枣树离体叶片不定芽再生体系建立的研究

建立了木枣无菌试管苗快繁体系,以无菌苗叶片为外植体,对影响离体叶片不定芽直接再生的因素进行了研究.试验结果表明,TDZ比BA能更有效地诱导叶片不定芽的再生;褐化是抑制不定芽再生频率提高的关键因子,培养基中添加PVP、V c及改变生长素的种类和浓度均不能促进不定芽再生;添加A gNO3能够减轻褐化并可以大幅度提高再生频率,同时培养初期经过3周避光培养更有利于提高再生效率.因此,以附加2.0 m g/L TDZ和0.2 m g/L IBA的M S培养基,并添加5.0 m g/L A gNO3,可以高效诱导木枣离体叶片不定芽再生,再生频率最高达98.3%.不定芽在附加0.2 m g/L IBA和0.5 m g/L GA3的M S培养基上进行继代伸长培养,当不定芽长至3 cm时,转接至附加0.4 m g/L IBA的1/2 M S培养基上可以良好地诱导生根.     

TDZ对苹果叶片离体再生不定芽的效应

以苹果叶片再生不定芽效率为评价指标,ＴＤＺ的细胞分裂素活性比ＢＡ高一个数量级。在０．４－６．０ｍｇ．Ｌ＾－１范围内ＴＤＺ浓度对新乔纳金苹果叶片再生芽效率没有显著影响。ＴＤＺ和ＢＡ交替使用可提高苹果吉片再生不定芽效率。     

美味猕猴桃品种‘金魁爷离体叶片不定芽诱导及生根培养基筛选

猕猴桃( Actinidia spp.)果实酸甜适中,含丰富的VC和多种矿质元素及氨基酸,其种子中还含有大量的亚麻酸、不饱和脂肪酸等成分[1],被誉为“水果之王”。湖北省农业科学院果茶蚕桑研究所从野生猕猴桃品种‘竹溪2号'(‘Zhuxi No.2')中实生驯化选育出美味猕猴桃也Actinidia chinensis var. deliciosa ( A. Chev.) A. Chev.页品种‘金魁'(‘Jinkui')[2],其果实耐贮性强[3]、植株较抗涝,适宜在易涝地区种植。     

不同培养条件对南烛离体叶片不定芽再生的影响

以南烛( Vaccinium bracteatum Thunb.)组培苗离体叶片为实验材料,研究了不同培养条件对其不定芽再生状况的影响并筛选出最适培养条件。结果表明：基本培养基类型、生长调节剂种类及质量浓度、琼脂和蔗糖质量浓度、外植体类型、外植体接种方式和暗培养时间均对南烛离体叶片不定芽的出芽时间和再生率、外植体干枯率以及不定芽的生长状况有明显影响。南烛离体叶片不定芽再生的最佳培养条件为：以中脉横切2次的叶片为外植体,以近轴面面向培养基的方式接种;以1/2MS-1/2WPM为基本培养基,添加7.5 g·L-1琼脂、25.0 g·L-1蔗糖、0.5 mg·L-1 TDZ、5.0 mg·L-12ip或4.0 mg·L-1 ZT,暗培养21 d后转至光照度2000 lx、光照时间16 h·d-1的条件下培养。     

香石竹叶片离体再生体系的建立

以香石竹(Dianthus caryophyllus Linn.)无菌苗叶片为外植体,从不同细胞分裂素及其他激素配合使用等方面进行筛选,建立香石竹叶片离体再生体系.结果表明,不同的细胞分裂素影响叶片不定芽分化频率,其中较低浓度的6-BA(0.5 mg·L-1)和TDZ(0.001 mg·L-1)配合使用能有效诱导香石竹叶片不定芽分化;添加一定浓度的PP333(4 mg·L-1)可提高叶片不定芽分化频率和平均芽数.香石竹叶片不定芽分化的适宜培养基为:MS 0.002mg·L-1TDZ 0.5 mg·L-16-BA 0.2 mg·L-1IAA 4 mg·L-1PP333;壮苗培养基为:MS 0.2 mg·L-1 6-BA 0.2 mg·L-1IAA;生根培养基为:1/2 MS.不定芽诱导频率达到42.61%,平均芽数为4.53个.     

