龙须菜多糖提取工艺优化及其体外免疫活性研究

本文对龙须菜（Gracilaria lemaneiformis）50℃下水提的粗多糖进行冻融,将其分成胶体和非胶体部分,比较了他们的溶出率、多糖含量、蛋白含量和体外免疫活性,并在此基础上应用正交实验对非胶体粗多糖的提取工艺进行了优化。结果表明,胶体部分的溶出率和多糖含量均显著高于非胶体部分,但是非胶体部分的免疫活性极显著高于胶体部分（P〈0．01）;尽管提取次数对溶出率有着较大的影响,但提取次数、料水比和提取时间对非胶体粗多糖的多糖含量、蛋白含量、免疫活性均无显著影响,综合正交实验结果和实际生产中的能耗因素,确定50℃条件下的最佳提取工艺为：料水比1：40（质量比）,提取2次,每次浸提3h。     

向日葵花盘水溶性多糖提取工艺及抗氧化研究

目的:研究了向日葵花盘中水溶性粗多糖的提取工艺及抗氧化性能.方法:采用单因素试验和L_9(3~4)正交试验设计,对多糖提取工艺进行优化,并采用Fenton体系和邻苯三酚自氧化法评价了该提取物的体外抗氧化能力.结果:优化工艺条件为:提取温度95℃、料液比1:20、提取时间4h,向日葵水溶性粗多糖得率为9.73%,其中温度是影响粗多糖提取的重要因素.结论:结果表明向日葵水溶性粗多糖有较好的抗氧化活性.     

响应面优化塔拉种子多糖的超声波提取及其抗氧化性研究

为获得塔拉多糖超声波提取的最佳工艺,利用中心组合实验设计原理,采用四因素三水平的响应面分析法,获得多元二次线性回归方程,以多糖提取率为响应值做响应面。并考察塔拉多糖的体外抗氧化活性。结果表明：塔拉多糖的最佳提取工艺条件为,超声辅助提取超声功率363 W,超声温度56℃,超声时间23 min,料液比1：17（g·mL^-1）,塔拉粗多糖的最大提取率（25.56%）与理论推测值（25.71%）相差较小。经纯化后塔拉多糖提取率为17.82%。以VC为阳性对照,对不同纯度的塔拉多糖进行抗氧化性的研究,发现其纯度越高,对ABTS自由基的清除能力越强。     

正交试验法优化桑叶多糖提取工艺

以脱除黄酮的桑叶为原料,采用热水浸提法提取桑叶多糖,研究了提取温度、提取时间、料液比、水溶液pH和提取次数对桑叶多糖得率的影响,通过正交实验优化了提取工艺条件。结果表明,在提取次数为2次条件下,桑叶多糖最佳提取工艺条件为提取温度100℃、提取时间4 h、提取液pH7、料液比(原料:提取液,g/mL)1:30,多糖得率为2.74%。该工艺稳定,桑叶多糖得率高,易于工业化生产。     

响应面法优化超声波法提取红枣多糖工艺

以新郑红枣为原料,利用响应面法优化超声波提取红枣多糖工艺。以红枣多糖的提取率为参考指标,研究料液比、提取次数、提取时间3个因素对红枣多糖提取率的影响。在单因素试验的基础上,利用Box-Behnken中心组合试验设计及响应面分析,对料液比、提取次数和提取时间进行优化组合,考察3个因素对红枣多糖提取率的影响。结果表明:提取红枣多糖的最佳工艺条件为液料比16∶1(m L/g)、提取次数2次、提取时间38 min,在此最佳条件下,红枣多糖的实际提取率为7.25%;证明此工艺可应用于红枣多糖的大规模提取。     

富硒黄山贡菊多糖的提取及其抗氧化活性研究

目的：探究富硒黄山贡菊多糖的超声辅助提取工艺优化及其抗氧化活性。方法：采用单因素和响应面试验研究最佳提取工艺,测定其体外抗氧化活性(DPPH·、·OH、ABTS⁺清除能力与Fe³⁺还原能力)。结果：料液比为25 mL/g时,最佳提取工艺条件：超声时间30 min,温度70℃,超声功率60 W;与水提法相比,超声辅助提取法和水提法的提取率分别为15.83%与13.46%,且硒含量分别为1.276 mg/kg和0.408 mg/kg;体外抗氧化活性实验表明超声辅助提取法优于水提法。结论：为富硒黄山贡菊多糖的纯化、结构鉴定及食药类产品开发应用提供研究基础。     

