小白及多糖提取、脱蛋白工艺及抗氧化性研究

本研究探讨了小白及多糖提取、脱蛋白工艺及其抗氧化性。以粗多糖提取率为指标,在单因素实验的基础上进行正交试验,探讨微波额定功率百分比、微波时间、浸提温度、浸提时间对粗多糖提取率的影响,得到最佳提取工艺参数:微波功率为额定功率的40%,微波时间60 s,浸提温度70℃,浸提时间2.5 h,在此条件下小白及多糖的得率为38.33%。脱蛋白实验结果显示:酶-Sevag法脱蛋白效果最好,其蛋白质脱除率为80.01%,多糖损失率为24.58%。比较小白及多糖的抗氧化性,得出酶制小白及多糖和小白及粗多糖对DPPH自由基、O■有较好的清除能力,其IC_(50)值分别为24.855、28.948μg/mL,0.212、0.223 mg/mL。研究结果为小白及等药用植物多糖的提取及综合利用提供借鉴。     

响应面法优化黑根霉胞外多糖脱蛋白工艺研究

采用单因素实验结合Box-Behnken中心组合设计方法,以蛋白质脱除率和综合指数为指标,考察木瓜蛋白酶浓度、酶解温度和酶解时间对黑根霉胞外多糖酶-Sevag法脱蛋白工艺的影响。经过响应面实验优化,确定最优条件为木瓜蛋白酶浓度425 U/mL、酶解温度62℃、酶解时间90 min,经三次重复实验验证,蛋白质脱除率与综合指数均值分别为54.08%和2.07。     

酶法脱蛋白提取大枣多糖工艺的研究

讨论了从提取环磷酸腺苷后的枣汁中提取枣多糖的最佳工艺条件,包括枣汁浓缩4倍,加无水乙醇调枣汁中乙醇体积分数为60%,醇沉5 h;木瓜蛋白酶脱蛋白效果最佳,木瓜蛋白酶液与枣汁的体积比为0.4∶ 1,温度60℃、pH5.0,酶解90 min,蛋白脱除率可达91.8%;AB-8树脂脱色,脱色率为73.64%,多糖得率为94.4%.红外光谱显示,提取的多糖与常规方法提取的多糖成分相同.     

锁阳多糖的提取及纯化工艺

目的:优化锁阳多糖(Cynomorium songaricum polysaccharide,CSP)的提取纯化工艺.方法:回流提取法提取CSP,以CSP得率为评价指标,在单因素试验的基础上,结合正交试验对提取工艺进行优化;以蛋白脱除率和多糖保留率为考察指标,比较Sevage法、TCA法、醋酸铅法及木瓜蛋白酶法对CSP...     

贵州野生甜藤多糖的提取与脱蛋白方法研究

以贵州野生甜藤干粉为原料,通过单因素试验,再通过正交试验优化甜藤多糖提取工艺,并采用Sevag法、TCA法、Sevag-TCA法、HCl O4法进行脱蛋白方法研究。结果表明,甜藤多糖最优提取工艺为:以水为溶剂,料液比1∶50,超声功率70 W,水浴温度70℃,超声提取时间110 min,提取2次;HCl O4法脱蛋白效果最佳,经3次脱蛋白处理后蛋白脱出率为94.78%,多糖损失率为15.14%,该法用于脱除甜藤植物多糖中的蛋白质,工艺简单,成本低,具有一定应用价值。     

木瓜蛋白酶法提取荸荠皮多糖

本文以低温烘干的荸荠皮为原料,利用木瓜蛋白酶提取荸荠皮中的多糖。通过单因素实验和正交实验研究了p H、木瓜蛋白酶用量、液料比、酶解温度、酶解时间对多糖提取效果的影响。结果表明,最佳提取工艺条件为:p H 4,木瓜蛋白酶用量0.3%,液料比25∶1 m L/g,酶解温度50℃,酶解时间2 h。验证实验表明,多糖平均得率可达30.03%,远高于相同条件下水提法的得率21.23%,且重现性好。本实验为提高荸荠的综合价值提供了理论基础和实验方法。     