TDZ对苹果叶片离体再生不定芽的效应(简报)

以苹果叶片再生不定芽效率为评价指标,TDZ的细胞分裂素活性比BA高一个数量级。在0.4～6.0mg·L－1范围内,TDD浓度对新乔纳金苹果叶片再生芽效率没有显著影响。TDZ和BA交替使用,可提高苹果叶片再生不定芽效率。     

火炬松成熟合子胚离体培养过程中诱导不定芽的影响因素研究

火世松（Pinus taed L）界南方松中最重要的针叶树种之一,在环境保护,园林绿化和林业生产中有重要应用价值。有关火炬松未成熟胚的体细胞胚胎发生和器官发生的研究报道不多,其成熟合子胚的愈伤组织器官发生未见报道。本文以取自湖南省邵阳市林场的火炬松成熟种胚为外植体,在诱导其愈伤组织器官发生的基础上,系统地研究了BA浓度,基本培养基（TE）浓度和不同碳源等对愈伤组织上不定芽的发生和发育的影响,优化了火炬松离体再生的培养条件,为火炬松的无性繁殖技术应用于实验生产奠定了基础。研究结果表明：不同的浓度条件下,4mg/LBA培养基上的不定芽诱导频率和每个胚上的芽平均数最高,分别是76．3％和3．4。火炬松器官发生愈伤组织（Fig.1)上的不定芽形成于愈伤组织表面（Fig.2)。不定芽的发生常不同步（Fig.3)。不定芽在低浓度BA(1-2mg/L）条件下发育较好(Fig.4),在高浓度BA（8－16mg/L）条件下发育减慢（Fig.5),在1mg/LBA条件下伸长生长较快（Fig.6);不同浓度基本培养基的实验结果表明,当基本培养基浓度为1．25TE时,不定芽诱导频率（73．5％）;不同浓度基本培养基的实验结果表明。池基本培养基浓度为0．5或0．75TE时,不定芽基部易形成愈伤组织（Fig.7)。在1．5TE培养基上,不定芽瘦弱且发育缓慢（Fig.8);不同碳源的实验结果表明,以2％的葡萄为碳源时,不定芽的诱导频率和每个胚上的芽平均数均最高,分别是83．7％和5．8。由此可见,4mg/LBA,1.25TE基本培养基和2％葡萄糖可能是构成火炬松成熟合子胚离体高效无性快速繁殖体系的决定性和关键因素。     

‘孔府酥脆’枣试管苗离体叶片不定梢诱导和再生

Using in vitro leaves of Zizyphus jujuba ‘Kongfusucui’ plantlet as explants,effects of culture method,phytohormone proportion and culture time on induction rate of adventitious shoot from leaves and effects of sucrose concentrations in rooting media on rooting of adventitious shoot were studied.The results show that induction rate of adventitious shoot by two-step culture method(firstly cultured on medium Ⅰ for four weeks then cultured on medium Ⅱ for three weeks) is significantly higher than that by one-step culture method(cultured continuously on medium Ⅰ for seven weeks).Phytohormone proportion in medium Ⅰ has an obviously influence on induction rate of adventitious shoot,which gradually increases with increasing of TDZ concentration in medium Ⅰ.And adding 1.0 mg·L-1 TDZ in medium Ⅰ leads to induction rate with above 80%.With culture time prolonging(cultured for 1,2,3 or 4 weeks on medium Ⅰ,respectively),induction rate increases gradually.Sucrose concentration has a significant effect on rooting of adventitious shoot,sucrose with higher concentration(30 g·L-1) is beneficial to rooting.According to induction rate and growth status of adventitious shoot,it is determined that optimal culture method of adventitious shoot induction from Z.jujuba ’Kongfusucui’ leaves is two-step culture method,that is,leaves firstly cultured on WPM medium containing 1.0 mg·L-1 TDZ and 0.5 mg·L-1 IAA for four weeks,and then cultured on WPM medium containing 0.5 mg·L-1 IAA and 1.0 mg·L-1 GA3 till adventitious shoot produced.     