响应面法优化黄绿卷毛菇子实体多糖的提取工艺及其体外抗氧化活性研究

以采自四川石渠的黄绿卷毛菇Floccularia luteovirens为研究对象,采用水提醇沉的经典方法以及单因素试验,并利用Box-Benhnken Design（BBD）中心组合试验设计原理,以提取温度、时间以及料液比3个影响因素作为自变量,多糖提取率为考察指标,设计3因素3水平的响应面试验,优化黄绿卷毛菇子实体多糖（FLPs）的提取工艺,并通过?OH和O₂ ^-?自由基清除能力考察FLPs的抗氧化能力。最终确定最优水提工艺为提取温度89.31℃,提取时间5.08h,料液比1:48.54（g/mL）,且FLPs具有良好的?OH和O₂ ^-?自由基清除能力,具有较强的体外抗氧化活性。同时,验证试验证明了该设计方法和模型的准确性和可行性,且在该工艺条件下,多糖提取率有所提高,可为其多糖功能性食品和药品的开发提供理论依据。     

蕨菜多糖超声波辅助提取及其药理活性初步研究

为优化蕨菜多糖的提取工艺,同时检测蕨菜多糖的药理学活性。实验采用超声波辅助提取法,在单因素试验的基础上,考察液料比、浸提次数、超声浸提时间、超声功率四因素对蕨菜多糖提取得率的影响。运用Design Expect 10.0软件分析,通过响应面分析法(RSM)优化提取条件,对蕨菜多糖促进小鼠脾细胞增殖能力和抑制结肠癌细胞(HTC-8)增殖能力进行分析。结果表明:蕨菜多糖的优化提取工艺为:液料比:36.2∶1;浸提次数:4次;超声浸提时间:43.1 min;超声波功率:240 W,在此条件下,蕨菜多糖提取效果最好,提取得率达8.60%。各因素对多糖提取得率的影响程度:浸提次数>液料比>超声浸提时间>超声功率。通过药理活性研究表明,本实验获得的蕨菜多糖具有脾细胞免疫增值和抑制结肠癌细胞增殖活性。     

Chong木总皂甙的提取研究及毒理学实验

以秦岭五加科植物Chong木之茎皮为原料,用乙醇提取活性物质Chong木总皂甙,探讨了原料粒度大小,提取剂浓度,提取温度,提取时间与次数,料液比等对Chong木总皂甙提取率的影响,获得了最佳工艺条件;对Chong木总皂甙的急性毒性的毒理学试验表明,该提取物基本无毒,初步认为以其作为功能性食品基料资源开发,在一定程度上是安全的。     

响应面法优化龙牙百合多糖的高温高压水提取法工艺

以江西万载龙牙百合为原料,研究了料液比、提取温度、提取时间和提取次数4个因素对百合多糖得率的影响,在单因素试验基础上,采用Box-Behnken响应面法设计优化提取工艺。结果表明:最佳提取条件为料液比1∶25(g/mL)、温度121℃、时间92 min,提取次数2次,在此条件下百合多糖的得率为6. 284%。该方法简单、易操作,比较适于百合多糖的提取。     

响应面优化超声辅助法提取拐枣种子中二氢杨梅素的工艺

二氢杨梅素和杨梅素是拐枣种子中的重要成分。通过超声辅助法从拐枣种子中提取二氢杨梅素，采用单因素法考察乙醇体积分数、超声辐照功率、提取温度、液料比和超声辐照时间影响参数的基础上，并选用Box-Behnken响应面设计法分析建立了超声辐照功率、超声辐照时间和液料比的二次多项式模型，优化提取工艺。结果得到超声辅助法提取拐枣种子中二氢杨梅素的最佳工艺参数为：乙醇体积分数为60%、超声辐照功率140 W、超声辐照时间30 min、液料比20.5 mL·g^-1，提取温度40℃。在此最佳条件下，二氢杨梅素得率为2.14±0.09 mg·g^-1。本提取方法简单快速，效率高，有利于拐枣资源的综合加工利用。     

