Folin-Ciocalteu比色法测定铜藻中褐藻多酚含量的研究

以没食子酸为标准品,使用福林酚(Folin-Ciocalteu)试剂,通过紫外-可见分光光度法,对铜藻中褐藻多酚的含量进行了测定。结果表明,测定波长为760 nm,显色试剂Folin-Ciocalteu的用量为1.25 m L,0.1 g/m L Na2CO3溶液用量为4.0 m L,定容至10 m L,显色温度为30℃,反应时间为60 min,多酚含量在15~50μg/m L范围内与吸光度呈良好线性关系,回归方程为Y=0.0138X+0.0267,R2=0.9993。本测定方法的平均回收率为96.18%,相对标准偏差(RSD)为2.44%。该方法的稳定性、重现性、精密度以及加标回收率的相对标准偏差均符合要求,可用于铜藻中褐藻多酚含量的测定。按照本方法测定铜藻中褐藻多酚的平均含量为17.36 mg/g(RSD=1.25%)。     

UV和HPLC法测定黄芩黄酮总苷元提取物中总黄酮和3种主要成分的含量

本文建立了黄芩黄酮总苷元提取物中总黄酮和3种主要成分的含量测定方法。采用HPLC法测定黄芩素、汉黄芩素和千层纸素A的含量。使用Agilent 1200型高效液相色谱仪,Eclipse XDB-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇-0.2%磷酸水(50∶50),流速1 m L/min,柱温35℃,检测波长275 nm的方法。黄芩素、汉黄芩素和千层纸素A线性范围分别为3.501~70.016μg/m L(r=0.9999),0.832~16.640μg/m L(r=0.9998),0.418~8.352μg/m L(r=0.9999);平均加样回收率(n=6)分别为99.55%、98.86%、9.997%,RSD分别为1.74%、1.74%、1.70%。采用UV法测定总黄酮含量,黄芩素线性范围为1.71~8.54μg/m L(r=0.9991);平均加样回收率(n=6)为100.93%,RSD为2.63%。黄芩素、汉黄芩素、千层纸素A和总黄酮的含量分别为48.22%~60.36%、12.09%~14.46%、5.05%~8.81%、78.11%~90.12%;研究结果表明该方法准确、可靠,适用于黄芩黄酮总苷元提取物的含量测定。     

微分脉冲伏安法测定沙苑子中鼠李柠檬素类黄酮含量

在 0 .0 5 m ol/ L 硫酸铵溶液中 ,采用微分脉冲伏安法 ,测定沙苑子中鼠李柠檬素类黄酮含量。灵敏度达 10 - 6mol/ L,在 6 .10× 10 - 6～ 3.0 5× 10 - 5m ol/ L 浓度范围内峰电流与沙苑子苷浓度成线性关系 (r=0 .995 9) ,回收率达96 .9%～ 10 3.0 % (RSD=2 .5 4 % ,n=6 )。结果表明 ,可不经分离直接测定沙苑子提取液中鼠李柠檬素类黄酮的含量     

蜜楝叶、花及果实中总黄酮含量积累动态研究

本文采用紫外分光光度法分析检测了不同生长时期蜜楝叶、花及果实中总黄酮的含量及其积累动态。芦丁标准品在7.76~77.60μg/m L范围内呈良好的线性关系,Y=0.0087X+0.0268(R2=0.9964),平均加样回收率为101.72%,RSD为2.25%(n=6)。随着植物发育阶段的推移,蜜楝叶、花、果实中总黄酮的含量逐渐增加,其中花蕾和幼果中总黄酮含量最高。研究结果表明蜜楝花及果实中黄酮类化合物含量丰富,可作为提取制备黄酮类化合物的一种植物资源,具有很好的开发利用价值。     

高通量检测大样本桑黄发酵液总黄酮含量方法的建立

建立了大样本的桑黄发酵液样品中总黄酮的高通量测定方法。通过L9(34)正交实验设计优化,确定了基于亚硝酸钠-硝酸铝比色法的微孔板检测方法,优化后总黄酮含量测定的最佳反应条件:5%亚硝酸钠30μL,10%硝酸铝30μL,10%氢氧化钠50μL,室温反应10 min,检测波长为510 nm。检测结果表明,针对大样本检测,该法稳定性高,平均回收率为100.7%,相对标准偏差为0.607%,线性范围为0~50μg/m L,线性相关系数r2=0.9994。比较分析结果显示,和多种传统总黄酮测定方法相比,实验所建立的高通量测定方法检测大样本快速、准确、用药量小,且稳定性高。     

