人工三倍体水晶彩鲫的性腺发育

雄性三倍体鱼的精巢发育比较一致,都完成了由精原细胞、初级精母细胞经减数分裂形成精子细胞的过程,有些还见有变态中的异形精子,个别的还观察到少量类似于正常的成熟精子。雌性三倍体鱼的卵巢发育相当复杂,分化多样,已辨别出卵巢发育分别停留在卵原细胞分化、初级卵母细胞形成、少量卵母细胞生长发育和较多卵母细胞生长发育的四种异常类型,其共同特点是都含有一些败育和趋于败育的细胞,后两类卵巢中普遍含有类似于三倍体鱼精巢中的组织细胞结构。     

三倍体Gong鳟性转换及性腺发育的研究

用高温刺激法获得三倍体Gong鳟幼体。从开始投饵起,分别投喂含有不同浓度17β－雌二醇（0－60μg/μg）的饵料,持续60天,获得了93％－100％的高三倍体雌性率（对照组的雌性率为52％）。三倍体雄鱼可观察到其精子形成,但性腺成熟度较相对的二倍体差;三倍体雌鱼的生殖细胞多停留在偶线期到粗线期,未发现有性成熟个体。实验结果推测,三倍体Gong鳟雌鱼的不育现象看来不是由于雌雄基因组的组成差异而致,更可能是由于三组染色体造成对Gong鳟卵巢发育更大的阻力。雌二醇处理对三倍体Gong鳟幼鱼的生长和成活没有明显的影响。     

三倍体虹鳟性转换及性腺发育的研究

用高温刺激法获得三倍体虹鳟幼鱼。从开始投饵起,分别投喂含有不同浓度17β-雌二醇(0～60μg/μg)的饵料,持续60天,获得了93%～100%的高三倍体雌性率(对照组的雌性率为52%)。三倍体雄鱼可观察到其精子形成,但性腺成熟度较相对的二倍体差;三倍体雌鱼的生殖细胞多停留在偶线期到粗线期,未发现有性成熟个体。实验结果推测,三倍体虹鳟雌鱼的不育现象看来不是由于雌雄基因组的组成差异而致,更可能是由于三组染色体造成对虹鳟卵巢发育更大的阻力。雌二醇处理对三倍体虹鳟幼鱼的生长和成活没有明显的影响。     

鱼类染色体组操作的研究 Ⅰ.静水压休克诱导三倍体水晶彩鲫

采用静水压休克方法研究了促使第二极体保留诱发三倍体水晶彩鲫的最佳条件。在卵受精后4—5min采用600kg/cm~2或650kg/cm~2的静水压处理3min,不但能导致100％的三倍化,而且胚胎的存活率相当高,孵化率为对照组的90％左右。研究表明,静水压休克是进行鱼类染色体组操作的有效方法,休克的最佳条件易于掌握,处理程序易于标准化。文中讨论了静水压处理的条件与三倍体出现率和胚胎存活率的关系,以及最佳条件下和不适条件下胚胎死亡的原因。     

人工诱导兴国红鲤三倍体最佳诱导条件的研究

采用冷休克处理兴国红鲤受精卵诱导产生三倍体鱼 ,初步探讨了获得三倍体兴国红鲤的最佳诱导条件 ,即最恰当的诱导温度 ,最恰当的诱导起始时间 ,最恰当的冷休克处理时间。结果表明 ,在人工授精后 5～ 8min ,将受精卵置于 0～ 2℃的冰水中冷休克处理 1 0～ 1 5min ,再迅速回温至正常水温 ( 2 0～ 2 5℃ )的水中发育 ,可以获得 ( 70± 5) %的三倍体兴国红鲤胚胎 ,孵化率为 50 %～ 70 % ,成活率可达 4 0 %～50 %以上 ,此为采用冷休克技术人工诱导兴国红鲤三倍体的最佳条件。     

乌鳢三倍体诱导及其生长

采用热休克抑制第二极体排放的方法诱导乌鳢(Channa argus)三倍体,以探索人工诱导乌鳢三倍体的理想热休克条件。采用DNA含量测定法和红细胞核大小鉴定法对获得的鱼苗倍性进行鉴定,同时对普通二倍体乌鳢群体与三倍体群体的生长差异进行了比较研究。结果表明,(1)热休克法适宜诱导条件为,(28±0.5)℃培育水温授精后4 min,在水温42℃条件下持续处理3 min,三倍体诱导率最高,达到87.69%;(2)三倍体与二倍体DNA含量差异极显著(P0.01),其比值为1.50︰1.00;(3)三倍体和二倍体在红细胞核长径、红细胞核体积、红细胞核面积等6项指标上存在极显著差异(P0.01);与二倍体相比,三倍体红细胞体积和核体积分别是其1.69倍和1.60倍;(4)在4月龄与8月龄,三倍体的体长和体重比二倍体稍高,但两者差异不显著(P0.05)。本实验结果为进一步开展乌鳢倍性育种奠定了基础。     