匀浆法提取沙枣果总黄酮工艺研究

沙枣常用于治疗脾胃虚弱、消化不良、肠炎腹泻、肺热咳嗽等疾病。为更好的开发利用沙枣植物资源,本研究通过传统水浴提取法和匀浆提取法的单因素对比实验,确定了匀浆法提取沙枣果总黄酮的提取方案。通过正交优化,获得匀浆法最优提取工艺为：乙醇浓度55%、料液比1∶30 g·mL^-1、匀浆时间5 min。在优化工艺条件下,沙枣果总黄酮的得率为6.57%。本研究为沙枣果的综合开发利用提供理论依据。     

超声辅助酸水解提取山里红叶中牡荆素的工艺优化

采用正交法优化山里红叶中牡荆素的超声辅助提取工艺。通过盐酸浓度、提取时间、固液比、超声功率、超声温度、乙醇浓度6种影响因素的单因素实验,研究它们与牡荆素提取得率之间的规律趋势;应用正交设计优化试验,研究盐酸浓度、提取时间、固液比和超声功率对山里红叶提取牡荆素得率影响大小,并确定最佳提取工艺。研究结果表明：当盐酸浓度为2 mol·L^-1、提取时间为40 min,固液比为1：20、超声功率为500 W、超声温度为50℃、乙醇浓度为50%时,效果最佳,得率为2.603 mg·g^-1;盐酸浓度具有较大显著性,且各因素影响顺序为：盐酸浓度 > 超声功率> > 提取时间 > 固液比。     

胶束介导联合超声—微波辅助法提取喜树叶中喜树碱及羟基喜树碱

为了寻找一种新的方法从喜树叶中提取喜树碱和羟基喜树碱,充分利用喜树资源,以喜树叶粉末作为提取原料,采用超声—微波辅助提取技术提取喜树叶中活性成分喜树碱和羟基喜树碱。采用响应面优化方法设计,分别考察微波时间、料液比、微波功率、表面活性剂的浓度4个因素对总提取率的影响,优化得到最佳提取工艺条件。研究结果表明：当微波时间为10.5 min、料液比为1∶60、微波功率为850 W、表面活性剂浓度为 8.5 g·L^-1时总提取率达到最佳。最佳工艺下总提取率为0.056 4%。     

基于天然低共熔溶剂的甜叶菊中甜菊糖绿色提取方法及优化

尝试利用天然低共熔溶剂(NADES)提取甜叶菊(Stevia rebaudiana)中的甜菊糖, 探索一种高效、绿色和环保的甜菊糖提取新方法。以甜叶菊干叶为原料, 对照传统提取溶剂水, 以甜菊糖中甜菊苷和莱鲍迪苷A的提取浓度作为指标, 筛选出最优的NADES提取配方, 然后通过Box-Behnken响应面法对NADES提取甜叶菊中甜菊糖的工艺条件进行筛选优化。结果表明, 提取效率最高的NADES配方为1,2-丙二醇:甘油:水=8:1:1 (v/v/v), 提取的甜菊苷浓度为2.59 mg∙mL^-1, 比水提取高16.40%, 提取的莱鲍迪苷A浓度为1.06 mg∙mL^-1, 比水提取高12.62%; 通过响应面法得到最优提取条件: 提取时间90分钟, 提取温度60°C, 超声功率为80 J∙s^-1, 预测甜菊苷提取浓度为3.49 mg∙mL^-1, 莱鲍迪苷A提取浓度为1.43 mg∙mL^-1, 与实验验证值(甜菊苷浓度为3.48 mg∙mL^-1, 莱鲍迪苷A浓度为1.42 mg∙mL^-1)接近。在最优条件下, 甜菊苷提取浓度比初始条件提高了34.36%, 莱鲍迪甘A提取浓度比初始条件提高了33.96%。NADES绿色环保, 且提取效率高于传统溶剂, 可用于甜叶菊中甜菊糖的绿色提取; 同时, 该提取方法可为后续推广至其它大宗经济植物类天然产物的绿色工业生产提供参考。     

