蛋白－碱性磷酸酶活性降低．这些结果不仅表明该激素具有非经典样作用,同时意味着激素也参与其靶细胞增殖分化的调节作用     

RFP134对UMR106细胞EGF受体酪氨酸蛋白激酶的调节作用

以大鼠成骨肉瘤细胞（ＵＭＲ１０６）为模型,研究了表皮生长因子（ＥＧＦ）对其受体酪氨酸蛋白激酶（ＴＰＫ）的调节作用。以及实验室从植物中提取纯化的二萜类活性物质（ＲＦＰ１３４）为诱导分化剂,观察了ＲＦＰ１３４对ＵＭＰ１０６细胞ＥＧＦ受体ＴＰＫ的活性和磷酸化作用的影响。并与ＲＡ和ＲＦＰ１３４＋ＲＡ处理细胞做了比较。结果显示ＥＧＦ与其受体结合后能激活ＴＰＫ,使ＴＰＫ活性增加２倍。ＲＦＰ１３４,ＲＡ,ＲＦＰ     

视黄酸对胰岛素受体表达的影响

ＳＭＭＣ－７７２１细胞经１０μｍｏｌ／Ｌ视黄酸（ＲＡ）处理１－５天后,完整细胞或纯化胰岛素受体（Ｉｎｓ－Ｒ）对胰岛素（Ｉｎｓ）的结合容量逐日降低。＾％３５Ｓ－甲硫氨酸参人Ｉｎｓ－Ｒ明显减少,特别是β亚基。部分纯化Ｉｎｓ－Ｒ的酷氨酸蛋白激酶（ＴＰＫ）活力也随ＲＡ处理时间延长而逐步降低。结果表明ＲＡ降低Ｉｎｓ－Ｒ的表达。但ＲＡ并不改变Ｉｎｓ－Ｒ与Ｉｎｓ结合的亲和力和它的负协同效应。     

甲状旁腺素增强成骨样细胞ROS 17/2.8中酪氨酸蛋白磷酸化的研究

为了研究甲状旁腺素（ｐａｒａｔｈｙｒｏｉｄｈｏｒｍｏｎｅ,ＰＴＨ）促成骨样细胞ＲＯＳ１７／２．８增殖分化的信号传递的机理,观察了ＰＴＨ对细胞内酪氨酸蛋白激酶（ｔｙｒｏｓｉｎｅｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅｓ,ＴＰＫ）活性及酪氨酸蛋白磷酸化水平的影响,并检测了ＰＴＨ对ｃ－ｒａｓｍＲＮＡ表达的诱导作用．结果表明,ＰＴＨ可增强细胞内ＴＰＫ活性,提高细胞内酪氨酸蛋白磷酸化水平,以及促进ｃ－ｒａｓｍＲＮＡ的持续表达．这些结果提示,ＰＴＨ促增殖的细胞内信息传递通路与酪氨酸蛋白激酶－ｒａｓ－ＭＡＰＫｉｎａｓｅ通路密切相关,而ＰＫＡ／ＰＫＣ通路的最终效应可能是通过与上述通路的ｃｒｏｓｓｔａｌｋ实现的     

甲状旁腺素、胰岛素样生长因子-Ⅰ对骨特征性标志蛋白的影响

为了阐明甲状旁腺素（ｐａｒａｔｈｙｒｏｉｄｈｏｒｍｏｎｅ,ＰＴＨ）、胰岛素样生长因子－Ⅰ（ｉｎｓｕｌｉｎ－ｌｉｋｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ－Ⅰ,ＩＧＦ－Ⅰ）在促成骨样细胞ＲＯＳ１７／２．８增殖的同时对其分化状况的影响,研究了ＰＴＨ、ＩＧＦ－Ⅰ对骨特征性标志蛋白碱性磷酸酶（ａｌｋａｌｉｎｅｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ,ＡＬＰ）活性、骨钙素（ｏｓｔｅｏｃａｌ－ｃｉｎ）ｍＲＮＡ表达及骨胶原蛋白（ｃｏｌａｇｅｎ）合成的影响．结果表明,ＰＴＨ、ＩＧＦ－Ⅰ均可抑制ＡＬＰ活性,ＰＴＨ的抑制作用强于ＩＧＦ－Ⅰ,抑制作用具有时间剂量依赖性;ＰＴＨ、ＩＧＦ－Ⅰ均可诱导骨钙素ｍＲＮＡ表达增加;ＰＴＨ能够促进３Ｈ－脯氨酸参入新生小鼠颅骨组织,既ＰＴＨ能够骨胶原蛋白合成增加．这些结果提示,ＰＴＨ、ＩＧＦ－Ⅰ在促成骨样细胞ＲＯＳ１７／２．８增殖的同时也促进其分化,表明在成骨细胞的生发成熟过程中,增殖、分化现象相辅相成,相伴而行．     

