Cocktail探针药物法评价傣药"雅解沙把" 对大鼠肝药酶P450亚型 CYP1A2、CYP2C19、CYP2E1、CYP3A4 活性的影响

目的:采用cocktail探针药物法研究傣药"雅解沙把"对肝细胞色素P450亚型CYP1A2、CYP2C19、CYP2E1、CYP3A4的影响。方法:将SD大鼠随机分为空白对照组、苯巴比妥钠组(10.8 mg/kg)、"雅解沙把"低剂量组(0.27 g生药/kg)和"雅解沙把"高剂量组(2.43 g生药/kg),按上述剂量灌胃给药,空白对照组灌胃蒸馏水。连续灌胃7天后处死动物,取肝脏制备肝微粒体,以甲硝唑为内标,建立HPLC方法检测Cocktail探针药物奥美拉唑、氯唑沙宗、咖啡因、氨苯砜的代谢情况。结果:与空白对照组比较,"雅解沙把"低剂量组和高剂量组氯唑沙宗的代谢明显升高,氯唑沙宗的含量显著降低(P0.01),"雅解沙把"高剂量组奥美拉唑和氨苯砜的代谢明显升高,奥美拉唑和氨苯砜的含量明显降低(P0.05)。"雅解沙把"低剂量组和高剂量组虽咖啡因代谢较与空白对照组有上升的趋势,但差异无统计学意义(P0.05)。结论:傣药"雅解沙把"能促进肝药酶CYP3A4、CYP2C19、CYP2E1的活性,加速药物代谢,这可能是其解药物毒的作用机制之一。     

氯吡格雷对大鼠肝药物酶CYP3A4 和CYP1A2 表达的影响

目的：氯吡格雷主要由CYP3A4 催化使其激活,CYP1A2 也参与氯吡格雷活化。关于氯吡格雷对肝微粒体酶的影响国内外 文献报道不多,因此本实验通过检测肝细胞色素氧化酶CYP3A4 和CYP1A2 的表达,探讨氯吡格雷对大鼠肝药物酶的影 响。方法：生理盐水为对照组,氯吡格雷设高、中、低三个剂量组（27,13.5,6.75mg/kg/d）,雄性健康大鼠连续灌胃给药7天,脱臼处 死,取肝组织,通过western blot法检测大鼠肝脏CYP3A4 和CYP1A2 蛋白表达情况。结果：1）、氯吡格雷抑制大鼠CYP3A4 蛋白 表达,氯吡格雷高中低剂量组分别比生理盐水组大鼠CYP3A4 蛋白表达量降低（P<0.05）;氯吡格雷低中高剂量组间进行比较,大 鼠CYP3A4 蛋白表达量呈梯度减少（P<0.05）;2）、氯吡格雷抑制大鼠CYP1A2 蛋白表达,氯吡格雷高中低剂量组分别比生理盐水 组大鼠CYP1A2 蛋白表达量降低（P<0.05）,氯吡格雷低中高剂量组间进行比较,大鼠CYP1A2 蛋白表达量呈梯度减少（P<0.05）。 结论：氯吡格雷使肝细胞色素氧化酶CYP3A4 和CYP1A2 的表达量减少,因此氯吡格雷高、中、低3 个剂量组均不同程度的抑制 大鼠肝脏CYP3A4 和CYP1A2 的表达,提示当氯吡格雷与某些主要经CYP3A4 和CYP1A2 代谢的药物合用时,发生代谢性相关 作用的可能性大。     

