在组织切片中肥大细胞的证明及迅速记数的简单方法

肥大细胞的选择性染色法如下:1)薄片新鲜组织(3—5毫米厚)于下液固定18—24小时,但标本置于此液至少一周尚无显明害处。配法:福尔马林液10毫升;95%酒精90毫升;醋酸钙1克。2)组织以95%酒精洗2次,每次1小时。3)以常法制做石蜡切片(8—12微米厚),粘片,脱蜡,经纯酒精至95%酒精。4)在室温于下液内染1小时。配法:甲苯胺蓝(toluidine blue)0.25克;70%酒精100毫升;浓盐酸     

以龙胆紫染硫酸酯多醣类的组织化学意义

甲、方法:1)固定于任何固定液皆可,但以酒精为最合适。石蜡切片,厚3微来。切片脱蜡,降酒精,至蒸馏水。2)以龙胆紫(gentian violet)水溶液1∶250,000或1∶1,280,000染色24小时(即0.25毫升0.1%龙胆紫贮存液加入100毫升蒸馏水内;或以0.1毫升0.1%龙胆紫液加入128毫升蒸馏水内)。3)滤纸吸干切片,然后在亚尼林二甲苯(anilinc-xylene)1∶1或1∶2液内脱色及脱水约5分钟(或稍长),直至紫色不再从切片上脱下为止。以二甲苯洗2—3次,用树胶封片。若染透明质酸(hyaluronic anid)可以甘油封片。     

去氧核醣核酸,多醣类,蛋白质的三色染色

甲)材料及固定:哺乳类、两栖组织,包括甲状腺、肾、小肠、胃、睾丸;昆虫的精巢,肌组织;及数种植物组知,固定于 Carnoy 氏液,福尔马林液,Helly 氏液,或 Smith 氏液皆可。乙)试剂试剂 T:天青 A-schiff 液——溶0.5克天青 A(azureA)于100毫升漂白液内(见下)可保持数周,用前加100%偏亚硫酸氢钾(K-me(?)abisulfite)数滴。试剂Ⅱ:漂白液——1N盐酸5毫升;10%偏亚硫酸氢钾或钠5毫升;蒸馏水90毫升;新鲜制备。试剂Ⅲ:高碘酸液(periodic acid solu)——高碘酸0.8克;蒸馏水90毫升;0.2M醋酸钠10毫升;新鲜配制。试剂Ⅳ:硷性复红 schiff 液——根据 Stowell 氏法(1945)配制,溶液置冰箱内可保持数月。     

胞间连丝玻片的制备

将柿子或黑枣的种子浸于温水中24小时,剥去种皮,将胚乳切成薄切片并于I—KI溶液(I 1克,KI 1.25克,蒸馏水100毫升)中固定3—5分钟,移入5％H_2SO_4溶液中3—5分钟。将切片置载片中央滴一滴结晶紫染色,3分钟后用50％酒精洗1—2     

于铬化及碳蜡包埋后染神经终足及线粒体

(一)固定:猫、兔以加有20—40毫克亚硝酸钠(Sod nitrite)的0.9%氯化钠液50—100毫升灌注(亚硝酸钠作为血管扩张剂):继以含10%蚁醛之0.9%氯化钠液300—500毫升灌注;取其脊髓,继续以上述10%蚁醛液固定,最少两天;置5—10毫米长的脊髓在室温下入下液浸5天。配法:重铬酸钾5克;氟化铬(chromiumfluaride)2克;蒸馏水100毫升,再入5%重铬酸钾于38—40℃下浸2—4星期,此液应换数次。     

应用~3H-胸腺嘧啶核苷测定血淋巴细胞转化的方法

本文介绍了应用微量血液测定DNA合成的方法:0.1毫升肝素抗凝血液灌入3毫升含PHA的Fagle’s生长培养液中,培养54小时后注入~3H-TdR 0.6微居里,再培养16小时,吸弃上清液,沉淀用生理盐水洗涤两次,5％三氯醋酸洗一次。然后沉淀加0.5毫升5％三氯醋酸置90℃水浴15分钟,离心后吸取上清液0.2毫升加到5毫升闪烁液中进行测量。闪烁液配方:PPO 3克,POPOP 0.4萘克、110克、二氧六环1000毫升。10例健康人血平均~3H-TdR掺入率为10.8％。     