灰树花粗多糖的提取方法比较及其分离纯化

比较了几种常规粗多糖提取法与超临界CO2提取法对灰树花粗多糖提取的差异,同时对灰树花粗多糖进行脱蛋白、脱色研究。试验结果表明:热水浸提法所得灰树花粗多糖得率最高,为28.1%,而超临界CO2提取法所得粗多糖纯度最高,为39.3%。聚酰胺法脱蛋白及脱色效果较好,蛋白脱除率及脱色率分别为69.9%、61.9%,且多糖吸附率较低。将超临界CO2法提取的灰树花粗多糖采用聚酰胺法脱蛋白及脱色后,多糖得率为79.3%,纯度为50.1%。因此聚酰胺法是分离纯化灰树花粗多糖的一种简便、高效的方法。     

仙人掌多糖提取过程中脱蛋白方法的研究

用水提取的仙人掌多糖常含有蛋白质C,实验以多糖损失率和脱蛋白率为衡量指标,选用了Sevag法、三氯乙酸法和酶法对仙人掌多糖提取物进行脱蛋白处理。实验结果表明,酶法、三氯乙酸法和Sevag法的脱蛋白率分别为89.67%、56.20%和45.65%,多糖损失率分别为7.19%、9.49%和13.75%。因此,酶提取法是替代常规方法的一种有效方法。     

白蜡虫卵蛋白酶解工艺的研究

本项目对白蜡虫(Ericerus pela)卵蛋白的酶解工艺进行了研究。通过正交试验确定木瓜蛋白酶为适宜的水解用酶,最佳用量为1.5%;酶解条件为酶解温度50℃,酶解pH值9.0,酶解时间24 h,原料与水比例为1∶20;试验结果还表明原料在酶解前经过预处理,蛋白水解率可提高20.7%,预处理条件为原料在20倍的1 mol/L盐酸溶液中,80℃恒温加热30 min;在确定的最佳条件下对白蜡虫卵进行预处理和酶解,蛋白水解率可达58.4%。     

桔梗多糖脱蛋白方法的优化及对抑菌性的影响

以桔梗为实验材料,对水提后的多糖采用以下五种方法:Sevage法、盐酸法、三氯乙酸法、酶法以及酶与Sevage结合的方法进行脱蛋白处理,分别比较各种脱蛋白方法的蛋白质清除率以及多糖损失率。同时,对脱蛋白前后不同浓度的桔梗多糖的抑菌性进行比较。结果表明,五种脱蛋白方法的蛋白清除率依次为三氯乙酸法盐酸法Sevage法酶法酶+Sevage法,即98.07%92.25%60.91%51.10%39.63%;多糖的损失率依次为三氯乙酸法酶+Sevage法Sevage法酶酶法盐酸法,即8.83%10.08%11.23%11.74%22.24%;其中,三氯乙酸法蛋白质的清除率最高,多糖的损失率最小,为最适宜的脱蛋白方法。桔梗多糖脱蛋白前后对根霉、青霉、黄曲霉均有抑制效果。且随多糖浓度的增加抑菌作用逐渐加强。桔梗多糖脱蛋白前对根霉的抑制作用大于脱蛋白后的多糖。对青霉和黄曲霉的抑制作用效果则为脱蛋白后的多糖大于脱蛋白前的多糖。     

响应面优化塔拉种子多糖的超声波提取及其抗氧化性研究

为获得塔拉多糖超声波提取的最佳工艺,利用中心组合实验设计原理,采用四因素三水平的响应面分析法,获得多元二次线性回归方程,以多糖提取率为响应值做响应面。并考察塔拉多糖的体外抗氧化活性。结果表明：塔拉多糖的最佳提取工艺条件为,超声辅助提取超声功率363 W,超声温度56℃,超声时间23 min,料液比1：17（g·mL^-1）,塔拉粗多糖的最大提取率（25.56%）与理论推测值（25.71%）相差较小。经纯化后塔拉多糖提取率为17.82%。以VC为阳性对照,对不同纯度的塔拉多糖进行抗氧化性的研究,发现其纯度越高,对ABTS自由基的清除能力越强。     

