流感疫苗呼吸道黏膜免疫效应的研究进展

流感病毒通过感染呼吸道黏膜上皮细胞而入侵机体,呼吸道黏膜是机体最先接触大量病毒、细菌等吸入抗原的部位。呼吸道黏膜既可以在黏膜局部又可以引起全身对病原体感染的保护性免疫应答。近年来,随着呼吸道黏膜免疫疫苗的发展,诱导呼吸道黏膜的防御机制得到进一步深入研究。黏膜免疫分子、细胞在其中的作用逐步明确,又为黏膜免疫疫苗的发展奠定了基础。本文将从呼吸道黏膜免疫角度论述流感病毒呼吸道免疫防御机制及其滴鼻疫苗的应用。     

流行性腮腺炎疫苗免后血清学效果及免疫方案探讨

选以往无流行性腮腺炎患病史和接种史的学龄及学龄前儿童２４３名,血清检测流腮ＨＩ抗体,阳性率为５５．６％,阳性率明显地随年龄增大而上升,而性别无差异。经用Ｓ生物所及Ｂ生物所生产的两种疫苗接种,免后ＨＩ抗体的跳高率及ＧＭＴ均较免前有明显上升。双份血清检测结果,免后ＨＩ抗体显著跳高率（≥４倍）为４４．８％;９８名免前阴性儿童免后ＨＩ阳转率５７．１％,ＧＭＴ为１１３．２９,两种疫苗均无显著差异,提示疫苗的质量和稳定性有待提高,笔者对当前免疫方案提出了改进意见。     

大流行流感疫苗血清学检测中马血球和鸡血球血凝抑制试验方法的比较

血凝抑制试验(HI)是评价季节性流感疫苗免疫效果的经典方法。由于对人、禽流感病毒的受体不同,不同来源的红血球检测敏感性可能有差异。实验中比较了经典的鸡血球HI方法和国外报道的马血球HI方法,发现两种方法在检测大流行流感疫苗接种者血清时,于不同毒株抗原检测时表现各不相同,检测结果差异在2倍之内,说明经典的鸡血球HI方法仍适用于评价大流行流感疫苗的免疫效果。     

国产重组酵母乙型肝炎疫苗接种小学生的五年免疫效果观察

为了解国产重组酵母乙肝疫苗的免疫持久性,对接种2批国产酵母疫苗（5μg/Dose),1批进口酵母疫苗（A;10μg/Dose)和另1批进口酵母疫苗（M;5μg/Dose)的268名小学生,进行了免后5年（T60）效果随访观察。结果表明,T60时接种A疫苗组抗体GMT（几何平均滴度）（197．53）显著高于M疫苗组（110．66）和2批国产疫苗（9312645GMT78．48,9312623GMT56．06）。抗体阳转率A疫苗组（85．71％）显著高于M疫苗组及国产两批疫苗（61．76％、65．26％、63．83％）（P＜0．05）。而国产两批疫苗与M疫苗组无显著性差异（P＞0．05）。本次随访结果表明,虽然国产酵母疫苗免后5年的抗体阳转率和抗体GMT与剂量相同的进口酵母疫苗的水平相当,但抗体阳转率已降至70％以下,应考虑加强接种。     

血凝抑制和病毒中和法在大流行流感疫苗临床血清学评价中的应用和比较

在大流行流感疫苗临床试验的免疫效果评价中,分别采用血凝抑制(HI)和病毒中和(VN)法检测血清中抗体滴度,并对结果进行比较。在中和试验中,分别以观察细胞病变法和血球凝集法确定中和法终点,两种方法得到的结果相近。376份血清(63.4%)以VN法和HI法检测获得结果相同。经统计学分析证明两种方法有很好的相关性,r值为0.85,HI 1∶40对应的VN滴度为1∶33。因此,在大流行流感疫苗免疫效果评价中,两种抗体检测方法有较好的一致性。     

深圳市龙岗区流感监测及健康人群流感抗体水平分析

对深圳市龙岗区近几年流感病原学及人群流感抗体水平的分析,为流感防控提供科学依据。通过流感监测系统对流感进行病原学和血清学监测的结果显示,2007年流感病毒分离率为1.08%(3/277),2009年分离率为6.68%(56/838),两年流感病毒分离率差别具有统计学意义(χ2=13.03,P=0.000)。2007年健康人群血清样本中H1N1、H3N2、BY、BV流感抗体阳性率分别为60.5%、82.1%、59.3%、50.2%,2010年健康人群血清样本中H1N1、H3N2、BY、BV、甲型H1N1流感抗体阳性率分别为36.2%、37.6%、40.2%、21.9%、37.6%,2007年和2009年各亚型流感抗体阳性率具有统计学意义(P<0.05),两年中均表现H3N2亚型抗体阳性率最高,BV抗体阳性率最低。2007年和2010年H1N1、H3N2、BY、BV抗体阳性率均高于2010年,差别均具有统计学意义(P<0.01)。因此应加强流感病毒抗原变异株和人群流感水平的监测,对5岁以下及20岁以上的易感人群加强流感疫苗的接种,预防流感大流行。     