植物维管束透明法

1.选幼嫩蚕豆一株连根拔出,用清水洗净根、茎表面污物备用。 2.将根部浸入碱性洋红溶液(配制:取0.5克碱性洋红溶解于2毫升95%酒精中后,用自来水稀释至150毫升)中染色12小时左右,待细小叶脉染为红色后,取出,用清水漂洗数分钟。     

绿色植物保存法的一点经验

在制作绿色植物浸渍标本时我们研究出下列方法可得满意的结果,兹介绍如后。保色液的配制:硫酸铜20克、浓盐酸2或3滴、水100毫升。将植物材料放入保色液中,如热至95℃左右,经半小时(视材料大小而略有增减)后,取出,在清水内充分洗净,然后放入5—10%福尔马林或70%酒精中保存即可。     

介绍一种绿藻的保色法

取醋酸汞(HgACO)10克、中性醋酸铅[Pb(ACO)_2]10克,溶于1000毫升90%酒精中,充分混匀后静置24小时,取上清液即得绿藻保色液.无鞭毛绿藻类,如石莼、礁膜、刺松藻、浒苔等,由于它们的植物体较大,只需把新采来的标本冲洗干净,去除杂藻,固着基物大小     

草履虫的纤毛染色方法

(一)杀死固定 1.固定液配制酒精95％5毫升,苦味酸(饱和液)15毫升,冰醋酸20毫升,甲醛60毫升,蒸馏水100毫升。将上面四种药物混合后,再加等量的蒸馏水稀释,即成200毫升的固定液。如要少配或多配,可依次按1∶3∶4∶12∶20的比例进行。此固定液可长期保存,效果不变,也适应其他原生动物和动物组织的固定。 2.固定的方法用吸管吸取培养草履虫的烧杯边缘的培养液,可得到高浓度的草履虫,投入离心管中,然后以9∶1的比例加入固定液(即草履虫培养液9份,固定液1     

消化系统实验

(一) 淀粉的消化 1.材料 5个长10厘米,直径1.5—2厘米的透析袋;5支口径大于透析袋的试管和5个塞子;Lugol氏碘溶液(即I-KI溶液)100毫升;可溶性淀粉溶液100毫升;唾液(2毫升唾液加2毫升水混合);1米长的线;若干小试管;5支滴管;Benedict氏溶液(简称班氏液)20毫升;葡萄糖液15毫升;淀粉糖化酶溶液20毫     

毛发制备胱氨酸

<正> (一)胱氨酸的制备 C.A.Vol.5,97,1911(J.Biol.Chem.,8,9～10)在园底烧瓶内装入50～500克毛发,按每100克毛发加入200毫升浓盐酸,瓶颈上插一支冷凝管。加热煮沸到双缩脲反应为负,一般约3～5小时。趁热加入过量的醋酸钠,刚果红为负,室温静置几小时,集滤沉淀,冷水洗涤,沉淀溶解在3～5%HCl 中,活性炭脱色,煮沸过滤液,慢慢加入浓醋酸钠,析出沉淀。     

显示环氧树脂厚切片中多糖,蛋白质和脂类的细胞化学方法

用花生(Arachis hypogaea L.)种子的子叶组织作为模式材料,Epon 812包埋的组织进行厚切片后,按下列三步染色。第一步,PAS 反应:(1)在0.5%高碘酸(0.3%硝酸配制)中10分钟;(2)自来水洗1—2分钟,蒸馏水经过;(3)锡夫试剂中30分钟;(4)偏亚硫酸氢钠溶液三次洗涤,每次2分钟;(5)自来水洗5分钟,蒸馏水经过。第二步,苏丹黑 B 液染色:(1)70%酒精中1—2分钟;(2)新鲜配制的0.3%苏丹黑 B 液(70%酒精配制)中染色,40—60℃,30分钟至1小时;(3)70%酒精中分色1分钟;(4)自来水冼,蒸馏水经过。第三步,考马斯蓝染色:(1)7%醋酸中1—2分钟;(2)1%考马斯蓝(7%醋酸配制)中染色,60℃,20分钟;(3)0.1%醋酸液中分色1分钟;(4)自来水冼5分钟,蒸馏水经过;(5)自然干燥或在40℃电热温箱中烘干。干燥后的切片用甘油胶封固。经这三步染色的切片,细胞内的多糖、脂类和蛋白体同时被显示:淀粉粒及纤维素的细胞壁为樱红色,油滴为黑色,蛋白体为蓝色。制片能长期保存。     