氯吡格雷对大鼠肝药物酶CYP3A4和CYP1A2表达的影响

目的：氯吡格雷主要由CYP3A4催化使其激活,CYPlA2也参与氯吡格雷活化。关于氯吡格雷对肝微粒体酶的影响国内外文献报道不多,因此本实验通过检测肝细胞色素氧化酶CYP3A4和CYPlA2的表达,探讨氯吡格雷对大鼠肝药物酶的影响。方法：生理盐水为对照组,氯吡格雷设高、中、低三个剂量组（27,13．5,6．75mg／kg／d）,雄性健康大鼠连续灌胃给药7天,脱臼处死,取肝组织,通过westernblot法检测大鼠肝脏CYP3A4和CYPlA2蛋白表达情况。结果：1）、氯吡格雷抑制大鼠CYP3A4蛋白表达,氯吡格雷高中低剂量组分别比生理盐水组大鼠CYP3A4蛋白表达量降低（P〈0．05）;氯吡格雷低中高剂量组间进行比较,大鼠CYP3A4蛋白表达量呈梯度减少（P〈0．05）;2）、氯吡格雷抑制大鼠CYPlA2蛋白表达,氯吡格雷高中低剂量组分别比生理盐水组大鼠CYPlA2蛋白表达量降低（P〈0．05）,氯吡格雷低中高剂量组间进行比较,大鼠CYPlA2蛋白表达量呈梯度减少（P〈0．05）。结论：氯吡格雷使肝细胞色素氧化酶CYP3A4和CYPlA2的表达量减少,因此氯吡格雷高、中、低3个剂量组均不同程度的抑制大鼠肝脏CYP3A4和CYPlA2的表达,提示当氯吡格雷与某些主要经CYP3A4和CYPlA2代谢的药物合用时,发生代谢性相关作用的可能性大。     

紫杉醇对食蟹猴和人CYP1A2、CYP3A4及CYP2A6酶代谢的影响

目的探讨紫杉醇对食蟹猴和人肝微粒体CYP1A2、CYP2A6和CYP3A4酶活性的影响。方法采用食蟹猴和人肝脏微粒体,分别以非那西汀、睾丸酮和香豆素分别作为CYP1A2、CYP2A6、CYP3A4的底物,建立CYP1A2、CYP2A6和CYP3A4体外代谢体系。采用不同浓度的紫杉醇分别与上述3种底物共同孵育于肝微粒体代谢体系中。用HPLC法分别测定各底物的代谢产物扑热息痛、6β-羟基睾丸酮、7-羟基香豆素的产生量,计算IC50值,以评估紫杉醇对CYP1A2、CYP2A6和CYP3A4代谢的影响。结果紫杉醇对食蟹猴肝微粒体3种酶的IC50值分别为570±5.9μmol/L、140±2.9μmol/L和无影响;紫杉醇对人肝微粒体3种酶的IC50值分别为193±6.6μmol/L、253±3.6μmol/L和24±1.6μmol/L。结论紫杉醇对食蟹猴肝微粒体CYP1A2和CYP3A4活性具有一定的抑制作用,但对CYP2A6酶的活性几乎没有影响。紫杉醇对人肝微粒体CYP1A2和CYP3A4活性的抑制作用较弱,但对CYP2A6酶的活性抑制作用较强,提示临床上紫杉醇与作为上述酶底物的药物联合用药时应慎重,以避免因中西药物相互作用所导致的不良反应发生。     

丹那唑对子宫内膜异位症大鼠异位内膜的影响

目的: 探讨丹那唑对子宫内膜异位症(内异症)大鼠异位内膜的影响.方法: 皮下注射丹那唑2、4、6和8周,观察其对异位内膜生长的影响;治疗8周后检测异位内膜白细胞介素-6(IL-6)mRNA的表达.结果: 治疗2、4、6和8周后,异位内膜体积缩小(P<0.01),逐渐呈萎缩状态;治疗8周后,异位内膜IL-6 mRNA表达明显减少(P<0.01).结论: 丹那唑使异位内膜逐渐萎缩退化,异位内膜IL-6 mRNA表达明显降低.     

