藏药印度獐牙菜提取物红外光谱分析及保肝活性比较研究

比较藏药材印度獐牙菜不同溶剂提取物指标成分及提取率较高的两种提取物之间的肝保护作用。采用HPLC和红外光谱分析技术分析不同溶剂提取物的指标成分变化;采用CCl4致小鼠肝损伤模型进行水提物和75%乙醇提取物保肝活性药效学研究。印度獐牙菜不同溶剂提取物的红外光谱图中能很好的对应獐牙菜苦苷1280 cm-1处,芒果苷1496和1464 cm-1处的特征峰。不同溶剂提取物的红外光谱之间及其所含目标成分的特征峰强度之间存在明显的差异。提取率较高的水提物和75%乙醇提取物均具有明显的保肝活性,且在0.5~2.0 g/kg的给药剂量范围内,印度獐牙菜75%乙醇提取物保肝活性呈明显的量效关系。     

不同生长季节下藏药麻花秦艽活性成分含量研究

采用高效液相色谱法测定了野生与栽培藏药麻花秦艽（Gentiana straminea）根中龙胆苦苷、落干酸、獐牙菜苦苷和獐牙菜苷四种环烯醚萜苷类化学成分的含量及其在不同生长季节的变化趋势。结果表明,4种环烯醚萜苷类成分的含量随植物的生长季节而波动,其活性成分含量在野生种与栽培种之间发生了一定的差异。但是,栽培根中的龙胆苦甙已达到药典的标准,可供药用。     

栽培藏药材麻花艽中四种苦苷类成分含量的季节性变化

采用高效液相色谱法,测定了栽培藏药材麻花艽根中龙胆苦苷、落干酸、獐牙菜苦苷和獐牙菜苷四种苦苷类成分的含量及其在不同生长期的动态变化。结果表明,四种苦苷类成分随植物的发育节律而波动。龙胆苦苷的含量是评价药材质量的重要指标。龙胆苦苷的含量虽然在7月有个积累的高峰期,但7月为花期,从资源可持续利用的角度考虑,不宜定为采收期,到9月含量又有所增加,故而确定栽培藏药麻花艽根的适宜采收期应在9~10月之间。     

藏药提宗龙胆和线叶龙胆花中四种苦苷类成分的HPLC测定

应用HPLC分析方法同时测定藏药提宗龙胆和线叶龙胆两种植物花中落干酸、獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、獐牙菜苷4种苦苷类成分的含量.采用Econosphere C18色谱柱(250×4.6 mm,5 μm),以甲醇-0.5%乙酸为流动相进行梯度洗脱,流速为1.0 mL/min;检测波长为245 nm.结果表明,除提宗龙胆中未检出獐牙菜苦苷外,其它成分均在两种植物中存在,但含量存在一定的差异.     

人工栽培与野生种抱茎獐牙菜矿物元素和氨基酸对比分析

抱茎獐牙菜又称藏茵陈,是藏药中常用草药,广泛应用于肝胆疾病的治疗。近年来,为满足日益增加的需求量,发展了人工栽培抱茎獐牙菜,研究比较人工栽培与野生抱茎獐牙菜之间的各种成分含量,对人工栽培抱茎獐牙菜替代野生抱茎獐牙菜用药有重要意义。本文对人工栽培及野生抱茎獐牙菜的矿物元素及氨基酸进行测定比较发现,人工栽培抱茎獐牙菜的矿物元素绝大多数比野生抱茎獐牙菜含量高,人工栽培抱茎獐牙菜氨基酸大多比野生抱茎獐牙菜含量高。     