卵巢发育阻滞的人工三倍体鱼减数分裂染色体配对的光镜观察

采用界面铺张制片和硝酸银一步染色的方法,对人工三倍体水晶彩鲫卵巢发育阻滞型个体的减数分裂染色体配对进行了光镜观察。在分化有初级卵母细胞的卵巢发育阻滞型的三倍体鱼中,减数分裂粗线期细胞主要的由二价体和单价体组成,也见有少量三价体和其它多价体,其染色体成员数大多在９０左右;在不同细胞间,染色体的大小变化较大;配对联会过程中形成的配对叉和产生的特异蛋白在一些细胞中明显可见。文中讨论了三倍体染色体配对紊乱     

鲤科鱼类6个正反交人工异源三倍体胚胎的染色体变化及其发育命运

采用静水压休克保留第二极体的方法,在鲤(♀)×鲢(?)、鲫(♀)×鲢(?)、白鲫(♀)×鲢(?)和鲢(♀)×鲤(?)、鲢(♀)×鲫(?)、鲢(♀)×白鲫(?)6个正反交组合中都诱导出了异源三倍体,但只有正交鲤(♀)×鲢(?)、鲫(♀)×鲢(?)和白鲫(♀)×鲢(?)3个处理组中整倍性的异源三倍体胚胎才有可能正常发育,孵化出苗;而反交鲢(♀)×鲤(?)、鲢(♀)×鲫(?)和鲢(♀)×白鲫(?)3个处理组中的异源三倍体胚胎在发育过程中不断发生染色体排除和丢失,形成非整倍体而死亡,只有少数雌核发育二倍体鲢才能孵化出苗。结果表明,鱼类人工异源三倍体胚胎的发育命运与杂交物种间的基因组大小有关。     

乙二醇降低超低温冷冻黄姑鱼精子的DNA损伤

为了解乙二醇(EG)为抗冻剂超低温冻存黄姑鱼(Nibea albiflora)精子的活力及DNA损伤情况,本研究以Hank′s盐溶液(HBSS)为稀释液,5%~30%乙二醇(EG)为抗冻剂,0.5 ml麦细管为冻存管,两步降温法超低温冷冻保存黄姑鱼精子,用显微观察法测定精子活力,用单细胞凝胶电泳技术(SCGE)检测精子的DNA损伤,用SPSS 11.5处理实验数据。黄姑鱼鲜精的激活率为85.67%±2.09%、运动时间为(318.67±6.11)s、寿命为(405.67±7.77)s。5%、10%、15%乙二醇(EG)组冻精的运动时间及寿命与鲜精相比差异不显著,其中10%乙二醇(EG)组冻精的激活率为84.67%±1.15%、运动时间为(319.00±12.12)s、寿命为(400.67±4.73)s;20%、25%、30%乙二醇(EG)组冻精的运动时间及寿命与鲜精相比差异显著。5%、10%、15%、20%乙二醇(EG)组冻精核DNA损伤状况与鲜精无显著差异,25%、30%乙二醇(EG)组冻精核DNA损伤状况与鲜精差异显著,且冻精核DNA的损伤程度与乙二醇(EG)浓度成正相关。分析认为,5%~15%乙二醇(EG)适宜作为黄姑鱼精子超低温冷冻保存用抗冻剂。     

环境因子及超低温冻存对黄姑鱼精子活力的影响

通过测定精子的激活率、运动时间及寿命研究了环境因子变化对黄姑鱼精子活力的影响及超低温冻存后黄姑鱼精子的活力。结果表明,黄姑鱼精子激活与运动的适宜盐度为25～35、适宜pH为7.5～8.5。在pH 8.0～8.5、盐度25条件下,精子激活率达(85.33±2.52)%,运动时间及寿命分别为(336±14.02)s及(405.33±12.22)s。精子激活与运动的适宜NaCl、KCl、MgCl₂及葡萄糖溶液浓度分别为300～500 mmol·L^-1、600 mmol·L^-1、800～1000 mmol·L^-1及900mmol·L^-1;精子在缺少HCO₃^-的人工海水中未能被激活;精子在无Ca²⁺或无Mg²⁺的人工海水中激活率均大于80%,但运动时间及寿命均有所缩短。以Cortland及HBSS溶液为稀释液、10%EG为抗冻剂冻存黄姑鱼精子,冻精激活率>80%,运动时间均超过200s。     

