广西眼镜蛇毒L-氨基酸氧化酶体内外抗血小板聚集实验研究

目的 研究广西眼镜蛇中提取的L-氨基酸氧化酶(L-amino acid oxidase)在人体外及家兔体内的抗血小板聚集作用.方法 用比浊法测定广西眼镜蛇毒L-氨基酸氧化酶对二磷酸腺苷(ADP)、胶原、凝血酶、花生四烯酸(AA)在人体外及家兔体内引起的血小板聚集率的影响.结果 实验中,能明显抑制二磷酸腺苷(ADP)、胶原、凝血酶、花生四烯酸(AA)引起的血小板聚集,并呈明显的正相关.结论 广西眼镜蛇毒L-氨基酸氧化酶在体内外均有较强的抗血小板聚集活性.     

蛇毒酶治疗心脑血管病的概述

蛇毒中含有十多种酶类及其它蛋白,其中蛇毒中的凝血酶样酶具有降解血浆纤维蛋白原,降低血浆粘度,降低血小板聚集等作用。经分离纯化的蛇毒酶制剂,在临床上广泛使用已20多年,积累了丰富的经验。现将蛇毒酶在心脑血管病中的应用情况概述如下。     

竹叶青蛇毒磷脂酶A2的分离纯化和性质研究

竹叶青蛇毒磷脂酶Ａ_２的分离纯化和性质研究冯波,吴卫甲,钱嵘,王克夷,周元聪（中国科学院上海生物化学研究所,２０００３１）关键词竹叶青蛇毒,磷脂酶Ａ_２;血小板聚集磷脂酶Ａ。在哺乳动物胰脏和蛇毒毒液中含量较丰富,其中蛇毒磷脂酶Ａ。除能水解甘油磷脂的第二...     

长白山白眉蝮蛇蛇毒酸性PLA_2质谱鉴定及其对血小板聚集的抑制作用

通过对纯化得到的长白山白眉蝮蛇蛇毒磷脂酶A2（ABUSV-PLA2）进行胶内胰蛋白酶酶解,产生的肽段经高效液相色谱-电喷雾串联质谱（HPLC-nESI-MS/MS）进行序列测定,蛋白鉴定采用SequestBioworks软件完成。ABUSV-PLA2与其它蛇毒来源PLA2的氨基酸序列比对表明：ABUSV-PLA2是一种新的蛇毒酸性磷脂酶A2。以ADP诱导的人血小板聚集实验结果表明：ABUSV-PLA2对ADP诱导的血小板聚集有轻微的解凝效应,但具有显著拮抗血小板的聚集作用,并呈现明显的剂量-效应关系,IC50为356nmol/L。     

五步蛇毒血小板聚集抑制因子cDNA的克隆及表达

采用一步法抽提五步蛇毒腺总ＲＮＡ,通过ＲＴ－ＰＣＲ的扩增出低分子量金属蛋白酶酶原的ｃＤＮＡ,克隆并测定了全序列。根据推导的氨基酸序列,发现其中一个ｃＤＮＡ除编码一个低分子量金属蛋白酶外,羧基端还包括一个血小板聚集抑制因子,这一结果证实了蛇毒金属蛋白酶和血小板聚集抑制因子起源于蛇毒金属蛋白酶酶原的前体。     

烙铁头Trimeresurus Mucrosquamatus蛇毒对血小板的活化作用

烙铁头Trimeresurus Mucrosquamatus蛇毒(TMV)可引起人和多种动物(狗、家兔、豚鼠)血小板的活化,发生聚集。血小板聚集强度与加入TMV的量有关。豚鼠血小板对TMV最为敏感,TMV引起豚鼠、家兔、狗和人的血小板聚集的最低剂量分别为0.6、12.5、2.0、2.0μg/ml。EDTA抑制而肝素不影响TMV对血小板的聚集作用。TMV的血小板聚集反应伴有5羟色胺的释放,引起家兔血小板5羟色胺最大释放(72％)的TMV剂量为100μg/ml。TMV还可以诱导血小板血栓恶烷A_2的形成。阿斯匹林能阻断TMV诱导的血栓恶烷A_2的生成,但并不抑制TMV引起的血小板聚集反应,提示TMV可能通过不依赖于血栓恶烷A_2的途径活化。初步结果表明TMV是研究血小板生理机制的有用工具。     

一种新型的α-纤维蛋白原酶对血小板聚集的影响

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测中国眼镜蛇毒蛋白酶水解纤维蛋白原的作用方式,发现该蛋白酶可迅速水解纤维蛋白原Aα链,对γ链作用较弱,对Bβ链无作用,是一种新型的α-纤维蛋白原酶.用比浊法测定血小板聚集率,证实中国眼镜蛇毒蛋白酶低剂量(0.025 mg/kg)、中剂量(0.05 mg/kg)以及高剂量(0.1 mg/kg)体内给药浓度依赖性地抑制ADP(10 .Μmol/L)和胶原(100 mg/L)诱导的兔血小板聚集.     