桂皮醛亚微乳注射剂中桂皮醛的含量测定研究

目的:建立桂皮醛亚微乳注射剂中桂皮醛含量的测定方法。方法:采用高效液相色谱法,按照固定相为色谱柱Diamonsil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈:0.5%冰乙酸水溶液(60:40),检测波长为288 nm,流速为1.0 m L·min~(-1),柱温为25℃,进样量为10μL的进样条件,测定桂皮醛亚微乳注射剂中桂皮醛的含量。结果:桂皮醛在5~100μg·mL~(-1)浓度范围内呈良好的线性关系,标准曲线方程为Y=1703 X-1996(r~2=0.999,n=6)。在低、中、高三个浓度下,一天内连续3次和连续3天测定样品,测定的RSD值均小于2.0%,精密度良好。加速试验中,在温度30℃,相对湿度60%的条件下放置6个月,样品测定结果与0天相比无变化。本实验中3批桂皮醛亚微乳注射剂中桂皮醛含量的均值为19.89μg·mL~(-1),平均回收率为100.98%,RSD为1.45%。结论:本方法操作简便、快速准确,稳定性高,系统重现性良好可有效控制桂皮醛亚微乳注射剂中有效成分含量。     

人工发酵古尼虫草中甘露醇的测定

利用比色法简便、准确和快速地测定发酵生产的古尼虫草菌丝中甘露醇含量。结果表明 ,甘露醇的最大特征吸收峰在 41 2nm处 ,质量浓度在 1 0～ 5 0mg/L范围内线性较好 ,其回归方程 ρ=-0 842 +97 3 2 9A,r=0 9992 ;平均回收率 1 0 0 2 4% ,RSD =0 5 4% (n=5 )。样品中甘露醇采用水提取法 ,提取时间 2h。甘露醇显色后 2 0min内测定对结果影响不大 ,在测定时要注意排除果糖对测定结果的影响。用此法测得发酵古尼虫草菌丝体中甘露醇的含量为 7.4% ,RSD =0 .2 4% (n =6)。     

超声辅助提取四齿四棱草中总黄酮及其抗氧化活性

本文采用正交实验优选超声辅助提取四齿四棱草中总黄酮的最佳工艺,测定其含量,并以Vc为对照,采用DPPH法、ABTS法和FRAP法对四齿四棱草总黄酮抗氧化活性进行综合评价。通过单因素实验和正交实验,研究乙醇浓度、超声时间、料液比、提取温度对四齿四棱草中总黄酮提取率的影响,优选出超声辅助提取四齿四棱草总黄酮的最佳工艺:乙醇浓度为70%,料液比为1∶30 g/m L,50℃超声提取两次,每次30 min,四齿四棱草总黄酮提取率为4.78%。四齿四棱草总黄酮对DPPH自由基(IC_(50)=42.91μg/m L,最大清除率为88.57%)、ABTS自由基(IC_(50)=44.61μg/m L,最大清除率为92.86%)的清除能力较好,对Fe~(3+)的还原能力(AEAC=5380μmol/g)亦较强,是一种天然的抗氧化剂。     

组培技术提高白背三七试管苗中总黄酮含量

为了建立一种提高白背三七试管苗总黄酮含量的组织培养技术,采用组织培养技术,改变激素配比、碳源、微量元素(Mn2+:Zn2+)比例和氮源,来提高白背三七试管苗中总黄酮的含量。正交实验结果表明,当碳源为蔗糖30 g/L、微量元素Mn2+:Zn2+比为44.6 mg/L:13.2 mg/L、氮源KNO3:NH4NO3为2 020 mg/L:1 600 mg/L、激素比NAA:6-BA为0.1 mg/L:1.5 mg/L时,白背三七试管苗中总黄酮含量相对于原盆栽植株提高了15%。通过组织培养技术建立了一种可提高白背三七总黄酮含量的繁殖体系,为白背三七优良种苗的培育提供技术支持,该研究结果也表明利用组织培养技术改变培养基中物质配比有益于植物生长和次生代谢产物积累。     

应用体积排阻色谱法测定口蹄疫灭活疫苗中的146S抗原含量

旨在应用体积排阻色谱法测定口蹄疫灭活疫苗中的146S抗原含量。使用TSKgel G4000SWXL(7.8 mm×30 cm)色谱柱,以pH 7.2的缓冲盐体系作为流动相,流速为0.6 mL/min,进样量为100μL,检测波长为259 nm。以口蹄疫病毒(O型)灭活146S抗原纯化样品建立标准曲线;使用灭活抗原液配制3份口蹄疫灭活疫苗,并进行精密度、重复性、特异性、耐受性验证;应用该方法快速测定16批疫苗的146S含量。结果表明,抗原浓度在0.56–67.42μg/mL范围内,其峰面积与浓度的线性关系良好(R~2=0.996,n=10),3份疫苗146S抗原测定回收率分别为93.6%(RSD=2.7%,n=3)、102.3%(RSD=2.6%,n=3)、95.5%(RSD=5.1%,n=3),方法重复性好、准确性强(RSD=0.5%,n=6),且操作简便、高效,对16批疫苗的测定结果较理想。应用该方法有望快速高效地检测口蹄疫灭活疫苗的146S抗原含量,为疫苗的质量控制提供有力支持。     