两种抗生素对黄姑鱼肝脏和肠道组织结构、抗氧化能力及肠道菌群的影响

为探究青霉素和氟苯尼考对黄姑鱼(Nibea albiflora)肝脏和肠道组织学结构、抗氧化能力及肠道菌群的影响,实验以黄姑鱼为研究对象,设置不同浓度的青霉素组(25、50和75 mg/kg)和氟苯尼考组(25、50和100 mg/kg),以基础饲料为对照,投喂期间,分别于5d后和10d后进行样品采集,检测肝脏和肠道组织学结构、抗氧化酶活性、相关免疫基因表达、肌肉中抗生素残余及肠道菌群组成变化。结果表明:(1)低浓度和中浓度的青霉素或氟苯尼考对黄姑鱼肠道和肝脏组织学结构没有明显影响,而高浓度组的肝脏和肠道组织均出现明显损伤;(2)无论处理5d或10d,与对照组相比,高浓度组肝脏中SOD、CAT和GSH-PX的活性均显著降低,而MDA含量显著升高;在肠道中,高浓度组的SOD活性均显著降低,而GSH-PX活性和MDA含量均显著升高;(3)肝脏和肌肉中均检测到2种抗生素残余,且高浓度的青霉素(54.48μg/kg)或氟苯尼考(1039.47μg/kg)处理10d后肌肉中抗生素残余均超出了最大残留限量;(4)无论处理5d或10d,高浓度的青霉素或氟苯尼考均显著抑制肠道中Arp2/3、ZO-1和Claudin4基因的表达水平,而促炎基因IL-6和TNF-α的表达水平显著上升,抑炎基因IL-10、TGF-β的表达水平显著下降;(5)青霉素或氟苯尼考对黄姑鱼肠道菌群的α-多样性无显著影响;变形菌门(Proteobacteria)的相对丰度均显著增加,而厚壁菌门(Firmicutes)的相对丰度均显著降低。综上,饲料中添加低浓度的青霉素或氟苯尼考对黄姑鱼肝脏和肠道形态结构、抗氧化酶活性及肠道相关结构基因、免疫基因和肠道菌群结构均无显著影响;而高浓度会引起肝脏和肠道组织损伤、氧化应激反应、黏膜免疫应答及影响肠道菌群多样性和组成。     

黄姑鱼的恶性黑色素瘤

从我国南海海域捕获的黄姑鱼(Nibea albiflora)中发现15例恶性黑色素瘤(malignant melanoma)。本文较详细地介绍了有关这种肿瘤的病理解剖学、病理组织学和超微结构的观察结果。在国内外首次报道黄姑鱼的这种恶性肿瘤对肿瘤学有一定的研究价值。     

不同香水月季染色体倍性鉴定及其繁育系统分析

【目的】香水月季(Rosa odorata)是一类重要的蔷薇属植物种质资源,具有较高的观赏价值及利用价值,为促进香水月季种质资源的开发和利用,对不同香水月季染色体倍性、花部综合特征和繁育系统特性进行研究。【方法】以9种香水月季为材料,采用流式细胞仪、杂交指数检测等对不同香水月季的染色体倍性、花粉活力、柱头可授性、花部特征等进行观察及测定,并对繁育系统进行分析。【结果】(1)9种香水月季均为二倍体,其花为两性花,花色明亮,多重瓣或半重瓣,其中5种香水月季雌雄蕊异熟;(2)9种香水月季的花粉活力普遍偏低,最高仅为35.47%,杂交指数(OCI)均≥4,其花粉量-胚珠比(P/O)值为6 709～75 521。【结论】9种香水月季的繁育系统类型均以异交为主,且繁育系统受花粉粒数、花瓣数等多个因素影响。     

葡萄花药三倍体植株的倍性鉴定

用卡宝品红染色法检查格列那什二倍体葡萄(Vitis vinifera var. Cre nache)花药再生植株的染色体, 并用UNICHRO软件对其数目及长度进行了测量。结果表明,这些花药植株根尖中染色体组型为2n=3x=57的细胞平均占观察细胞总数的86.5%,来自不同花药的再生殖株均为三倍体。讨论了这些植株的可能来源。Abstrart:The chromosome number in the root tip of triploid plants regenerated from anther culture of diploid Vitis vinifera var.Grenache were examined with Carbolfuchsin staining method and the length of chromosomes were measured with UNICHRO package.The results show that average pecentage of cells which have a karyotype for 2n=3x=57 in root tip of pollen plants were 86.5% in the total number of cells observed,the plants regenerated from different anthers are triploid.Their possible origin is discussed.