腓肠肌标本制备的简易方法

下面介绍一种在体的坐骨神经肌肉标本制备的简易方法 ,以供在教学实验中参考。具体方法、操作步骤如下 :1)取蛙 1只 ,毁髓后用手术剪将蛙的一侧后肢皮肤环形切开 ,并将该侧后肢皮肤撕去。2 )将蛙腹位固定在蜡盘上 (用大头钉将蛙的四肢固定即可 ) ,用玻璃分针沿半膜肌和股二头肌的裂缝找出坐骨神经 ,游离出 1段 (2 cm左右 )并穿线。3)用手术镊在腓肠肌跟腱下穿线并结扎 ,提起结扎线剪断肌腱与胫腓骨之间的联系 ,游离出腓肠肌。至此 ,在体的坐骨神经腓肠肌标本制备完毕。此法的优点 :手术简便易操作 ,不易损伤坐骨神经 ,由于是在体标本 ,动物…     

七叶莲对蟾蜍坐骨神经动作电位的影响

目的：观察七叶莲水煎液对蟾蜍离体坐骨神经复合动作电位的幅度及传导速度的影响,研究其对坐骨神经电生理特性的作用。方法：将制备的蟾蜍坐骨神经干分为4组,分别在任氏液和浓度为10％,20％,40％的七叶莲水煎液中浸泡,用MedLab生物信号采集处理系统引导神经干复合双相动作电位,并分别测定各组不同浸泡时间的坐骨神经干动作电位的幅度和传导速度两项电生理指标。记录不同浓度的七叶莲水煎液对蟾蜍离体坐骨神经复合动作电位的幅度和传导速度的影响。结果：10％,20％,40％3种浓度的七叶莲水煎液均使坐骨神经复合动作电位的幅度变小（P〈0．01）,传导速度变慢（P〈0．01）并最终使坐骨神经动作电位消失,且经过一段时间后动作电位的幅度和传导速度均能恢复。结论：七叶莲能可逆地阻滞神经动作电位的传导。     

肌肉收缩实验的改进

肌肉收缩实验的改进按《生物》实验本（第二册）第二十二页图示装置,进行肌肉的收缩演示实验时,我进行了以下改进：（１）删去带指针的显示器。（２）保留胫腓骨。（３）用蟾蜍腓肠肌作实验,在跟键中央紧扎一棉线,剪断扎线下方的跟键,提起棉线,细心分离腓肠肌至膝部...     

观察动作电位的好材料

《生理学实验》中 ,观察神经动作电位这一实验 ,都是用蟾蜍的坐骨神经为实验材料。但我感到以蟾蜍的坐骨神经为实验材料有不方便处 :如受季节的限制 ,造成取材难 ,神经的长度不够 ,在进一步做动作电位的传导实验时 ,不能完成。为此 ,笔者采用鱼的侧线神经 ,来做这一实验 ,克服了上述的不足 ,实验效果很好。具体的做法是 :在市场购买中等大小的活鲤鱼 ,用单面刀片在鱼体的侧线前端 (近鳃盖后缘 1.5cm左右 )切开 1cm左右深的横向切口 ,后端切开 0 .5cm左右深的横向切口 ,然后用镊子从前端把侧线神经轻轻拉出 ,置生理液中保存备用即可。经对比…     

青风藤水煎液对蟾蜍坐骨神经干电生理的影响

目的：探索青风藤对蟾蜍离体坐骨神经干电生理特性的影响。方法：40只蟾蜍随机分成4组：任氏液对照组和青风藤低、中、高剂量组（0.2、0.10、0.05 g/ml）（n=10）,通过RM6240C多道生理信号采集处理系统记录其在不同浓度青风藤水煎分别浸泡15 min和30 min时,动作电位的传导速度、幅度和动作电位阈强度。结果：与对照组相比,高剂量组的神经干动作电位的传导速度显著减慢（P<0.01）,中、高剂量组的幅度显著降低（P<0.01）,高剂量组的动作电位阈强度显著增大（P<0.01）。结论：动作电位传导速度、幅度与青风藤剂量呈负相关,动作电位阈强度与青风藤剂量呈正相关。青风藤水煎液降低坐骨神经的兴奋性,阻滞动作电位的传导,可能发挥抑制坐骨神经痛的作用。     

