星点设计-效应面法优化大孔树脂纯化还原型萝卜硫苷工艺及体外抗氧化活性研究

为研究大孔树脂纯化还原型萝卜硫苷的最佳工艺及其抗氧化能力。实验以8种不同型号的大孔树脂对还原型萝卜硫苷的比吸附量、吸附率和洗脱率为指标筛选出最佳型号的大孔树脂,采用单因素考察和星点设计-效应面法优选出大孔树脂纯化还原型萝卜硫苷的工艺参数,通过测定纯化前后还原型萝卜硫苷提取物对DPPH自由基及ABTS~+·自由基的清除能力来表征其抗氧化活性。结果表明,HPD-722型大孔树脂纯化还原型萝卜硫苷效果最好,最佳纯化工艺为:上样液pH 5.3,上样流速2.5 BV/h,上样液浓度0.53 mg/mL;洗脱液为70%乙醇溶液,洗脱液体积为2.5 BV,洗脱液流速为1.5 BV/h,还原型萝卜硫苷纯度由0.404%提高到17.903%,纯度提高了44.35倍,纯化后的还原型萝卜硫苷GRH提取物与萝卜提取液相比,清除DPPH自由基和ABTS~+·自由基的能力分别提高了67.31和45.27倍。     

余甘原汁中多酚的大孔树脂提取分离及其抗氧化活性

为研究余甘子多酚的分离提取方法,本文以余甘原汁为原料,采用NKA-Ⅱ大孔吸附树脂,对上样量、洗脱剂、洗脱体积及洗脱速度等条件进行了考察,并对提取物的抗氧化活性进行了对比分析。通过试验确定了余甘原汁多酚的大孔树脂分离提取条件为:上样速度2BV/h,上样量0.8BV,洗脱剂为70%乙醇溶液,洗脱体积3BV,洗脱速度8BV/h,在此条件下NKA-Ⅱ大孔树脂对余甘原汁中多酚的吸附率可达到88.42%,洗脱率为90.93%,提取率为80.39%;对提取物的抗氧化活性分析显示,与分离前的余甘原汁干燥物相比,提取物的多酚和维生素C含量均提高了0.53倍,类超氧化物歧化酶活性(SODL)提高了1.4倍;铁离子还原能力(FRAP)明显高于分离前,对DPPH自由基、ABTS自由基及脂质氧化的半抑制浓度(IC50)均显著低于分离前的原汁干燥物,表明通过大孔吸附树脂分离,使余甘原汁中的多酚等抗氧化活性成分得到了有效的分离纯化。     

瓦尼桑黄多酚类化合物纯化及抗氧化活性

瓦尼桑黄中含有较多的酚类化合物,多酚类化合物具有较高的抗氧化活性。本研究采用深共熔溶剂(deep eutectic solvent,DES)提取多酚类化合物,通过单因素试验确定大孔树脂纯化桑黄多酚的最佳工艺参数。实验结果表明：HPD-100大孔树脂纯化桑黄多酚的效果最好,其静态吸附-解吸最佳参数为：吸附时间为4 h,上样浓度10 mg/mL、上样液pH 4.0、解吸乙醇浓度为70%;动态吸附-解吸最佳参数为：上样量100mL、洗脱量110mL。在最佳条件下桑黄子实体多酚的纯度从14.56%提高到33.81%,纯化后的多酚具有良好的抗氧化活性能力。DPPH和ABTS自由基清除能力分别为92.75%和93.03%,对牛血清蛋白氧化损伤保护效果良好,能有效抑制L929细胞的衰老。     

榅桲总多酚的纯化工艺及PTP1B抑制作用研究

通过采用11种大孔吸附树脂对榅桲多酚粗提物的静态吸附和解吸试验,筛选出适合分离纯化榅桲总多酚的最优树脂,并对其动态吸附特性和影响因素进行研究。结果表明:最佳纯化工艺条件为:AB-8大孔吸附树脂做吸附填料,上样液质量浓度0.04 g/m L,以2 BV/h的吸附速率进行吸附,上样量为11 BV,用3 BV蒸馏水除杂后,以50%乙醇溶液为洗脱剂,洗脱液用量为4 BV,洗脱流速控制在2 BV/h。经AB-8树脂吸附富集后,样品总多酚质量浓度达到了30.11 mg/g,是粗提物(9.55 mg/g)的3倍。对纯化前后的榅桲总多酚进行PTP1B的抑制作用研究,结果显示,榅桲总多酚对PTP1B有较强的抑制作用,即榅桲总多酚纯化前的IC50为78.14μg/m L,用AB-8树脂纯化后所得总多酚的IC50为16.12μg/m L。     

