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1.
对41例健康儿童和17例反复呼吸道感染患儿(复咸儿)的外周血淋巴细胞ADA活性进行了检测.两例ADA活性明显低下的复感儿的外周血T淋巴细胞被选作实验样品,经体外培养后,采用lipofectin介导的的方法导入外源性ADA基因.结果表明:体外培养的两例复感儿淋巴细胞中ADA活性较基因转移前升高;细胞免疫学特性也在一定程度上获得改善 相似文献
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人血树突状细胞培养后的形态及抗肿瘤活性 总被引:2,自引:0,他引:2
观察新鲜分离和经体外培养36小时的人外周血树突状细胞DC。和DC36的形态学及其对淋巴因子与植物血凝素激活的杀伤细胞(LPAK细胞)体外诱导人肝癌细胞株BEL┐7402的促进作用。形成学观察用免疫细胞化学法。抗肿瘤实验分为三大组:(1)L组(BEL┐7402+LPAK),(2)LD36组(BEL┐7402+LPAK+DC36),(3)LD0组(BEL┐7402+LPAK+DC0)。各组均采用LPAK与BEL┐7402为5∶1和10∶1两种效靶比。培养48小时后用中性红摄入比色法检测LPAK细胞的杀伤活性。结果显示,DC36的形态以具有细长突起者为多,与DC0主要为园形或具有短而钝突起的形态有明显差别。各组的细胞毒活性依次为:LD36组>LD0组>L组(P<0.01),并随效靶比增高而相应增强。这表明新鲜分离的人外周血DC在体外经36h培养后,不仅在形态上成熟,而且抗肿瘤活性也明显增强 相似文献
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人外周血淋巴细胞酶超微结构定位与活性研究 总被引:2,自引:0,他引:2
应用电镜酶细胞化学方法研究了人外周血淋巴细胞ATP酶、G6P酶、5′ND酶的超微结构定位与活性。结果:1ATP酶主要定位在淋巴细胞膜下方,在内质网及线粒体等膜相结构也见到此酶的分布。G6P酶主要定位在内质网、线粒体等膜相结构。5′ND酶主要定位在细胞膜外表面。三种酶定位准确,颗粒清晰。2此结果与我们对人体淋巴结淋巴细胞酶超微结构定位结果相同。结果提示应用电镜酶细胞化学方法可以检测人外周血淋巴细胞酶活性变化,对于判定免疫细胞功能状态,具有一定意义。 相似文献
4.
大剂量国产胸腺肽联合干扰素治疗慢性乙肝疗效及其机理初探 总被引:3,自引:0,他引:3
本文研究大剂量胸腺肽联合干扰素对慢性乙肝患者的治疗作用,发现胸腺肽联合干扰素治疗三个月后,患者的ALT复常率、HBeAg转阴率、HBVDNA阴转率和HBVDNA有效下降率分别为760%、440%、560%和960%。T淋巴细胞亚群分析结果表明,联合治疗后,患者外周血CD4+淋巴细胞亚群上调,CD8+亚群下调,二者比值趋于正常,说明国产胸腺肽联合干扰素治疗慢性乙肝的治疗机理与免疫调节作用有关。 相似文献
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CD3ε和PMA对fas基因转录调控作用的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
研究了CD3ε和PMA对细胞凋亡基因fas的转录调控作用.根据已知的人fas基因5'上游序列设计引物,用PCR法从人胸腺细胞基因组DNA中扩增出fas5'上游长为446bp的启动子片段.将此片段定向克隆到以虫荧光素酶为报告基因的真核细胞表达载体pXP2中.经限制性内切酶酶切鉴定及序列测定分析表明此重组表达质粒DNA的结构和序列正确.用此质粒(pXP2-fasup)瞬时转染人JurkatT淋巴细胞,分析报告基因的表达水平.结果表明fas基因上游-506到-60的区域有弱启动子活性,约是阴性对照的1.5倍.抗CD3ε抗体和PMA处理均可增强fas启动子的活性,促进报告基因的表达,其虫荧光素酶活性分别是未经处理的pXP2-fasup转染细胞的1.7倍和3.3倍,但二者没有协同作用.PKC的抑制剂staurosporine和PTK的抑制剂herbimycinA可抑制PMA诱导的fas基因转录,使虫荧光素酶基因的表达降至未用PMA处理的水平.但PTK的另一种抑制剂genistein可与PMA发挥协同作用,上调fas基因的转录,使虫荧光素酶活性增加到5倍.这些结果为阐明CD3ε及PMA介导T淋巴细胞激活和凋亡的分子机制 相似文献
6.
用于基因治疗的病毒载体 总被引:4,自引:0,他引:4
近几年来,基因治疗研究发展迅速,目的是将外源基因导入靶细胞,在体内产生疗效。早在1990年美国NIH的研究人员就将腺苷脱氢酶(adenosinedeaminase,ADA)基因导入病人的淋巴细胞,改善了由于ADA基因缺损造成的免疫缺陷[1,2]。基因... 相似文献
7.