蛙肠系膜平铺片的制作

单层扁平上皮分布在心脏和血管等处的内表面, 肠系膜的间皮也是单层扁平上皮。用蛙肠系膜来制作单层扁平上皮平铺片,取材容易,操作简单,效果好。 1 处死动物用双毁髓法处死青蛙。 2 取材将蛙腹面朝上,置于解剖盘中,剪开腹部皮肤和肌肉。首先从胃幽门下部剪断,再从直肠下部剪断,然后剪断肠系膜根,把小肠和肠系膜全部剥离取出。沿肠系膜缘将肠和肠系膜分离,在培养皿中,用质量分数0．8％的生理盐水将肠系膜洗干净,剪一小方块材料置于洁净的载玻片中央。并用解剖针将其展平。     

“青蛙变色”演示实验

利用“青蛙变色”演示实验,可说明激素的作用,帮助学生了解脑垂体的作用,懂得什么叫体液调节.现将实验步骤和方法介绍如下. 课前准备取4—6只大蟾蜍,逐个取下脑垂体,制备脑垂体混悬液.具体做法是:剪开蟾蜍二口角,从口角后缘将头颅剪下,剪断处露出一个骨孔(称枕骨大孔),再用尖剪刀由枕骨大孔伸入颅腔,沿副蝶骨之     

蟾蜍横纹肌在硫脲作用下兴奋和收缩的分离

蟾蜍缝匠肌在含0.7M 硫脲的任氏溶液中浸泡后,丧失对直接刺激作电反应和机械反应的能力。将肌肉放回正常任氏溶液后,电反应能力能逐渐恢复,而机械反应能力则不能,由此可以得到表现兴奋与收缩分离的肌肉标本。硫脲不仅能使活的肌肉失去收缩能力,还能使经甘油抽提过的肌纤维束不可逆地丧失因三磷酸腺苷作用而缩短的能力。经甘油抽提的肌纤维束因三磷酸腺苷的作用而缩短后,可因再用硫脲溶液处理而伸长。以上这些结果指示硫脲对肌肉收缩能力的影响是对收缩蛋白体系直接作用的结果。肌纤维经硫脲处理后膜电位下降,动作电位振幅减低,时程变慢,膜电阻和膜电容都减小。硫脲对神经肌肉接头传递也能产生可逆的阻滞。     

不同浓度酒精任氏液对蛙坐骨神经干双相复合动作电位的影响*

目的:定量探究1%～80%酒精任氏液对蛙坐骨神经干双相复合动作电位(AP)的作用及其恢复情况。方法:制备长为6～8 cm的蛙坐骨神经干标本,分别将含有0%、1%、2%、4%、8%、16%、32%、48%、64%、80%酒精的标准任氏液通过新加装在神经屏蔽盒中的加药液槽浸泡位于刺激电极和接地电极之间的神经干各5 min,用BL-420F系统分别记录由刺激所诱发的双相AP;之后用标准任氏液冲洗5遍,浸泡5 min, 分别记录冲洗后AP。结果:与标准任氏液相比, ≤4%酒精任氏液对AP峰值和传导速度无影响,≥8%酒精任氏液作用后可使AP峰值和传导速度均下降;16%、32%和≥48%酒精任氏液作用后分别使神经干失去产生AP能力的比例为30%、90%和100%。≤32%酒精任氏液作用后冲洗,AP峰值可完全恢复;48%、64%和80%酒精任氏液作用后冲洗,能恢复产生动作电位能力的比例分别为90%、40%和0%,平均峰值分别下降至正常的60%、36%和0%;冲洗后: ≤8%酒精任氏液作用后的AP速度与正常无异,≥16%酒精任氏液作用后的AP速度无法完全恢复。结论:不同浓度酒精对AP峰值和传导速度影响不同,这对酒精的合理使用及过度使用后的损伤恢复有参考意义。     