丹酚酸A的分离纯化工艺及其抗氧化活性的研究

研究优化聚酰胺树脂分离纯化白花丹参丹酚酸A的最佳工艺,并测试其提取物的抗氧化活性。以吸附量和解吸量为指标,利用静态吸附和动态吸附的方法,确定丹酚酸A的最佳分离纯化条件。结果表明聚酰胺树脂的最佳纯化工艺条件为:上样液丹酚酸A质量浓度为11 g/L,上样液体积流量为1.0 m L/min,上样量为150m L,洗脱溶剂为50%乙醇,洗脱体积流量为1.0 m L/min,洗脱体积为10 BV,纯化后丹酚酸A量可达40.36%。通过清除DPPH自由基和还原能力测定初步评判该工艺下的提取物的抗氧化活性,结果表明,该提取物具有良好的抗氧化活性。     

雪松松针挥发油化学成分及抗氧化活性研究

采用水蒸气蒸馏法提取雪松松针挥发油,利用气相色谱-质谱联用技术分析其化学成分。使用维生素C为阳性对照,以DPPH自由基、ABTS自由基和羟基自由基清除作用为指标评价挥发油的抗氧化活性。从雪松松针挥发油中鉴定了37种化学成分,占挥发油总量的95.10%,以烃类和醇类为主;挥发油对DPPH自由基、ABTS自由基和羟基自由基有明显的清除作用,其IC₅₀分别为0.30、0.22及0.96 μg·mL^-1,且呈现一定的量效关系。可见,雪松松针挥发油中含有多种有应用价值的化学成分,具有显著的抗氧化活性。     

细叶十大功劳叶中总生物碱大孔树脂纯化及抗氧化研究

为确定细叶十大功劳(Mahonia fortunei)叶中总生物碱大孔树脂分离纯化的最佳工艺条件及抗氧化活性，该研究通过比较6种大孔吸附树脂对总生物碱的静态吸附和解吸附效果，优选出最佳树脂并考察其动态纯化总生物碱的工艺条件，并采用DPPH法对纯化前后的总生物碱抗氧化性能进行评价。结果表明：(1)AB-8型大孔吸附树脂纯化效果最好，其最佳工艺条件为上样浓度50 mg·mL^-1(生药浓度)、上样量26 BV、上样液流速2 BV·h^-1;吸附完成后，以3 BV水洗后再以4 BV 50%乙醇洗脱，在此条件下得到的总生物碱含量由13.33%提高到56.64%。(2)各样品对DPPH自由基的清除能力为对照品Vc(IC₅₀=10.39μg·mL^-1)>总生物碱纯化品(IC₅₀=39.08μg·mL^-1)>总生物碱粗品(IC₅₀=55.28μg·mL^-1)。综上表明，AB-8型大孔吸附树脂可有效富集细叶十大功劳叶中总...     

水麻果多酚的提取纯化及其抗氧化、抗肿瘤活性作用

为提取分离水麻果多酚,探索水麻果多酚的抗氧化及抗肿瘤能力。本研究通过单因素试验和正交试验优化水麻果多酚超声提取工艺,使用大孔树脂纯化水麻果多酚,通过测定水麻果多酚的总还原力以及清除·OH、DPPH·、ABTS·的能力来表征其抗氧化活性,以宫颈癌Hela细胞和肺癌A549细胞为抗肿瘤研究对象,测定水麻果多酚的抗肿瘤作用。在最优超声提取工艺条件下,即乙醇浓度为60%,料液比为1∶30,超声功率200 W,超声温度为70℃,提取时间为40 min,水麻果多酚得率为3. 29%,纯化产物总酚含量为40. 47 mg/100 mg,水麻果多酚的总还原力与维生素C相当,对·OH、DPPH·、ABTS·均具有显著清除作用,可抑制Hela细胞和A549细胞的生长增殖,并导致癌细胞产生大量活性氧,出现凋亡形态特征。该提取工艺简单、高效且多酚得率高,提取物经大孔树脂纯化后总多酚含量显著提高,且具有显著的抗氧化和抗肿瘤活性。     