阳离子脂质体DOTAP佐剂对H5N1流感病毒裂解疫苗免疫效果的影响

目的研究阳离子脂质体DOTAP佐剂对H5N1型流感病毒裂解疫苗免疫效果的影响。方法制备DOTAP阳离子脂质体流感病毒裂解疫苗(简称DOTAP流感裂解疫苗),检测其包封率。将BALB/c小鼠分为13组,分别用含0.1、1.0、10.0μg HA/只剂量以DOTAP、Al(OH)3、CPG-ODN为佐剂以及不含佐剂的流感裂解疫苗于0、21天皮下免疫,PBS作为对照组,用血凝抑制试验检测小鼠初次免疫后21、42天血清HI抗体滴度;用ELISA检测初次免疫后21、42天血清特异性IgG抗体、IgG1、IgG2a亚类抗体滴度,以及初次免疫后42天小鼠脾脏单个核细胞体外经抗原刺激后细胞因子IL-2、IL-4、IFN-γ的分泌水平。将BALB/c小鼠分为3组,分别用含不同DOTAP剂量(100、300、600μg/只)的DOTAP流感裂解疫苗于0、21天皮下免疫,检测初次免疫后21、42天小鼠血清HI抗体滴度和IgG抗体滴度。结果 DOTAP流感裂解疫苗粒径在300~400 nm,带正电荷,包封率在50%以上;DOTAP流感裂解疫苗诱导的HI抗体水平和特异性IgG抗体水平均高于流感裂解疫苗,而与铝佐剂和Cp G-ODN佐剂间差异无统计学意义;DOTAP流感裂解疫苗产生的抗体仍以IgG1亚类抗体为主,免疫后42天诱导的IgG2a亚类抗体水平高于流感裂解疫苗和铝佐剂,低于Cp G-ODN佐剂;DOTAP流感裂解疫苗免疫后既分泌高水平Th1型细胞因子IFN-γ,同时也分泌高水平Th2型细胞因子IL-4;不同DOTAP剂量的DOTAP流感裂解疫苗免疫后,其HI抗体滴度和IgG抗体滴度在低、中、高剂量组之间存在明显的量效关系。结论 DOTAP作为H5N1型流感病毒裂解疫苗的佐剂可显著提高流感裂解疫苗的免疫原性,其对体液免疫应答的增强作用不低于铝佐剂和Cp G-ODN佐剂,并具有诱导细胞免疫应答的能力。     

建立膜抗原荧光抗体试验评价北京株冻干水痘疫苗免疫效果

为了建立用于水痘疫苗接种后血清中特异性抗体检测的膜抗原荧光抗体(FAMA)法,并对接种水痘疫苗后儿童血清中水痘特异性抗体进行检测,评价北京株水痘疫苗的免疫效果。以水痘带状疱疹病毒(VZV)感染细胞作为抗原制备成固定抗原玻片,以异硫氰酸荧光素(FITC)标记的羊抗人IgG作为二抗建立FAMA法,并对该法的敏感性、特异性进行验证。运用此法对不同剂量北京株水痘疫苗接种后儿童血清中特异性抗体进行检测,分析儿童血清中水痘特异性抗体水平以及免后抗体阳转率,并与Oka株水痘疫苗进行比较。结果显示,FAMA法敏感性可达0.0196IU/ml,特异性好。应用此法检测300名观察者免前免后双份血清样本中抗VZVIgG,易感者中北京株水痘疫苗原苗(39810PFU/0.5ml)、2000PFU/0.5ml、500PFU/0.5ml接种组儿童血清免后抗体阳转率分别为100%、98.77%、85.42%,抗体几何平均滴度(GMT)分别为36.4、34.3、18.6,原苗与2000PFU间的抗体阳转率和GMT均无显著性差异(P>0.05),但原苗与500PFU、2000PFU与500PFU间的抗体阳转率和GMT均有显著性差异(P<0.05)。对照国产、进口Oka株水痘疫苗接种后抗体阳转率分别为95.35%、96.97%,抗体GMT分别为13.3、16.0,不同剂量北京株疫苗抗体阳转率与国产、进口Oka株疫苗相比,差别无显著性(P>0.05),但北京株疫苗原?     