嗅鞘细胞复合PLGA导管修复周围神经缺损的研究

探讨嗅鞘细胞(OECs)复合聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物(PLGA)导管对大鼠坐骨神经缺损的修复作用。方法:SD大鼠80只,随机分成4组,切除右侧部分神经干造成10mm的神经缺损。OECs PLGA组用充满细胞外基质凝胶和OECs悬液(CM-DiI预标记)的PLGA导管桥接坐骨神经缺损;OECs 硅胶管组用含相同内容物的硅胶管桥接;PLGA组和硅胶管组则分别用充满细胞外基质凝胶和DMEM/F12培养基的PLGA导管和硅胶管桥接。术后每周进行感觉运动功能检测,8周时行腓肠肌湿重恢复率、乙酰胆碱脂酶(AChE)染色、电生理和组织形态学分析等检测,同时移植细胞的两组每周进行细胞示踪观察。结果:移植细胞沿神经纵轴分布;除坐骨神经功能指数(SFI)指标外,OECs PLGA组的各项再生功能指标均优于其它三组。结论:OECs复合PLGA导管能够促进再生神经的成熟和靶组织功能的恢复,二者联合移植是一种有效的周围神经缺损修复方法。     

两栖类动物骨骼标本的简易制作

两栖类的骨骼结构较为简单,且取材方便,因此,人们常从两栖类着手,进行骨骼标本的制作。但是传统的两栖类骨骼标本制作方法较为繁琐,制作周期长(大约需1周的时间)。我们对传统方法进行了改进,制成的标本可与用传统方法制成的标本媲美。以蟾蜍(Bufo bufo)为例,具体制作方法如下:1麻醉准备一密闭容器(如标本瓶)作为麻醉瓶,内放一块浸过乙醚的棉花,选取体型较大的活蟾蜍放入麻醉瓶中,将其深度麻醉至四肢僵直,大约需10min。2去皮、内脏及肌肉将麻醉后的蟾蜍仰面放入解剖盘中,左手拉起蟾蜍腹部皮肤,右手拿剪刀沿腹部正中线剪开5cm的小口,然后向上…     

期前收缩与代偿间歇教学实验的改进

期前收缩与代偿间歇实验,传统的方法是将普通电极接触在体蛙(或蟾蜍)心心室,在心舒张期给予单个刺激,通过描记装置观察心室的反应。由于电极与心室接触的紧密程度不易控制,一般均有接触不良或妨碍心搏影响描记等缺陷。我们参考了有关实验方法,改进了这一实验,收到了较好的效果。器材离体蛙心灌流实验装置一套,漆包线。实验方法和原理在离体蛙心灌流实验装置的基础上,用一直径约0.2毫米的漆包线(线端去掉漆膜)系在蛙心夹上。再取另一同规格的漆包线插入蛙心插管内任氏(Ringer)液中作为无关电极。将两漆     

鸦片受体在轴突内流动

近年来生化研究指出,在轴突和神经纤维末梢有突触前鸦片受体。这些脂蛋白受体,自神经胞体合成后,通过何种方式或途径,输送到末梢部位而起作用,目前尚不清楚。美国霍普金斯大学医学院Young等用一种高敏感、可定量测定鸦片受体的标记显微放射自显影方法发现,大鼠结状神经节有鸦片受体;结扎迷走神经后,结扎线近端鸦片受体大量积聚。这一实验结果首次证明,鸦片受体在神经元胞体合成后,经轴浆流动运输至末梢部位。Young等首先分离出结状神经节和迷走神经,在神经节下方约1.5厘米处将迷走神经做一结扎。在结扎后不同时间,切除结扎线两端神经3～4厘米,冰冻后做8～10微米的连续切片,并固定于载玻片上。随     