大孔吸附树脂纯化绿茄叶黄酮的工艺研究

研究大孔吸附树脂纯化绿茄叶黄酮粗提取物的最佳工艺。通过比较10种大孔吸附树脂纯化黄酮粗提取物的吸附及解吸性能,筛选出纯化树脂XDA-1,并考察XDA-1树脂对黄酮粗提取物的静态、动态吸附与解吸的性能。结果表明,XDA-1树脂对黄酮粗提取物纯化的最佳工艺参数:吸附平衡时间8 h,吸附浓度2.00 mg/m L,p H值3.0,温度25℃,上样流速2 BV/h;解吸平衡时间2 h,解吸剂为p H值为3.0的体积分数80%的乙醇溶液,解吸流速3 BV/h,纯化倍数2.37。该研究证实大孔吸附树脂纯化绿茄叶黄酮的方法简单可行,为绿茄叶黄酮的分离纯化提供了实验依据。     

大孔树脂纯化岩高兰多酚的工艺研究

为获得大孔树脂纯化岩高兰多酚的最佳工艺,以岩高兰的地上部分为原料,通过考察6种不同类型树脂(HPD-100、X-5、AB-8、D101、HPD-600、NKA-II)的含水率、吸附率和解吸率的大小,筛选出一种最适合纯化岩高兰多酚的树脂。在此基础上,选择对纯化工艺影响较大的4种因素(上样浓度、乙醇浓度、洗脱流速、洗脱体积),进行响应面法分析得到最佳工艺。结果表明:HPD-600型大孔树脂对岩高兰多酚的纯化效果最佳,其最优工艺参数为:上样浓度0.84 mg·mL^-1;乙醇浓度62.15%;洗脱流速0.67 mL·min^-1;洗脱体积2.71 BV。该条件下,岩高兰多酚的提取率为229.18 mg·g^-1,岩高兰多酚的纯度由8.11%提高到22.56%,回收率为67.78%。本研究为岩高兰多酚的纯化工艺提供了新的技术路线,也可为岩高兰提取物的研究和应用提供参考。     

黔产接骨草中总多酚的含量测定及抗氧化活性研究

以黔产接骨草药材为研究对象,建立了福林酚比色法检测接骨草中总多酚含量方法;并采用单因素结合响应面优化设计法优化接骨草中总多酚提取条件;在此基础上,同时测定接骨草不同产地、不同药用部位总多酚的含量,并以清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基和ABTS自由基的能力为评价指标,对接骨草不同药用部位抗氧化活性进行比较研究。结果表明,不同产地、不同药用部位接骨草中总多酚含量差异较大;同批次接骨草中总多酚含量依次为叶全草茎根;接骨草中叶、全草、茎和根清除DPPH的IC50值分别为1.14、1.70、2.25、2.65 mg/m L,清除ABTS的IC50值分别为1.16、1.56、2.17、3.15 mg/m L,且活性大小与总多酚质量浓度呈现明显量效关系。该方法简便、快捷、重复性好,为接骨草基于总多酚含量的质量评价和质量控制提供参考,以IC50作为判定抗氧化活性强弱的指标,4个不同药用部位中以接骨草叶提取物抗氧化能力相对较强。     

黄连木叶粗多酚的纯化及其抗氧化研究

采用硅胶柱层析法对黄连木叶粗多酚进行纯化,并且对纯化后的多酚、单宁、黄酮组分进行测定。结果表明,纯化产物中的多酚、单宁、黄酮含量分别为1．0125g当量没食子酸每克样品、0．8600g当量单宁酸每克样品和0．1453g当量芦丁每克样品。与粗多酚相比,多酚含量提高了20．54％,单宁含量提高了13．53％,黄酮含量提高了12．03％。采用DPPH自由基清除法、FRAP总抗氧化法对纯化产物进行体外抗氧化活性检测。同时,以秀丽隐杆线虫（Caenorhabditiselegans）为模式动物检测纯化产物对胡桃醌诱导线虫体内活性氧（ROS）的抑制效应和对线虫存活率的影响。结果表明,黄连木多酚纯化产物体外抗氧活性强于黄连木叶粗多酚,强于维生素C,但稍逊于纯茶多酚;且能显著提高线虫的存活率和降低线虫细胞内ROS浓度。以上结果说明黄连木叶多酚是很好的天然抗氧化剂,具有在食品、医药、化妆品等领域广泛应用的潜力。     

