一种改良的鱼类染色体富集制片方法

运用淋巴细胞分离液处理黄鳝肾细胞悬浮液后,成功地分离了其中红细胞和淋巴细胞,以富集的淋巴细胞进行染色体制片,可避免有核红细胞的影响,获得高分裂指数的黄鳝染色体标本,该方法简便,结果稳定,亦适用于其他鱼类,两栖类和鸟类的染色体制片。     

改进的植物染色体制片方法

文章以外来物种肿柄菊和濒危物种三棱栎的根尖和茎尖为材料,改进植物染色体制片技术的结果表明:改进后的方法能明显提高植物染色体制片的质量和所需目的细胞的获得率。     

果蝇唾腺染色体的观察和制片方法的改进

几年来我们在教学中进行了多方面的实验探索,在果蝇唾腺制片方法上加以改进,采用加蔗糖液保色,树脂胶封边,制备一种半永久制片标本。操作过程如下: 1.取出唾腺,在其上加2滴(37℃)蒸馏水低渗处理10～20分钟,使唾腺细胞涨大有利于染色体的分散。 2.用滤纸吸去蒸馏水,加1滴1N HCl解离8～15分钟(时间随当时的温度而定),吸去解离液,用蒸馏水轻轻冲洗2～3次,将水吸净。     

植物染色体制片方法的改进

染色体是生物细胞核中最重要而稳定的成分，它具有特定的形态结构和一定的数目，具有自我复制能力，并积极参与细胞的代谢活动，能出现连续而有规律的变化，是决定物种繁衍的遗传物质的载体。人们一直在不断地探索和改进染色体的观察和鉴定方法。从早期的涂片法．到经典的常规压片法，直至20世纪60年代末建立起来的显带技术，以及90年代迅速发展的染色体原位杂交技术。作者长期从事植物染色体的研究，并给本科生和研究生讲授细胞遗传学理论和实验课，结合科研对染色体的制片技术进行了改进．供参考．[第一段]     

黄鳝激素敏感性脂肪酶基因Hsl染色体原位杂交定位

动物脂肪组织中的甘油三酯在数量上是最重要的储存能源。Hsl基因所编码的激素敏感性脂肪酶是一种多功能酶。它通过催化水解储存在脂肪组织中的甘油三酯,以及卵巢、肾上腺、睾丸和胎盘中的胆固醇酯,在机体能量供应和类固醇生成作用中发挥重要作用。本研究以放射性同位素和地高辛标记重组质粒pBS中所含猪Hsl基因作为探针,分别与Pst Ⅰ酶切的黄鳝基因组总DNA和有丝分裂染色体标本进行Southern杂交和荧光原位杂交(FISH)。结果显示,Southern杂交呈现一条带,片段长度约为11.5kb。同时,应用FISH定位Hsl基因于黄鳝5号染色体,相对着丝粒距离为78.35±1.26。该定位结果与应用“特定染色体DNA池”定位黄鳝Hsl基因结果相符,且定位结果更为精细。表明在淡水鱼类黄鳝基因组中存在Hsl基因,另一方面也首次提供黄鳝5号染色体上FISH杂交信息,从而为增加黄鳝染色体组中已知的遗传标记和建立高精度遗传图谱奠定基础。Abstract:Adipose tissue triacylglycerols are the quantitatively most important source of stored energy in animals.Hormone-sensitive lipase encoded by hormone-sensitive lipase gene (Hsl) is a multifunctional enzyme that catalyzes the hydrolysis of triacylglycerol stored in adipose tissue and cholesterol esters in the adrenals,ovaries,testes and macrophages.Using pig Hsl gene inserted into pBS labeled by the radioactive isotope and the digoxigenin as the probes respectively,one band,11.5kb,has been shown to hybridized with total DNA of rice field eel digested with Pst Ⅰby Southern blotting and Hsl gene has been assigned to metaphase chromosome 5,at the position of 78.35±1.26 from the c entromere in rice field eel by fluorescent in situ hybridization (FISH).The mapping results are corresponding to that of “specific-chromosomal DNA pool”obtained by chromosome microisolation used to map gene and the mapping result is more accurate.The results of the study further illustrate the importance of the presence of Hsl gene in rice field eel genome and provide the first FISH mapping data for rice field eel chromosome 5.The current studies would advance the addition of known genetic markers and the construction of high resolution genetic map in rice field eel genome.     

一种新的染色体制片永久封片法

细胞的有丝分裂和减数分裂制片是植物细胞学和细胞遗传学研究不可缺少的技术。对于一些重要的染色体制片进行永久封片,不仅为实验结果保存了必要的细胞学证据,而且也为特殊细胞学现象的重新观察和研究提供了可能性。传统染色体制片的封片剂主要有加拿大树脂(Canada balsam)、Euparal胶和DPX     

巴西橡胶树染色体制片方法的改良及FISH信号检测

本研究以巴西橡胶树热研7-33-97品种幼叶为材料,通过改良配制纤维素酶与果胶酶混合酶的溶剂、酶解时间等参数,对酶解去壁低渗方法进行了相应改良。结果表明,在37℃下,采用磷酸盐缓冲液(NaH2PO4,31.21 g/L; Na2HPO4, 71.64 g/L; Na Cl, 8 g/L; pH=5.5)作为溶剂,配制终浓度为5%纤维素酶、4%果胶酶的酶混合液时,酶解时间为1.0 h,大大缩短了酶解时间。用该法制备的中期标本,染色体形态分散、清晰、细胞膨大良好,荧光原位杂交信号检测后,信号正常。本研究可为橡胶树细胞遗传学、基因定位提供细胞学方法。     

介绍一种叶螨染色体的制片技术

<正> 叶螨总科(Tetranychoidea)包括了许多世界性分布的农业大害虫。研究叶螨的染色体,对于其分类、进化、性比和孤雌生殖等方面的研究均有十分重要的意义。叶螨个体小,染色体十分短小(一般1～4μm),给观察和研究带来了一定的难度。国外一般采用普通压片法制片、观察叶螨的染色体,但国内尚未见有关这方面的报道。作者以朱砂叶螨Tetranychuscinnabarinus(Boisduval)和二斑叶螨T.ur-ticae Koch为材料对叶螨染色体的制片技术进行了摸索,现简要报道如下。