Physical characteristics and antioxidant effect of polysaccharides extracted by boiling water and enzymolysis from Grifola frondosa

Grifola frondosa has been widely consumed in China and other Asian countries. Recent studies on G. frondosa have focused on the activities of polysaccharides extracted by water, and the activities of polysaccharides extracted by enzymolysis have not been studied. In this work, the relationship between the physical properties and antioxidant activity of polysaccharides extracted from G. frondosa by boiling water and enzymolysis was studied. Five polysaccharide extracts from the fruit body of G. frondosa were prepared by different extracting methods including boiling water, single enzyme enzymolysis with three different single enzymes (cellulose, pectinase, and pancreatin), and combined enzyme enzymolysis (cellulose:pectinase:pancreatin; 2:2:1). Characteristics such as the viscosity, Mw, polysaccharide content, protein content, infrared spectra, and antioxidant activities of the extracts were evaluated. The highest antioxidant activity was exhibited by the extracts prepared by combined enzyme extraction. The correlation analysis between antioxidant activity and polysaccharide content, protein content, Mw or viscosity indicated that the Mw had a more important role in antioxidant activity. Overall, the results indicate that the combined enzyme polysaccharide extracts can be developed as a new potential natural antioxidant.     

藿香枝叶多糖的提取工艺及其清除羟基自由基作用研究

采用苯酚-硫酸,并以超声法辅助提取野生藿香枝叶中的多糖,设计L9(34)正交试验考察料液比、pH和超声提取时间对藿香枝叶中多糖提取的影响,并对藿香多糖进行清除.OH试验。结果表明,藿香多糖的最佳提取工艺为料液比1∶10,超声提取30min,pH值为6,可使藿香多糖的提取率高达7.50%。藿香多糖对羟基自由基有显著地清除效果,表明其有抗氧化作用。     

壳聚糖絮凝法精制合欢皮多糖水提液的工艺

采用壳聚糖对合欢皮总多糖的絮凝纯化工艺进行研究。通过单因素和正交试验,得到优化的工艺条件:壳聚糖用量为生药量0.8 mL/g,絮凝温度35℃,絮凝时间4 h,药液浓缩比(质量体积比)为1∶10(g/mL),在此条件下,多糖保留率、脱蛋白率和多糖纯度分别为91.23%、22.26%和47.27%,优于传统的水提醇沉法。     

黑豆种皮花色苷酶法辅助提取工艺优化及其抗氧化活性分析

优化黑豆种皮花色苷复合酶法辅助提取工艺,并对其抗氧化活性进行评价。通过单因素试验和响应面法优化确定了黑豆种皮花色苷生物酶法辅助提取的最佳工艺为:复合酶(纤维素酶400 U/g,α-淀粉酶50 U/g),酶解温度50℃,液料比26∶1 mL/g,乙醇体积分数64%,酶解时间为59 min。在此条件下,提取花色苷的含量为2.019 mg/g。抗氧化试验研究表明,黑豆种皮花色苷的还原能力、对超氧阴离子自由基清除能力低于抗坏血酸,但对亚硝酸根离子和DPPH自由基、ABTS自由基的清除能力强于抗坏血酸。因此,生物酶法辅助提取是一种高效的黑豆种皮花色苷提取方法,且作为一种新型花色苷资源,黑豆种皮花色苷有着挖掘和应用价值。     