柔毛淫羊藿愈伤组织诱导及其总黄酮和淫羊藿苷含量测定

本研究旨在探讨柔毛淫羊藿愈伤组织的最佳诱导条件和愈伤组织中总黄酮、淫羊藿苷含量。采用正交试验设计方法研究不同外植体、培养基、培养温度和光照条件对柔毛淫羊藿愈伤组织诱导的影响,分光光度法测定愈伤组织中总黄酮含量,高效液相色谱法测定其中淫羊藿苷含量。结果显示,以幼叶为外植体,培养基为N6+2, 4-D 3 mg/L+6-BA 1 mg/L+NAA 0.5 mg/L,在黑暗或弱光(1 000 Lx)和(21±1)℃条件下愈伤组织诱导效果最好;愈伤组织中总黄酮和淫羊藿苷含量分别达5.24%和0.564%,与叶中含量无显著差异。初步建立了柔毛淫羊藿愈伤组织诱导的适宜培养条件,为高产淫羊藿总黄酮和淫羊藿苷的组培苗生产和细胞悬浮培养体系的建立提供了依据。     

不同地区红景天植物红景天苷含量比较研究

采用高效液相色谱法(HPLC)测定了6种不同地区红景天植物红景天苷含量.以甲醇为提取溶剂,室温超声提取45 min,HPLC测定条件:岛津C18柱(4.6×250 mm,5 μm);流动相为甲醇∶水=3∶7;柱温25℃;检测波长为275 nm.结果表明,红景天苷含量分别为:大花红景天0.36%,狭叶红景天(狮子七)0.32%,宽果红景天0.14%,白三七0.04%,在小丛红景天、洮河红景天中未检测到红景天苷.     

高效液相色谱测定小蔓长春花中长春胺的方法优化

采用不同比例的甲醇-1%二乙胺(pH 7.5)、甲醇-1%碳酸铵、乙腈-1%二乙胺(pH 7.5)、乙腈-1%碳酸铵为流动相,在比对保留时间的基础上加以光谱确认,并对小蔓长春花提取液中长春胺保留时间及其分离情况进行研究,以选择测定长春胺的最佳流动相体系.结果显示:在甲醇-碳酸铵、乙腈-碳酸铵、乙腈-二乙胺体系中,长春胺峰很难完全分离,其光谱扫描结果与标准品不一致;而在甲醇-二乙胺体积比为65∶35时,长春胺峰可实现基线分离,其光谱扫描结果与标准品一致,且长春胺在0.05~0.5 g/L范围内与峰面积线性关系良好(R2=0.997),平均加样回收率为100.71%(n=5),RSD=2.23%.研究表明,甲醇-1%二乙胺(体积比为65∶35,pH 7.5)为测定小蔓长春花中长春胺含量的最佳流动相体系,可用于小蔓长春花药材的质量监控.     

高效液相色谱法测定浓缩苹果汁中棒曲霉素

建立了高效液相色谱法 (HPLC)测定浓缩苹果汁中棒曲霉素含量的方法。用乙酸乙酯提取浓缩苹果汁中棒曲霉素 ,碳酸钠水溶液净化提取液 ,蒸干乙酸乙酯层 ,其残留物用醋酸缓冲液溶解。棒曲霉素的含量测定采用HypersilODS (5 μm ,2 5 0mm×4 6mmi d)色谱柱 ,流动相V(乙腈 ) :V(醋酸盐缓冲液 ) :V(水 ) =5 :3:2 ,流速 1ml min ,检测波长 2 76nm。结果表明 :棒曲霉素浓度与峰面积有很好的线性关系 ;用HPLC测定浓缩苹果汁中棒曲霉素的含量可操作性强、准确度高 ,棒曲霉素回收率高达 99 2 %,重现性好 (RSD为 0 4 %) ;灵敏度高最小检出量为 10 μg L。     