本文介绍运用蛇毒制剂(胶囊)治疗海洛英成瘾者10例,通过用药及用药后对照观察,药瘾者外周血中T淋巴细胞亚群(CD3、CD4、CD8、CD4/CD8)及体液免疫(IgG、IgA、IgM和C3)的变化,并分析临床意义。对照组10例,采用口服美沙酮治疗,在用药前及用药后检测药瘾者外周血中T淋巴细胞亚群及体液免疫。观察结果,发现蛇毒组用药后药瘾者外周血中淋巴细胞总数增加明显,T淋巴细胞亚群中CD3及CD4均有增加,CD3有不同程度下降,CD4/CO比值有不同程度升高,提示蛇毒用于戒毒治疗有提高机体自身免疫功能的变化。对照组中(用美沙酮者)治疗后外周血中淋巴细胞总数增加不明显,T淋巴细胞亚群CD3及CD4亦有增加,但CD8也见增加,结果CD4/CD3比值增加不明显,原因不详,是否与用麻醉药品有关,有待今后进一步研究。 相似文献
8.
本实验观察了缺氧复氧对豚鼠心肌细胞膜电位的影响及磷酸肌酸的保护作用。结果表明缺氧5-20min时RP、APA减小,Vmax减慢,APD10、APD50、APD90缩短。复氧5-20min后,RP、APA和Vmax进一步减少,APD10、APD50、APD90明显缩短。在灌流液中加入磷酸肌酸保持其浓度在10-6mol时,RP、APA显著增加,Vmax增快,APD10、APD50、APD90明显延长。复氧20min后膜电位各项参数趋向恢复正常。此结果提示,磷酸肌酸对缺氧复氧的心肌具有显著的保护作用。 相似文献
9.
CD3AK细胞抗肿瘤作用的研究进展 总被引:3,自引:0,他引:3
魏虎来 《微生物学免疫学进展》1997,25(1):80-82
抗CD3单克隆抗体激活的杀伤细胞CD3AK是一种新型抗肿瘤免疫活性细胞,具有体外扩增能力强,细胞毒活性高,体内抗肿瘤效果好,低依赖IL-2等特点。本文综述了CD3AK细胞的诱导和扩增、形态学和免疫学特性、体内外抗肿瘤作用和CD3AK细胞的活性增强物质,并讨论了CD3AK细胞的作用机制 相似文献
10.
将人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和人血清白蛋白第三功能区(HAS-D3)的基因串联后,在E.coli中获高效表达,表达量占菌体蛋白的32.6%.利用TF-1体外细胞活性测定表明,GM-HSA的活性单位为1.04×10~6U/mg,虽然其比活性低于GM-CSF,但比后者具有更高的体外热稳定性和储藏稳定性. 相似文献
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人重组GM—CSF/HSA—D3嵌合蛋白(GM—HSA)在大肠杆菌中的表达及其产… 总被引:1,自引:0,他引:1
将人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和人血清白蛋白第三功能区(HSA-D3)的基因串联后,在E.coli中获高效表达,表达量占菌体蛋白的32.6%。利用TF-1体外细胞活性测定表明,GM-HSA的活性单位为1.04×10^6U/mg,虽然其比活性低于GM-CSF,但比后者具有更高的体外热稳定性和储藏稳定性。 相似文献
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国产胸腺肽治疗慢性乙肝疗效及其机理初探 总被引:2,自引:0,他引:2
本文观察大剂量胸腺肽对慢性乙肝患者的治疗作用并研究其作用机理。用ELISA、PCR 和免疫化学染色法等比较分析胸腺肽治疗三个月后,ALT、HBV- M 和HBV DNA 等指标变化,发现患者ALT 复常率、HBeAg 转阴率、HBV DNA 阴转率和HBV DNA 有效下降率分别为58.33 % 、33.33 % 、41.67 % 和91.67 % ;同时患者外周血CD4 +淋巴细胞亚群上调,CD8 + 亚群下调,二者比值趋于正常。说明国产胸腺肽治疗慢性乙肝有较好的应用前景,其治疗机理与免疫调节作用有关。 相似文献
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登革病毒感染性转录体技术 总被引:2,自引:0,他引:2
登革病毒 (Denguevirus)属黄病毒科黄病毒属 ,基因组结构为单股正链RNA ,全长约 1 0~ 1 1kb。登革病毒在复制过程中不形成DNA中间体 ,因此要在基因水平研究其特征存在一定困难 ,因为突变、重组、克隆等分子生物学技术都是在DNA水平上的操作。体外转录制备感染性RNA(感染性转录体 )技术提供了解决这一难题的新途径[1]。该技术是把病毒RNA逆转录成cDNA ,并置于RNA聚合酶启动子的下游 ,在RNA聚合酶的作用下体外转录出全长正链RNA ,经转染易感细胞后复制出子代病毒颗粒。由于这种子代病毒来自cDN… 相似文献
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乙醛磺酸对小鼠胚胎细胞遗传和胚胎发育影响的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
