CCDC3对结肠癌细胞增殖、迁移和侵袭功能的影响及其作用机制

该文研究了CCDC3基因对人结肠癌HCT116细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其作用机制。采用CCK-8法检测CCDC3对人结肠癌HCT116细胞增殖的影响。采用平板克隆和软琼脂克隆方法检测CCDC3对癌细胞克隆形成能力的影响。采用Transwell方法检测CCDC3对HCT116细胞迁移和侵袭的影响。采用Western blot法检测CCDC3对HCT116细胞上皮间质转化相关蛋白质水平的影响。采用体内成瘤实验检测CCDC3对HCT116细胞致瘤能力的影响。结果表明, CCDC3在癌细胞的生长调节中发挥重要的作用。过表达CCDC3显著促进癌细胞生长,增强癌细胞的克隆形成能力,增强癌细胞的迁移、侵袭和致瘤能力;敲低CCDC3后,癌细胞的恶性减弱。同时,该研究还发现, CCDC3的表达与癌细胞发生上皮间质转化相关。这些研究结果表明, CCDC3可能是一个新的癌基因,为结肠癌治疗寻找新的治疗靶点提供了线索。     

双丁酰cAMP对人体肺腺癌细胞表面凝集素受体及其侵袭能力的影响

着重观察双丁酰ｃＡＭＰ对培养的人肺腺癌细胞膜上多种凝集素受体表达的影响,并将体外经双丁酰ｃＡＭＰ处理的癌细胞接种于裸鼠皮下,观察移植瘤自发性生长状况。结果表明,经双丁酰ｃＡＭＰ处理的人肺腺癌细胞表面ＲＣＡ、ＷＧＡ、ＵＥＡ－１、ＤＢＡ、ＣｏｎＡ凝集素受体表达降低,同时伴有移植瘤成瘤潜伏期延长,侵袭能力下降。结果提示双丁酰ｃＡＭＰ导致的癌细胞表面数种凝集素受体的表达下降,可能是恢复癌细胞间粘附识别能力、降低其侵袭力的机制之一     

肿瘤转移的新miRNA故事

肿瘤转移是恶性肿瘤发展的晚期事件。癌细胞从原发瘤处侵袭基底膜、穿越细胞外基质、内渗入血管或者淋巴管、与宿主细胞相互作用、黏附于基底膜外渗进入远端组织,在与原发瘤不同的解剖学部位形成微转移灶,并最终适应陌生的1     

涎腺腺样囊性癌细胞蛋白激酶C的活性阻抑对其侵袭能力的影响

用蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ） 抑制剂Ｈ７ 作用于人涎腺腺样囊性癌ＳＡＣＣ８３ 系, 利用扫描电镜观察对人羊膜基底膜侵袭能力的影响。癌细胞接种于羊膜基底膜表面４８－ ７２ 小时后, 在扫描电镜下可以观察到对照组癌细胞侵袭现象, 侵袭的细胞伸出丝状伪足且侵入基底膜内, 伪足周围的基底膜断裂和被溶解, 而实验组癌细胞侵袭现象很难发现。细胞附于基底膜表面, 细胞表面较光滑且无明显伪足伸出, 基底膜无明显受损改变。实验结果表明, 降低涎腺腺样囊性癌细胞的ＰＫＣ活性可明显降低其侵袭能力, ＰＫＣ与涎腺腺样囊性癌的侵袭能力有密切的关系     

Lewis肺癌细胞与其衍生细胞系的比较

目的对比Lewis肺癌细胞(LLC)及LLC原位接种后获得的第一代衍生细胞(R1-LLC)和R1-LLC原位接种后获得的第二代衍生细胞(R2-LLC)间的生物学特性,比较该三种细胞在原位种植模型中的侵袭转移能力。方法离体实验:采用cck8法、克隆球形成实验、Tanswell侵袭试验分别检测细胞的增殖、侵袭能力,透射电镜观察细胞和组织的结构形态;活体实验:观察在7、14、21 d时LLC、R1-LLC、R2-LLC细胞分别原位种植模型中的成瘤与转移情况,统计成瘤率与成瘤时间。结果 LLC、R1-LLC、R2-LLC细胞的增殖能力差异无显著性(P0.05),侵袭能力R2-LLCR1-LLCLLC(P0.05)。活体实验显示LLC、R1-LLC、R2-LLC成瘤率分别为66.67%、80%、93.33%(P0.05)。结论在离体及活体实验中,R2-LLC比R1-LLC及LLC细胞具有更强的侵袭及转移特性。     