沙冬青种子总黄酮测定方法及纯化工艺研究

旨在建立沙冬青种子总黄酮测定方法及沙冬青种子总黄酮纯化工艺。选用常用4种黄酮显色方法,通过紫外波长扫描分别确定槲皮素为对照品及沙冬青种子总黄酮的最佳吸收波长,建立标准曲线,并对各测定方法进行方法学验证,利用新建立的条件方法对沙冬青种子总黄酮进行含量测定;实验选择AB-8、D101、S-8型大孔树脂通过静态吸附及解析试验,筛选出AB-8型大孔树脂进行动态试验,建立大孔树脂纯化工艺条件,进一步通过乙酸乙酯进行萃取,提高其总黄酮纯度。结果显示,以槲皮素为对照品,采用Al Cl3-CH4O显色法,在检测波长为335 nm条件下可对沙冬青种子总黄酮含量进行有效测定;AB-8型大孔树脂在上样液浓度为6 mg/m L、上样液p H5.5、上样液体积5 BV、上样液流速3.5 BV/h条件下吸附,以70%乙醇、洗脱液流速1.5 BV/h、洗脱液体积6 BV条件下洗脱,沙冬青种子总黄酮含量由纯化前5.69%提高到41.07%;用AB-8树脂纯化后的总黄酮配置成一定浓度溶液后用乙酸乙酯萃取,总黄酮含量达到76.15%。     

高效液相色谱法测定1,25- 二羟基维生素D2纳米乳注射液的含量

目的:建立高效液相色谱法测定1,25-二羟基维生素D_2纳米乳注射液含量。方法:采用C18-STⅡ色谱柱(4.6×250 mm,5μm);流动相为乙腈-水=85:15(V/V);流速:1.5 m L/min;检测波长:274 nm;温度:室温;进样量:200μL。结果:该方法专属性好,平均回收率99.96%(RSD为0.63%,n=9);溶液在冷藏(2~6℃)保存24 h稳定(RSD=0.98%,n=7);在0.06μg/m L~4.0μg/m L范围内线性关系良好,其回归方程为:Y=201098 X-8412.5(R2=0.9998,n=9)。结论:该方法简便、快捷、灵敏度高、专属性强,可用于该注射液的含量测定。     

不同黄秋葵花中总黄酮的提取和含量测定

通过对超声波法、水浴法、水浴超声波法、水浴微波法四种不同方式辅助提取黄秋葵花中总黄酮的方法进行比较,确定以水浴超声波法辅助提取测定黄秋葵花中总黄酮效果较好.采用紫外可见分光光度法,以芦丁为标准品,样品总黄酮在0.00 ～0.067 mg/mL范围内线性良好,其回归方程为y=12.046x-0.0015,R2 =0.9993.采用水浴超声波法辅助提取、硝酸铝显色法测定11个湘葵品系的样品花中总黄酮含量,结果表明：在11种黄秋葵花样品中,湘葵3号的花中总黄酮含量最高,为5.29％,湘葵8号的花中总黄酮含量最低,为1.70％.上述研究结果为黄秋葵的质量评价及今后的产业化研究提供新思路.     

银杏雌配子体发育及原生质体分离与培养的研究

经观察,银杏雌配子体在4月下旬-5月下旬为游离核时期,5月上旬采集的雌配子体在0.5%纤维素酶(Onzuka R—10)与0.5%果胶酶(Serva)混合酶液中酶解4—5h,原生质体密度为6×10~5—8×10~5/ml,活性87.3%。原生质体在去掉NH_4NO_3的MT培养基中,附加BA1.0mg/L,NAA3.0mg/L,谷氨酰胺1000mg/L,Vc5mg/L,采用液体浅层培养获得了肉眼可见的多细胞团。     

日本药局方(第11改正)收载的药用氨基酸质量标准和检测方法

<正> 1.异亮氨酸L—ィンロィシンL—Isoleucine H H H_5C_2—C—C—COOH CH_3NH_2 C_6H_(13)NO_2:131.17 本品干燥后测定含量,含L-异亮氨酸(C_6H_(13)NO_2)98.5%以上。性状本品为白色结晶或结晶性粉末,无臭,味微苦。本品稍难溶于水,难溶于冰醋酸,几乎不溶于乙醇或乙醚。本品水溶液(1→100)的pH约为6。鉴别(1)本品0.3g,加水10ml,加     

不同理化因子对雪莲毛状根生长和总黄酮生物合成的影响

在 1 2MS液体培养基上研究了不同理化因子对水母雪莲毛状根生长和总黄酮生物合成的影响。实验结果表明 :氮源总浓度 (包括NH+4和NO-3)为 30mmol L ;NH⁺₄ NO^-₃比例为 5∶2 5 ;2 %蔗糖和 3%葡萄糖组合 ;0.5mg LGA₃和 0.5mg LIBA ;pH5.8;18h d的光照 (光强为 35.0.0lx) ;2.4℃ ;摇床转速为 100rmin有利于毛状根生长及总黄酮的生物合成。在此培养条件下 ,经过21d的培养毛状根生长量达到 12.8g L(DW) ,总黄酮合成量为 192.2mg L ,即总黄酮含量占毛状根干重的 15 % ,约为干重野生水母雪莲植株总黄酮含量的 2.5倍。