蛇毒去整合素的研究进展

去整合素是蛇毒中的一类蛋白质,能识别和作用于多种细胞膜上的整合素家族粘附分子,从而影响某些生理和病理过程,如血小板聚集、骨吸收、细胞迁移和血管生成等。     

血小板计数在五步蛇咬伤中的临床意义

目的探讨血小板计数在五步蛇咬伤临床治疗中的指导意义。方法对2006年3月至2009年12月我院收治的77例五步蛇咬伤病人在运用抗蛇毒血清治疗时对病人的血小板计数进行动态监测。蛄果患者入院时的血小板计数越低,抗蛇毒血清用量越大,呈负相关。结论在五步蛇咬伤治疗中,血小板计数可指导抗蛇毒血清的应用剂量。在应用抗蛇毒血清后血小板计数仍较低者．常提示抗蛇毒血清的用量不足,需追加剂量。     

浙江产蝮蛇蛇毒对血小板聚集的影响

浙江产蝮蛇蛇毒的分离参照涂光俦(1979)的方法。浙江产蝮蛇蛇毒经DEAE-Sephadex A-50柱层析分离后得到14个蛋白峰,各峰的蛋白含量见表1。将收集的各峰经适当稀释后取0.2ml进行酶活力测定,除磷脂A酶活力按吴新陆、陈远聪(1981)方法测定外,其他酶活力测定如前文(云南省动物研究所,1976),然后做各峰对血小板聚集功能的影响,参照阮长耿等(1983)的方法,所用诱导剂的浓度为ADP(2μM),AA(100μg/ml)以及PAF(3×10~(-7)M),用这三种诱导剂诱导键康人对血小板产生不可逆性聚集,聚集强度分别为75％,75％和70％。粗毒在最终浓度为250μg/ml时能完全抑制上述三种诱导剂所致的血小板聚集。     

毒蛇咬伤病人的血小板聚集功能初探

目的为了探讨血液毒及混合毒类毒蛇咬伤病人的血小板功能情况,了解临床中毒发病机理。方法对近年来在本院急诊科确诊的五步蛇(Da.),蝮蛇(Ah.),眼镜蛇(Nn.),眼镜王蛇(Oh.),蝰蛇(Vr.),烙铁头(Tm.)和竹叶青(Ts.)等各种血液毒及混合毒类毒蛇咬伤17例病人25个血样,进行最大血小板聚集率(MAR)的检查和分析研究。结果除了Da未见MAR下降外(仅1例1个样品),其余各蛇种咬伤的样品均有下降。在获得未经治疗(抗蛇毒血清)的15个样品的检查结果中,进行统计分析,Vr、Tm以及Ah的MAR比正常人对照组(51.3±16.0)%明显下降。结论蛇毒中的血小板集聚抑制因子,可引起蛇伤患者体内血小板聚集功能下降,血小板处于无用状态,结果有些蛇伤病人DIC样综合征时出现严重出血而无明显微循环血栓形成致器官受损的临床症状。     

竹叶青蛇毒血小板聚集剂的分离纯化及生化特性

经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－７５凝胶过滤和ＦＰＬＣＭｏｎｏＱ阴离子交换柱层析及Ｓｕｐｅｒｏｓｅ－１２凝胶过滤,从竹叶青蛇的蛇毒中纯化到一个能诱导人血小板聚集的均一组分．经ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳测定其分子量为６８０００左右．等电点为４．３．测定了它的氨基酸组成,对它活化血小板的作用机理进行了初步研究,结果表明它是一种强的血小板激动剂．     

蝮蛇抗栓酶治疗周围血管病的护理体会

蝮蛇抗栓酶是从蝮蛇蛇毒中提取的酶制剂,具有降低血浆纤维蛋白原、降低血液粘稠度和降低血小板聚集功效,是临床上较好的抗血栓药物。我科近年来,以蝮蛇抗栓酶为主治疗３３例周围血管病,效果满意,现将护理体会报告如下：１临床资料本组３３例中男性２１例,女性１２例...     

蕲蛇酶注射液治疗急性脑梗死Ⅱ期临床研究总结

蕲蛇酶注射液治疗急性脑梗死Ⅱ期临床研究总结赵玉宾李美琳曹美英慕容慎行季晓林蕲蛇酶注射液含有从蕲蛇毒中分离获得的三个类凝血酶同功酶。临床前实验证明,本品具有抗血小板聚集、降低血浆纤维蛋白原含量,延长部分凝血活酶时间,对抗动物实验性脑血栓及动静脉血栓的效...     