子宫内膜异位症对小鼠生育能力的影响

目的建立子宫内膜异位症小鼠模型,观察子宫内膜异位症对模型小鼠妊娠能力的影响。方法通过"腹腔+皮下"同系异体子宫内膜注射法建立子宫内膜异位症小鼠模型,与假手术组、空白组比较,观察其妊娠率及活胎率,观察子宫内膜异位症对模型小鼠妊娠能力的影响。结果建模2周后,小鼠皮下和腹腔均见有子宫内膜异位病灶生成,模型组、假手术组和空白组,共三组。通过生育功能检测,三组妊娠率差异有显著性意义(P0.05)。三组的活胎数差异有显著性意义(P0.05)。结论成功建立子宫内膜异位症小鼠模型,并证实子宫内膜异位症可影响模型小鼠生育功能。     

草鱼肝细胞中CYP2E1活性的诱导研究

CYP2E1为代谢大部分药物及环境巾毒物的关键酶。以草鱼肝细胞（Ctenopharyngodon idellus hepatocyte）为反应体系,选取氯唑沙宗（CZX）为底物,采用反相高效液相色谱（RP-HPLC）法测定其产物6-OH-氯唑沙宗（HCZX）的量,Lowry法测定肝细胞巾蛋白的浓度从而反映CYP2E1活性,并采用该酶特异性诱导剂乙醇对其进行诱导,观察其酶活变化及CZX在细胞中代谢情况。结果表明,CZX在草鱼肝细胞中的基础代谢较低,经过对CYP2E1诱导条件的优化及筛选,得到最佳诱导剂剂量为4μg／mL、诱导时间为24h、底物浓度为50μg／mL并且孵育时间为1h时,其酶活达到最高,约为0．47μg／min&#183;mg。对照组和诱导组的草鱼肝细胞中CZX的消除半衰期（t。）分别为202．10h和28．75h,差异极显著,表明乙醇诱导的CYP2E1能够加快底物的代谢。酶促反应动力学参数表明乙醇诱导的CYP2E1与底物的亲和力较高,酶促反应强度较大。该结果能够为CYP2E1代谢的药物及环境毒物的研究提供理论依据。     

子宫内膜异位症患者在位内膜及异位内膜中Claudin-1、Claudin-3的表达及意义

目的:探讨紧密连接蛋白claudin-1、claudin-3在子宫内膜异位症(内异症)发生发展中的作用及意义.方法:免疫组织化学方法检测正常子宫内膜、内异症患者的在位内膜和异位内膜组织中claudin-1、claudin-3蛋白质的表迭.结果:chudin-1、claudin-3蛋白主要定位于子宫内膜细胞的细胞膜/质,内异症患者的异位内膜中claudin-1、claudin-3蛋白的表达显著低于在位内膜及正常子宫内膜(P＜0.01).结论:claudin-1、claudin-3蛋白在内异症患者异住内膜中的表达明显下调,二者可能与内异症的发生发展相关.     

应用TaqMan定量方法研究巴马香猪CYP1A1、2A19、2E1 mRNA表达

目的巴马香猪是我国具有特色和优势的实验用小型猪资源品系,用于药物评价具有广阔前景。方法 以β-actin作校正,利用TaqMan定量技术对巴马香猪肝、肾、肾上腺、小肠、皮肤、脑、肺、睾丸、前列腺、子宫和卵巢等组织中CYP1A1、2A19和2E1 mRNA的表达水平进行检测,检测结果与报道的人体对应酶CYP1A2、2A6、2E1进行比较。结果巴马香猪CYP1A1、2A19、2E1 mRNA均以肝脏中最高,肝外组织明显较低,并且巴马香猪肝脏CYP1A1、2A19、2E1 mRNA均低于报道的人肝对应酶。结论巴马香猪CYP1A1、2A19、2E1与人体对应酶CYP1A2、2A6、2E1的mRNA组织表达存在一定差异,提示在其作为相应CYP亚型代谢的药物评价时应考虑这种种属差异对实验结果推广到人的影响。     

ERβ对子宫内膜异位症小鼠模型的影响

目的通过建立子宫内膜异位症小鼠模型探讨雌激素β受体对子宫内膜异位症的影响。方法利用雌激素β基因敲除小鼠建立自体子宫内膜异位模型;应用人不同的组织在SCID小鼠建立子宫内膜异位症模型后,注射雌激素β受体激动剂WAY-200070,观察其对异位病灶生长的影响。结果比较30只雌激素β受体基因敲除小鼠及22只同源未敲除小鼠异位病灶生长及组织细胞形态无明显差异（P〉0.05）;雌激素β受体激动剂WAY-200070对不同类型的SCID小鼠内异症病灶生长影响无明显差异（P〉0.1）。结论雌激素β受体对子宫内膜异位病灶的形成影响作用微弱。     