重要藏药川西獐牙菜种子萌发的研究

比较了温度、生长素(赤霉素GA3)和储藏条件对川西獐牙菜(SwertiamussotiiFranch)高海拔野生自然种群和低海拔栽培后种子发芽率的影响。未经任何处理的高海拔野生自然种群种子的发芽率明显高于低海拔栽培种群。无论是赤霉素处理还是低温处理对种子的发芽率都有显著提高。经过处理后,两种来源的种子最终发芽率没有明显的变化。结果表明:(i)野生的或栽培的川西獐牙菜种子都存在休眠现象;(ii)通过引种栽培不能打破川西獐牙菜种子的休眠,该机制可能是受遗传因素的控制;(iii)赤霉素处理和4℃低温冷藏对打破种子的休眠具有重要作用。     

滇龙胆不同部位裂环烯醚萜类物质含量比较分析

采用高效液相色谱法,对云南临沧云县滇龙胆不同部位龙胆苦苷、獐牙菜苦苷、当药苷含量进行分析.结果显示:(1)龙胆苦苷、獐牙菜苦苷、当药苷在滇龙胆根、茎、叶、花中均有分布;龙胆苦苷、獐牙菜苦苷在根部含量较高,分别为(35.88±5.89)mg/g和(1.35±0.33)mg/g;当药苷在花部含量最高,为(0.97±0.24)mg/g.(2)不同部位有效成分间具有显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)的相关性.(3)相同海拔条件下,不同栽培方式下滇龙胆根部龙胆苦苷含量差异不显著(P>0.05),但茎部、叶部獐牙菜苦苷含量差异显著(P<0.05).     

滇龙胆中萜类物质积累的动态变化

滇龙胆（Gentiana rigescens）为传统中药材。采用单因素方差分析比较不同生长季节滇龙胆的根部及茎叶部位龙胆苦苷、獐牙菜苦苷及当药苷含量的动态变化。结果表明,在不同生长季节,滇龙胆的根部与茎叶部位3种有效成分的含量具明显差异。龙胆苦苷主要积累于根部;獐牙菜苦苷、当药苷主要积累于茎叶部位。相关性分析表明,龙胆苦苷含量受气候因子的影响,月平均温度与茎叶部位龙胆苦苷含量呈极显著负相关（R=-0.57,P〈0.01）,月降水量与根部、茎叶部位龙胆苦苷含量呈显著（R=-0.48,P〈0.05）或极显著（R=-0.74,P〈0.01）负相关;根中当药苷含量与獐牙菜苦苷含量呈极显著正相关（R=0.62,P〈0.01）,茎叶部位獐牙菜苦苷含量与当药苷含量呈显著正相关（R=0.38,P〈0.05）。研究结果表明,滇龙胆中龙胆苦苷含量受降水量和温度的影响;龙胆苦苷、獐牙菜苦苷及当药苷的含量变动具相关性;9-11月较适宜滇龙胆药材的采收。     

4种秦艽属植物不同器官中4种环烯醚萜苷成分含量的比较分析

利用HPLC法测定了秦艽(Gentiana macrophylla Pall.)、粗茎秦艽(G.crassicaulis Duthie ex Burk.)、麻花秦艽(G.straminea Maxim.)和小秦艽(G.dahurica Fisch.)根、茎、叶和花中4种环烯醚萜苷成分(包括马钱苷酸、獐牙菜苦苷、龙胆苦苷和獐牙菜苷)的含量,并对来源于不同产地秦艽和小秦艽不同器官4种环烯醚萜苷成分的含量进行了比较。结果显示:4种秦艽属植物不同器官4种环烯醚萜苷成分含量差异明显,来源于3个产地(陕西太白、甘肃西河乡和马狭)的秦艽和2个产地(青海互助和陕西麟游)的小秦艽不同器官中4种环烯醚萜苷含量也均具有明显差异。4种秦艽属植物根、茎、叶和花中龙胆苦苷和马钱苷酸总量分别为质量分数5.996%～10.869%、0.310%～4.065%、0.235%～4.138%和0.545%～5.591%;根中獐牙菜苦苷和獐牙菜苷的质量分数分别为0.516%～0.953%和0.042%～0.210%,茎中分别为0.173%～0.383%和0.031%～1.700%,叶中分别为0.068%～0.684%和0.020%～3.208%,花中分别为0.460%～0.832%和0.138%～3.827%。粗茎秦艽各器官龙胆苦苷和马钱苷酸总量均最高,小秦艽各器官龙胆苦苷和马钱苷酸总量均最低,总体上,秦艽和粗茎秦艽中龙胆苦苷和马钱苷酸总量高于小秦艽和麻花秦艽;小秦艽茎、叶和花中獐牙菜苷含量均最高,而秦艽茎和叶及粗茎秦艽花中獐牙菜苷含量均最低。4种秦艽属植物根部龙胆苦苷和马钱苷酸含量均明显高于茎、叶和花,獐牙菜苦苷在根和花中的积累较多,獐牙菜苷在花中的含量均相对最高。产自青海互助的小秦艽茎、叶和花中獐牙菜苷含量均最高,质量分数分别为2.884%、5.215%和7.321%。研究结果表明:4种环烯醚萜苷成分含量不但与植物种类和器官有关,而且与产地和采样时间也有关。     

