脂类代谢与冠心病的关系——Ⅱ.血清脂蛋白纸上电泳预染分型法及其在临床应用的意义

近年来冠心病的发病率和死亡率很高,青中年人中发病率亦日趋增多,因此冠心病成为现代医学研究的重大课题。作者初步建立了一个重复性较好,操作简便,费用经济,适用于临床实验室的脂蛋白纸上电泳预染分型法.以便为高脂蛋白血症分型提供较多的线索。一、用苏丹黑B石油醚-无水乙醇饱和溶液先染血清,后在含1%白蛋白的TEB(三羟甲基氯基甲垸-乙二胺四乙酸-硼酸)缓冲液中,电压160V,电流0.75～1.O毫安/滤纸条,电泳16小时,能使40微升正常血清在滤纸上出现除原点外还有三条着色区带,即β-脂蛋白,前β-脂蛋白及α-脂蛋白。正常人脂餐后,在原点与β-脂蛋白间还有乳糜微粒及前β-脂蛋白“拖尾”区带出现。二、用门诊数十名患者血清,分别电泳20次观察方法的重复性。结果:β-,前β-及α-脂蛋白相应地为43.O±O.42(S.E.)%,33.7±0.52(S.E.)%及23.4±0.47(S.E.)%。三、测定了33名(男18名,女15名),平均年龄为43.7岁,一般健康良好,无脂类代谢疾病的本医学院教职工的脂蛋白:α-,β-和前β-脂蛋白相应为187±42毫克/100毫升,241.3±34.2毫克/100毫升及75.2±29.3毫克/100毫升。四、讨论了不同类型高脂蛋白血症中脂蛋白的异常及分型在临床应用上的意义。     

脂类代谢与冠心病的关系——Ⅲ.从我国人血清外观、血脂水平和脂蛋白电泳分型图谱对高脂蛋白血症分型的初步认识

本文目的在于通过血清外观(包括乳糜微粒试验)、血脂水平和脂蛋白分型电泳图谱的综合分析,对我国人高脂蛋白血症分型提出初步认识。一、33例正常人血清外观,有3例轻度混浊,乳糜微粒试验全部阴性。二、43例男性和28例女性的胆固醇相应为166.6±23.5和176,4±29毫克/100毫升;34例男性和28例女性的甘油三酯分别为107.42±41和104.4±29毫克/100毫升,两者在性别上均无统计学显著差异。三、采用累加频数分布曲线计算出胆固醇、甘油三酯和各个脂蛋白的正常高限:胆固醇为198毫克/100毫升,甘油三酯137毫克/100毫升,α-脂蛋白240毫克/100毫升(44.5%),β-脂蛋白309毫克/100毫升(57%),前β-脂蛋白124毫克/100毫升(22.5%)。四、通过测定胆固醇、甘油三酯浓度及血清外观可将高脂血症按高脂蛋白血症分型。在所测33名正常人中血清胆固醇的升高与β-脂蛋白的相符率达85.4%,甘油三酯与前β-脂蛋白的相符率亦达2/3以上。五、鉴于血清外观、血脂浓度通常与一定脂蛋白的浓度有关,因此可用血清外观及血脂测定来筛选高脂蛋白血症及初步预测其类型;相反,依据脂蛋白电泳图谱,不仅可对高脂蛋白血症的类型作出初步判断,也可对血脂水平作出大致估计,两者互相补充,彼此对照,再结合临床资料,无疑会增强辨别高脂蛋白血症类型的可靠性。最后,按照我们的初步认识,对四个高脂蛋白血症的病例作了分型的尝试。     

脂蛋白的研究 Ⅰ.人血清β脂蛋白的大量分离的新方法及其某些性质的研究

(1)本文利用大分子D.S.与β脂蛋白复合物的性质对血清β脂蛋白的大量分离及其某些性质进行了研究。(2)自制D.S.可以在中性pH与人血清β脂蛋白形成不溶的复合分子。该复合分子可以溶解于12%NaCl溶液中,并可用纯化学的方法分离,释放自由β脂蛋白。(3)该脂蛋白溶液经纸上电泳、琼脂凝胶电泳及琼脂免疫电泳的鉴定均证实为纯净的β脂蛋白,只有一种免疫性,不再含有可觉察出的D.S.。经超速离心分析,主要含有S,2—6的低密度脂蛋白及少量S_f值较高的β脂蛋白。(4)新鲜的β脂蛋白为草黄色液体,平均浓度为1克/100毫升,在可见光400—500mμ波长有三个明显的吸收峰,在紫外光275mμ波长有一吸收峰。于2℃冰箱保存二周或在4℃浓缩均不致产生沉淀。(5)本文对D.S.-β脂蛋白复合分子的性质进行了初步研究,并对其结合方式作了简单的讨论。(6)本文提供了一个简单、温和、不用长时间超速离心而可大量分离和浓缩血清β脂蛋白的化学方法。     