子宫内膜异位症中hMLH1、hMSH2基因启动子区的甲基化研究

目的：探讨错配修复基因1（hMLH1）、错配修复基因2（hMSH2）启动子区甲基化与子宫内膜异位症的关系。方法：采用甲基化特异性PCR方法检测23例子宫内膜异位症组织和20例正常子宫内膜中hMLH1、hMSH2基因启动子区的甲基化状态。结果：hMLH1基因在子宫内膜异位症中的甲基化率为39％（9/23）,在正常子宫内膜组织中的甲基化率为5％（1／20）,两者比较,差异有统计学意义（P〈0．05）;hMSH2基因在子宫内膜异位症中的甲基化率为8％（2／23）,在正常子宫内膜组织中的甲基化率为5％（1／20）,两者比较,无明显差异（P〉0．05）。结论：hMLH1基因启动子区甲基化可能与子宫内膜异位症发病有关;hMSH2基因启动子区甲基化与子宫内膜异位症之间不存在显著联系。     

巨噬细胞迁移抑制因子拮抗剂对子宫内膜异位症的影响

目的：探讨巨噬细胞迁移抑制因子拮抗剂（ISO-1）对子宫内膜异位症的影响。方法：以裸鼠为研究对象,构建子宫内膜异位元症动物模型,应用巨噬细胞迁移抑制因子拮抗剂进行干预,观察子宫内膜异位症小鼠的成活率和体重变化;采用RT-PCR检测基质金属蛋白酶-2（MMP-2）,基质金属蛋白酶抑制剂-2（TIMP-2）,血管内皮细胞生长因子（VEGF）,TNF-αmRNA的表达,ELISA检测TNF-α蛋白的表达。结果：ISO-1对子宫内膜异位症小鼠的存活率无明显影响,但可增加其体重（P〈0.05）。ISO-1减少子宫内膜异位症小鼠受损组织中MMP-2、VEGF、TNF-α的表达（P〈0.05）,但对TIMP-2的表达无明显影响。结论：巨噬细胞迁移抑制因子被特异性阻断后,可明显抑制受损组织的重构、血管生成和炎症,最终影响子宫内膜异位症的组织生长及进一步恶化,这可能是临床治疗子宫内膜异位症的新策略。     

GnRH-a对子宫内膜异位症患者血清CA125、EMAB及RANTES的影响

目的:探讨促性腺激素释放激素激动剂(Gn RH-a)对子宫内膜异位症患者血清CA125、EMAB及RANTES的影响。方法:选取我院收治的子宫内膜异位症患者92例,根据治疗方法不同分为两组,对照组予以常规治疗,治疗组在对照组基础上加用醋酸亮丙瑞林微球注射治疗。检测两组患者治疗前后血清CA125、EMAB及RANTES水平。结果:与治疗前相比,两组患者治疗后CA125、RANTES明显降低,EMAB转阴率明显升高,差异有统计学意义(P0.05);与对照组相比,治疗组患者治疗后CA125、RANTES水平降低,EMAB转阴率升高,差异有统计学意义(P0.05);治疗组不良反应发生率低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:Gn RH-a能够降低子宫内膜异位症患者血清CA125、RANTES及EMAB水平,提高机体免疫功能,安全性较高,对临床具有指导意义。     

CYP7A1基因-204位点A/C变异对启动子活性的影响

CYP7A1（cholesterol 7α-hydroxylase ）在胆固醇向胆汁酸代谢途径中起着至关重要的作用.为研究该基因启动子区-204位点A/C多态性是否影响基因表达, 利用荧光素酶作为报告基因,将含有A或C等位基因的启动子区片段分别正向和反向插入不含启动子的pGL3 basic质粒载体中,再以重组体转染4种细胞株,采用双荧光素酶报告基因检测系统测定酶活性并进行比较.实验结果表明,2种基因型的正向序列启动子活性均高于相应的反向序列,含有A等位基因的启动子片段活性比含有C等位基因的片段低约1/3.TRANSFAC数据库分析显示,当-204位点等位基因为C时,可能存在1个Zic3结合位点.研究结果提示,CYP7A1基因启动子区-204位点A/C变异可减少启动子活性从而影响基因表达,其原因可能为1个潜在的Zic3结合位点的丧失.     