本文报道乙醛磺酸(SAD)不仅会降低小鼠胚胎细胞的rRNA基因转录活性,而且还明显提高了胚胎细胞姐妹染色单体互换(SCE)频率,导致胚胎发育停滞和胎儿死亡,最终使幼鼠出生率明显下降。当SAD浓度为10-5mol/L时,小鼠胚胎细胞rRNA基因转录活性降低为正常值的15%,并引起SCE频率成倍增加,幼鼠出生率仅为正常值的50%;当SAD浓度增至10-3mol/L时,此时rRNA基因转录活性完全被抑制,而且SCE频率增加为正常值的4.8倍,幼鼠出生率从正常值100%降为4%。SAD对小鼠胚胎细胞这种细胞遗传学效应和对胚胎发育影响的程度与该药浓度成正相关。此外,我们还对rRNA基因转录活性和SCE的改变与哺乳类胚胎发育之间的关系进行了初步的讨论。 相似文献
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细胞粘附分子(CAM)可介导细胞间及细胞与间质之间的相互作用并传导信息,参与机体胚胎发育、免疫调节、炎症反应、组织修复及肿瘤转移等生理和病理过程。细胞间粘附分子1(ICAM1)是主要的CAM分子之一,可表达于活化的细胞,内皮细胞等。人膜是母体与胚胎滋养层直接接触的特殊组织、已发现蜕膜细胞在着床过程中参与了局部免疫耐受的形成,但对着床期ICAM1在蜕膜细胞表达的动态研究鲜见报道。本研究采用免疫荧光、多参数流式细胞术,分别从整体和局部角度、着床过程中外周血淋巴细胞(PBLC)及子宫内膜/蜕膜(EC/DC)细胞ICAM1的不同表达特点进行了动态观察和对比性分析。结果发现,ICAM1在着床期PBLC及EC/DC中的表达均存在明显的动态变化(Tab.1;Figs.1&2)。ICAM1在PBLC中的表达于妊娠第一天(D1)即开始降低,D2降至最低;与此不同,ICAM1在EC/DC中的表达于D2开始降低,D4降至最低,D5开始恢复,但尚未恢复到对照水平。结果表明,ICAM1在蜕膜局部的表达调节方式不同于外周血;ICAM1表达阳性的外周血,淋巴细胞和蜕膜细胞均代表着活化的功能性细胞,这些细胞表面ICAM 相似文献
18.
抗水稻条纹叶枯病毒核酶的设计,克隆及体外活性测定 总被引:10,自引:0,他引:10
为探索控制水稻条纹叶枯病毒(Ricestripevirus,RSV)设计合成了特异切割该病毒RNA保守区及编码病害特异性蛋白(DiseaseSpecificProtein,DSP)基因的核酶,核酶基因的长度均为40个碱基,用化学合成方法合成其正链及与其3'-末端互补的15个碱基引物,用TagDNA多聚酶合成其互补链。双链DNA直接插入克隆载体PGEM3zf(+)的Smal位点。序列测定表明,克隆得到的核酶序列与设计的核酶序列完全一致。经SP6RNA多聚酶体外转录得到核酶RNA。当核酶RNA与以同样方法转录得到的靶基因RNA混合反应,可得到预期结果相同的切割片段,表明两种核酶在体外均具有特异性切割活性。 相似文献
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大鼠肝tRNA^Ile基因的克隆与体外转录 总被引:1,自引:1,他引:0
采用PCR扩增出大鼠肝tRNA^Ile基因,构建了重组质粒pGWIW,并用T7RNA聚合酶/启动子系统对其进行了体外表达。经过对转录产物片段大小及运用Northermblot鉴定,证明了获得了不含修饰核苷酸的大鼠肝tRNA^Ile。生物学活性检测显示:合成基因体外转录产物氨基酰经活性是天然tRNA的40%,提示修饰核苷酸在哺乳动物Ile-tRNA合成酶的识别过程中起重要作用。 相似文献
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化学修饰对反义寡核苷酸稳定性及抗流感病毒活性的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
为了探讨 A S O D N 化学修饰形式与 A S O D N 稳定性,体外细胞毒性以及抗流感病毒活性之间的关系,合成了 7 种不同化学修饰形式的 A S O D N:硫代 A S O D N 及其 3′端分别磷酸化和胆固醇修饰;3′与 5′端硫代,中间为天然结构的混合骨架 A S O D N;天然结构 A S O D N 及其 3′端分别磷酸化和胆固醇修饰等.测定了 7 种修饰体在小鼠血清, M D C K 细胞裂解液,含 2% 胎牛血清的 D M E M培养液以及水中的稳定性,体外细胞毒性和在细胞水平抗流感病毒活性.结果表明,混合骨架 A S O D N,硫代 A S O D N 及其 3′端接磷酸和胆固醇的修饰形式在小鼠血清, M D C K 细胞裂解液与含2% 胎牛血清的 D M E M 培养液中稳定性相对较高,作用 24~48 h 仅混合骨架 A S O D N 与硫代 A S O D N 发生部分降解;天然结构 A S O D N 及其 3′端接磷酸和胆固醇修饰体在 24 h 内大部分降解.所有 A S O D N 修饰体在水中具有很高稳定性,48 h 内未见降解作用.7 种 A S O D N 修饰形式在 M D C K 细胞中未表现明显的细胞毒性.硫代 A S O D N 及其 3′端接磷酸和胆 相似文献