竹叶青蛇毒血小板聚集剂的分离纯化及生化特性

经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－７５凝胶过滤和ＦＰＬＣ Ｍｏｎｏ Ｑ阴离子交换柱层析及Ｓｕｐｅｒｏｓｅ－１２凝胶过滤。从竹叶青蛇的蛇毒中纯化到一个能诱导人血小板聚集的均一组分。经ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳测定其分子量为６８０００左右。等电点为４．３。测定了它的氨基酸组成。对它活化血小板的作用机理进行了初步研究,结果表明它是一种强的血小板激动剂。     

烙铁头蛇毒素纤维蛋白原溶酶研究:Ⅱ.对纤维蛋白原及凝血酶的作用

烙铁头（T.mucrosquamatus）蛇毒纤维蛋白原溶酶TMVFg能水解三肽底物Bz-Phe-Val-Arg-PNA，但对凝血酶的良好底物Cbz-Gly-Pro-Arg-PNA却活性甚低。TMVFg显著延长血浆凝血酶时间、血浆复钙时间及纤维蛋白原溶液凝血酶时间。同时，TMVFg体外也能延长全血凝固时间，表明具有抗凝作用。纤维蛋白原-纤维蛋白转换实验表明：TMVFg水解纤维蛋白原产生的纤维蛋白原断片（FDP）除具有抗凝血酶，抑制纤维蛋白聚合活性外，还能促进纤维蛋白的聚合。进一步用FPLC分离TMVFg水解人纤维蛋白原混合液，得两个FDP断片功能峰，FDP组分Ⅰ和FDP组分Ⅱ。其中FDP组分Ⅰ能抑制纤维蛋白凝块形成；FDP组分Ⅱ能促进纤维蛋白凝块形成，抑制TMVA（烙铁头蛇毒血小板活化素，它可不通过ADP、花生四烯酸途径而诱导血小板聚集），但对ADP诱导的家兔血小板聚集无影响。TMVFg对凝血酶水解三肽底物Cbz-Gly-Pro-Arg-PNA及凝固纤维蛋白原的活性也有一定抑制作用。实验证明，TMVFg抗凝的主要作用机理是其水解纤维蛋白原产生的断片对纤维蛋白原凝固的抑制作用、FDP断片抗凝血酶作用及TMVFg本身对凝血酶活性的抑制所引起的，但在二者之间，前者是主要的。从研究结果发现：TMVFg水解纤维蛋白原所产生的断片有一类能加速凝血酶凝固纤维蛋白原的过程，这就发现了FDP断片的新功能。它证明了FDP断片作为血液凝固、纤溶正反馈调节因子的功能。这一类FDP断片还能抑制TMVA诱导的血小板聚集，因此，烙铁头蛇毒纤维蛋白原溶酶TMVFg将成为研究血液凝固调节系统及血小板聚集第三条途径的强有力试剂。     

蝮蛇抗栓酶在临床中的新用途

蝮蛇抗栓酶在临床中的新用途赵冠群桂林市医学情报所蝮蛇抗栓酶（Ｓｖａｔｅ,又名清栓酶、去纤酶）是由陆生东北蝮蛇、江浙蝮蛇的蛇毒中提取、分离纯化的蛋白水解酶和精氨酸酶制剂,郝文学等氏业已证实它具有抗凝、溶栓、降脂、去纤、降低血液粘度和血小板聚集、扩张血管...     

降纤酶与抗栓酶-3号联合应用治疗脑梗死40例疗效观察

降纤酶是国产蛇毒类新型溶栓抗凝药物 ,它是采用高科技分离提纯的单一组份酶制剂 ,能降解血浆纤维蛋白原 (FG) ,减少血小板粘附聚集 ,促进血管内皮细胞释放 t- PA (组织纤溶酶原激活物 ) ,降低 PAL - I (组织纤溶酶原激活物 - l) ,使形成的纤维蛋白很快被清除 ,并能抑制红细胞聚集 ,缩短红细胞通过时间 ,从而起到降低全血粘度 ,改善微循环 ,加速血栓溶解 ,使阻塞的血管再通和防止血管再栓塞的作用。而抗栓酶 - 3号已被广泛应用于临床多年 ,具有抗凝、溶栓、去纤、抗血小板粘附、聚集等作用。我院于 1 998～ 1 999年联合应用降纤酶与抗栓…     

蝮蛇毒抗凝血活酶组份及几种蛇毒粗毒对人红细胞和血小板的作用

蝮蛇毒抗凝血活酶组分及蝗蛇毒、圆斑蝰蛇毒和眼镜蛇毒粗毒,不仅能够水解血浆中的磷脂,而且还能水解完整人红细胞膜和完整人血小板膜上的磷脂。但是五步蛇毒和金环蛇毒粗毒却不能水解完整人血小板膜上的磷脂。 扫描电镜观察表明,由于抗凝血活酶组份和几种蛇毒粗毒的作用,人红细胞和人血小板的形态发生了巨大的变化;人红细胞由正常的双圆盘形变成带刺的小球,人血小板的外形变成蜂窝状。     

一种新的α—纤维蛋白原酶对血小板聚集的影响

ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）检测中国眼镜蛇毒蛋白酶水解纤维蛋白原的作用方式,发现该蛋白酶可迅速水解纤维蛋白原Ａα链,对γ链作用较弱,对Ｂβ链无作用,是一种新型的α－纤维蛋白原本科,用比浊法测定血小板聚集率,证实中国眼镜蛇毒蛋白酶低剂量（）０．０２５）ｍｇ／ｋｇ）、中剂量（０．０５ｍｇ／ｋｇ）以及高剂量（０．１ｍｇ／ｋｇ）体内给药浓度依赖性地抑制ＡＤＰ（１０μｍｏｌ／Ｌ）和胶原（１