外源性雌、孕激素对裸鼠人子宫内膜异位症病灶中MMP-2、TIMP-2及VEGF蛋白表达的影响

目的:探讨雌、孕激素对异位内膜及MMP-2、TIMP-2、VEGF蛋白表达的影响.方法:将育龄妇女正常分泌晚期子宫内膜注入裸鼠盆腹腔,建立EMs裸鼠模型,随机分为四组,分别予雌激素(E)、孕激素(P)、雌激素+孕激素(E+P)及对照(C)组生理盐水肌肉注射.术后18天处死裸鼠,取异位组织,采用免疫组化方法(PV6001/6002法)检测各组异位内膜MMP-2、TIMP-2、VEGF蛋白表达水平,与种植前子宫内膜比较.结果:异位内膜较正常内膜MMP-2、VEGF蛋白表达增强,TIMP-2蛋白表达减弱(P均<0.01);E组、P组、E+P组MMP-2/TIMP-2比值及VEGF蛋白表达均高于C组(P均<0.01).E+P组同E组相比MMP-2/TIMP-2比值及VEGF蛋白表达无差别(P均>0.05).结论:异位内膜的侵袭性和血管新生能力增强,且对激素的反应不同于正常内膜.     

左炔诺孕酮对子宫内膜异位症患者血清TNF-α、IL-6、以及VEGF水平的影响

目的:研究左炔诺孕酮治疗子宫内膜异位症患者的临床疗效以及对患者血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、血管内皮生长因子(VEGF)水平的影响。方法:研究对象选取我院2016年4月到2017年1月间收治的子宫内膜异位症患者94例,采用随机数字法将其分为对照组和研究组,每组各47例。对照组患者于月经第1 d起口服孕三烯酮胶囊治疗,研究组于月经来潮后4d内置入左炔诺孕酮宫内缓释系统(LNG-IUS)治疗,所有患者均连续治疗5个月。比较两组患者的临床疗效、不良反应发生情况及治疗前后血清TNF-α、IL-6、以及VEGF水平的变化。结果:研究组治疗总有效率高于对照组(P=0.03);治疗后两组患者血清TNF-α、IL-6、VEGF水平均较治疗前明显降低(P0.05),且研究组的血清TNF-α、IL-6、VEGF水平均显著低于对照组(P0.05);研究组不良反应发生率低于对照组(P=0.04)。结论:左炔诺孕酮治疗子宫内膜异位症的临床疗效显著,治疗安全性较高,可能与有效降低患者血清TNF-α、IL-6及VEGF水平有关。     

定坤丹联合复宫宁颗粒治疗子宫内膜异位症的疗效及对血清MCP-1、sICAM-1、CA125水平的影响

目的:探讨定坤丹联合复宫宁颗粒治疗子宫内膜异位症的疗效及对血清单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、可溶性细胞间粘附分子(s ICAM-1)、CA125水平的影响。方法:选择2014年12月至2016年12月我院接诊的96例子宫内膜异位症患者,通过随机数表法将其分为观察组(n=48)和对照组(n=48)。对照组给予醋酸亮丙瑞林微球注射液联合定坤丹治疗,观察组在对照组基础上联合复宫宁颗粒治疗,两组均连续治疗3个疗程。比较两组治疗前后卵泡生成激素(FSH)、黄体生成激素(LH)、雌二醇(E2)及血清MCP-1、s ICAM-1、CA125水平的变化,临床疗效及不良反应的发生情况。结果:治疗后,观察组临床疗效总有效率明显高于对照组(93.75%vs.70.83%,P<0.05),FSH、LH明显低于对照组,E2明显高于对照组(P<0.05);两组血清MCP-1、s ICAM-1、CA125较治疗前均显著降低(P<0.05),观察组以上指标明显低于对照组(P<0.05)。此外,观察组潮热、多汗、阴道出血总发生率明显低于对照组(P<0.05)。结论:与醋酸亮丙瑞林微球注射液联合定坤丹治疗相比,定坤丹联合复宫宁颗粒治疗子宫内膜异位症的效果更好,其可有效改善患者卵巢内分泌功能,缓解临床症状,其内在机制可能和降低血清MCP-1、s ICAM-1、CA125水平相关。     