一株耐辐射新菌种的分离鉴定及其多糖的抗氧化研究

【目的】确定新疆辐射污染土样中分离筛选获得的一株产多糖的耐辐射菌株W36-1的分类学地位和抗氧化特性。【方法】对该菌株进行的60Co辐照,结合菌落形态和菌丝特征显微观察、Biolog鉴定以及16S rRNA基因序列分析。采用苯酚硫酸法测定其多糖含量,采用Fenton法测定多糖的粗提物对超氧阴离子清除率;用DPPH法测定抗氧化性;采用邻苯三酚自氧化法测定对超氧阴离子的清除率。【结果】W36-1可耐5 kGy辐照,为一株欧文氏菌属(Erwinia)新种;其粗多糖含量为53.17%,该多糖对超氧阴离子清除率为75.63%,对DPPH清除率为62.43%,羟基自由基去除率为54.89%。【结论】菌株W36-1产的多糖具有抗氧化性。     

响应面优化酶解—微波辅助提取桑叶多糖的工艺研究

采用响应面优化酶解——微波辅助法从桑叶中提取桑叶多糖的提取工艺。在单因素试验的基础上通过采用Box-Behnken方法,研究液固比、提取时间、提取温度对桑叶多糖提取率的影响。结果显示,拟合方程显著,最终确定桑叶多糖的最优提取条件为：酶含量2%、酶解pH6、酶解温度50℃、酶解时间20 min、液固比15 mL·g^-1、提取时间13 min、提取温度76℃,该条件下桑叶多糖的实际提取率为15.23%,与理论模拟值15.12%接近,建立的模型真实可靠。该方法用于提取桑叶中的多糖类成分,工艺简单、成本低,具有有较高的应用价值。     

鹿茸血制备ACE抑制肽的酶解条件优化

以天山马鹿的鹿茸血为原料,通过体外检测方法检测不同酶及酶解条件下的产物的ACE抑制肽活性及抗氧化活性。结果表明,以A lcalase碱性蛋白酶水解,底物浓度6%、加酶量40μl/g蛋白、pH 8.0、温度55℃的条件下,酶解3 h,水解度为28.0%,酶解产物的血管紧张素转化酶(angiotensin converting enzym e,ACE)抑制活性可达93.55%,与抗氧化活性呈正相关关系。     

Expression, purification, and characterization of Tara, a novel telomere repeat-binding factor 1 (TRF1)-binding protein

Tara was originally identified as a binding protein of guanine nucleotide exchange factor Trio. Although Tara may be involved in many fundamental cellular processes, ranging from actin remodeling, directed cell movement, to cell cycle regulation, aging, and cancer, the exact molecular mechanisms are poorly understood. We expressed recombinant Tara in Escherichia coli and purified the protein to approximately 99% purity using affinity chromatography and gel-filtration chromatography. The identity of the purified protein was confirmed by mass spectrometry. Non-denaturing polyacrylamide gel electrophoresis and gel-filtration chromatography showed that Tara forms multimer in vitro. The purified Tara was used to generate polyclonal antibody, which could specifically recognize both the recombinant and endogenous Tara. Using the pull-down assay, we showed that the purified Tara interacted with TRF1, suggesting that the purified protein is functional and biologically active. The availability of purified Tara and anti-Tara antibody provides critical reagents for elucidating Tara's cellular function and its molecular mechanism.     

Antioxidant and antitumor activities of the polysaccharide from seed cake of Camellia oleifera Abel

To explore biomedical potential of the polysaccharide from seed cake of Camellia oleifera Abel, we investigated antioxidant and antitumor capacities of the polymer. The results showed that the polysaccharide is capable of scavenging both superoxide anion and hydroxyl radicals in vitro. The highest scavenging rate of superoxide anion and hydroxyl radicals is 85% and 76%, respectively. Using the model animal, Caenorhabditis elegans, we further show that the polysaccharide can increase antioxidant enzyme activity, decrease lipid peroxidation level, and reduce paraquat-induced oxidative damage at a polysaccharide concentration more than 50mg/l. We also revealed that the polysaccharide has some ferric chelating ability and strong in vivo antitumor activity. The antitumor rate against Sarcoma180 solid tumor grown in BALB/C mice reached 85.6% at the highest dose of 40×20mg/kgdays.