可溶性55kD人肿瘤坏死因子受体(shTNFR55)在变铅青链霉菌中的分泌表达

从 Ｈｅ Ｌａ 细胞中提取总 Ｒ Ｎ Ａ,采用反转录 Ｐ Ｃ Ｒ 技术,从该总 Ｒ Ｎ Ａ 中扩增了约 ５３０ ｂｐ 的ｓｈ Ｔ Ｎ Ｆ Ｒ５５ 基因的 ｃ Ｄ Ｎ Ａ,并克隆至质粒 ｐ Ｕ Ｃ ｍ ｅｌ中酪蛋白酶 ｍ ｅｌ Ｃｌ 分泌信号肽编码序列的下游,构建成含融合基因 ｍ ｅｌ／ Ｔ Ｎ Ｆ Ｒ 的重组质粒 ｐ Ｕ Ｃ ｍ ｅｌ／ Ｔ Ｎ Ｆ Ｒ．把融合基因 ｍ ｅｌ／ Ｔ Ｎ Ｆ Ｒ 插入链霉菌表达质粒 ｐ Ｉ Ｊ４５９ 的多克隆位点,使之位于 ｅｒｍ 强启动子的下游,得到重组表达质粒 ｐ Ｉ Ｊ４５９ ｍ ｅｌ／ｓ Ｔ Ｎ Ｆ Ｒ．经 Ｓｏｕｔｈｅｒｎ 杂交证明重组质粒 ｐ Ｉ Ｊ４５９ ｍ ｅｌ／ｓ Ｔ Ｎ Ｆ Ｒ 插入了 ｓ Ｔ Ｎ Ｆ Ｒ５５ 基因片段．对重组菌株 Ｓｔｒｅｐｔｏｍ ｙｃｅｓ ｌｉｖｉｄａｎｓ（ｐ Ｉ Ｊ４５９ ｍ ｅｌ／ｓ Ｔ Ｎ Ｆ Ｒ）的发酵液进行 Ｓ Ｄ Ｓ Ｐ Ａ Ｇ Ｅ、受体配基杂交（ Ｌｉｇａｎｄ ｂｌｏｔ）分析、对 Ｔ Ｎ Ｆ 敏感的 Ｌ９２９ 细胞的细胞毒性中和试验表明,可溶性肿瘤坏死因子受体 ｓ Ｔ Ｎ Ｆ Ｒ５５ 在链霉菌中得到了分泌表达,表达产物具有生物学活性．表达产物的分子量约在 ２６～２８ ｋ Ｄ 之间．     

表油菜素内酯对绿豆幼叶衰老的促进作用

表油菜素内酯（ｅｐｉＢＲ）０．０５ｍｇ／Ｌ能促进绿豆幼叶的衰老,其叶绿素和蛋白质含量均明显低于对照。绿豆幼叶经ｅｐｉＢＲ处理后,可使过氧化物酶活性明显增加,但同工酶谱无变化;超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）和过氧化氢酶（ＣＡＴ）活性随ｅｐｉＢＲ处理时间的延长而降低。ｅｐｉＢＲ能促进丙二醛（ＭＤＡ）含量增加,而其含量与ＳＯＤ和ＣＡＴ活性是显著负相关。     

表油菜素内酯对绿豆幼叶衰老的促进作用

表油菜素内酯（ｅｐｉＢＲ）０．０５ｍｇ／Ｌ能促进绿豆幼叶的衰老,其叶绿素和蛋白质含量均低于对照。绿豆幼叶经ｅｐｉＢＲ处理后,可使过氧化物酶活性明显增加,但同工酶谱无变化;超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）和过氧化氢酶（ＣＡＴ）活性随ｅｐｉＢＲ处理时间的延长而降低。ｅｐｉＢＲ能促进丙二醛（ＭＤＡ）含量增加,而其含量与ＳＯＤ和ＣＡＴ活性呈显著负相关。     