牡丹籽饼粕中芍药苷类成分及其大孔吸附树脂纯化研究

采用乙醇提取,树脂纯化,HPLC制备以及LC-MS和1H NMR鉴定,从牡丹籽粕的醇提物中分离纯化了4种主要成分,分别为6'-O-β-D-葡萄糖芍药内酯苷、芍药内酯苷、β-gentiobiosylpaeoniflorin和芍药苷。对大孔吸附树脂法纯化芍药苷类成分的条件进行了试验,从4类11种树脂中筛选出HPD-200A型大孔吸附树脂,其较优的吸附分离条件为:上样液浓度(芍药苷)8.0 mg/mL,上样体积为4.5倍床体积(BV),流速为1/16 BV/min,洗脱剂乙醇溶液浓度为50%(v/v),洗脱体积为4 BV,流速为1/16 BV/min。此条件下所得提取物中含芍药苷32.3%、芍药内酯苷16.5%、6'-O-β-D-葡萄糖芍药内酯苷8.02%、β-gentiobiosylpaeoniflorin 6.63%。     

大孔树脂纯化嘉宝果叶片多酚及其生物活性和组成分析

为探讨嘉宝果(Myrciaria cauliflora)叶片多酚的分离纯化方法,对4种树脂(NKA-2、NKA-9、HPD-826和HPD-400A)进行了筛选,并分析了其多酚的抗氧化、体外降糖活性和组成成分。结果表明,NKA-9树脂适于嘉宝果叶片多酚纯化,最佳工艺条件为:上样液质量浓度2.00 mg/mL、洗脱液乙醇体积分数70%、上样流速1.0 mL/min、上样量204 mL、洗脱流速0.9 mL/min、洗脱量70 mL。嘉宝果叶多酚纯度可达69.86%。嘉宝果叶片纯化后的多酚抗氧化及α-葡萄糖苷酶抑制活性高于纯化前,但α-淀粉酶抑制活性低于纯化前。HPLC结果表明,嘉宝果叶片中含有杨梅苷、芦丁、金丝桃苷和鞣花酸,其中鞣花酸含量最高[(16.15±0.49) mg/g]。因此,NKA-9树脂适合分离纯化嘉宝果叶片多酚,纯化后的多酚抗氧化及α-葡萄糖苷酶抑制活性增强。     

瘦柄红石蕊次生代谢产物Biruloquinone的抗氧化作用研究

讨论了从瘦柄红石蕊Cladonia macilenta发酵液中分离得到的一种自然界罕见的菲醌化合物biruloquinone的体外抗氧化能力;分别采用DPPH·自由基清除法和ABTS·+自由基清除法对其抗氧化活性进行测定。结果显示,biruloquinone具有较高的抗氧化活性,且在检测浓度范围内对自由基的清除效果呈现剂量依赖关系,在浓度分别为100μg/m L和1.2 mmol/L时对DPPH·和ABTS·+自由基清除能力最大值分别达到90.83%和75.39%,其自由基半数清除浓度(EC50)分别为24.91μg/m L和0.488 mmol/L,在ABTS·+法中,biruloquinone的总抗氧化能力为2.5 TEAC。     

国槐叶黄酮的抗氧化活性研究

本文采用ABTS清除体系、DPPH清除体系、H2O2/Fe2+/水杨酸检测体系、亚硝基清除体系、普鲁士蓝法、邻苯三酚自氧化法研究了国槐叶黄酮的抗氧化活性,并同芦丁、Vc进行了比较。结果表明,国槐叶黄酮对几种自由基均有不同的清除效果,在质量浓度为50μg/mL时,国槐叶黄酮对羟基自由基(·OH)、ABTS、DPPH、亚硝基自由基(NO2-)和超氧阴离子自由基(O2-·)的清除率为分别62.09%、47.70%、43.28%、22.11%、21.83%;与芦丁、Vc相比较,国槐叶黄酮清除ABTS、DPPH自由基的能力低于芦丁和Vc,而清除NO2-、.OH的能力高于芦丁和Vc,对O2-·的清除能力低于Vc而高于芦丁,其次国槐叶黄酮具有很好的还原力。由此说明,国槐叶提取物可以作为天然抗氧化剂,可以应用在医药食品领域。     