RNAi 介导的组织因子基因沉默抑制裸鼠移植性结肠癌的生长

组织因子(tissue factor,TF) 是机体外源性凝血途径的启动因子,发挥生理性止血的重要作用.近来研究表明,TF 除凝血功能外尚与多种恶性肿瘤的血管生成,侵袭转移及预后密切相关.为探讨 TF 对人结肠癌细胞（LoVo 细胞）生长能力的影响,构建带有 TFsiRNA 的重组腺病毒Ad pTF 和不带有 TFsiRNA 的对照病毒 Ad pDC,分别感染 LoVo 细胞,采用RT PCR 和 Western 免疫印迹法检测被感染 LoVo 细胞的 TF mRNA 和蛋白表达水平,并通过体内成瘤实验,进一步分析对 LoVo 细胞生长能力的影响.结果显示,与感染 Ad pDC 的 LoVo 细胞相比,感染 Ad pTF 的 LoVo 细胞的 TF mRNA 和蛋白表达水平更低,皮下种植瘤的体积更小,局部侵袭范围也更局限.研究表明,腺病毒介导的 RNAi 能特异而有效地沉默 LoVo 细胞中 TF 基因的表达,进而抑制 LoVo 细胞体内种植瘤的生长侵袭能力.     

R钙粘蛋白抑制涎腺腺样囊性癌的侵袭和转移

目的 明确R钙粘蛋白（R-cadherin,R-cad）在涎腺腺样囊性癌（salivary adenoid cystic carcinoma,SACC）中的作用。方法 首先通过免疫组织化学染色比较R-cad在涎腺腺样囊性癌组织和癌旁正常涎腺组织中的表达差异。之后,选取涎腺腺样囊性癌高转移细胞株SACC-LM,通过siRNA干扰技术有效下调R-cad表达,通过迁移小室迁移实验和侵袭小室侵袭实验以及裸鼠肺转移瘤模型实验,检测R-cad表达下调后,SACC-LM细胞迁移和侵袭能力的改变。结果 免疫组织化学染色显示,相对于癌旁正常涎腺组织,R-cad在涎腺腺样囊性癌组织中的表达量降低;迁移小室和侵袭小室实验证明,Rcad表达下调后,SACC-LM细胞的迁移能力和侵袭能力增强;裸鼠肺转移瘤模型实验证明,R-cad表达下调的SACC-LM细胞在裸鼠体内形成更多的肺转移灶。结论 在涎腺腺样囊性癌中R-cad可能有抑制涎腺腺样囊性癌细胞迁移、侵袭和远处转移的作用。     

肌动蛋白结合蛋白对肝癌细胞迁移与侵袭能力的影响及其机制研究

该文旨在探讨肌动蛋白结合蛋白(actin-binding protein,ANLN)对肝癌细胞迁移与侵袭能力的影响。应用荧光定量PCR(q RT-PCR)检测ANLN在肝癌组织和癌旁组织中的表达差异,运用慢病毒介导sh RNA干扰技术靶向敲低肝癌细胞Huh-7中ANLN的表达,并通过q RT-PCR和Western blot方法验证敲低效率;通过细胞迁移实验和侵袭实验检测肝癌细胞的迁移与侵袭能力。进一步通过q RT-PCR和Western blot检测ANLN基因敲低对基质金属蛋白酶9(matrix metallopeptidase 9,MMP9)m RNA和蛋白质水平的影响。最后,分析MMP9在ANLN敲低调控的肝癌细胞迁移侵袭过程中的作用。结果显示,在20例肝癌组织样本和癌旁组织中,ANLN在肝癌组织中m RNA水平较癌旁组织显著增高(P0.001)。其中,在发生转移的肝癌组织中,ANLN m RNA水平较无转移的肝癌组织显著增高(P0.001)。慢病毒介导sh RNA能显著抑制肝癌细胞中ANLN的表达,ANLN基因敲低能抑制肝癌细胞的迁移能力,并能显著抑制肝癌细胞的侵袭能力。机制研究发现,ANLN的基因敲低能显著抑制MMP9的表达,MMP9的过表达能逆转ANLN基因敲低对肝癌细胞迁移侵袭能力的抑制作用。该研究结果提示,在肝癌组织中,ANLN m RNA水平明显增高,ANLN的表达水平与迁移侵袭能力密切相关。ANLN基因敲低可能通过调节MMP9的表达,从而抑制肝癌细胞的迁移侵袭能力。     