藏药抱茎獐牙菜HPLC指纹图谱研究

采用反相高效液相色谱-二极管阵列的检测方法,对不同产地的10批野生和栽培抱茎獐牙菜药材的水溶性成分进行了分析,建立了抱茎獐牙菜药材的指纹图谱.色谱柱为VP-ODSC18柱 5μm,150mm×4.6mm ,流动相为甲醇-0.02%的磷酸水溶液,检测波长254nm.用文中的最佳条件可较全面地反映抱茎獐牙菜的主要成分,为藏药抱茎獐牙菜的质量控制提供了科学依据.     

HPLC法同时测定藏药岷县龙胆中4种有效成分的含量

采用高效液相色谱法同时测定藏药岷县龙胆中獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、獐牙菜苷和异荭草苷含量。结果测定岷县龙胆中獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、獐牙菜苷和异荭草苷的含量分别为0.108%、1.46%、2.21%、1.61%。色谱条件为:色谱柱:XDB-C18(4.6 mm×250 mm,5μm);柱温:25℃;流速:1.0 mL/min;流动相:甲醇/0.01%乙酸水溶液梯度洗脱;检测波长260 nm。本方法快速、准确、重复性好,适用于岷县龙胆中4种有效成分的含量测定,可为藏药岷县龙胆药材的质量控制提供依据。     

2种藏茵陈类植物的引种地繁殖系统研究

通过观察、套袋、人工授粉对引种至低海拔栽培地的2种藏茵陈"类植物——川西獐牙菜(Swertia mus-sotii)和抱茎獐牙菜(S.franchetiana)繁育系统进行研究.结果表明:(1)引种的2种植物均为雌雄同株、自交亲和,但大部分花雌雄异熟(dichogamy)和雌雄异位(herkogamy),雌雄同熟的比例为24%,且雌雄同熟的雄蕊群远离雌蕊,需要靠传粉昆虫等传粉媒介传粉.(2)引种到低海拔的2种藏茵陈"类植物结实率和发芽率均较高,其中川西獐牙菜柱头张开第2天的授粉结实率达76.54%,种子发芽率达84.29%.(3)低海拔栽培的川西獐牙菜的传粉昆虫是家养蜜蜂,抱茎獐牙菜的开花时间较川西獐牙菜晚20 d,有效的传粉昆虫由家养蜜蜂变成一种很小的蜂类.研究表明,川西獐牙菜和抱茎獐牙菜由高海拔引种到低海拔地区后,结实率和种子发芽率均较高,可以用引种栽培的方式进行藏茵陈"药材的繁殖.     