国产重组酵母乙型肝炎疫苗接种小学生的3年免疫效果观察

本文报告对２５８ 名小学生应用０、１、６ 月程序,接种２ 批国产酵母疫苗（５ μｇ／０．５ ｍ ｌ）,１ 批Ａｍ ｇｅｎ 酵母疫苗（１０ μｇ／ｍ ｌ）,１ 批Ｍ ＳＤ 酵母疫苗（５ μｇ／０．５ ｍ ｌ）的小学生免后３ 年（（Ｔ３６）效果观察。结果表明,Ｔ３６ 时抗体 ＧＭＴ（几何平均滴度）,Ａｍ ｇｅｎ 疫苗组（１４５．７５）显著高于 ２ 批国产疫苗（９２．１１、８３．５２）和Ｍ．Ｓ．Ｄ 苗组（７４．６２）,抗体ＧＭＴ 峰值显著低于Ａｍ ｇｅｎ 和Ｍ ．Ｓ．Ｄ 苗的２ 批国产酵母疫苗,与Ｍ．Ｓ．Ｄ 苗抗体ＧＭＴ 水平无显著差异（Ｐ＞ ０．０５）。抗体阳转率间各疫苗组均无显著差异（９３．１０％ ～７４．１４％ ）。本次随访结果表明,采用０,１,６ 免疫程序,国产酵母疫苗免后３ 年的抗体阳转率和抗体ＧＭＴ水平不低于进口同类酵母疫苗的水平。     

广州市1992-2007年出生新生儿接种乙型肝炎疫苗免疫效果评估

为评估广州市新生儿乙型肝炎疫苗(HepB)接种纳入计划免疫管理后免疫效果。对1992-2007年出生并接种HepB的新生儿2877人,按1992-2001年和2002-2007年出生新生儿分为计划免疫管理前(Ⅰ组)、计划免疫管理后(Ⅱ组)2组,采血检测乙肝病毒表面抗原(HBsAg)、乙肝病毒表面抗体(抗-HBs)和乙肝病毒核心抗体(抗-HBc)。Ⅱ组HBsAg阳性率为0.48%比Ⅰ组的4.54%阳性率下降了80.65%,在统计学意义上有显著差异。抗-HBc阳性率也由36.07%下降为26.73%,Ⅱ组的抗-HBs阳性率为75.19%,高于I组水平。新生儿乙型肝炎疫苗纳入计划免疫管理后群体免疫效果良好,使用不同种类乙肝疫苗效果没有统计学差异。重组(酵母)乙型肝炎疫苗有较好的近期保护效果和免疫原性,与以前使用血源乙型肝炎疫苗效果相当。     

季节性流感疫苗对小鼠感染H7N9禽流感病毒的保护效力

目的评价季节性流感裂解疫苗对流感病毒H7N9的免疫保护效力。方法用我国2012~2013年度季节性流感裂解疫苗,以腹腔注射方式免疫BALB/c小鼠,并设PBS免疫模型组,末次免疫14 d后以5 LD50A/Anhui/1(H7N9)进行攻试验。感染后观察记录小鼠临床表现,体重变化,并分别于第2天和第4天每组处死3只小鼠,取肺组织和鼻甲骨测病毒滴度和载量。结果感染后疫苗与模型组小鼠体重下降明显,疫苗组存活率为10%,模型组全部死亡。感染后第4天疫苗组鼻甲骨滴度显著低于模型组。血凝抑制试验及中和实验表明免疫小鼠血清无中和H7N9病毒抗体。结论季节性流感疫苗在小鼠中对于H7N9流感病毒感染无明显保护作用。     

虎血清犬腺病毒抗体调查

犬腺病毒（Canine adenovirus,CAV）属于腺病毒科哺乳动物腺病毒属成员,分为犬腺病毒Ⅰ型（CAV-1）和犬腺病毒Ⅱ型（CAV-2）,其中CAV-1主要引起狐狸（Vulpes vulpes）脑炎和犬（Canis familiaris）传染性肝炎（殷震和刘景华,1997;胡体拉,1963）。在国内,夏咸柱等（1984）首次分离到CAV-1,随后,多个地区的不同动物中又有相继分离到该病毒的报道（钟志宏等,1990;范泉水和袁国庆,1992;夏咸柱等,1984）。CAV-2主要引起犬的喉气管炎和幼犬咳嗽,在我国的感染也比较普遍（范泉水和夏咸柱,1999）。     