越冬松针瘿蚊幼虫整体携脂蛋白 的分离和纯化

采用KBr密度梯度超速离心并结合常规Sepharose CL-4B凝胶柱层析,从越冬松针瘿蚊Thecodiplosis japonensis(Uchida et Inouye) 幼虫整体中,分离并纯化了一种携脂蛋白。这是第二例从昆虫整体分离并纯化出携脂蛋白的报道。采用凝胶柱层析确定该携脂蛋白的相对分子质量为638 kD,它是由分别为240 kD和52 kD的两个亚基组成 。整体分子中含有52.8%的蛋白和47.2%的脂类 。苏丹黑B和希夫氏试剂染色显示阳性,说明它是一种糖脂复合蛋白。采用超速离心确定它的密度为1.11 g/mL,表明它是一种高密度的脂蛋白。     

脂蛋白(a)与动脉粥样硬化及脑梗死的研究进展

脂蛋白(a)是由载脂蛋白(a)和低密度脂蛋白构成的。脂蛋白(a)不随血浆中同型半胱氨酸、载脂蛋白A、高密度脂蛋白的变化而变化,是一种相对独立的脂蛋白。脂蛋白(a)的合成过程主要是在肝脏中完成的,脂蛋白(a)可以抑制NO介导的血管舒张,破坏血管壁中促凝与抗凝因子的平衡,参与动脉粥样硬化斑块的形成。动脉粥样硬化是脑梗死最基本的病因之一,在临床工作中我们应当重视脂蛋白(a)与脑梗死的关系,我们可以通过测定血清中脂蛋白(a)的水平来预测脑梗死的患病风险,尤其能对病变损害程度重,病变累及范围广的脑梗死的发生提出预警。高水平的血浆脂蛋白(a)是脑梗死及动脉粥样硬化的独立危险因素,本文就脂蛋白(a)与动脉粥样硬化及脑梗死研究中的进展做一综述,为脑梗死的预防提供参考和研究依据。     

脂蛋白质组学研究进展

脂蛋白质组学(lipoproteomics)是一门应用蛋白质组学技术对脂蛋白(lipoprotein)进行全面、系统地分析和鉴定,进而了解脂蛋白的组成和功能以及与相关疾病发生、发展之间关系的新兴学科.近些年来,脂蛋白质组学研究促进了脂蛋白中蛋白质组分的急性期响应、补体激活、免疫响应、炎症响应、蛋白酶抑制等新功能的发现,显示了广阔的应用前景.本文对脂蛋白的功能和分类,以及目前应用于脂蛋白质组学研究的脂蛋白分离方法和蛋白质鉴定方法进行了简述,并综述了高密度脂蛋白、低密度脂蛋白和极低密度脂蛋白的脂蛋白质组学研究,及其在冠状动脉疾病、糖尿病、类风湿性关节炎等疾病研究的最新进展.     

脂蛋白代谢的研究——Ⅰ.脂蛋白脂肪酶的分离、提纯及其某些性质的研究

脂蛋白脂肪酶(LPL)是脂蛋白代谢中的关键酶之一。它分解富含甘油三酯的脂蛋白中的甘油三酯为甘油和脂肪酸。本文利用Heparin-Sepharose-Cl-6B亲合层析法直接分离、提纯了牛奶中的LPL。本方法操作简单,流程较短,分离效果较佳,重复性较好。提纯倍数为7,300,比活为14,000单位/毫克蛋白,回收率为13%左右。经鉴定在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中呈现一主要蛋白带,分子量为65,000道尔顿。酶反应的最适底物浓度为4～8毫克,最适pH为8.3～8.5。该酶能被VLDL和HDL激活,LDL和apoA-I无影响。鱼精蛋白和1.0M NaCl有抑制作用。肝素有降低该酶对抑制剂等不利因素的敏感性。牛奶LPL已初步应用于人血清脂蛋白代谢的研究。     

迷迭香酸抗穿透支原体脂蛋白诱导巨噬细胞凋亡的作用研究

探讨迷迭香酸对穿透支原体脂蛋白诱导巨噬细胞凋亡的保护作用。方法:以穿透支原体脂蛋白损伤RAW264．7细胞为模型,用MTT法检测细胞存活状况,DNA片断化分析观察穿透支原体脂蛋白对RAW264．7细胞DNA降解的影响,碘化丙啶染色流式细胞术检测细胞凋亡率。结果:7．5mg/L穿透支原体脂蛋白可引起RAW264．7细胞存活率降低,出现细胞凋亡特征性“DNA梯带”,流式细胞术检测细胞出现凋亡亚G1期峰,凋亡率为31．9%;100μmol/L迷迭香酸预处理1小时后可以升高RAW264．7细胞的存活率,凋亡细胞特征性的梯状梯带消失,细胞凋亡亚G1期峰消失,并使RAW264．7细胞的凋亡率下降为7．9%。结论:迷迭香酸有抗穿透支原体脂蛋白诱导RAW264．7细胞凋亡的作用。     