“藏茵陈”的基原植物和药用亲缘学

详细比较藏药"藏茵陈"基原植物川西獐牙菜及其混淆品(代用品)抱茎獐牙菜、紫红獐牙菜、四数獐牙菜、红直獐牙菜、大籽獐牙菜、狭叶獐牙菜和椭圆叶花锚的外部形态特征及化学成分,澄清了这一类群在分类上的混乱,发现川西獐牙菜与紫红獐牙菜在习性,花部特征,种子形态和化学成分组成等方面相似性最高,印证了核基因ITS序列的结果。同时分析"藏茵陈"混淆的原因是多种来源和形态相似性造成的,讨论了"藏茵陈"鉴定的方法。通过对獐牙菜属系统关系的分析,提出紫红獐牙菜作为川西獐牙菜替代品的理论依据。     

西南獐牙菜化学成分的研究

对龙胆科(Gentianaceae)獐牙菜属植物西南獐牙菜(Swertia cincta)进行化学成分研究,从中分离鉴定了15个化合物,包括5个裂环烯醚萜(苷),2个三萜,1个口山酮,4个芳香酸(醇),以及3个其它类成分.以上化合物分别为:獐牙菜苦苷(swertiamarin,1),龙胆苦苷(gentiopicroside,2),红白金花内酯(erythrocentaurin,3),(-)龙胆内酯((-)-gentiolactone,4),angelone(5),齐墩果酸(olcanolic acid,6),3-表-蒲公英赛醇(3-epi-tarax-erol,7),当药醇苷(swertianolin,8),间羟基苯甲醇(m-hydroxybenzyl alcohol,9),邻苯二甲酸二甲酯(dimethyl phthalate,10),邻苯二甲酸二异丁酯(diisobutyl phthalate,11),3,4-二羟基苯甲酸(12)和正三十一烷醇( n-hentria-contanol,13),β-谷甾醇(β-sitosterol,14)和胡萝卜苷(daucosterol,15).其中化合物4-5,7,9～13和15为首次从西南獐牙菜中分离得到.     

新疆野生及栽培荒漠肉苁蓉提取物免疫活性研究

旨在比较新疆野生与栽培荒漠肉苁蓉提取物主要活性成分差异,并检测其诱导小鼠体内树突状细胞(Dendritic cells,DC)成熟能力,评价其免疫活性。采用超声法制备提取物,紫外法测定多糖及苯乙醇苷类化合物含量;脚掌免疫小鼠,流式细胞术检测其对小鼠体内CD11c+DCs表面CD86(Cell differentiation antigens 86,CD86)和MHCII(Major histocompatibility complex II,MHCII)表达情况。结果表明,野生及栽培荒漠肉苁蓉水提物中多糖含量分别为59.58%和76.82%,醇提物中苯乙醇苷类化合物含量分别为17.12%和8.47%;小鼠免疫实验结果表明,野生和栽培荒漠肉苁蓉提取物可显著增强小鼠体内CD11c+DCs表面CD86和MHCII上调表达(P0.01),且效果与阳性对照组LPS相当,相同剂量野生与栽培醇提物除对CD86的作用差异显著外(P0.05),其它提取物之间对CD86和MHCII的作用均无显著差异(P0.05)。新疆野生和栽培荒漠肉苁蓉主要成分之间存在一定差异,且在适宜浓度下均可显著促进小鼠体内DCs成熟,且差异不大。     

滇龙胆与青叶胆环烯醚萜类物质计量特征分析

龙胆科龙胆属滇龙胆(Gentiana rigescens)与獐牙菜属青叶胆(Swertia mileensis)为我国特有种。采用高效液相色谱法测定其中马钱苷酸、獐牙菜苦苷、龙胆苦苷和当药苷含量,结合多变量分析研究环烯醚萜类成分含量及其构成比例在龙胆科植物种内和种间的差异。研究结果显示,4种环烯醚萜类成分的计量特征呈现种间差异,依据环烯醚萜类成分含量及其构成比例,所有滇龙胆样品可分为4类。马钱苷酸含量与纬度呈极显著负相关(R=-0.348,P0.05),与海拔呈极显著正相关(R=0.307,P0.01);獐牙菜苦苷含量与经度呈极显著负相关(R=-0.592,P0.01),高海拔有利于植株中当药苷构成比例的增加(R=0.245,P0.05);地理因子对植株中龙胆苦苷含量变化影响不显著(P0.05)。     