枣庄市2008年麻疹减毒活疫苗强化免疫效果评价

为了评价枣庄市麻疹疫苗(MV)强化免疫的效果,于2008年在所辖区开展了流行病学调查、麻疹血清学监测和费用-效益分析等,对MV强化免疫进行了评价。枣庄市麻疹年平均报告发病率在强化免疫前为14.1/10万,对1-6岁儿童开展MV强化免疫后,2010年麻疹发病率为0.8/10万,降低了93.5%;1-6岁儿童麻疹发病构成,强化免疫前为39.87%,强化免疫后为25.90%,大大减少了5岁以下儿童的麻疹发病;强化免疫后,1-6岁儿童麻疹抗体阳性率为99.3%,抗体几何平均滴度(GMT)从强化免疫前的1∶563.0增长到强化免疫后的1∶814.9。开展MV强化免疫费用-效益比值为1∶2.23~1∶3.12。开展MV初始化强化免疫是加速麻疹控制最有效的措施之一。     

提高DNA疫苗免疫效果的策略

近年来,ＤＮＡ疫苗的研究进展迅速,已在多种病毒、细菌、寄生虫病、肿瘤、过敏性疾病及免疫病理性疾病的防治研究中取得了令人鼓舞的成果,进一步提高ＤＮＡ疫苗的免疫效果是今后努力的方向。当前在这方面主要的策略有：构建真核表达载体时,选择合适的启动子;质粒基本骨架中插入免疫刺激序列（ＩＳＳ）或选择具有免疫增强作用的载体;细胞因子基因与外源基因共表达或共接种以提高外源基因编码抗原诱导的免疫反应。此外,质粒ＤＮＡ的接种剂量和途径也可影响免疫反应效果。     

猴源细小病毒血凝和血凝抑制试验的优化与应用

目的优化猴源细小病毒的血凝和血凝抑制（HA/HI）试验条件,以优化的方法对160份2010年～2011年间采集于中国北京地区圈养猴群的血清样品进行猴源细小病毒抗体调查。方法 在不同的缓冲液、缓冲液pH值、猪红细胞浓度、兔血清浓度、阿氏液比例和温度下进行猴源细小病毒的HA/HI试验,选择合适的HA/HI条件。通过优化的HA/HI方法对160份猴血清进行猴源细小病毒抗体检测。结果pH 7.0、0.02 mol/L PBS、0.75%猪红细胞、0.5%兔血清和4℃可作为猴源细小病毒HA/HI试验合适的反应条件,猪血球以1∶1阿氏液抗凝,可保存5～7 d不影响实验结果。猴血清的猴源细小病毒抗体阳性率为58.1%。结论方法优化后稳定性增强、检测时间缩短、准确性提高。细小病毒在我国北京地区圈养猴群中感染比较普遍。     

中国婴儿中脊灰母传抗体水平对两种疫苗免疫效果的影响

为了了解2月龄婴儿中针对脊髓灰质炎病毒的中和抗体水平,并探讨母传抗体对脊髓灰质炎减毒活疫苗(OPV)和灭活疫苗(IPV)免疫效果的影响。对416名2月龄婴儿分别接种OPV和IPV,采集免疫前后血清,用微量中和法检测血清中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型脊髓灰质炎病毒中和抗体滴度,评价抗体GMT水平及4倍增长情况。检测结果显示,2月龄婴儿母传抗体Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型阳性率分别为45%、38.2%和17.5%,抗体GMT水平为9.0、8.1和5.2。经接种两组疫苗后,母传抗体阳性者与阴性者免后抗体GMT水平相比,OPV组无明显差异,IPV组阳性者略低于阴性者。在免前抗体滴度<1∶32人群中,OPV组免后抗体滴度4倍增长率及几何滴度增长倍数分别为:Ⅰ型93.6%、71.2;Ⅱ型98.2%、43.7;Ⅲ型91.7%、47.9;IPV组免后抗体滴度4倍增长率及几何滴度增长倍数分别为:Ⅰ型82%、9.4;Ⅱ型62.8%、5.1;Ⅲ型95.6%、11.7;在免前抗体滴度1∶32～1∶128人群中,OPV组Ⅰ型92.3%、23;Ⅱ型86.4%、13.9;Ⅲ型55.6%、4.1;IPV组Ⅰ型48%、2.5;Ⅱ型15%、0.9;Ⅲ型55.6%、2.7。目前中国2月龄婴儿免前脊灰抗体阳性率较高,尤其是Ⅰ、Ⅱ型。脊灰母传抗体对两种疫苗免疫效果有一定干扰,对IPV疫苗的影响较为明显。