从小白鼠血液制备染色体的快速方法

每只小白鼠注射(I.P)0.1毫升秋水仙素(0.6毫升/毫升),四小时后杀死。从心脏取血,用肝素抗凝。取10滴左右血液置于一刻度离心管中,管内预先装好3—5毫升0.7％柠檬酸钠,放在37℃下温浴,摇匀后加一滴稳定的玻璃酸酶(150N.F.单位/毫升)。在37℃下温浴20分钟。用温浴的最后五分钟配制3∶1甲醇-醋酸固定液。温浴完毕时加2滴固定剂并温和地摇匀。600转离心机离心5分钟弃去上清液(留1毫升左右)再加3毫升固定剂,加塞后放置冰箱30分钟。在600转离心机离心5分钟弃去上清液(留1毫升),再加预冷固定液3毫升,用吸管来回搅匀。离心弃去上清液。再加2毫升冷固定剂,并在冰箱中过夜。第二天离心后弃去上清液,用甲醇洗,吸去甲醇,取一     

运动神经末梢(运动终板)制片法

运动神经末梢分布到骨骼肌纤维并和肌纤维紧密相贴,组成运动终板。运动终板呈卵圆形的板状隆起,一般长40—60微米,厚约10微米,大小可随肌纤维的粗细而改变。 1.取材蜥蜴、壁虎、蛇及幼年的哺乳动物的肋间肌。肌肉每块厚度3毫米左右。 2.固定组织人下列固定液呈透明。柠檬酸20克,葡萄糖7克,1％氯化金水溶液1毫升,蒸馏水100毫升 3.方法步骤 (1) 用洁净滤纸将固定后的组织吸干。 (2) 1％氯化金水溶液,浸30—60分钟(放置暗处)至肌肉组织呈金黄色为止。     

绿藻保色液的配制和使用方法

一、无鞭毛绿藻保色液的配制和使用方法1、保色液的配制取醋酸汞(HgACO)10克、中性醋酸铅(Pb(ACO)_2)10克,溶于1000毫升90%酒精(C_2H_2OH)中,混匀后静置24小时,取澄清液即得绿藻保色液。2、使用方法无鞭毛藻类如礁膜、刺松藻等,它们的植物体较大,处理较简单。只要把植物体冲洗干净,去掉杂藻,而固着物体大小适中,即可移入保色液中,一星期以后换液一次,然后蜡     

鱼类染色体的观察

在早春到市场上买性成熟的活雄鲤一条,取其精巢(性腺已发育到第Ⅳ期),做染色体的观察。 1.固定将精巢放入Carnoy固定液(无水酒精3份,冰醋酸1份),固定3小时,再换入70％酒精中。 2.染色用镊子和解剖针仔细取出精巢内的精细小管(细如白发),一小段,放手掌上剔去周围异物之后,放置载玻片上,加醋酸洋红(45％醋酸100毫升加洋红1克煮沸、冷却、过滤即成),染色2-3小时。     

肺血管注射制片

材料猫、兔、豚鼠、大鼠。步骤 1.注射浆的配制 (1)取5克卡红放入40毫升蒸馏水中,边搅拌边加氨水,至完全溶解后,用滤纸过滤。 (2)取明胶20克入150毫升蒸馏水中,置水浴锅中加热充分溶解。     

纸层析法测定庆丰霉素

我们通过试验,找到了一种测定庆丰霉素的纸层析法,此法简易、快速、较准确。现介绍如下。一、试剂层析溶剂:正丁醇:冰乙酸:蒸馏水=2.8:1:1。显色剂:0.3克茚三酮,5毫升吡啶用95%的乙醇定容为100毫升配成。春雷霉素溶液(作定量标准用):贮备液为2毫克/毫升,用时以蒸馏水稀释为500微克/毫升。贮备液可在冰箱中保存三个月。     

肺血管注射石蜡切片

通过卡红明胶液进行血管注射,而不经过其他染色方法,直接石蜡切片,可清楚地显示毛细血管在泡壁上的分布及其毗邻关系。卡红明胶液的配制 1.取卡红6克加入50毫升蒸馏水中,逐渐滴加氨水,直至完全溶解,过滤备用。 2.取精制明胶20克与200毫升蒸馏水混合,过夜,置水浴锅中滆水加热溶解。随即取卡红液入明胶液中,搅拌混合,逐步滴加醋酸,至