RNA干扰肝细胞肝癌中PECAM-1的表达对肿瘤细胞侵袭及增殖的影响

目的:探讨PECAM-1在肝细胞肝癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)组织中的表达及意义。方法:选择2013年5月-2015年6月在我院接受治疗的HCC患者100例,收集肝癌患者HCC组织及癌旁组织,另选取100例正常肝脏组织作为对照组。应用免疫组织化学法检测PECAM-1在肝癌组织、癌旁组织以及正常肝脏组织中的阳性表达。利用小分子干扰RNA技术(si RNA)构建低表达的PECAM-1,并转染至肝癌细胞中抑制PECAM-1的表达。应用Transwell小室法检测肝癌细胞的侵袭能力,CCK-8法检测肝癌细胞的增殖能力。结果:PECAM-1在肝癌组织、癌旁组织及正常肝脏组织中呈不同程度阳性表达(P0.05);PECAM-1在肝癌组织及癌旁组织中的表达显著高于正常肝脏组织,差异具有统计学意义(P0.05);PECAM-1在肝癌组织中的表达显著高于癌旁组织,差异具有统计学意义(P0.05);转染si RNA PECAM-1后,肝癌细胞中PECAM-1 m RNA的表达水平明显下降,PECAM-1蛋白表达也明显降低,差异具有统计学意义(P0.05);转染si RNA PECAM-1后,肝癌细胞侵袭及增殖能力明显降低,差异具有统计学意义(P0.001)。结论:PECAM-1在肝癌患者血清中高表达,PECAM-1 si RNA能够抑制肝癌细胞的侵袭及增殖能力,提示PECAM-1可作为预测肝癌发生及发展的临床指标。     

OIP5对肝癌细胞SMMC-7721增殖和侵袭迁移能力的影响

目的:探讨OIP5对肝癌细胞SMMC-7721增殖和侵袭迁移能力的影响。方法:采用RNA干扰技术沉默肝癌细胞中OIP5的表达后,通过qRT-PCR和Western-blot技术检测OIP5的下调效率,CCK-8和平板克隆法检测肝癌细胞的增殖能力,Transwell法检测肝癌细胞的侵袭和迁移能力。结果:转染OIP5-siRNA后,肝癌细胞SMMC-7721中OIP5 mRNA和蛋白的表达水平均明显降低(P0.05);同时,与对照组相比,OIP5-siRNA组肝癌细胞SMMC-7721的CCK-8实验的OD值、平板克隆法测得的克隆球个数、Transwell法测得的迁移细胞数与侵袭细胞数均明显低于对照组(P0.05)。结论:OIP5能够促进肝癌细胞的增殖和侵袭迁移,可能作为肝癌治疗的潜在靶点。     

67kD层粘连蛋白受体的克隆、表达及其对肝癌细胞侵袭能力的影响

探讨细胞膜表面 6 7kD层粘连蛋白受体 (6 7kDlamininreceptor ,6 7LR)在肝癌细胞侵袭转移中的作用 ,从肝癌细胞中提取RNA ,通过RT PCR扩增 6 7LR的前体——— 37kD层粘连蛋白受体前体(37kDlamininreceptorprecursor,37LRP)基因并定向克隆到真核表达载体pcDNA3.1 myc His(- )A ,采用脂质体将重组质粒转染到HepG2肝癌细胞中 ,通过G4 1 8筛选和RT PCR、流式细胞术鉴定 ,获得了细胞膜表面 6 7LR高表达 (阳性率为 6 9.2 % )和低表达 (阳性率为 1 1 .7% )的细胞克隆 ,采用体外细胞侵袭实验测定不同细胞的侵袭能力 ,发现膜表面 6 7LR高表达的细胞侵袭能力明显高于低表达及不表达细胞 ,说明 6 7LR在肝癌细胞侵袭转移过程中可能具有重要意义     