[PEAD:肝素:NGF]生物材料促进大鼠坐骨神经损伤恢复

目的:探讨新型材料poly(ethylene argininylaspartate diglyceride)(PEAD)结合肝素包裹神经生长因子组成的三元复合体比单纯运用NGF治疗大鼠坐骨神经损伤效果明显,为临床治疗外周神经损伤提供实验依据。方法:24只200g左右Wistar大鼠,分成生理盐水组,NGF组,NGF凝聚体三组,每组各8只,距梨状肌下缘远侧约1.5cm处运用静脉夹夹紧坐骨神经2min,采用无创细线(5/0)缝合肌肉和皮肤,并用碘伏进行消毒,NGF组每天沿坐骨切迹肌注80ngNGF,持续30天;NGF凝聚体组仅在造模时肌注复合体(内含2.4μg的NGF);生理盐水组给予等体积的生理盐水。术后每周运用脚步印迹法评价动物的行为学,并于30天后灌流、收集各组损伤侧坐骨神经,运用HE染色及投射电镜观察坐骨神经结构恢复情况,免疫荧光标记MBP,观察其蛋白的表达。结果:NGF组,NGF凝聚体组在行为学、病理结构及蛋白的表达远高于生理盐水组,并且NGF凝聚组的治疗效果优于NGF组。结论:新型凝聚体包载NGF具有明显的促进周围神经损伤后的修复与再生作用,能够在一定程度上提高单纯运用NGF治疗大鼠坐骨神经损伤的不足,达到更加理想和显著的促恢复效果。     

制备观察蝗虫精原细胞减数分裂装片

制备蝗虫精原细胞减数分裂装片的方法介绍如下：１取材捕捉到蝗虫雄性成虫后,用剪刀在腹部第１,２节腹侧面剪一道口子,用镊子自剪口处伸入,从背面前部夹住一组织块向外拉,可见一团黄色组织块即蝗虫精巢。２固定将精巢投入蒸馏水中低渗５ｍｉｎ后转至固定液（甲醇∶冰...     

昆虫幼虫吹胀标本的改进制作法

将幼虫放在废纸上,头向操作者,背向上,用玻璃管(或竹管)压在虫体上面,先由中间开始向尾端滚压,使肠翻出,挤出部分粪便,再沿头后向尾端滚压,挤出全部粪便。注意滚压时速度要慢些,以免肠壁破裂。将打气针(篮球打气用的,文化用品商店有售)或9号左右的注射针头(应将针尖磨成钝圆)粗的一端装在双连球(医药商店有售)的皮管上,左手的食指和拇指轻轻的捏住翻出的肠壁,右手将气针插进肠口,插得深一些。用线在靠近肛门处将肠缚在针头上。此时,用双连球     

大鼠局灶性脑缺血模型的有效制备

目的比较三种不同手术方法制作大鼠永久性脑缺血模型的效果,包括死亡率、神经功能评分、脑梗死体积、手术效率。方法将采用不同手术方法制备脑缺血模型的大鼠随机分为三组。1组在术中分别结扎颈总动脉（CCA）、颈外动脉（ECA）、枕动脉、翼腭动脉,并且用动脉夹对颈内动脉（ICA）进行临时夹闭;2组在术中分别结扎颈总动脉、颈外动脉,暴露枕动脉和翼腭动脉但不结扎,用丝线悬挂颈内动脉而不是用动脉夹夹闭,线栓在显微镜直视下插入颈内动脉越过翼腭动脉起始点至大脑中动脉分叉处;3组只暴露颈总动脉、颈外动脉和颈内动脉,结扎颈总动脉、颈外动脉,丝线悬挂颈内动脉,显微镜下将线栓盲插至颈内动脉大脑中动脉分叉处。分别检测三组模型的死亡率、神经功能评分、梗死体积、手术时间。结果第3组制作动物模型的方法所花费时间平均为17.5 min,死亡率较低,神经功能评分及梗死体积稳定。结论采用第3组手术方法可以缩短手术时间,提高手术效率,能够高效地制作出更加稳定的可用于临床实验的大鼠脑缺血模型。     