裸果木再生体系建立与不定芽发生研究

为探究裸果木再生体系建立的影响因素,确定其不定芽发生的起源,该研究以裸果木健壮植株的茎段为外植体,采用6 BA和IBA不同浓度组合,筛选愈伤增殖及不定芽再生的最佳浓度组合,确定生根诱导的关键影响因素,建立再生体系,并对其不定芽分化进程进行解剖结构分析,以确认其起源。结果表明：(1)裸果木茎段的最佳愈伤增殖培养基为MS+1 mg·L^-1 IBA+1 mg·L^-1 6 BA+30 g·L^-1蔗糖+7 g·L^-1琼脂,主体间效应分析表明IBA为关键影响因素;愈伤大小随IBA浓度增加呈现先升高后下降的趋势。(2)最佳不定芽诱导培养基为MS+0.5 mg·L^-1 6 BA+30 g·L^-1蔗糖+7 g·L^-1琼脂,诱导不定芽数量为4.9个/块,生芽率达92.3%。(3)生根诱导中,SH基本培养基和蔗糖浓度为关键因素,最佳生根培养基为SH+0~10 g·L^-1蔗糖+7 g·L^-1琼脂,生根率达91.3%。(4)解剖结构观察发现,不定芽起源于愈伤表层的分生细胞,为外起源。该研究通过器官发生途径建立了裸果木的再生体系,确定了不定芽为外起源,为裸果木这一珍稀濒危的林木种质资源保护及可持续利用奠定了研究基础,并为其未来的发展利用提供了有效途径。     

向日葵离体再生体系的建立

为了建立高效的向日葵离体再生体系,从基因差异、外植体取材、生长素和细胞分裂素浓度、附加物的添加等方面出发,对向日葵愈伤诱导、分化、生根等过程进行了系统优化。结果表明：杂交材料相对于自交材料更容易实现再生;最佳外植体是生长4 d的子叶;最佳愈伤诱导培养基是MS培养基 (MS) +2.0 mg/L 6-苄基腺嘌呤 (6-BA)+0.5 mg/L奈乙酸 (NAA)+1.0 mg/L激动素 (KT),诱导率最高可达100％;最佳分化培养基是MS+0.2 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+0.3 mg/L KT+0.3 mg/L硝酸银 (AgNO3)+0.2 g/L活性炭 (AC),芽分化率可达71％;最佳生根培养基是1/2 MS+0.6 mg/L吲哆丁酸 (IBA),生根率最高为77％。方差分析表明,材料基因型、外植体生长时间、激素、AgNO3、AC对向日葵再生呈现显著性影响。     

草莓高频离体再生体系的研究

以6个草莓品种为试材,研究了影响草莓不定芽再生的各种因素,建立离体叶片高效再生系统。结果表明,外植体基因型、激素种类及配比、叶龄等是影响草莓再生的主要因子,其中‘鬼露甘’叶片最佳芽诱导培养基为MS 2.0 mg/L 6-BA 0.1 mg/L IBA,‘嫜姬’叶片愈伤组织的诱导以MS 3 mg/L 6-BA 0.2 mg/L 2,4-D较好,而且1周左右的暗培养可以防止外植体的褐化。芽伸长的最适培养基为MS 0.5 mg/L 6-BA 0.5 mg/L IBA,生根的最适培养基为MS 0.2 mg/L IBA,试管苗移栽后成活率为87%。     