消症汤对子宫内膜异位模型大鼠异位组织细胞增殖和凋亡的影响

目的　探讨“消症汤”对子宫内膜异位症 (endometriosis,EMT)模型大鼠异位组织细胞增殖和凋亡的影响 ,为临床用药提供实验依据。方法　制作大鼠EMT动物模型 ,模型鼠每日分别以 0 5ml和 1 0ml中药灌胃 ,连续用药 3周后观察异位组织细胞增殖指数和凋亡指数。结果　模型对照组细胞增殖指数大于用药组 ,凋亡指数小于用药组 (P <0 0 1)。 0 5ml组和 1 0ml组比较细胞增殖指数和凋亡指数无显著差异 (P >0 0 5 )。结论　“消症汤”能促进异位组织细胞凋亡 ,抑制异位组织增殖。     

散结镇痛胶囊联合孕三烯酮对子宫内膜异位症患者性激素、子宫动脉血流动力学和血清MMPs的影响

目的：探讨孕三烯酮和散结镇痛胶囊联合治疗对子宫内膜异位症（EMT）患者性激素、子宫动脉血流动力学和血清基质金属蛋白酶（MMPs）的影响。方法：选取中国人民解放军中部战区总医院2021年1月～2022年12月期间收治的EMT患者195例,采用双色球法将患者分为对照组（孕三烯酮治疗,n=97）和观察组（散结镇痛胶囊联合孕三烯酮治疗,n=98）。对比两组疗效、性激素指标、子宫动脉血流动力学和血清MMP-2、MMP-3、MMP-9/基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)水平,同时观察两组不良反应发生率。结果：与对照组相比,观察组的临床总有效率更高（P<0.05）。治疗后,观察组卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）、雌二醇（E2）低于对照组（P<0.05）。治疗后,观察组搏动指数（PI）、阻力指数（RI）低于对照组,收缩期最大流速（PSV）、舒张末期流速（EDV）高于对照组（P<0.05）。治疗后,观察组MMP-2、MMP-3、MMP-9/TIMP-1低于对照组（P<0.05）。两组不良反应发生率差异无统计学意义（P>0.05）。结论：散结镇痛胶囊联合孕三烯酮...     

孕三烯酮联合米非司酮对子宫内膜异位症患者血清VEGF、MMP-9、sICAM-1水平的影响

目的:研究孕三烯酮联合米非司酮治疗子宫内膜异位症患者的临床效果及对患者血清血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloprotein-9,MMP-9)、可溶性细胞黏附因子-1(soluble Intercellular adhesion molecule-1,sICAM-1)水平的影响。方法:选择2017年6月至2018年10月在我院进行治疗的子宫内膜异位症患者96例,根据治疗方案不同分为观察组和对照组,对照组给予孕三烯酮治疗,观察组在对照组的基础上联合米非司酮治疗。治疗后,观察和比较两组的临床疗效,治疗前后血清VEGF、MMP-9、sICAM-1水平及临床症状、体征的变化。结果:治疗后,观察组总有效率显著高于对照组(P0.05),两组患者血清VEGF、MMP-9、sICAM-1水平均较治疗前显著减低(P0.05),且观察组血清VEGF、MMP-9、sICAM-1水平均明显低于对照组(P0.05);两组患者治疗后痛经、非经期下腹痛、性交痛、子宫直肠窝结节粘连、子宫直肠窝触痛以及子宫活动受限的发生率均较治疗前显著降低,且观察组以上症状体征的发生率明显低于对照组(P0.05)。结论:采用孕三烯酮联合米非司酮治疗子宫内膜异位症可有效提高其临床疗效,且安全性较高,可能与其显著降低患者血清VEGF、sICAM-1、MMP-9水平有关。