用新鲜材料观察四种基本组织

从刚处死的动物身上取下所需的新鲜材料,观察动物四种基本组织的方法,取材容易,操作简便,不需要特殊药品及仪器,对缺少切片、标本的中学是很有用的。实验动物蟾蜍或蛙、小鼠都可。一般器材显微镜、天秤、载玻片、盖玻片、细口玻璃瓶、解剖器、大头针、青霉素小瓶、软木轮、培养皿(或用药瓶的塑料盖代用)、滤纸、大针、吸管。药品 30—40%氢氧化钠水溶液(以33％最佳),1%硝酸银水溶液,0.9%生理盐水、蒸馏水、紫药水或碘酒(市售)、任格(Ringer)氏液(两栖类生理盐水)。实验方法 1.处死动物:蟾蜍(或蛙)用探针毁脑和脊髓。小鼠用颈椎脱位法。 2.取材和观察上皮组织: 单层扁平细胞及细胞间质的观察取蟾蜍(或蛙、小鼠)肠系膜一块,铺展于带孔的软木轮上,四周用大头针固定。用蒸馏水洗肠系膜2—3次,洗毕,将此软木轮放在培养皿内(或塑料瓶盖),然后在肠系膜上滴入1%硝酸银溶液(液体没过肠系     

改良线栓法大鼠大脑中动脉阻塞模型的建立

目的对大鼠大脑中动脉阻塞（MCAO）再灌注模型进行改良,通过比较再灌注24h时大鼠神经功能评分、梗死率、模型制作时间、成功率和死亡率等指标评价改良线栓法大鼠MCAO再灌注模型的有效性。方法12只SD大鼠随机分为对照和模型两组,对照组采用分离结扎翼腭动脉,从颈外动脉插入线栓至大脑中动脉。模型组采用不分离结扎翼腭动脉,从颈总动脉分叉处插入线栓至大脑中动脉。阻断大脑中动脉血供2h后将线栓拔出实现再灌注。于再灌注24h时观察脑组织组织病理学改变,计算比较两组大鼠神经功能评分、模型制作时间、模型成功率和死亡率以及鼠脑切片TTC染色测量脑梗死率。结果两组MCAO模型在再灌注24h后大鼠神经功能评分、梗死率、模型成功率和死亡率等方面没有显著差异;模型组的模型制作时间显著少于对照组（P〈0．05）。结论采用不分离结扎翼腭动脉,由颈总动脉插入线栓的改良线栓法是稳定和可靠的MCAO造模方法。     

rhBMP-2 诱导异位软骨修复重建兔气管缺损的实验研究

目的:探讨重组人骨形成蛋白-2(rhBMP-2)作为激活物诱导异位软骨修复并重建兔气管缺损的可行性。方法:取24只新西兰大白兔,制备气管前壁软骨1/3缺损模型。随机分为A、B组,每组12只,A组为实验组,在气管缺损处前壁颈前肌肉修补,多点注射rhBMP-2;B组于气管软骨缺损部位直接颈前肌群修补。术后观察动物一般情况,于4、8、12周取材进行大体观察、HE染色观察重建区域情况。结果:术后A组动物均存活至实验完成,B组因气道感染及气道分泌物堵管潴留致使实验兔死亡,其余动物出现皮下气肿,呼吸不畅等情况。组织学观察A组有明显的新生软骨细胞及少量软骨样组织,可见结缔组织包绕,周围肌肉组织完整,排列整齐,未见明显坏死组织,有少量淋巴细胞浸润。B组未见软骨组织生成,可见大量肉芽组织增生,结缔组织排列紊乱,伴少量坏死组织,大量淋巴浸润。结论:rhBMP-2可通过注射到颈前肌肉修补肌群中诱导软骨细胞和软骨样组织生成,减轻炎症反应,联合颈前肌瓣修复重建气管缺损能充分维持修复重建后的气道形态,具有减少术后皮下气肿、气管狭窄的作用,有望用于临床修复重建气管组织缺损。