Aurora-A高表达对食管癌细胞侵袭和 MMP-9表达的影响

目的:建立Aurora-A高表达的稳定细胞系,并探讨Aurora-A高表达对食管癌细胞侵袭和MMP-9蛋白表达与活性的影响。方法:利用脂质体法稳定转染Aurora-A表达质粒,通过Westernblot和RT-PCR鉴定Aurora-A高表达的稳定细胞系。利用细胞体外侵袭实验观察细胞的侵袭能力,并通过Western blot、ELISA和明胶酶谱的方法观察MMP-9的蛋白表达水平和活性。结果:建立了Aurora-A高表达的稳定细胞系,且Aurora-A高表达能增加食管癌细胞的体外侵袭能力,并提高了MMP-9的蛋白表达水平和活性。结论:初步阐明了Aurora-A促进食管癌细胞侵袭的作用以及分子机制,为Aurora-A可能成为治疗食管癌的有效靶点提供了依据。     

Periostin在非小细胞肺癌中的高表达可增强肺癌细胞的增殖和侵袭能力

为了研究非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者的血浆和肺癌组织中Periostin蛋白表达水平以及对癌细胞增殖和侵袭的影响。本研究选取了40例非小细胞肺癌患者作为研究组,同时选取40例同期体检的健康人群作为对照组,采用Real-time PCR的方法比较肺癌患者和健康人群的血浆中,以及肺癌患者的癌组织和癌旁正常组织中Periostin表达水平;采用小分子干扰RNA(small-interfering RNA,si RNA)抑制非小细胞肺癌细胞系A549中Periostin的表达,使用CCK-8法检测A549增值能力的变化,使用Transwell方法观察A549侵袭能力的变化。研究结果显示,Periostin蛋白在非小细胞肺癌患者的血浆中表达水平显著高于正常人群(p0.05),同时在肺癌组织中的含量显著高于癌旁组织(p0.05);导入Periostin的si RNA后,A549细胞的增殖和侵袭能力显著下降(p0.05)。本研究表明,Periostin在非小细胞肺癌患者的血浆和肺癌组织中表达量提高,可以增强肺癌细胞的增殖和侵袭能力。     

细胞癌变以及癌细胞的浸润、转移与细胞膜寡糖的关系

癌细胞表面的寡糖变化虽然不尽相同,但其糖蛋白和糖脂中含岩藻糖的寡糖都有增加。癌细胞的浸润、转移行为与其表面的肿瘤相关的糖密切有关,细胞表面含丰富唾液酸的癌细胞容易转移。癌细胞表面寡糖亦影响癌细胞转移到那一个靶组织。再者,糖脂的成分亦与癌细胞的转移有关。     

细胞内F-actin的聚合与解聚对肝癌Bel-7402细胞的影响

目的：为探讨癌细胞内F—actin的解聚与聚合对癌细胞的形态、迁移、侵入的影响。方法：利用激光共聚焦显微镜对贴附培养的人肝癌：Bel-7402细胞形态及其细胞内F-actin进行观察;使用流式细胞仪对贴附的Bel一7402细胞及其脱落细胞与Cyt—B处理后Bel-7402细胞内F-actin的含量进行分析。结果：Bel-7402细胞在培养的过程中,癌细胞形态伸展,出现侵入性生长,细胞内F-actin聚合形成粗大的贯通细胞内的F-actin束,F-acfin含量增高;癌细胞在生长过程中,常出现重叠生长,细胞变圆,F_actin解聚变短,F-acfin小体增高,细胞有脱落的趋势,其脱落细胞内的F-actin含量低于贴附细胞。结论：人肝癌：Bel-7402细胞内F-actin的聚合可增加癌细胞的贴附和侵入性：细胞内F-actin的解聚,及Gactin重新聚合形成F-aefin小体可影响到癌细胞脱落及迁移。     

PNAS:以毒攻毒?肿瘤细胞也能干预癌症了!