川贝母内生真菌Fusarium tricinctum CBY11抗氧化活性及代谢成分研究

结合形态特征和分子生物学方法,将一株分离自川贝母鳞茎的内生真菌CBY11鉴定为Fusarium tricinctum。分别研究其发酵液石油醚提取物(PEE)、乙酸乙酯提取物(EAE)、正丁醇提取物(BAE)和乙醇提取物(ETE)的DPPH自由基清除活性、总抗氧化活性(以ABTS法测定)和总还原力(FRAP法测定),以及其总多酚含量(TPC)、总黄酮含量(TFC)和总皂苷(TSC)含量。结果发现EAE、BAE和ETE均具有较强的DPPH自由基清除活性(IC50分别为1.95mg/m L、1.19mg/m L、1.64mg/m L)和总抗氧化活性(IC50分别为0.43mg/m L、0.58mg/m L、0.43mg/m L),但总还原能力相对较弱;PEE的抗氧化活性整体较低。此外,EAE、BAE和ETE的TPC、TFC及TSC显著高于PEE(P0.05)。可见TPC、TFC及TSC与抗氧化活性呈现出一定的正相关性。HPLC分析表明EAE含有多种具有较强抗氧化活性的酚酸等物质,如芹菜素。GC/MS分析表明PEE中含有少量抗氧化酚类物质,最主要成分是烷烯烃类。本研究表明川贝母内生真菌CBY11具有产生丰富抗氧化活性成分的能力,具有多种利用价值。     

凤仙花不同部位乙醇提取物多酚、黄酮含量测定及抗氧化活性研究

采用55%的乙醇分别回流提取凤仙花的茎、叶、花中的活性物质,采用比色法测定各部位的多酚及总黄酮含量,测定各提取物对DPPH、羟自由基、超氧阴离子自由基的清除能力和还原力等抗氧化活性指标。结果表明,凤仙花各部位的多酚(以没食子酸计)、总黄酮(以芦丁计)含量由高到低依次为凤仙花的叶、花、茎,多酚含量分别为72.81、66.07、33.07 mg/m L,总黄酮含量分别为112.13、108.06、30.62 mg/m L。各种提取物均有不同程度的抗氧化活性,且抗氧化活性与提取物浓度存在量效关系,其中叶提取物清除DPPH自由基、羟自由基、超氧阴离子自由基活性以及还原力均最高,本研究为凤仙花作为低毒高效的天然抗氧化剂应用提供了依据。     

龙脑樟去油枝叶中总多酚的酶解-超声辅助提取及抗氧化活性

为探讨龙脑樟去油枝叶中总多酚的酶解-超声辅助提取工艺,在单因素实验的基础上,通过Box-Behnken设计-响应面法研究纤维素酶用量(X_1)、乙醇浓度(X_2)、液料比(X_3)对龙脑樟去油枝叶中总多酚提取率的影响;同时,以清除DPPH自由基和羟基自由基的能力为评价指标,对总多酚提取物的抗氧化活性进行测定。结果表明,各因素对总多酚提取率的影响顺序为液料比(X_3)乙醇浓度(X_2)酶用量(X_1);酶解-超声辅助提取龙脑樟去油枝叶中总多酚的最优工艺条件为:酶用量1.9%,乙醇浓度54%,液料比34 m L/g,酶解温度50℃,酶解时间1.5 h,超声时间30 min,超声频率45 k Hz,超声功率360 W,超声温度70℃;在此条件下,总多酚提取率的平均值为22.08 mg/g,与预测值相近,二次回归模型预测性良好。总多酚提取物对DPPH自由基和羟基自由基的清除作用均呈现量效关系,半数抑制浓度(IC_(50))值分别为0.36和0.15 mg/m L,表明总多酚提取物具有较强的抗氧化能力。     

沙棘叶多酚提取物抗氧化及体外降血糖活性研究

本实验以沙棘叶为原料,通过溶剂提取制得提取物A,将提取物A经大孔树脂纯化制得沙棘叶多酚提取物B,在研究提取物A及提取物B的抗氧化能力和自由基清除能力的基础上,探究了沙棘叶多酚提取物B对猪胰α-淀粉酶的抑制类型,并通过DNS法来评价提取物B的体外降糖能力。实验结果表明:提取物A、提取物B多酚含量分别为18.59%和30.25%;以VC当量计,总抗氧化能力分别为6.15 mgVC/g提取物A、9.79 mgVC/g提取物B,对应的DPPH自由基清除率IC_(50)值分别为20.19μg提取物A/mL、8.6μg提取物B/mL;当猪胰α-淀粉酶浓度为0.5 mg/mL以下,反应时间在1 min以内时,酶反应体系具有良好的线性趋势,在此条件下,沙棘叶多酚提取物B对猪胰α-淀粉酶具有一定的抑制作用,其半抑制浓度为0.25 mg/mL,属于可逆反竞争抑制。本研究可为沙棘叶的开发和利用提供数据支撑。