细胞诱导分化剂对HL60细胞β-1,4-半乳糖基转移酶活性的影响

用荧光标记的受体底物（Ｇｎβ１－２Ｍα１－６（Ｇｎβ１－２Ｍα１－３）Ｍβ１－４Ｇｎβ１－４（Ｆｕｃα１－６）Ｇｎ－ＰＡ）,结合高效液相层析（ＨＰＬＣ）建立了细胞β－１,４－半乳糖基转移酶的活性检测方法．研究了ＨＬ６０细胞在体外低血清培养后不同的时间其酶活性的变化,发现１２至２４ｈ酶活性达到一个高峰,为５０．１４ｐｍｏｌ／ｍｉｎ（１０６ｃｅｌ）,此时细胞处在分裂间期,其它各测定时间变化不大．用ＰＭＡ,ＲＡ等细胞诱导分化剂处理ＨＬ６０细胞株时,发现其活性发生了较明显的变化,ＰＭＡ诱导的细胞其酶活性在２４ｈ变化最大,升高到对照的１．３２倍;而ＲＡ处理的细胞其酶活性在７２ｈ变化最大,升高到对照的２．１５倍．     

核受体辅助因子及其信号转导

类固醇激素、核受体及其辅助因子在细胞增殖、分化中起重要的作用。核受体与相应的配体结合后同细胞内的辅助激活因子ＣＢＰ／Ｐ３００、ＰＣＡＦ、Ｐ／ＣＩＰ和ＳＲＣ家族等结合形成的复合物能使组蛋白乙酰化促进基因的转录,当缺乏配体时核受体同辅助抑制因子ＳＭＲＩ、mSin3A及ＨＡＤ１具有很强的结合力使组蛋白去乙酰化抑制基因的转录活性。ＭＡＰＫ、ＰＫＡ、ＡＰ－１、Ｓap-a、ＪＡＫ／ＳＴＡＴ、ＪＡＫ信号传导中核受体辅助因子参与信号传导过程影响基础的转录。     

抗旱性不同的两个大豆品种对外源H_2O_2的响应

两个品种的大豆叶圆片经１０－４ｍｏｌ／Ｌ和１０－３ｍｏｌ／Ｌ的Ｈ２Ｏ２处理１２ｈ后,超氧物歧化酶（ＳＯＤ）、过氧化氢酶（ＣＡＴ）与谷胱甘肽还原酶（ＧＲ）活性明显增加,但１０－２ｍｏｌ／Ｌ的Ｈ２Ｏ２处理却使这些酶活性降低。抗旱性较强的大豆品种小粒豆１号较抗旱性较弱的鲁豆４号能维持较高的叶绿素含量和较高的ＳＯＤ、ＣＡＴ及ＧＲ活性,对Ｈ２Ｏ２的抗性较强。５０μｍｏｌ／Ｌ的亚胺环已酮（ＣＨＭ）能消除Ｈ２Ｏ２对ＳＯＤ、ＣＡＴ与ＧＲ活性的刺激作用,而同样浓度的放线菌素Ｄ（ＡＭＤ）则不能。     

创伤后巨噬细胞对T细胞白介素2及白介素2受体α基因表达的直…

以２５μｇ／ｍｌ的丝裂霉素Ｃ处理巨噬细胞３０ｍｉｎ,可阻断巨噬细胞白介素１（ＩＬ－１）、白介素６（ＩＬ－６）、肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）及前列腺素Ｅ２（ＰＧＥ２）的合成与分泌。创伤小鼠巨噬细胞经丝裂霉素Ｃ处理后,可明显抑制正常Ｔ细胞白介素２（ＩＬ－２）ｍＲＮＡ及ＩＬ－２受体（ＩＬ－２Ｒ）α ｍＲＮＡ水平,并增强Ｔｓ细胞的抑制活性。去除Ｔ细胞中Ｔｓ细胞可使巨噬细胞的抑制作用消失。表明创伤后巨噬细胞可通过     

抗旱性不同的两个大豆品种对外源H2O2的响应

两个品种的大豆叶圆片经１０＾－４ｍｏｌ／Ｌ和１０＾－３ｍｏｌ／Ｌ的Ｈ２Ｏ２处理１２ｈ后,超氧化岐化酶（ＳＯＤ）、过氧化氢酶（ＣＡＴ）与谷胱甘肽还原酶（ＧＲ）活性明显增加,但１０＾－２ｍｏｌ／Ｌ的Ｈ２Ｏ２处理却使这些酶活性降低。抗旱性较强的大豆品种小粒豆１号较抗旱性较弱的鲁豆４号能维持较高的叶绿素含量和较高的ＳＯＤ、ＣＡＴ及ＧＲ活性,对Ｈ２Ｏ２的抗性较强。５０μｍｏｌ／Ｌ的亚胺环已酮（ＣＨＭ）能消除     