獐ISSR-PCR反应体系的建立与优化及引物筛选

利用正交试验L₁₆(4⁵)对影响獐(Hydropotes inermis)ISSR-PCR反应的Taq DNA聚合酶浓度、dNTP浓度、引物浓度、Mg²⁺浓度及模板DNA浓度5个因素在4个水平上进行优化,同时对退火温度进行梯度PCR反应,以建立适合于獐ISSR-PCR反应的最佳体系.最终确定獐25μL ISSR-PCR反应体系为:Taq酶1.25 U·25μL^-1、Mg²⁺浓度2.5 mmol·L^-1、引物浓度0.3μmol·L^-1、DNA模板量350 ng·25μL^-1、dNTP浓度0.15 mmol·L^-1.在此基础上,利用优化的反应体系成功筛选出10条用于獐相关研究的ISSR引物并确定了各自的最佳退火温度,为今后利用ISSR技术进行獐的物种鉴定与分类、亲缘关系、系统发育和生理病理学研究奠定了技术基础,也为开展其它大型资源动物如黑麂的保护遗传学研究提供理论基础.     

pH对灵芝液态发酵代谢物及抗氧化活性的影响

已有研究报道灵芝栽培生长的最适pH在中性偏酸环境,在碱性范围的生长及代谢情况鲜见报道。本研究主要探究广泛pH对灵芝液态发酵代谢物及其抗氧化活性的影响。采用摇瓶液态培养后分析代谢物中灵芝三萜、胞内外多糖、菌丝体蛋白及抗氧化活性等指标,系统比较灵芝菌丝体在pH值2-11的生长和代谢情况。研究结果表明,灵芝菌丝体生长、合成灵芝三萜、胞内多糖、30E胞外多糖、菌丝体蛋白和菌丝体水解氨基酸的最适pH值分别为10、3、2、7、2和2。对应结果分别为17.13 g/L、33.86 mg/g、72.73 mg/g、7.86 g/L、71.42 mg/g和107.10 mg/g。比对照分别提高28.5%、77.3%、22.4%、96.5%、97.1%和70.8%。胞内多糖组分1和组分2最高分子量均在初始pH 4,分别为1.016×10⁸ g/mol和9.280×10⁴ g/mol,胞外多糖组分1最高分子量在初始pH 10,为4.946×10⁶ g/mol;对菌丝体的总抗氧化能力、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2- picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除能力、羟自由基清除能力分析结果表明最佳的初始pH分别为3、7、9。本研究为液态发酵方式下灵芝生长及其代谢物定向调控发酵的工艺优化提供参考依据,同时发现灵芝菌丝体中优质蛋白及抗氧化活性可在功能性食品和化妆品领域推广应用。     

响应面优化酶解—微波辅助提取桑叶多糖的工艺研究

采用响应面优化酶解——微波辅助法从桑叶中提取桑叶多糖的提取工艺。在单因素试验的基础上通过采用Box-Behnken方法,研究液固比、提取时间、提取温度对桑叶多糖提取率的影响。结果显示,拟合方程显著,最终确定桑叶多糖的最优提取条件为：酶含量2%、酶解pH6、酶解温度50℃、酶解时间20 min、液固比15 mL·g^-1、提取时间13 min、提取温度76℃,该条件下桑叶多糖的实际提取率为15.23%,与理论模拟值15.12%接近,建立的模型真实可靠。该方法用于提取桑叶中的多糖类成分,工艺简单、成本低,具有有较高的应用价值。     

淫羊藿生物碱的超声波-微波协同提取及其 对HeLa细胞的抑制作用

建立了药用植物心叶淫羊藿(Epimedium brevicornum)生物碱的超声波-微波协同提取工艺, 探讨了提取机理, 分析了生物碱的化学组成及其对人宫颈癌HeLa细胞增殖的抑制作用。采用正交试验法优化得到了淫羊藿生物碱的超声波-微波协同提取工艺: 浸泡时间为40分钟, 超声波-微波协同作用18分钟, 微波功率250 J∙s^-1, 液固比为30 mL∙g^-1, 乙醇溶液浓度为70%。超声波-微波协同提取法的提取率可达16.146 mg∙g^-1, 显著高于超声波提取法、微波提取法和加热提取法。扫描电子显微镜观察结果表明, 超声波-微波协同作用可使淫羊藿叶片样品表面出现大量裂隙。激光粒度分析显示, 超声波-微波协同提取后, 中、低粒度范围的样品量明显增多, 而高粒度范围的样品量明显减少。薄层色谱和高效液相色谱分析结果表明, 淫羊藿生物碱含有木兰花碱, 不含小檗碱或含量很低。淫羊藿生物碱对HeLa细胞的增殖具有明显的抑制作用, 并且呈现出剂量依赖性。研究结果为药用植物淫羊藿资源的开发利用提供理论依据。