革兰氏阴性菌脂蛋白Lol系统转运蛋白的功能及表面展示分泌机制

细菌脂蛋白是细胞膜的重要组成成分,在革兰氏阴性菌的生理及致病性中扮演着重要的角色。革兰氏阴性菌中已知负责胞内脂蛋白转运的是Lol(Localization of lipoprotein)系统。该系统识别成熟脂蛋白的分泌信号,将外膜脂蛋白转运并定位于细胞外膜内侧。近年来的研究发现,跨细胞外膜进行表面展示的脂蛋白实际上在革兰氏阴性菌中广泛存在,其分泌机制开始成为研究热点。为了对革兰氏阴性菌中脂蛋白分泌机制的研究现状有一个系统全面的了解,本文概述了脂蛋白转运过程中Lol系统5个转运蛋白的功能与保守性、不同细菌中脂蛋白分泌信号的差异以及表面展示脂蛋白可能的分泌机制。     

革兰氏阳性菌脂蛋白的研究进展

细菌脂蛋白是细胞膜的重要组成部分,对细菌发挥各种生理活性起重要作用,与营养摄取、环境感知、细胞膜和细胞壁稳态的维持、蛋白质的折叠和定位等过程密切相关。随着生物技术不断发展和完善,越来越多的脂蛋白种类及功能被发现。综述了革兰氏阳性菌中脂蛋白的功能、生物合成过程和应用方面的研究进展,重点介绍了脂蛋白生物合成过程中关键酶磷脂酰甘油转移酶(Lipoprotein diacylglyceryl transferase,Lgt)和脂蛋白信号肽酶(Lipoprotein signal peptidase II,LspA)对革兰氏阳性菌生理活性产生的影响,为今后革兰氏阳性菌脂蛋白的研究提出了展望和建议。     

青龙胶囊治疗高脂蛋白血症150例疗效分析

以青龙胶囊口服,治疗150例高脂蛋白血症.用药4～12周,总有效率83.4%.其中总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)平均下降4.5%、18%及6.9%,总胆固醇与高密度脂蛋白胆固醇的比值(TC/HDL—C)下降9.3%.并对青龙胶囊调脂机制进行探讨.     

结核分枝杆菌脂蛋白Rv1016c增强细菌成膜能力和抑制自噬

目的研究结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis, Mtb)脂蛋白Rv1016c在Mtb感染和结核病发病中的作用和机制。方法将Mtb脂蛋白Rv1016c基因导入野生耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis, MS)构建重组菌株MS-Rv1016c,比较脂蛋白Rv1016c对菌体生长、成膜能力、细菌聚集、毒力等方面的影响,评估重组菌株MS-Rv1016c对自噬的影响。结果 Rv1016c基因的导入,因过表达脂蛋白使得MS的菌落变大、褶皱增加,使菌体聚集度降低,使细菌成膜速度加快、生物被膜产量增加;Rv1016c显著抑制巨噬细胞自噬,促进细菌在细胞内持留。结论 Rv1016c能够促进MS生物被膜形成,抑制细胞自噬,增强细菌毒力。为研究脂蛋白在Mtb致病机理中的作用提供理论依据。     

大白鼠脑中表达低密度脂蛋白(LDL)受体的神经元可吸收含脱辅基蛋白E(ApoE)的脂蛋白

用组织荧光和免疫细胞化学相结合法研究含脱辅基蛋白E(ApoE)的脂蛋白是否可被中枢神经元所吸收。实验结果如下: 1.含ApoE的脂蛋白仅被注射针迹附近的神经元所吸收。 2.只有表达出低密度脂蛋白(LDL)受体的神经元才能吸收含ApoE的脂蛋白。 3.不能表达LDL受体的神经元不能吸收含ApoE的脂蛋白。 实验结果表明,含ApoE的脂蛋白、LDL受体的表达及ApoE-LDL受体的相互作用是哺乳动物中枢神经系统内实现胆固醇运输和维持胆固醇代谢平衡的重要机制。     