大鼠卵巢绒毛膜促性腺激素受体在CHO中的表达和扩增

本文报道了利用二氢叶酸还原酶放大系统将大鼠ＬＨ／ｈＣＧ受体（记为Ｆ－ｈＣＧＲ）及其胞外肽段（记为Ｔ－ｈＣＧＲ）在中国苍鼠卵巢细胞（ＣＨＯ）中的表达。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析表明,Ｆ－ｈＣＧＲ为一条蛋白质带,其表观分子量为９２ｋｄ,而Ｔ－ｈＣＧＲ为３５ｋｄ和３７ｋｄ两条带。表达受体对其配基ｈＣＧ表现出高的亲合力,Ｆ－ｈＣＧＲ的解离常数为７×１０－９ｍｏｌ／Ｌ,Ｔ－ｈＣＧＲ为６．４×１０－９ｍｏｌ／Ｌ。表达Ｆ－ｈＣＧＲ的转染ＣＨＯ细胞可结合１２５Ｉ－ｈＣＧ,而表达Ｔ－ｈＣＧＢ者不结合１２５Ｉ－ｈＣＧ。这提示Ｆ－ｈＣＧＲ主要存在于细胞质膜表面上。表达Ｆ－ｈＣＧＲ的转染ＣＨＯ细胞能刺激。ｃＡＭＰ的形成,而表达Ｔ－ｈＣＧＲ者不能刺激ｃＡＭＰ形成。免疫荧光定位结果表明,Ｔ－ｈＣＧＲ主要分布于质膜的细胞质侧以及胞内其他一些细胞器膜上。用免疫亲和层析可以得到纯化的Ｔ－ｈＣＧＲ。     

百草枯和苯甲酸钠对渗透胁迫下抗旱性不同玉米品种愈伤组织的影响

两个品种玉米愈伤组织经０．５和５ｍｍｏｌ／Ｌ的百草枯处理３ｈ后,在渗透胁迫下处理２４ｈ电解质泄漏率增加;Ｈ２Ｏ２和ＭＤＡ积累;ＡｓＡ和ＣＡＲ含量的减少加剧。０．５和５ｍｍｏｌ／Ｌ的苯甲酸钠减轻渗透胁迫诱导的氧化伤害,促进ＣＡＴ活性的增加;使ＳＯＤ、ＧＲ、ＡＰ和ＰＯＤ能维持较高的活性;ＡｓＡ和ＣＡＲ含量降低的幅度减小。     

去甲肾上腺素对棕色脂肪组织募集反应的调节作用

去甲肾上腺素（ＮＡ）可引起棕色脂肪组织（ＢＡＴ）的产热作用,也是ＢＡＴ募集反应主要的调节物质。ＢＡＴ中存在的肾上腺素受体（ＡＲ）至少包括α１,α２,β１和β２四型。ＢＡＴ的产热作用主要由β３－ＡＲ介导;其细胞增殖和细胞分化分别由β１－ＡＲ和β３－ＡＲ介导。与ＢＡＴ募集有关的几种转录因子的表达也受ＮＡ的调控,例如ｃ－ｆｏｓ和非成熟细胞Ｃ／ＥＢＰα基因的表达受β－和α１－ＡＲ的调节;Ｃ／ＥＢＰβ和成熟     

催乳素对大鼠前腺上皮细胞内雄激素受体和5a—还原酶活性…

一实验建立了无血清培养的大鼠前列腺上皮细胞内雄激素受体（ＡＲ）的测定方法,并研究究了催乳素（ＰＲＬ０对细胞ＡＲ数量和５ａ－还原酶活性的影响。结果表明：ＰＲＬ使前列腺上皮细胞内ＡＲ数量显著增加,其中１０ｎｇ／ｍｌＰＲＬ的作用最强,但高剂量的ＰＲＬ则失去对ＡＲ的刺激作用。ＰＲＬ还能拮抗雄引起的其自身受体的下调作用,使受体的数量回升至对照组水平。对５ａ－还原酶的催化产物双氢睾酮（ＤＨＴ）的测定结果显示Ｐ