正通常情况下,大多数癌细胞在脱离实体瘤组织后,无法耐受机体血液环境的不适冲击。然而,有些顽强的癌细胞不仅幸免于难,还可以重新返回肿瘤原发灶,发挥促瘤组织生长的作用。近日,来自新墨西哥大学癌症中心的夫妻档研究团队Renata Pasqualini和Wadip Arap,在美国科学院院报(Proceedings of the National Academy of Sciences,PNAS)杂志上发表了关于利用癌细胞"潜返"病灶特性进行抗肿瘤应用开发的文章。     

eEF1A1通过HGF/c-MET通路调控肝癌细胞的迁移和侵袭能力

目的 探讨真核翻译延长因子1A1(eukaryotic translation elongation factor 1 α 1,eEF1A1)对肝癌细胞的侵袭、迁移和HGF/c-MET通路的影响及作用机制。方法 采用qRT-PCR和Western bolt检测肝癌细胞和组织中eEF1A1表达。构建eEF1A1敲除载体转染HLF和Alex肝癌细胞,CCK-8和Transwell实验检测细胞的增殖、侵袭和迁移能力。KM plotter分析患者的总体预后。通过eEF1A1基因敲除的转录组测序,Western bolt检测HGF、c-MET和p-c-MET蛋白的表达。裸鼠皮下成瘤实验检测eEF1A1对肝癌肿瘤的影响。结果 eEF1A1在肝癌细胞和组织中显著升高,敲低eEF1A1能抑制HCC细胞的增殖、迁移和侵袭。eEF1A1高表达与肝癌的不良预后相关。此外,敲除eEF1A1显著降低HGF和p-c-MET蛋白水平,抑制肝癌肿瘤的生长,但c-MET蛋白水平无显著差异。结论 eEF1A1通过抑制HGF/c-MET信号通路抑制肝癌细胞迁移和侵袭。     

埃兹蛋白的表达与非小细胞肺癌转移的关系研究

目的:探究埃兹蛋白(Ezrin)的表达与非小细胞肺癌转移的关系。方法:通过免疫组化检测Ezrin在有无转移的非小细胞肺癌组织中的表达差异,通过细胞免疫组化、western-blot、RT-PCR检测Ezrin在不同转移潜能肺癌细胞系中的表达差异,通过transwell考察Ezrin对不同转移潜能癌细胞侵袭和迁移能力的影响。结果:Ezrin蛋白在有转移的非小细胞肺癌组织中的表达水平明显高于无转移的肺癌组织,在高转移潜能肺癌细胞系中的表达高于低转移潜能细胞系,受抑制时会削弱高转移潜能肺癌细胞的迁移和侵袭能力,过表达时会增强低转移潜能肺癌细胞的侵袭和迁移能力。结论:Ezrin可能在非小细胞肺癌及其转移中发挥重要作用。     

细胞增殖相关基因Nek2的表达与宫颈癌发生的相关性研究

[目的]探究细胞增殖过程中中心体分离相关基因Nek2(NIMA-related kinase 2,Nek2)的表达水平以及抑制Nek2对宫颈癌细胞的增殖、侵袭及迁移能力的影响。[方法]采集未经放疗或化疗的正常宫颈组织50例,宫颈癌组织40例,提取标本组织总RNA,实时荧光定量PCR检测Nek2在病样组织中的表达水平,以正常宫颈组织作为对照分析Nek2与宫颈癌发生的相关性。以Nek2 siRNA转染Si Ha、He La和293FT(对照)细胞,CCK-8细胞增殖检测法分析细胞数量和对细胞增殖的抑制率,Transwell小室侵袭和Transwell迁移实验检测细胞侵袭和迁移能力。[结果]Nek2 mRNA在宫颈癌的相对拷贝数(0.0119±0.00601)极显著高于(P0.01)正常宫颈组织(0.00133±0.00216),上调8.94倍。抑制Nek2的活性可显著抑制宫颈癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力(P0.05),且抑制率显著高于非肿瘤细胞的抑制率。[结论]Nek2在宫颈癌组织中的表达水平显著提高,其通过促进癌细胞增殖、侵袭和迁移来促进肿瘤的发生,可作为宫颈癌治疗的候选靶标。     

Majocchi肉芽肿研究进展

正皮肤癣菌是一类寄生于人及动物皮肤浅层角蛋白组织的丝状真菌,其具有亲角质性,感染一般局限于人与动物的浅部组织,如皮肤角质层、指甲和毛发,而不向真皮、皮下组织等深部组织发生侵袭感染[1]。随着免疫抑制剂、糖皮质激素等广泛应用,局部外伤、放疗、糖皮质激素类药物长期外用以及糖尿病、艾滋病等患者增多,皮肤癣菌可逃避免疫监视入侵真皮及皮下组织,严重者可出现多脏器侵袭及播散,导致深部感染的患者日渐增多[2-6]。Majocchi肉芽肿作为皮肤癣菌深部