苹果矮化砧木‘JM7’的组织培养及其离体叶片不定梢再生

以苹果优良矮化砧木‘JM7’ （Malus prunifolia×M. pumila ‘Malling 9’）为试材, 研究了基本培养基对试管苗增殖生长的影响、蔗糖浓度对试管苗生根的影响及基本培养基、细胞分裂素种类和浓度对离体叶片不定梢再生的影响。结果表明： 基本培养基MS比QL显著提高增殖梢数, 但QL比MS更有利于获得健壮生长的绿苗。3%蔗糖浓度比2%的不定根发生速度快。叶片不定梢再生最适宜的基本培养基是QL。在QL培养基上, 6-BA和TDZ对离体叶片不定梢再生率的影响无显著差异, 但6-BA诱导产生的不定芽在不定梢诱导培养基上可直接伸长生长形成不定梢, 而TDZ诱导产生的不定芽需转移到不加TDZ而加低浓度6-BA的培养基上形成伸长生长的不定梢。     

茶树茎段不定芽高效发生体系的建立

茶树(Camellia sinensis)是重要的经济作物,杂合度高且变异度大,其高效离体再生体系鲜见报道。以舒茶早茎段为起始外植体,进行不定芽高效发生影响因子研究。结果表明,MS+2 mg·L^–1 6-BA为定芽诱导的最适配方,定芽诱导率为84.44%,吸收底盘膨大率为80%,利于后续不定芽诱导;MS+2 mg·L^–1 6-BA+0.2 mg·L^–1 NAA+0.1 mg·L^–1KT+1 mg·L^–1脯氨酸为不定芽增殖诱导的适宜配方,不定芽诱导率为88.89%,平均芽数为7.8。不定根诱导的适宜配方为1/2MS+3 mg·L^–1 IBA,生根率为85.56%。采用RAPD和ISSR技术对再生植株进行分子检测,在连续2代离体再生植株中未发现明显变异。     

杂交鹅掌楸的不定芽诱导及植株再生

1　植物名称　杂交鹅掌楸 (Ｌｉｒｉｏｄｅｎｄｒｏｎｈｙｂｒｉｄ———Ｌ .ｃｈｉｎｅｎｓｅ×Ｌ .ｔｕｌｉｐｉｆｅｒａ)。2　材料类别　春季的萌动芽。3　培养条件　不定芽的诱导培养基 :(1 )ＭＳ 6 ＢＡ1 .0ｍｇ·Ｌ-1(单位下同 ) ＫＴ 0 .5 ＩＢＡ 0 .2 Ｖｃ5 ;(2 )     

杂种白杨离体再生体系的建立

以杂种白杨'717杨'(Populus tremula×Populus alba)和'353杨'(Populus tremula×Populus tremuloides)的叶片为材料,研究不同基因型、激素组合对叶片分化和不定芽生根的影响.结果表明:'717杨'叶片最适分化培养基是MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA,'353杨'叶片最适分化培养基是MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+0.01 mg/L TDZ;最佳生根培养基为1/2 MS+0.2 mg/L IBA+0.2 mg/L NAA,生根率达100%;叶片培养的最佳位置是自茎尖展叶的1～3片叶;20 mg/L卡那霉素可以抑制'717杨'和'353杨'叶片的诱导分化,40 mg/L卡那霉素可以抑制'717杨'和'353杨'不定芽的生根.     

李砧木Marianna离体叶片再生体系优化研究

以李砧木‘Marianna’试管苗新梢顶端第1片叶为外植体,研究激素组合、基本培养基种类及外植体类型等对不定芽再生的影响。结果表明:1/2 MS基本培养基和WPM培养基再生率显著高于MS和SH培养基;叶片附带叶柄的外植体再生率和再生不定芽数显著高于叶柄和切除叶柄的叶片外植体;最佳再生培养基为1/2MS+2.0mg/L TDZ+0.1 mg/L IBA+0.25%琼脂+3.0%蔗糖,最高再生率和再生不定芽数分别为81.7%和7.46±1.38个;最佳生根培养基为1/2MS+0.5~1.0 mg/L IBA,能获得96.7%生根率、较高的生根数和根长。     