大白鼠脑中表达低密度脂蛋白(LDL)受体的神经元可吸收含脱辅基蛋白E(ApoE)的脂蛋白

用组织荧光和免疫细胞化学相结合法研究含脱辅基蛋白E(ApoE)的脂蛋白是否可被中枢神经元所吸收。实验结果如下: 1.含ApoE的脂蛋白仅被注射针迹附近的神经元所吸收。 2.只有表达出低密度脂蛋白(LDL)受体的神经元才能吸收含ApoE的脂蛋白。 3.不能表达LDL受体的神经元不能吸收含ApoE的脂蛋白。 实验结果表明,含ApoE的脂蛋白、LDL受体的表达及ApoE-LDL受体的相互作用是哺乳动物中枢神经系统内实现胆固醇运输和维持胆固醇代谢平衡的重要机制。     

海边月见草叶提取物乙醇洗脱级分的抗氧化作用

海边月见草(Oenothera drummondii Hook.)叶提取物经X-5大孔树脂吸附及体积分数10%、30%、50%和70%乙醇溶液梯度洗脱获得4个级分,研究了这4个级分对DPPH、·OH和O2-的清除作用及其在卵黄脂蛋白过氧化体系中的抗氧化作用。4个洗脱级分均表现出较强的清除DPPH和·OH的能力,清除率随各级分浓度的升高而提高,其中,30%乙醇洗脱级分的清除作用最强,对DPPH和·OH的50%抑制浓度(IC50)分别为0.069和0.741g·L-1。浓度达1.0g·L-1,4个洗脱级分对O2.均有一定的清除能力,且对卵黄脂蛋白过氧化作用的抑制率均在50%以上。结果表明,海边月见草叶提取物的不同浓度乙醇洗脱级分具有较强的清除自由基的能力,并有一定的抗卵黄脂蛋白过氧化的作用,但总体效果较槲皮素略差。     

载脂蛋白基因和功能研究

绝大部分载脂蛋白(Apo)一级结构已阐明,目前进入基因水平的研究。Apo 结构多态性和功能之间关系值得注意。Apo 是脂蛋白必要的结构蛋白,它们作为配体与相应受体相互作用,同时调节脂蛋白代谢三个关键酶:脂蛋白脂酶,肝性甘油三酯脂酶和卵磷脂胆固醇酰基转移酶的活性。Apo 可能作为一种代谢程序剂,编序和调节脂蛋白代谢和体内胆固醇平衡。     

甘青铁线莲花水提取物的抗氧化活性研究

本文采用邻二氮菲-Fe2 氧化法,邻苯三酚自氧化法以及卵黄脂蛋白不饱和脂肪酸(PUFA)过氧化体系,对甘青铁线莲花水提取物清除超氧阴离子自由基(O-·2 )和羟自由基(·OH )以及抑制卵黄脂蛋白脂质过氧化(LPO)作用的效果进行了测定.结果表明:甘青铁线莲花水提取物有清除O-2、OH的能力,同时能抑制卵黄脂蛋白脂质过氧化(LPO)作用,在相同干物质浓度下(黄酮含量为2.20 μg),抑制卵黄脂蛋白脂质过氧化(LPO)作用最强、O-2次之、OH最弱,这说明甘青铁线莲花水提取物有抗氧化作用,且水提物抗氧化活性在一定浓度范围内与其黄酮类化合物含量呈正相关.     

S180腹水癌小鼠体液脂蛋白的探讨

 通过对患S(180)腹水癌小鼠的血清脂蛋白琼脂糖电泳分析,表明患癌小鼠的β蛋白逐渐增多,电泳的迁移率有减慢的趋势。通过对无细胞的腹水研究,发现其中相当于极低密度脂蛋白部分对癌细胞有较高的杀伤活性,而对正常的骨髓细胞无明显作用。该部分脂蛋白电泳迁移率比血清各种脂蛋白的迁移率均快。     

脂蛋白酯酶与动脉粥样硬化

脂蛋白酯酶(1ipopmtein lipase,LPL)是调节脂蛋白代谢的一种关键酶,如具有水解血浆脂蛋白中三酰甘油的作用等．体内LPL减少会导致血三酰甘油升高和高密度脂蛋白胆固醇降低,增加患动脉粥样硬化的危险．通过提高LPL的活性可以抑制动脉粥样硬化的发生发展．已有的研究说明NO-1886促进心肌和脂肪组织LPL mRNA表达,提高心肌、脂肪组织、骨骼肌和血液中LPL活性,因而改善脂蛋白代谢,抑制动脉粥样硬化．     

过饱和胆汁中的脱脂脂蛋白可抑制胆固醇结晶形成

在过饱和胆汁的模拟系统中,当加入由人血清提纯的浓度与人胆汁相同的脱脂脂蛋白A-1和A-2,可延长胆固醇-水合物的晶核(nucleation)过程。但脱脂脂蛋白C-3和其它血清蛋白则无此作用。由凝胶过滤层析法分级分离的人胆囊胆汁中,存在脱脂脂蛋白A-1和A-2,它对胆固醇结晶的晶核过程有强抑制作