15种獐牙菜属植物中主要药用成分的高效液相色谱测定

对青藏高原和云贵高原的15种獐牙菜属植物进行了3种苦味苷,即獐牙菜苦苷(swertiamarin)、龙胆苦苷(gentiopicroside)、苦龙苷(amarogentin)、一种黄酮苷-当药黄素(swertisin)、及5种口山酮苷-芒果苷(mangiferin)、当药醇苷(swertianolin)、7-O-[a-L-吡喃鼠李糖-(1→2)-β-D-吡喃木糖]-1,8-二羟基-3-甲氧基口山酮(7-O-[a-L-rhamnopyranosyl-(1-2)-β-D-xylopyranosyl]-1,8-dihydroxy-3-methoxyxanthone)、7-O-β-D-吡喃木糖-1,8-二羟基-3-甲氧基口山酮(7-O-β-D-xylopyranosyl-1,8-dihydroxy-3-methoxyxanthone)、3-O-β-D-吡喃葡萄糖-1,8-二羟基-5-甲氧基口山酮(3-O-β-D-glucopyranosyl-1,8-dihydroxy-5-methoxyxanth-one)等9种主要药效成分同时进行了高效液相色谱的含量测定(Kromasil C18柱,甲醇一水梯度洗脱,二级管阵列检测);并对其主要药效成分的分布进行了比较。     

滇龙胆与青叶胆环烯醚萜类物质计量特征分析?

龙胆科龙胆属滇龙胆( Gentiana rigescens)与獐牙菜属青叶胆( Swertia mileensis)为我国特有种。采用高效液相色谱法测定其中马钱苷酸、獐牙菜苦苷、龙胆苦苷和当药苷含量,结合多变量分析研究环烯醚萜类成分含量及其构成比例在龙胆科植物种内和种间的差异。研究结果显示,4种环烯醚萜类成分的计量特征呈现种间差异,依据环烯醚萜类成分含量及其构成比例,所有滇龙胆样品可分为4类。马钱苷酸含量与纬度呈极显著负相关( R＝－0?348, P<0?05),与海拔呈极显著正相关( R＝0?307, P<0?01);獐牙菜苦苷含量与经度呈极显著负相关( R＝－0?592, P<0?01),高海拔有利于植株中当药苷构成比例的增加( R＝0?245, P<0?05);地理因子对植株中龙胆苦苷含量变化影响不显著( P>0?05)。     

RP-HPLC法测定青海产四种秦艽中獐牙菜苦苷的含量

建立了秦艽中獐牙菜苦苷含量测定的RP-HPLC方法。色谱条件：采用ZorbaxEclipseXDB-C18柱（150mm×4.6mm,5μm）,流动相：甲醇-0.03%磷酸水溶液梯度洗脱（0～25min：15%～23%;25～30min：23%～30%）,流速：1mL/min,柱温：25℃,检测波长240nm,獐牙菜苦苷在0.20～1.8μg范围内成良好的线性关系,r=0.9999,回收率RSD=1.32%。对青海产4种秦艽中獐牙菜苦苷的含量进行了定量分析,测定结果：小秦艽中獐牙菜苦苷的含量最高为：0.62%,麻花秦艽与管花秦艽的含量没有显著差异,分别为：0.43%,0.45%,簧管秦艽的含量最低为：0.32%。     

藏药麻花秦艽中苦苷类成分的含量测定及品质评价

建立了反相高效液相色谱检测藏药麻花秦艽药材中主要苦苷类成分龙胆苦苷与落干酸含量的分析方法,对栽培和野生藏药植物麻花秦艽中苦苷类成分进行了定性、定量分析,对栽培麻花秦艽代替野生麻花秦艽入药进行了品质评价,结果表明,栽培植物藏药麻花秦艽不仅可代替野生药材入药,并具有深度开发的前景。