喜树不定芽的诱导及植株再生

1植物名称喜树(Camptotheca acuminate),别名旱莲木. 2材料类别一年生喜树带芽茎段. 3培养条件芽诱导培养基:(1)MS NAA 0.05mg·L-1(单位下同) 6-BA 1.0.芽增殖培养基:(2)MS NAA 0.1 6-BA 0.5;(3)MS NAA 0.1 6-BA 1.0;(4)MS NAA 0.1 6-BA 2.0;(5)MS NAA0.5 6-BA 0.5;(6)MS NAA 0.5 6-BA 1.0;(7)MS NAA 0.5 6-BA 2.0.壮苗培养基:(8)MS NAA 0.05 6-BA 0.1～0.5.生根培养基:(9)1/2MS NAA 0.1 IBA 1.0;(10)1/2MS NAA 0.5 IBA1.0;(11)1/2MS NAA 1.0 IBA 1.0.以上所有培养基均附加6.5 g·L-1琼脂、30 g·L-1蔗糖,pH值为5.9.培养温度为(25±2)℃,光照度为1000～2000lx,光照时间14 h·d-1.     

泰山酸枣离体叶片再生体系的建立

以泰山酸枣叶片为外植体,以WPM为基本培养基,研究了植物生长调节剂种类、浓度及培养方法等因素对离体叶片不定芽再生的影响,结果表明:不定芽启动的最佳培养基激素组合为1.0 mg·L-1 TDZ+0.5 mg·L-1 IAA;不定芽诱导伸长最佳培养基的激素组合为0.1 mg·L-1 IAA+0.5 mg·L-1 GA3.暗培养是不定芽再生的必需条件,在最适宜的不定芽再生培养基上,叶片连续光培养,不定芽不能再生;叶片先进行暗培养3周后转入光下培养,叶片不定芽再生效果最好,再生率最高可达100%.     

菠萝离体再生研究进展

菠萝(Ananas comosus)具有很高的食用、药用及观赏价值,但存在种子萌发率低、遗传转化困难、基因编辑体系缺乏等问题,其基础研究及优质种苗规模化繁育亟需高效、可靠的离体再生系统。本文对菠萝离体再生外植体选择、外植体消毒、基本培养基筛选、直接不定芽发生、间接不定芽发生、体细胞胚胎发生、不定根诱导及炼苗移栽等方面的研究进展进行综述,以期为菠萝细胞工程育种、遗传资源改良及种苗工厂化生产提供理论与技术参考。     

紫茉莉不定芽诱导和植株再生

紫茉莉(Mirabilis jalapa)观赏价值较高,是一种重要的污染修复植物.组织培养技术为植物品种改良和选育的重要途径,但紫茉莉离体快繁方面的研究尚未见有相关报道.该研究以紫茉莉叶片和茎段为外植体,通过观察和统计外植体愈伤组织和不定芽的诱导情况,分析不同植物生长物质对紫茉莉植株再生的影响.结果表明:紫茉莉带芽茎段比较适合丛生芽的诱导,当带芽茎段在MS+1.0 mg·L-16-BA+1.5 mg·L-1 KT+1.0 mg·L-1 NAA+0.05 mg·L-1 TDZ培养基中培养时,不定芽的增殖系数较高.无论是MS或1/2MS培养基,都可诱导不定根的产生,其中生根效果较好的培养基为1/2 MS+0.5 mg·L-1 NAA.该研究结果探索了紫茉莉组织培养的最适条件,根据愈伤组织诱导率和不定芽的增殖系数筛选出了适宜不定芽诱导的培养基类型,根据不定芽生根情况确定了最佳的生根诱导培养基,为建立紫茉莉高效稳定的再生和遗传转化体系奠定了基础.